临床相关毛孢子菌的鉴定及体外药物敏感性研究

目的探讨临床相关毛孢子菌的鉴定方法及对常见抗真菌药物的体外敏感性。方法对48株临床分离的毛孢子菌分别通过形态学、API20C AUX、Vitek 2 Compact及核糖体rDNA ITS序列分析等方法鉴定到种;采用浓度梯度法（E-test）测定氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑、两性霉素B及卡泊芬净对48株毛孢子菌的最低抑菌浓度。结果形态学和API20C AUX、Vitek 2 Compact不能准确区分不同种的毛孢子菌,以核糖体rDNA ITS序列分析将48株毛孢子菌鉴定为8个种：阿萨希毛孢子菌,星型毛孢子菌,皮瘤毛孢子菌,真皮毛孢子菌,皮肤毛孢子菌,赖巴克毛孢子菌,T.domesticum,T.jirovecii。体外药敏结果显示：卡泊芬净对毛孢子菌无体外活性,MIC〉32μg/mL;氟康唑和两性霉素B对毛孢子菌活性差,体外活性最好的药物是伏立康唑和伊曲康唑。结论常规方法不易将毛孢子菌准确鉴定到种的水平,ITS序列分析准确快速,可以辅助临床区分难鉴定毛孢子菌。毛孢子菌药敏谱不同于临床常见其他酵母菌,氟康唑和两性霉素B对其活性差,伏立康唑具有良好的体外抗菌活性。     

侵袭性毛孢子菌感染的诊断和治疗

侵袭性毛孢子菌感染主要包括真菌血症、单个器官感染和播散性毛孢子菌病,常发生于免疫低下人群,尤其因患有血液病或化疗而出现中性粒细胞减少的患者,诊断需结合临床表现、组织病理活检和血培养等。由于毛孢子菌属种间鉴定的困难和标准化体外药敏试验的缺乏,毛孢子菌病的最佳治疗方案尚未确定,应根据体外药敏试验制定个体化治疗方案。     

基于PubMed数据库毛孢子菌病临床研究文献计量学分析

目的分析国际毛孢子菌病文献概貌,了解毛孢子菌病临床相关研究现状,为更好地开展毛孢子菌临床研究提供思路和依据。方法利用汤森路透TDA软件分析PubMed数据库收录的毛孢子菌病临床相关文献的时间、国家、期刊、作者和高频主题词分布,并获得作者合作网络图。结果临床毛孢子菌病相关文献始于1970年,经过1981～1992年的快速增长期后,近年来数量增长不明显。日本在临床毛孢子菌病研究领域具有领先优势,美国、印度、巴西、法国和中国内地发文量也较多。刊载毛孢子菌病临床研究文献最多的期刊是《日本胸部疾病杂志》（Nihon Kyobu Shikkan Gakkai Zasshi,Japa—nese Journal of Thoracic Diseases）和《临床微生物学杂志》（Journal of Clinical Microbiology）。发文量最多的作者分别是熊本大学医学部的Ando M、Araki S和琦玉医科大学的Sakata T。毛孢子菌病的高频主题词涉及毛孢子菌病的诊治、宿主免疫和毛孢子菌致病机制等。结论日本和美国仍是相关领域的研究大国,但近5a来,更多的中国科研团队加入到这一研究领域,提高了我国学者的学术影响力。侵袭性毛孢子菌病的诊治是临床毛孢子菌病研究的主要关注点。     

阿萨希毛孢子菌生物膜构建及水杨酸干预策略研究

目的在医院内常用生物材料聚氯乙烯（PVC）表面构建阿萨希毛孢子菌的生物膜,评估该生物膜对几种临床抗真菌药物的耐药性,并观察水杨酸是否对阿萨希毛孢子菌生物膜的形成有干预作用。方法菌株鉴定采用API20CAUX并经PCR鉴定复核;使用PVC于RPM11640-MOPS中培养进行阿萨希毛孢子菌生物膜构建;MIC测定采用法国生物梅里埃公司ATB Fungus-3真菌药敏试剂条以及微量液体稀释法,并观察水杨酸对生物膜构建的影响。结果阿萨希毛孢子菌可以通过几个不连续阶段在聚氯乙烯表面形成生物膜,且已使用PVC块上附着的生物膜细胞比未使用PVC块上黏附的生物膜细胞明显密集;固着相即生物膜细胞的MIC比浮游相成倍提高;24h两性霉素B的MIC〉512μ/ml,且经两性霉素B的药物刺激后,阿萨希毛孢子明显可见芽管延长,菌丝交织;水杨酸作用后阿萨希毛孢子菌的菌丝明显变短,孢子短小。结论介入性器械可以作为阿萨希毛孢子菌生物膜构建的黏附基质,使微生物群体黏附于细胞外多聚材料表面而造成持续播散感染,因此生物膜干预对阿萨希毛孢子菌深部感染的治疗有很重要的意义。     

从糖尿病患者血液中检出一株出芽毛孢子菌

20 0 2年 8月 ,我室从一糖尿病患者血液中检出一株出芽毛孢子菌 (Trichosporonpullulans) ,现报道如下。1　病历摘要患者 ,女 ,5 0岁 ,住院号 :2 11138,既往有糖尿病史。 4天来因发热、头晕、头痛、上腹部疼痛、恶心、呕吐 ,到当地卫生院治疗 ,症状无缓解 ,于 2 0 0 2年 8月 2 8日入我院。查体 :T39 7℃ ,P 86次 /分 ,BP 12 0 / 75mmHg ,R 2 0次 /分 ,WBC7 7× 10 9/L、N 0 86、L 0 14、Hb 12 8g/L、PLT 16 2× 10 9/L ,血糖 2 8 3mmol/L。一般情况差 ,呼吸音清 ,腹平软 ,上腹部压痛、无反跳痛 ,四肢无畸形和浮肿。初步诊断 :1 发…     

红色毛癣菌的研究进展

红色毛癣菌是最常见的也是世界范围内传播是广的一种皮肤癣菌,属毛癣菌属,本文简述了最近几年在该菌的基因鉴定,基因分类,基因结构的分子生物学研究和免疫学研究方面的主要进展,在基因鉴定中发展了红色毛癣菌特异性探针TR20S和毛癣菌属特异性引物TR1、TR2和NS5,NS6;利用测序方法对毛癣菌属进行了重新分类,并且用探针,限制性片段多态性分析等方法对红色毛癣菌进行了种内分型研究。     

实验室确诊的孢子丝菌感染51例

孢子丝菌病由申克孢子丝菌感染而引起,由于一些医师缺乏对该疾病临床表现的认识及实验室检查手段的欠缺,易造成误诊。为了提高对该病的诊断率,减少因误诊给患者带来的痛苦,我们选择了2005年在外院误诊的病例51例,后经我院真菌实验室和病理室检查纠正原诊断的患者情况进行报道。     

rRNA基因序列分析在阿萨希毛孢子菌鉴定中的应用

作者对近年有关毛孢子菌属rRNA分析的研究进行了综述,目前的研究结果表明。RNA的26S亚基的D1／D2区、ITS和IGS区的序列分析对毛孢子菌属的鉴定均有一定价值,其中ITS转录间区与18S、5．8S以及26S相比具有较高的特异性;IGS区序列分析优于ITS区序列分析;IGS1区优于IGS2区。     

申克孢子丝菌感染诊治1例

通过1例16岁女孩由申克孢子丝菌导致的皮下孢子丝菌病,口服伊曲康唑治疗有效,回顾申克孢子丝菌的实验室检验方法 ,以此来提高孢子丝菌感染的诊断水平。     

改良CLSI M38-A方案应用于红色毛癣菌的研究进展

国内外学者将改良CLSI M38-A方案应用于红色毛癣菌时进行了改进。这些改进包括红色毛癣菌培养基为燕麦培养基、马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）、沙堡弱葡萄糖琼脂（SDA）,接种物仅含小分生孢子,培养基为RPMI1640,接种物量为CFU/ml,培养温度为28℃,培养时间为7 d,MICs终点确定标准为MIC-0,质控菌株选择须癣毛癣菌MRL1957和红色毛癣菌MRL666。     

联合应用抗真菌药物对不同地区来源红色毛癣菌的体外敏感性实验

目的调查联合应用抗真菌药物对不同地区来源红色毛癣菌的体外抗真菌作用,探讨药物的体外相互作用及地区因素对红色毛癣菌药物敏感性的影响。方法以M38-A方案测定酮康唑、萘替芬、联合使用酮康唑萘替芬以及单用特比萘芬对红色毛癣菌的最小抑菌浓度(MIC),并计算了酮康唑与萘替芬的药物间抑菌浓度指数(FICI)。结果联合使用酮康唑萘替芬组的最小抑菌浓度显著低于单用酮康唑、萘替芬组,和单用特比萘芬组的疗效相似。北京的红色毛癣菌株对上述药物的敏感度均低于上海和南京的菌株。结论联合应用抗真菌药物优于单用,地区差异可能会影响红色毛癣菌对药物的敏感性。     

球形孢子丝菌致婴儿固定型孢子丝菌病1例及相关实验研究

报道1例由球形孢子丝菌所致的婴儿固定型孢子丝菌病。患儿女,3个月,因左眼下内侧皮损2个月就诊,皮损脓液标本进行真菌培养,对培养获得菌株进行形态学、生理学和分子生物学鉴定,并进行药物敏感性检测。真菌培养阳性,镜下可见典型的套袖样菌丝。钙调蛋白基因序列分析鉴定为球形孢子丝菌。药敏试验显示特比萘芬和伊曲康唑对该菌株的菌丝相最低抑菌浓度（minimal inhibitorycon centration,MIC）分别为0．5μg／mL和0．5μg／mL;对该菌株的酵母相的MIC值分别为0．25μg／mL和0．5μg／mL。给予患者口服特比萘芬32．5mg／d治疗10周后皮损消退呈瘢痕化修复。依据临床及实验室检查确诊该病例为球形孢子丝菌所致固定型孢子丝菌病,特比萘芬治疗本病例显示较好疗效。     

犬小孢子菌病67例临床观察

犬小孢子菌病为亲动物真菌,感染人类致头皮、头发、皮肤及甲的传染性疾病,还可致头皮深在性感染引起脓癣等。以往均按其发病部位分别归人其他皮肤癣菌病如头癣、体癣等病种内报告。国内少有人将犬小孢子菌所致的病作为一独立的疾病来全面描述。为进一步认识犬小孢子菌及其所致疾病的特征,提高诊断、治疗、预防水平。作者在上海复旦大学华山医院皮肤科进修期间观察了经真菌培养为犬小孢子菌的67例癣菌病患者的真菌学特点和临床表现,并对其特征进行分析研究,现归纳报道如下。     

须癣毛癣菌分类进展

须癣毛癣菌以往被视为单一的菌种,然而随着形态学和分子生物学等试验的研究,逐步探索并明确须癣毛癣菌的菌间分类及有性型的关系.本文综述了须癣毛癣菌在亲宿主性、交配试验、形态学和生理学试验、及分子生物学试验所进行的研究.     

须癣毛癣菌的形态学及分子生物学鉴定

目的对临床上分离自人(36株)及狐狸(5株)的须癣毛癣菌菌株进行新的分类系统鉴定,并检测传统的分类方法是否能满足临床鉴定需要。方法①观察原鉴定为须癣毛癣菌菌株在沙氏培养基、1%蛋白胨培养基、溴甲酚紫乳固体葡萄糖琼脂培养基(BCP-MSG)和显微镜下形态学及尿素酶、毛发穿孔等生理学试验表现。②通过ITS区段和LSU区段分子生物学序列分析进行新的分类系统的菌种分型,并对传统形态学和生理学鉴定方法进行检测。结果①41株须癣毛癣菌形态学及生理学试验符合须癣毛癣菌(38株)和红色毛癣菌(3株)菌落的特点。②ITS区段序列分析发现ITS区段能将须癣毛癣菌和红色毛癣菌准确的鉴定到种,但无法明确其种内分型;而LSU区段序列分析可对36株(36/38)须癣毛癣菌有性型做出明确的鉴定。结论传统实验室鉴定方法仍具有其有效性及可靠性。通过分子生物学鉴定,临床分离的须癣毛癣菌皆为指(趾)间毛癣菌(38/38),而LSU区段的序列分析鉴定狐狸源性菌株皆属于本海姆节皮菌,有别于大多数人源性菌株有性型为万博节皮菌,对于须癣毛癣菌的菌种鉴定更优于ITS区段,但分子生物学试验还需结合形态学的观察,才能够对菌种做出正确的鉴定。     

来自中国北方部分地区33株孢子丝菌菌株的表型和基因型鉴定

孢子丝菌病是一种临床常见的真菌感染疾病,近期有研究认为其致病菌是由多个同形种构成的复合体。为明确我国孢子丝菌病致病菌的生理学以及分子生物学方面的特点,对33株分离自我国孢子丝菌病患者组织的病原菌进行了研究,首先检测其在37℃是否生长以及PDA培养基上生长21d的菌落直径,其次检测其糖同化特点,最后对其钙调蛋白(Calmodulin,CAL)基因进行PCR扩增、序列测定以及系统进化分析。结果显示,这些菌株全部为球形孢子丝菌Sporothrix globosa,说明我国孢子丝菌病的病原菌可能以球形孢子丝菌为主。     

孢子丝菌病43例临床分析

目的 探讨孢子丝菌病的发病原因及特点。方法 就1991～2002年间在本院就诊的深部真菌病病例,利用沙氏真菌学检查方法筛查确诊为孢子丝菌病43例并进行临床观察。结果 1991—1993年患者5例（11．63％）,1994～1996年水灾后2年内患者34例（79．07％）,1997～2002年5年内患者4例（9．30％）。有明显外伤史及疑似蚊、蜂叮螫者占总发病人数72．09％。伴高血压者占20．93％。碘化钾治愈率100％。结论 各种原因造成的环境污染或某些自然灾害致使腐生菌大量生长繁殖是引起本病区域性流行的根本原因。外伤及昆虫叮、螫为重要致病条件。碘化钾为首选治疗药物。     

播散型孢子丝菌病

孢子丝菌病是申克孢子丝菌引起的皮肤、皮下及附近淋巴管的慢性结节或溃疡性病变。最早由美国的Baltimore报道了首例,1898年Schenck由上肢多发性脓肿中分离出病原菌,称为Sporotrichumsp．。1900年Hektoen和Perkins报道了第2例,将病原菌命名为SporotrixSchenckii。1920年西泽等报道了日本首例。1916年刁德信报道了我国首例。以后世界各国陆续报道,为世界性分布。     

皮肤型孢子丝菌病316例临床分析

目的探讨孢子丝菌病的临床特征及病理特点,指导临床实践。方法分析1972～2007年间就诊于我院的孢子丝菌病447例,其中有详细资料者316例,做皮肤组织病理检查的203例中,105例做了PAS染色检查。结果春季发病者占50．34％,临床分型以固定型略多（52．53％）。儿童主要以面部发病。主要病理改变为混合细胞性肉芽肿。PAS染色阳性率为38．1％。结论孢子丝菌病常年皆可发病,近几年有增多的趋势,春季为本病高发季节。儿童皮损主要在面部,多为固定型。病理改变多为混合细胞性肉芽肿。病理切片、PAS染色诊断阳性率不高,确诊主要靠真菌培养。     

1株多重耐药申克孢子丝菌感染的治疗

报道1例由多重耐药申克孢子丝菌引起的面部孢子丝菌病。患者61岁男性,面部皮疹2 a余,先后口服伊曲康唑、特比萘芬和氟康唑治疗16个月无效。患者皮损经真菌镜检和培养确诊为孢子丝菌病,分离的申克孢子丝菌体外药敏试验显示其菌丝相和酵母相对上述三种药物均不敏感。给予患者口服10%碘化钾溶液治疗3个月获得痊愈。