共查询到20条相似文献,搜索用时 62 毫秒
1.
2.
用聚乙二醇诱导选定的成对原生质体间的融合 总被引:6,自引:0,他引:6
用微吸管选取单对原生质体,在含聚乙二醇(PEG)的微滴中诱导融合。此法克服了常规的PEG群体融合方法中的盲目性,能排除一方亲本原生质体自相融合和多个原生质体的融合,以及未融合的原生质体的混杂,保证融合产物来自选定的成对原生质体,从而使PEG融合技术精确化。此法在植物细胞工程和细胞生物学研究中有广泛的应用前景 相似文献
3.
被子植物配子-体细胞杂交研究的进展与展望 总被引:3,自引:0,他引:3
Pental和Power于1985年提出用植物的单倍体原生质体,与二倍体体细胞原生质体融合产生三倍体植株,以用于限量基因转移研究的设想"'。次年粘毛烟草(Nicotianaglutinosa川、抱子四分体原生质体与烟草(N.tatacum)的体细胞原生质体融合,就成功地得到了三倍体杂种植株,并被称 相似文献
4.
包括许多重要粮食和饲料作物在内的豆科植物的体细胞杂交研究已有20多年历史。早在70年代,Kao等[15]即利用豌豆、大豆原生质体与其它植物原生质体进行融合,观察到可以分裂的大豆(+)豌豆、玉米(+)大豆、小麦(+)大豆异核体,大麦和大豆融合细胞最后形成细胞团,同时指出核融合发生在融合后的第一次分裂过程中。1974年,Kartha等[16]将大豆(Glycinemax)悬浮培养细胞原生质体与油菜原生质体融合,也得到细胞团。1976年,Constabel等[10]得到了大豆悬浮培养细胞与豌豆、Viciahajastana(一种野豌豆)、烟草、番红花叶肉细胞原生质… 相似文献
5.
6.
7.
水稻与大黍不对称休细胞杂交再生植株 总被引:2,自引:0,他引:2
采用PEG(聚乙二醇)融合法,诱诱导水稻(Oryza sativa L.)原生质体与无融合生殖大黍(Panicum maximum Jacq.)原生质体融合,经过融合体筛选、培养,成功地获得了再生植株并移栽成活。在融合前水稻原生质体经过2.5mmol/L碘乙酰胺(IOA)在室温(22-25℃)条件下处理15min,大黍原生质体经过60Kr软X射线照射处理。对获得的28株融合再生植株进行初步检测发现 相似文献
8.
基因组对芸苔属作物原生质体培养及植株再生的影响 总被引:5,自引:0,他引:5
本文以包心菜、芜菁油菜、浙油601的无菌苗叶肉原生质体为材料,经不同液体培养基浅层培养,细胞分裂并形成愈伤组织。愈伤组织经增殖后,转到分化培养基上诱导分化,均获得了再生植株。本文着重研究了植物基因组对原生质体分裂频率及植株再生的影响。研究结果表明:(1)植物基因组对原生质体分裂频率的影响随原生质体培养基的不同而异;(2)植物基因组对原生质体再生植株影响显著,芜菁油菜的A基因组不利于原生质体再生植株 相似文献
9.
用PEG—高Ca高PH法诱导抗卡那霉素的烟草(Nicotianatabacum)品系N364+Km+花粉原生质体和黄花烟草(Nicotiarustica)叶肉原生质体融合。幼嫩花粉原生质体和叶肉原生质体之间的融合体培养启动胚胎发生分裂,经卡那霉素筛选后,少数多细胞团存活并形成小愈伤组织。成熟花粉原生质体与叶肉原生质体之间的融合体则仅产生管状结构。这一结果表明,作为融合一方的花粉原生质体的发育时期对融合产物的发育途径有重要影响。 相似文献
10.
应用Gateway克隆技术构建了以CaMV35S为启动子,含AtRGS1-GFP融合基因的植物表达载体,并分别用根癌农杆菌介导法和PEG介导法转化拟南芥野生型(C01)悬浮细胞系和幼苗叶片原生质体,利用荧光显微镜观察AtRGS1-GFP融合基因在转化受体系统中的表达与定位。结果显示,在含AtRGS1-GFP融合基因的转化细胞系中,GFP绿色荧光在细胞膜(壁)上特异表达;原生质体瞬时表达系统中,GFP绿色荧光在细胞膜上强烈表达,表明AtRGS1蛋白定位于细胞质膜上。 相似文献
11.
《Journal of Fermentation and Bioengineering》1990,69(3):186-188
Protoplasts of cycloheximide-resistant strains from Aspergillus oryzae IFO 5239 were fused with those of kabicidin-resistant strains from Aspergillus niger IFO 4407. By nuclear staining in conidia, it appeared that all of the fusant conidia had two kinds of nuclei. Small nuclei seemed to be derived from A. oryzae and large nuclei seemed to be derived from A. niger. However, three types of antibiotic resistance were shown among the conidia of fusants. Almost all were kabicidin resistant. Conidia of fusants were multinuclear and had various DNA contents and various sizes. By the comparison with the growth rates of parental strains, the growth rates of A. niger were superior to those of A. oryzae. The inclination in the distribution of antibiotic resistance of fusant conidia seemed to owe more to the differences of growth rates between parental strains than the influence of the multinucleate nature of a parental strain. 相似文献
12.
13.
黑曲霉原生质体诱变选育果胶酶高产菌株 总被引:1,自引:0,他引:1
通过UV和NTG诱变筛选获得了2株高产果胶酶突变株。以果胶酶产生菌黑曲霉EIM6为诱变材料,采用1.5%的溶壁酶和1.5%的纤维素酶处理其对教生长期菌丝体2h获得高质量的原生质体。采用UV25S或50μg/mL NTG诱变30min,构建原生质体突变库,经刚果红果胶平板筛选获得果胶酶突变株,通过液体深层培养复筛获得高产突变株EIM6-U11、EIM6-N5,酶活力分别从46598.08、46598.08U/mL提高至68596.57、68879.56U/mL,分别提高了47.21%、47.82%。连续8次传代经发酵测酶活力表明高产突变株EIM6-U11、EIM6-N5具有较高的遗传稳定性。 相似文献
14.
去壁酶与酶解方式对曲霉原生质体释放的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
研究了纤维素酶、蜗牛酶、溶菌酶以及菌丝体培养方式和酶解方式对黑曲霉和米曲霉菌丝释放原生质体的效应。发现黑曲霉菌丝原生质体制备最佳条件为固体透析培养菌丝体,2%纤维素酶,在平皿中,28℃和80r/min条件下酶解3h;米曲霉原生质体制备最佳条件为2%纤维素酶+1%蜗牛酶+5mmol/L二硫苏糖醇,酶解时间6h,其它条件与黑曲霉的相同。 相似文献
15.
16.
17.
18.
水稻原生质体细胞核及原生质体融合体的简易染色观察法 总被引:2,自引:0,他引:2
筛选出一种荧光染料罗丹明B(Rhodamine B),利用该荧光染料染色,原生质体细胞核在普通光学显微镜或荧光显微镜下呈红色或发出强烈的桔红色荧光,能清晰地进行分辨。利用罗丹明B或者使用荧光染料FDA,对两种不同来源的原生质体进行染色,在荧光显微镜下,两种不同来源的原生质体分别发出桔红色或绿色荧光,因此可以用于原生质体融合中不同的融合体类型的观察和分析。 相似文献
19.
Summary The power of protoplast fusion as a generally applicable method for obtaining genetic recombination is demonstrated by the recombination of genes involved in avermectin biosynthesis. A backcross ofStreptomyces avermitilis strain MA6202, an improved mutant that had lost the ability to carry out the methylation of the C-5 hydroxyl of the avermectin molecule, with the original soil isolate MA4680 resulted in the recovery of at least one unambiguous recombinant class despite the instability of rifampicin resistance, one of two markers initially used for recombinant selection. Such intrinsic instability is frequently encountered in streptomycete genetics, and this result delineates the utility of protoplast fusion as a genetic tool. Other difficulties addressed include recovery of complementary recombinant classes, differences in recombination frequency due to colony density on regeneration medium, and alteration in plating efficiency on diagnostic media following protoplasting and regeneration. The results of a cross between a nicotinamide auxotroph MRG1003 and a lysine auxotroph MRG 1004 are included to aid in the elucidation of these problems as well as to support the finding of homologous recombination inS. avermitilis. 相似文献
20.
以疣粒野生稻和栽培稻02428的成熟种子为材料,对愈伤组织的诱导和继代、胚性悬浮细胞系建立、原生质体制备、再生细胞团分化及植株再生进行研究。结果表明:(1)水稻愈伤组织诱导的最佳2,4-D浓度为0.014 mmol/L;(2)胚性悬浮细胞系建立的最佳条件为AA 悬浮培养基+ 0.009 mmol/L 2,4-D ,每25 mL液体培养基加入0.4 g愈伤组织的初始接种量,7 d的继代周期;(3)原生质体制备的最佳条件为20 g/L纤维素酶+ 1 g/L果胶酶,酶解5 h,800 r/min离心5 min;(4)用荧光增白剂(VBL)细胞壁染色液可以快速、准确的检测原生质体制备及培养过程中细胞壁的变化情况。 相似文献