B淋巴细胞恶性肿瘤独特型-抗独特型研究现状

<正>根据Jerne的网络学说,免疫球蛋白(Ig)的可变区可诱导抗独特型抗体的产生。抗Id抗体能与相应抗原结合调整免疫系统,保持其内环境的相对稳定性。近年来实验证明,不仅Ig分子,B细胞的抗原受体有Id,而且T细胞抗原受体和T细胞分泌的辅助和抑制因子也有Id,他们均有抗原特异性Id和交叉反应Id。这些Id的表达均受基因调控。     

单个B细胞抗体制备技术及应用

单克隆抗体是现代生命科学研究的重要工具,为许多领域的发展作出了不可估量的贡献。随着PCR技术和单克隆抗体技术的发展和成熟,单个B细胞抗体制备技术迅速兴起。该技术能够对单个的抗原特异性B细胞进行抗体基因的体外克隆和表达,保证了轻重链可变区的天然配对,相较于传统的抗体制备技术具有效率高、全人源、基因多样性更丰富等优势。单个B细胞抗体制备技术已成为制备全人抗体的热门方法,同时也促进了包括抗体发生成熟、疫苗保护机制、疫苗开发、肿瘤及自身免疫疾病等免疫学相关研究。文中就单个B细胞抗体制备技术的过程及应用作简要综述。     

布鲁氏菌抗独特型抗体的研究

在建立布鲁氏菌单克隆抗体细胞株的基础上,筛选具有保护作用的单抗A7免疫家免制备抗独特型抗体(简称二抗)。经阻断试验和竞争抑制试验证实,该二抗具有抗原“内影象”。将其提纯后配制成甘油佐剂苗免疫豚鼠和小白鼠．检测结果表明：免疫豚鼠和小白鼠产生了布鲁氏菌凝集抗体;免疫小鼠的循环T ANAE-细胞百分数明显高于对照组;免疫豚鼠在免疫后4个月时强毒菌株攻击有79．2％获得保护。因此认为,该二抗不仅具有抗原的。内影象”结构,而且具有良好的免疫原性,可供作疫苗用。     

B淋巴细胞表面抗原及其生物学意义

B细胞表面抗原是目前研究B细胞激活、增殖和分化调控的两个重要领域之一。B细胞表面抗原作力B细胞表面标志,其研究已相当深入,这些抗原的表达细胞种类、分布谱和生化特性都已基本明确。其中一些抗原的生物学意义也已明确,如已证明CD19抗原的功能是抑制B细胞激活、相反CD20抗原能启动B细胞激活;CD21、CD22和CD40却能增强B细胞的增殖;CD23则又能与B细胞自分泌生长有关等。不但如此,许多实验室已使用分子生物学技术克隆各CD抗原的编码基因,从分子水平上进行研究。     

抗人B7-H1单克隆抗体的制备和鉴定

目的:采用杂交瘤技术制备抗人B7-H1单克隆抗体,并对其进行鉴定。方法:经抗原免疫的小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞以常规方法融合;用间接ELISA法筛选分泌抗体的杂交瘤细胞株;阳性克隆用有限稀释法获得稳定分泌抗人B7-H1单克隆抗体的杂交瘤细胞株;扩增杂交瘤细胞注射进小鼠腹腔后制备腹水;纯化腹水中的单克隆抗体并对其亚型进行鉴定;用间接ELISA法测抗体效价;将肺癌组织制成石蜡切片,用抗人B7-H1抗体进行免疫组化染色。结果:获得1株稳定分泌抗人B7-H1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的单抗类型为IgG1;抗体效价为1×108,纯化后的抗体含量为6.76g/L;免疫组化实验中,单抗可与肺癌组织表面的B7-H1蛋白特异地结合。结论:制备了人B7-H1单克隆抗体,为B7-H1检测试剂盒的研制奠定了基础。     

B淋巴细胞激活因子研究进展

B淋巴细胞刺激因子(BAFF)在B细胞免疫中具有促进B细胞的分化、成熟,调节体液中的抗体反应等重要的作用。然而过多的BANFF表达可使B细胞存活时间延长,B细胞数目增多,活性过高而导致自身免疫性疾病。BAFF与细胞表面的三种受体结合,执行着并不完全相同的功能。由于BAFF在B细胞发育、分化及白体免疫性疾病(特别是系统性红斑狼疮)中具有重要的作用,BAFF及其下游的信号转导因子成为疾病治疗的理想靶位。     

抗A、抗B血型单克隆抗体试剂稳定剂的筛选研究

临床上使用的抗A、抗B血型定型试剂根据其原材料来源,可分为多克隆抗体(免疫马血清)和单克隆抗体两大类,与多克隆抗体血型试剂相比,单抗血型试剂具有生产成本低、亲合力高等优点,但单抗血型试剂的稳定性欠佳。通过向单抗血型试剂中加入不同配比的稳定剂,观察其对抗A、抗B血型单抗     

抗B型葡萄球菌肠毒素单克隆抗体的研制及其鉴定

本文用纯化B型葡萄球菌肠毒素(SEB)免疫Balb/c小鼠的脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,经筛选及克隆化共获6株能稳定分泌抗SEB的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株。通过将以混合佐剂(降植烷 FIA的混合物)和杂交瘤细胞同时注射制备McAb腹水的方法与常规法相比较,不仅量多(多1.56～1.84倍),而且活性好(高1个数量级)。初步鉴定表明:6株McAb均属IgGl亚类;其培养上清和腹水的ELISA滴度分别为10~(-3)～10~(-4)和10~(-5)～10~(-8)。它们与SEA均不起反应,其中3株(Sl.B4和E7)与SECl有轻微交叉反应;都能被10μg/m的SEB完全阻断等。说明其免疫学活性及特异性均较良好。     

不同刺激对小鼠B细胞表面IgD表达的影响

本文通过细胞流式计（ＦＡＣＳ）技术,利用单克隆抗体抗－ＩｇＤ［Ｉｇ（５ｇ（５ａ）７．２］研究了膜表面ＩｇＤ（ｓＩｇＤ）在新制备的小鼠Ｂ细胞上的表达。并通过用不同的丝裂原刺激脾脏休止Ｂ细胞,研究了不同刺激对Ｂ细胞ｓＩｇＤ表达的调节,发现脾脏Ｂ细胞形成两个主要细胞群,高浮力密度小Ｂ细胞高度表达ｓＩｇＤ的细胞主要是低浮力密度大Ｂ细胞。无论用细菌脂多糖（ＬＰＳ）或抗－ＩｇＭ和白细胞介素－６（ＩＬ－６）刺激     

CD23McAb抑制活化B细胞增殖机制的初步探讨

本研究用ＣＤ２３单克隆抗体交联活化的人扁桃体Ｂ细胞,证明ＣＤ２３ＭｃＡｂ对Ｂ细胞呈双向调节效应,即：高浓度区抑制Ｂ细胞增殖,低浓度区促进Ｂ细胞增殖,继而,用对Ｂ细胞有抑制效应浓度的ＣＤ２３ＭｃＡｂ交联Ｂ细胞膜ＣＤ２３分子,通过研究抑制效应恢复条件,探讨了ＣＤ２３ＭｃＡｂ产生抑制效应的作用机制。结果显示：去除ＣＤ２３ＭｃＡｂ后,抑制作用不能恢复,用ＳＡＣ再次活化,使Ｂ细胞恢复增殖状态,用促Ｂ细胞增殖     

黄曲霉毒素B1抗独特型抗体的制备和应用研究I抗独特型抗体的制备和性质研究

以黄曲霉毒素B1(AFB1)与牛血清蛋白（BSA)的连接物AFB1-BSA注射免疫兔子获得抗AFB1抗血清,经(NH4)2SO4沉淀、酶切处理与亲和层析分离纯化后,得到抗AFB1独特型抗体Ab1及其酶切片段Fab1,然后再将Fab1注射免疫BALB／c小鼠,得到抗(抗AFB1)独特型抗体Ab2及其酶切Fab2。研究了Ab2和Fab2的性质,结果表明,Ab2和其Fab2部仅与Ab1及其Fab1反应,而不和抗桔霉素等其他抗体反应,有较好的特异性。以AFB1与卵清蛋白(OV)的连接物AFB1-OV为包被抗原,Fab1为反应抗体,Ab2和Fab2为竞争抗原,达到50％的竞争抑制率时,Ab2和Fab2的浓度分别为3．98ug／ml和1．12ug／ml;而以Ab2和Fab2为包被抗原,Fab1为反应抗体,AFB1为竞争抗原,达到50％的竞争抑制率时,AFB1的浓度分别为44．67ug/L和6.31ug／L,这表明无论是Ab2还是Fab2都和AFB1有很好的内影像关系,可以作为AFB1的替代品用于AFB1的免疫学检测。但是相对而言,由于Fab2的分子量小,反应时的空间位阻小,所以Fab2更适合于用作AFB1的替代品。     

Inducible resistance to Fas—mediated apoptosis in B cells

Apoptosis produced in B cells through Fas(APO-1,CD95) triggering is regulated by signals derived from other surface receptors:CD40 engagement produces upregulation of Fas expression and marked susceptibility to Fas-induced cell death,whereas antigen receptor engagement,or IL-4R engagement,inhibits Fas killing and in so doing induces a state of Fas-resistance,even in otherwise sensitive,CD40-stimulated targets.Surface immunoglobulin and IL-4R utilize at least partially distinct path ways to produce Fas-resistance that differentially depend on PKC and STAT6,respectively.Further,surface immunoglobulin signaling for inducible Fas-resistance bypasses Btk,requires NF-κB,and entails new macromolecular synthesis.Terminal effectors of B cell Fas-resistance include the known anti-apoptotic gene products,Bcl-XL and FLIP,and a novel anti-apoptotic gene that encodes FAIM (Fas Apoptosis Inhibitory Molecule).faim was identified by differential display and exists in two alternatively spliced forms;faim-S is broadly expressed,but faim-L expression is tissue-specific.The FAIM sequence is highly evolu tionarily conserved,suggesting an important role for this molecule throughout phylogeny.Inducible resistance to Fas killing is hypothesized to protect foreign antigen-specific B cells during potentially hazardous interactions with FasL-bearing T cells,whereas autoreactive B cells fail to become Fas-resistant and are deleted via Fas-dependent cytotoxicity.Inadvertent or aberrant acquisition of Fas-resistance may permit autoreactive B cells to escape Fas deletion,and malignant lymphocytes to impede anti-tumor immunity.     

两性霉素B脂质体抗烟曲霉的研究

目的 通过对两性霉素B脂质体（L-AmB）的烟曲霉抵抗实验的研究,初步探讨其抗真菌的机制,为临床的合理使用两性霉素B脂质体提供实验指导。方法 将烟曲霉菌株复苏后,接种于沙保弱平板,恢复正常毒力。用洗液洗脱烟曲霉的孢子,进行两性霉素B脂质体及两性霉素B体外抗真菌的研究;用注射器吸取一定量的含烟曲霉孢子的溶液,注入小鼠的肺部,当确证其肺部感染了烟曲霉后,用L-AmB进行治疗,后期通过观察小鼠肺部的病理结果判断疗效并检测鼠肺部细胞在药物治疗后的细胞自噬相关基因LC3B,Beclin-1的水平。结果 L-AmB组的体内外抑菌作用强于AmB组且L-AmB可显著增加鼠肺部细胞的自噬水平。结论 两性霉素B脂质体可通过显著的增加细胞的自噬水平,来有效的抵抗烟曲霉的感染。     

小鼠B淋巴细胞活化过程中Ly—5（B220）的表达

本文通过ＦＡＣＳ技术,利用单克隆抗体ＲＡ３－６Ｂ２抗Ｌｙ－５（Ｂ２２０）研究了Ｌｙ－５（Ｂ２２０）在新制备的小鼠脾脏Ｂ细胞上的表达,特别是用不同的丝裂原刺激而激活Ｂ细胞后Ｌｙ－５（Ｌｙ－５ｈｉ）,浮力密度较低的大Ｂ细胞则为Ｌｙ－５＾ｌｏｗ。用多允隆刺激因子ＬＰＳ（细菌脂多糖）刺激脾脏高浮力密度小Ｂ细胞,可诱导Ｌｙ－５的表达仍保持较高状态,但当用抗－ＩｇＭ与白细胞介素－６一起刺激时,则诱导Ｌｙ－５的     

NF-κB信号转导途径与肿瘤抗凋亡关系的研究进展

细胞核因子κB(NF—κB)家族及其介导的细胞信号转导通路广泛调控着人类免疫和炎症反应中一系列基因的表达,同时也发现它对肿瘤的发生发展有着重要作用,特别是它可以调控一些细胞凋亡相关基因如TRAF家族、IAPs家族、Bcl-2家族及FLIP基因、p53基因、COX-2基因的转录表达,从而大大提高肿瘤细胞的抗凋亡能力。本文就近年来对NF—κB通路与肿瘤抗凋亡关系的研究进展作一综述。     

抗人活化血小板单克隆抗体SZ—51可变区基因的克隆与序列分析

抗人活化血小板单克隆抗体ＳＺ—５１可变区基因的克隆与序列分析顾建明,张效民,万海英,李佩霞,Ｍ．Ｐ．ＬＥＦＲＡＮＣ阮长耿（江苏省血液研究所,苏州医学院血栓与止血研究室,２１５００７）法国Ｍｏｎｔｐｅｌｌｉｅｒ分子遗传研究所关键词单克隆抗体,免疫球蛋白...