中华羊茅内生真菌Epichlo? sp.挥发性物质的抑菌活性及成分分析

为测定中华羊茅内生真菌Epichloe sp.挥发性物质的抑菌活性和成分,依次采用挥发油提取器和乙酸乙酯萃取Epichloe sp.菌株的发酵产物,再采用琼脂扩散法、悬滴法和滤纸片扩散法测定其抑菌活性;基于顶空固相微萃取和气相质谱联用法分析挥发性物质成分。结果表明:挥发性物质、乙酸乙酯提取物、水相部分和发酵液可以抑制小麦根腐离蠕孢(Bipolaris sorokiniana)、新月弯孢(Curvularia lunata)和黑曲霉(Aspergillus niger)菌丝生长。高浓度的挥发性物质对四种真菌孢子萌发和芽管长度抑制效果显著高于低浓度(P<0.05)。结果表明,随着挥发性物质浓度的增加对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和大肠杆菌(Escherichia coli)的抑菌作用增强,同一挥发性物质浓度对金黄色葡萄球菌的抑制作用强于大肠杆菌。此外,从挥发性物质中鉴定出32种具有较高质谱匹配度的化合物,其中主要成分包括异山梨醇(16.26%)、甲基叔丁基醚(8.18%)、二氢甘露醇(3.75%)、羟基丙酮(2.99%)、乙酸(1.22%)、己醇(1.20%)、3-糠醛(0.92%)、5-羟甲基二氢呋喃-2-酮(0.86%)、5-羟基戊酸-2,4-二叔丁基苯酯(0.86%)和棕榈酸甲酯(0.85%)。总之,中华羊茅内生真菌Epichlosp.挥发性物质具有拮抗细菌和真菌的作用。     

藓类提取物对植物病原真菌的抑菌性研究

以立枯丝核菌(Rhizoctonia)、尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)、苹果轮纹病菌(Macrophoma kawatsukai)、梨黑星病菌(Fusicladium pirina)、草莓灰霉菌(Botrytis cinerea)等七种植物病原真菌为供试菌,通过生长速率法测定了24种藓类的乙醇提取物对病原真菌的抑制作用.结果表明,在提取物浓度为1.2mg干样/mL,大镰刀藓提取物对立枯丝核菌的抑制作用最强,抑菌率为67.8%.藓类提取物不仅对植物病原真菌有抑菌活性,而且还有多种藓类提取物对病原真菌菌丝有促进生长活性,如锐尖匍灯藓对立枯丝核菌菌丝生长的促进率为95.1%.选出大镰刀藓、扁灰藓、紫萼藓、山地水灰藓、疣小金发藓、橙色净口藓、锐尖匍灯藓和羊角藓对立枯丝核菌和灰霉菌的抑菌性或菌丝生长促进性进行了进一步研究,藓类提取物对病原菌的抑菌性或菌丝生长促进性在一定范围内随浓度的增加而增强,并且抑菌性随时间的延长呈下降趋势.     

珍珠柴粗提物对13种植物病原菌的抑制活性

以生长速率法测定了珍珠柴7种溶剂粗提物对棉花黄萎病菌V991、棉花黄萎病菌V43-1、棉花枯萎病菌、茄子黄萎病菌、稻曲病病菌、苹果黑星病菌、番茄枯萎病菌、番茄叶霉病菌、黄瓜黑星病菌、西瓜炭疽病菌、芦笋茎枯病菌、扩展青霉和梨黑斑病菌13种植物病原菌的抑制活性。结果表明,不同溶剂粗提物的抑菌活性差异很大,某些溶剂粗提物对个别病菌表现出较强的抑制作用,如水粗提物对棉花黄萎病菌V991,石油醚粗提物对苹果黑星病菌的抑制率分别达100%和91.89%;有的溶剂粗提物的病菌抑制作用较弱,如二氯甲烷粗提物对13种病菌的抑菌率均较低;有些还表现出一定的促进生长作用,如甲醇粗提物对梨黑斑病菌表现为明显的促进生长作用。     

黄花草木樨提取物抑菌活性初探

采用离体和活体试验方法分别测定了黄花草木樨不同溶剂提取物对12种植物病原真菌的抑菌活性.结果表明:各溶剂提取物对12种植物病原真菌均具有不同程度的抑菌活性,其中以乙酸乙酯提取物的抑菌活性最高,对油菜菌核病菌、玉米大斑病菌和白菜黑斑病菌抑制菌丝生长的EC50分别为0.62、0.83、0.64g/L,对稻瘟病菌和玉米大斑病菌抑制孢子萌发的EC50分别为0.67、0.97g/L.离体组织法测定表明其乙酸乙酯提取物对番茄灰霉病菌具有较高的保护和治疗作用,在浓度为5.0g/L时,防治效果分别为75.41%和59.18%(6d).活体试验表明乙酸乙酯提取物对小麦白粉病和小麦条锈病也有一定的保护作用,在浓度为10.0g/L时,防治效果分别为73.39%和63.27%.     

10种药用植物乙醇提取物的抑真菌活性研究

真菌病害是降低农作物产量和品质的最重要因素之一,严重威胁粮食安全.化学农药是防治真菌的有效手段,但长期不合理的使用,其弊端凸显;而采用植物代谢产物防治真菌病害是化学杀菌剂的理想替代品.因此,本研究采用菌丝生长速率法,检测了10种药用植物的乙醇提取物对9种植物病原真菌的抑制效果.结果表明姜黄、川芎、苦参乙醇提取物在1 000 g/mL浓度下对超过5种真菌(马铃薯晚疫菌、西瓜枯萎菌、小麦赤霉菌、水稻纹枯菌和苹果轮纹菌)的抑制率高于50%,显示出较高的抑菌活性.本研究发现姜黄、川芎、苦参具有广谱抑菌活性,抑菌活性成分值得进一步分离鉴定,为寻找天然产物抑真菌活性物质提供了参考依据.     

广西夹竹桃内生真菌的多样性和抑制几种水产病原菌活性筛选

为研究夹竹桃(Nerium oleander)内生真菌的多样性并评价其次生代谢产物的活性，该研究对广西夹竹桃(Nerium oleander)的内生真菌进行分离纯化，采用形态学和ITS序列分析结合的方法进行鉴定，以5种指示菌(其中有3种弧菌)对内生真菌提取物进行抑菌活性筛选。结果表明：(1)从广西夹竹桃中共得到19株内生真菌，这19株内生真菌都属于子囊菌门，涵盖5个目7个属，包括炭疽菌属(Colletotrichum)、球座菌属(Guignardia)、叶点霉属(Phyllosticta)、新壳梭孢属(Neofusicoccum)、曲霉属(Aspergillus)、隔孢壳科新属(Nothophoma)和间座壳属(Diaporthe),优势属为炭疽菌属(分离率为36.85%)和球座菌属(分离率为21.05%),其中炭疽菌属主要分布于茎，球座菌属全部来源于叶。(2)jing-117(Neofusicoccum sp.)和ye-130(Guignardia sp.)对坎氏弧菌有较为特异的抑菌效果，ye-136(Aspergillus sp.)能同时抑制蜡样芽孢杆菌和坎氏弧菌，ye-135(A...     

苹果树内生菌筛选及其对苹果腐烂病防治效果

为了获得苹果腐烂病菌的内生拮抗菌株,并初步研究其拮抗特性以及防治效果,用平板对峙法从苹果树根部、茎部、叶片筛选到具有拮抗作用的内生菌,明确其无菌滤液的抑菌效果,并测定拮抗菌株对苹果离体果实腐烂病害的防治效果。从分离纯化的56株内生菌中筛选出12株苹果腐烂病菌的拮抗菌,其中G2、G9、J32和Y40的抑菌效果比较明显,分别为69.64%、58.93%、67.86%、67.88%,当G2和G9的无菌滤液浓度达到8%时,其抑制率最高,分别达到了78.26%、76.29%,J32和Y40的无菌滤液浓度达到8%时抑制率均达到72.33%;在苹果果实离体试验中,G2、Y40的抑制率分别达到32.56%和26.89%;所筛选的这4株菌株对小麦赤霉病菌(Fusa Hum graminearum)、番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、烟草赤星病菌(Alternaria longipes)、棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporun f.sp.vasinfectum)、稻瘟病菌(Pyricularia oryzae Cav)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cucumerium)、西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)均有一定的抑制作用,其中抑制率最高达79.65%;4株菌对苹果腐烂病病原菌的抑制大多数会导致病原菌菌丝畸形。试验结果表明拮抗真菌G2、G9、J32和Y40均对苹果腐烂病菌有较强拮抗作用,为进一步开展苹果主要病害的生物防治研究提供了潜在资源菌。     

新疆苹果黑星病菌野生型菌株对腈菌唑的敏感性基线

为建立苹果黑星菌对腈菌唑的敏感性基线,对田间苹果黑星菌的抗药性监测和病害防治提供科学指导,选用从新疆长期未施任何化学农药的废弃果园中采集分离的37个苹果黑星菌野生型菌株,采用分生孢子萌发法和菌丝生长速率法进行不同浓度梯度杀菌剂腈菌唑(myclobutanil)的敏感性测定.结果表明:苹果黑星菌对腈菌唑的敏感性分布范围为...     

白色麝香霉挥发性有机化合物的抗菌活性和组成分析

采用核糖体RNA转录间隔区(internal transcribed spacer of ribosomal RNA,ITS r RNA)、RNA聚合酶II(RNA polymerase II,rpb2)和β-维管蛋白(beta-tubulin,tub1)基因系统发育分析法,鉴定了一株分离自浙江庆元的麝香霉ZJQY709,鉴定结果表明该菌为白色麝香霉Muscodor albus。生长速率法测定结果显示该菌株最适生长温度为22–28℃。二分格培养皿对峙培养法测定该菌挥发性有机化合物的抑菌活性,结果表明其挥发性有机化合物对灰葡萄孢菌和立枯丝核菌的生长抑制作用较强,而对尖孢镰刀菌和终极腐霉的抑制作用较弱。固相微萃取/气质联用法分析该菌产生的挥发性有机化合物,结果显示其挥发性有机化合物成分复杂,主要气体成分为2-甲基丙酸、乙酸-2-甲基丙酯和1-丁醇-2-甲基乙酸。     

瑞拉菌素产生菌的鉴定

自陕西秦岭太白山土壤中分离到 1株编号为S 5 12 0的放线菌。根据对其生物特征鉴定、生理生化特征分析 ,它与链霉菌属中委内瑞拉链霉菌最为相近 ,但菌种S 5 12 0对梨黑星病菌、苹果腐烂病菌等多种引起植物病害的病原真菌有拮抗和溶菌作用 ,故认为S 5 12 0是委内瑞拉链霉菌的一个新变种 ,定名为委内瑞拉链霉菌秦岭变种(Streptomycesvenezuelaevar .qinlingensis.n .Var)。     

利迪链霉菌K2对灰霉病菌的抑菌效果及抑菌物质鉴定

灰霉病是多种经济作物生产过程以及果蔬储藏运输中常见的病害,链霉菌能产生丰富的次级代谢产物,对灰霉病菌具有较好的抑制效果。【目的】筛选出更高效、功能更多的链霉菌,为针对灰霉病的生防菌剂的研发提供优良菌种。【方法】采用管碟法对菌株K2进行液体培养基的筛选及培养液活性的测定;双皿对峙等2种方法进行产挥发性物质对灰霉病菌的抑菌活性测定;通过16S rRNA基因序列分析进行菌株K2鉴定;高效液相色谱及液相色谱-质谱2种方法对培养液活性成分进行定性验证;顶空固相微萃取-气质联用对菌株K2产生的挥发性物质成分进行检测及鉴定。【结果】菌株K2在液体培养基A中产生的次级代谢物对苹果腐烂病菌、苹果轮纹病菌、核盘菌、杨树溃疡病菌和烟草赤星病菌等多种植物病原真菌均具有较强的抑制作用;K2产生的挥发性物质对灰霉病菌的抑制率达100%,且抑制效果与挥发性物质的量有关;菌株K2与利迪链霉菌(Streptomyces lydicus)亲缘关系非常接近,相似性为99%;培养液活性成分中含有谷氏菌素、丰加霉素和纳他霉素;在挥发性物质成分中发现了烯类、醇类、酯类及烷烃类等30种挥发性物质,其中含量较多的物质分别是2-met...     

核桃青皮乙醇提取物抑菌活性研究

以34种植物病原真菌和5种细菌为供试菌,采用离体试验方法对核桃青皮乙醇提取物及其萃取相进行抑菌效果研究.结果表明:核桃青皮乙醇提取物对供试病原真菌均有一定的抑制活性;在浓度为40 mg·mL~(-1)时,乙酸乙酯萃取相抑菌效果最好,对番茄灰霉、棉花立枯和小麦纹枯3种病原真菌的抑制率均为100%,对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径达12.07 mm和12.54 mm;不同浓度乙酸乙酯萃取相对相同病原菌的抑制效果差异显著,对番茄灰霉、棉花立枯、苹果炭疽、小麦纹枯和小麦赤霉5种病原菌的EC_(50)分别为:7.263 4、6.219 1、9.069 5、5.591 2和10.310 2 mg·mL~(-1).     

固相微萃取-气质法测定土壤挥发性抑菌物质*

运用固相微萃取 气相色谱 质谱法 (SPME GC MS) ,测定了参与土壤抑真菌作用的土壤挥发性成分和土壤细菌挥发性代谢物。通过比较土壤来源和土壤细菌来源的挥发性抑菌成分 ,发现在强挥发性抑菌土壤和土壤细菌代谢物中普遍存在着三甲胺、二甲基二硫醚、3 甲基 2 戊酮、甲基吡嗪、 2 ,5 二甲基吡嗪、N ,N 二甲基辛胺、十九烷等化合物。这些化合物很有可能就是参与土壤抑菌作用 ,特别是挥发性物质抑菌作用的主要成分。另外 ,为深入了解土壤中参与抑菌作用的挥发性化合物提供了简便有效的方法。     

枯草芽孢杆菌JA脂肽类及挥发性物质抑菌效应的研究

枯草芽孢杆菌JA产生的脂肽类抗生素对植物病原真菌有广谱抗性.将发酵液经过酸沉淀、甲醇抽提以及反相高效液相色谱等步骤,分离得到脂肽类抗生素的纯品.经IC50实验和抗菌谱测定,考察了脂肽类抗生素对多种植物病原菌的作用,确定了脂肽类抗生素的抗菌谱.深入研究表明,枯草芽孢杆菌JA还产生未知成分的挥发性抑菌物质,能够抑制灰霉病菌孢子的萌发和菌丝的生长.脂肽类抗生素和挥发性抑菌物质的协同作用,有助于提高枯草芽孢杆菌的生物防治效果.     

黄柏果实提取物对植物病原真菌的抑制作用

在室内测定了芸香科植物黄柏(Phellodendron chinese Schneid.)果实乙醇粗提物及其4个不同极性溶剂的萃取部分在浓度为1 mg/mL时对小麦纹枯病菌(Rhizoctonia cerealis)、稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)、番茄镰刀菌萎焉病菌(Fusarium oxysporum f. sp.lycopersici)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum)、棉花枯萎病菌(Fusarium vasinfectum)、棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae)、小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)、玉米小斑病菌(Bipolaris maydis)、西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.niverum)、梨黑星病菌(Venturia piri-na)、稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)等11种植物病原真菌的抑制作用.乙酸乙酯部分和正丁醇部分对植物病原菌均表现出较强的抑制活性,其中乙酸乙酯部分对两种丝核菌小麦纹枯病菌和稻纹枯病菌的生长抑制作用最强,抑制率分别为100.00%和89.36%;正丁醇部分对两者的抑制率分别为97.32%和61.32%.实验结果表明,黄柏果实中的抗真菌活性成分主要存在于乙醇粗提物中的乙酸乙酯和正丁醇萃取部分中.     

一株木霉菌挥发性物质的抑菌活性测定及成分分析

目的：测定木霉菌XYT-12菌株的挥发性物质对植物病原真菌的抑制活性,并分析其挥发性物质的化学成分。方法：抑菌活性测定采用对扣法,化学成分分析采用气相色谱-质谱联用法（GC-MS）。结果：木霉菌XYT-12的挥发性物质对植物病原真菌有一定的抑制活性,以对番茄灰霉病菌的抑制作用最强,达到61.78%;木霉菌挥发性物质的主要成分为6-戊基-2H-吡喃-2-酮（6PP）,在菌丝和PDB培养液挥发物中的相对含量分别为90.346%和88.729%。     

固相微萃取-气质法测定土壤挥发性抑菌物质

运用固相微萃取．气相色谱,质谱法(SPME-GC／MS),测定了参与土壤抑真菌作用的土壤挥发性成分和土壤细菌挥发性代谢物。通过比较土壤来源和土壤细菌来源的挥发性抑菌成分,发现在强挥发性抑菌土壤和土壤细菌代谢物中普遍存在着三甲胺、二甲基二硫醚、3-甲基-2-戊酮、甲基吡嗪、2,5-二甲基吡嗪、N,N-二甲基辛胺、十九烷等化合物。这些化合物很有可能就是参与土壤抑菌作用,特别是挥发性物质抑菌作用的主要成分。另外,为深入了解土壤中参与抑菌作用的挥发性化合物提供了简便有效的方法。     

基于高通量测序的3种竹子小枝真菌群落

为了解感染丛枝病时竹子真菌群落的特征,以丛枝病侵染的斑竹(Phyllostachys bambusoides f. lacrima-deae)、毛竹(Ph. edulis)和早竹(Ph. praecox)小枝为研究材料,运用高通量测序技术、DNA条码技术和生物信息学技术,分析了感染丛枝病的斑竹、毛竹、早竹真菌群落的物种组成和多样性,探讨了竹子丛枝病病原菌与其他竹子真菌之间的相关性。结果表明:(1) 3种竹子小枝共鉴定到706个最终的OTUs,所有样品中均存在的有48个; 3种感病竹子真菌群落中相对丰度较高的菌群包括:针孢麦角菌属(Aciculosporium)、竹黄属(Shiraia)、漆斑菌属(Myrothecium)、棘壳孢属(Pyrenochaeta)、刺盘孢/炭疽菌属(Colletotrichum)、镰刀菌属(Fusarium)、弯梗孢属(Camptophora)和假酵母状菌属(Pseudozyma)。(2)3种感病竹子真菌群落间的Chao1指数和Shannon指数差异不显著(P0.05)。(3) 3种感病竹子的病原菌为竹针孢座囊菌(Aciculosporium take),该菌与13种竹子真菌之间存在负相关,其中9种的相关性达到显著水平(P0.05);该菌与2种竹子真菌之间存在较弱的正相关。(4)鉴定的竹子真菌中存在绿色木霉(Trichoderma virens)、枝孢霉属真菌(Cladosporium sp.)、竹黄属真菌(Shiraia sp.)、弯孢霉属真菌(Curvularia sp.)、青霉属真菌(Penicillium sp.)和枝顶孢属真菌(Acremonium sp.),这些真菌是竹子病害潜在的生防菌。     

梨黑星菌粗毒素对抗病和感病梨离体叶片生理特性的影响

以不同抗病性梨品种为材料,研究了梨黑星菌粗毒素对梨离体叶片的过氧化物酶(POD)活性、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性、丙二醛(MDA)含量、细胞膜相对透性以及叶绿素含量变化的影响.研究表明,毒素接种后抗病和感病品种叶片的POD和PAL活性、MDA含量和相对电导率均呈上升趋势,其间会有1个或2个峰值出现,且抗病品种叶片的POD和PAL活性高于感病品种,而细胞内MDA含量和相对电导率增加比率低于感病品种;同时,毒素使梨离体叶片的叶绿素、类胡萝卜素含量下降,且感病品种的下降幅度大于抗病品种.总之,梨离体叶片POD和PAL的活性变化与梨品种抗病性呈正相关,叶片MDA含量和相对电导率变化与梨品种抗病性呈负相关,抗病品种离体叶片对毒素的毒害有更强的抵抗力.     

永州薄荷精油成分分析及其与异蛇蛇蜕浸液复配剂抑菌效果研究

为更好开发利用永州异蛇(尖吻蝮蛇)和永州薄荷两种地方特色资源,本研究通过GC-MS法分析了永州薄荷精油的成分,采用药敏纸片法测试了永州薄荷精油、异蛇蛇蜕浸液及二者复配剂的抑菌效果。结果发现,永州薄荷精油中共检出20种成分,其中含量较多的成分为薄荷醇(42.67%)、薄荷酮(27.30%),二者占总含量近70%;另有7种成分占总量比例超过1%,分别是α-蒎烯(3.65%)、β-蒎烯(3.28%)、柠檬烯(5.63%)、正辛醇(1.47%)、异薄荷醇(7.88%)、胡薄荷酮(1.35%)、乙酸薄荷酯(2.70%);还含有2种其他产区薄荷精油中未被检出的萜烯与二氢香芹醇(0.50%)。永州薄荷精油与异蛇蛇蜕浸提液均对金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌表现出抑菌活性,其中薄荷精油对痢疾杆菌的抑制效果较金黄色葡萄球菌更佳,而异蛇蛇蜕浸提液则对二者的抑制活性无显著差异;两种提取物复配液的抑菌效果优于各自单方;相同原液浓度下,二者最佳复配比为薄荷精油:蛇蜕浸提液1∶2(V∶V);复配剂对痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度分别为15和10 mg/mL。研究结果为两种地方特色动植物资源的协同开发提供了实验依据。