DNFB柱前衍生化RP-HPLC测定大黄种子氨基酸的含量

采用柱前衍生RP-HPLC法测定大黄种子中氨基酸的含量。6 mol/L盐酸水解得到氨基酸,以2,4-二硝基氟苯(DNFB)为柱前衍生化试剂,梯度洗脱。色谱柱为Gemimi-NX C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相A相为0.1 M乙酸钠水溶液,B相为乙腈-水(1∶1),柱温37℃,检测波长360 nm。结果表明,三种正品大黄种子中均含有17种氨基酸,总量在11.30%~19.26%。该方法灵敏、准确,有良好的重复性和稳定性。     

柱前衍生反相高效液相色谱法测定绞股蓝茶叶中17种游离氨基酸含量

建立2,4-二硝基氟苯柱前衍生化-反相高效液相色谱法测定绞股蓝茶叶中17种游离氨基酸的含量。以Phenomenex Gemini NX C18(4.6mm×250mm,5μm)为分析柱,采用梯度洗脱,流动相A为0.05mol·L-1乙酸钠(pH=6.4,含0.1%N,N-二甲基甲酰胺),流动相B为乙腈-水(1∶1,v/v),检测波长为360nm,柱温35℃;经方法学考察,该方法具有良好的稳定性和重现性。测定结果表明,绞股蓝茶叶中17种游离氨基酸总量为39.79mg·g-1,其中人体必需氨基酸占游离氨基酸总量的36.57%。从氨基酸含量考虑,绞股蓝茶叶具备一定的开发利用价值。     

应用不同柱前衍生法于HPLC测定西洋参中的氨基酸

通过微波水解衍生方法与柱前衍生方法测定西洋参中的氨基酸成分并进行对比,评价两种方法使用的合理性与应用价值。通过微波水解衍生及柱前衍生两种不同的衍生方法测定同一来源的西洋参药材中的氨基酸成分含量,比较两种实验方法的操作性、准确合理性及测定氨基酸成分含量。两种实验方法平均回收率及相对标准偏差为:柱前衍生法回收率90.1%~101.7%、RSD 0.9%~3.9%,微波水解衍生法90.1%~113.1%、RSD 1.1%~9.5%(除个别氨基酸在酸水解过程中易被破坏)。柱前衍生法主要测定游离氨基酸的含量,其中西洋参根中的精氨酸占总量的59%。微波衍生法明显缩短了氨基酸分析时间,实验操作上体现显著优势。柱前衍生法准确、可靠,测定产物稳定。测定西洋参干燥根中游离的精氨酸含量占游离氨基酸总量的一半以上,含量最高,为西洋参的化学成分与药理作用的进一步研究提供参考依据。     

两种柱前衍生反相高效液相色谱法测定血液和尿液中游离氨基酸

建立以PITC法和AQC法为柱前衍生试剂测定血液和尿液中游离氨基酸含量的测定方法。采用Waters-e2695操作系统,色谱柱为Shim-vp,ODS(250mm×4.6mm,5μm)(日本,岛津公司),以甲醇/乙腈/水和醋酸钠溶液(pH 6.5)为流动相,梯度洗脱。分别采用紫外和荧光检测器对血液和尿液中游离氨基酸进行含量测定。结果显示,两种衍生化方法灵敏度好、分离度高,具有良好的线性范围(r>0.990 0),准确度高(平均回收率为75.1%～127.0%),进样精密度好(RSD为0.12%～3.42%)。PITC法在尿液中游离氨基酸含量测定中显示了良好的测试准确性;而AQC法测定尿液中组氨酸、苏氨酸、脯氨酸超出线性范围,需要对尿样的前处理进行深入研究。     

柱前衍生化HPLC法测定黄芪中黄芪甲苷的含量

目的：建立黄芪中黄芪甲苷的柱前衍化高效液相色谱测定法,并用该法对不同产地黄芪中黄芪甲苷的含量进行比较,方法：以吡啶－苯甲酰氯（２．５：１）为衍生化试剂,对黄芪甲苷分子中的羟基进行苯甲酰化,以甲醇－四氢呋喃－水（９０：４：６,０．２％三乙胺）为流动相,ＶＤ３为内标物,在２３０ｎｍ波长处检测。结果黄芪甲苷在０．００４－０．０８０ｍｇ．ｍＬ＾－１范围内呈线性,相关系数为０．９９９９,平均回收率为９４．７     

柱前衍生化HPLC法测定加巴喷丁胶囊中主药的含量

目的:建立柱前衍生化HPLC法测定加巴喷丁胶囊中的主药含量。方法:对加巴喷丁柱前衍生化后进行测定,选择Sinochrom-ODS(250 mm×4.6 mm,5μm)为固定相,0.33 mol.L-1乙酸水溶液-甲醇-乙腈(30∶70∶30)为流动相等度洗脱,流速1.0 mL.min-1,检测波长336 nm。结果:加巴喷丁在1.0～12.0 mg.L-1质量浓度范围内线性关系良好,其平均加样回收率为99.4%(n=9),RSD为0.84%;测得样品中加巴喷丁含量为标示量的99.82%。结论:该法便捷可靠,专属性强,可用于加巴喷丁胶囊中主药的含量测定。     

衍生化GC-MS同时测定苍耳子中14种脂肪酸的含量

建立衍生化气相色谱-质谱联用(GC-MS)同时测定苍耳子不同产地及商品药材中14种脂肪酸含量的方法。采用HP-5MS(30.0 m×250μm×0.25μm)毛细管色谱柱,程序升温,初温:80℃,以10℃/min升至195℃,保持2 min,再以3℃/min升至230℃,保持2 min。进样口温度250℃,分流比10∶1,进样量1.0μL,载气为氮气,流速为10 m L/min,对苍耳子不同产地及商品药材脂肪油的甲酯化样品采用SIM模式进行分析。14种脂肪酸的响应峰面积与其相应浓度的线性关系良好(r0.9948),加样回收率为97.02%~100.75%。本方法准确、专属,重复性好,能有效测定苍耳子药材中含有的脂肪酸,为苍耳子药材内在质量的综合评价提供依据。     

柱前衍生氨基酸的高效液相色谱分析

综述了目前柱前衍生氨基酸高效液相色谱分析技术的最新进展和现状,分别详细介绍了应用最广、技术最先进的几种柱前衍生氨基酸分析技术和方法。     

二四——二硝基氯苯柱前衍生化HPLC法在测定3—AA注射液含量的应用

主要论述了使用一种流动相,二四——二硝基氯苯柱前衍生化ＨＰＬＣ法测定国内药厂生产的３—ＡＡ注射液含量,达到了与专用氨基酸分析仪同等检测效果     

HPLC同时测定竹笋中核苷和氨基酸类成分的含量

建立了高效液相色谱法测定竹笋中6种核苷和3种氨基酸类成分的分析方法。采用YMC-Pack ODSAQ C18(250×4.6 mm,5μm)柱,流动相为乙腈(A),0.5%乙酸缓冲液(B),流速为1.0 m L/min,柱温为30℃,检测波长为254 nm。结果表明:在10~1000μg/m L范围内,9种目标化合物的质量浓度与峰面积呈现良好的线性关系,相关系数均在0.999以上,加标回收率平均在86.74%~100.17%之间,相对标准偏差在0.04%~2.90%之间,表明在方法准确度和精密度良好,能够满足竹笋样品中这9种目标化合物的检测要求。该方法方便,快捷,准确可靠,易推广使用。     

鱼腥草游离氨基酸组成及含量的HPLC分析

研究不同鱼腥草材料间及其两个不同采收时期游离氨基酸组成及含量差异 ,筛选游离氨基酸种类较多 ,含量较高的新品系 ,并确定适宜的采收时期。对 1 9份鱼腥草材料阴干地上部分游离氨基酸成分进行了高效液相色谱分析。 6月和 1 0月采收的鱼腥草中分别含有 1 5种和 1 4种氨基酸 ,都不含Cysteine -ss -Cysteine和Lysine,1 0月采收的还不含有Tyrosine。氨基酸中Proline含量最高 ,Glycine含量最低。此外 ,1 0月采收的鱼腥草的游离氨基酸总量高于 6月采收的鱼腥草。供试材料中 6月采收的W0 1 - 86和 1 0月采收的W0 1 - 5多数游离氨基酸含量均为同一采收时期的最高值。分别为 5 894 .76mg/kg和 6 1 6 6 .1 3mg/kg。此外 ,蕺菜与峨眉蕺菜间游离氨基酸成分间无显著差别。因此鱼腥草不同材料间及不同采收时期游离氨基酸含量不尽相同 ,游离氨基酸含量与染色体数目间相关不显著     

柱前衍生反相高效液相色谱法测定马尾松(Pinus massoniana )针叶中γ-氨基丁酸和17种游离氨基酸

建立了自动在线柱前衍生反相高效液相色谱法同时测定γ-氨基丁酸(GABA)和17种游离氨基酸含量的方法.以邻苯二甲醛-9-芴基甲基氯甲酸酯(OPA-FMOC)为衍生试剂进行衍生,Agilent Hypersil AA-ODS-C18色谱柱分离,梯度洗脱,二极管阵列检测器检测,在19min内分离测定了马尾松苗木针叶中GABA 和17种游离氨基酸的含量.该方法测定氨基酸的回收率高于90.1%,精密度和重现性均较好(相对标准偏差为0.21%～2.81%),经测定,发现马尾松被马尾松毛虫取食后,所测18种氨基酸总量明显降低,从418.3μg · g-1降低到310.4μg · g-1鲜重.     

不同种质和地域太子参氨基酸柱前衍生-HPLC测定及多元统计分析

探讨种质和生态环境因素对太子参中氨基酸类成分积累的影响。采用柱前衍生化高效液相色谱(HPLC)测定太子参中20种游离氨基酸含量,并进行多元统计分析。排序分析表明同一种质不同地域、同一地域不同种质太子参间均存在一定差异;主成分分析显示谷氨酸、苏氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、γ-氨基丁酸为太子参特征氨基酸,综合评价表明就氨基酸而言江苏句容栽培的ZS2太子参品质较好;单因素方差分析表明栽培地域与其特征氨基酸存在显著相关。生态环境因子是影响太子参中氨基酸含量的主要因素。本研究为深入研究太子参药材的品质形成机制提供基础资料。     

柱前衍生HPLC法测定大鼠血浆中的河蚌糖胺聚糖

目的:建立柱前衍生高效液相色谱法(HPLC)用于河蚌糖胺聚糖在大鼠血浆中的含量测定。方法:使用异硫氰酸荧光素(FITC)对河蚌糖胺聚糖进行荧光标记,色谱柱为Shodex SB-804HQ(8.0×300 mm),流动相为流速为0.5 m L·min-1的0.1 mol·L-1的Na H2PO4-Na2HPO4缓冲液(p H 7.8),柱温30℃,激发波长495 nm,发射波长520 nm。结果:FITC对河蚌糖胺聚糖的荧光标记率为70;线性范围为5~120μg·m L-1,批内和批间精密度均小于15.0%,提取回收率为51.5~58.6%,样品在血浆中稳定性良好。结论:血浆中内源性杂质不干扰样品的测定,建立的方法符合生物样本的分析要求。     

HPLC测定不同海拔小叶金露梅17种氨基酸含量

目的:建立高效液相色谱法测定小叶金露梅中17种氨基酸含量的方法。方法:采用N,N-二硝基氟苯柱前衍生氨基酸后测定;色谱柱为Phenomenex Gemini 5μC18,流动相为醋酸钠(pH=6.40)和50%乙腈,采用梯度洗脱,检测波长为360nm,外标法计算含量。结果:17种氨基酸线性关系、精密度、稳定性、重复性良好,加样回收率为97.4%～102.8%(RSD为1.21%～2.5%)。各海拔的氨基酸总量范围是10%～14.79%,在不同海拔小叶金露梅中氨基酸平均质量分数顺序为亮氨酸>天冬氨酸>异亮氨酸>组氨酸>丝氨酸>精氨酸>丙氨酸>苯丙氨酸>缬氨酸>谷氨酸>脯氨酸>甘氨酸>赖氨酸。小叶金露梅含有7种必需氨基酸,它们的含量均大于48%。本方法简便、准确,为小叶金露梅药理提供理论依据。     

衍生化条件的优化及不同产地青蒿中青蒿素含量的柱前衍生化-HPLC法测定

Derivation conditions of pre-column derivation-HPLC method used for determinating artemisinin content were compared and selected,and artemisinin content in above-ground part of Artemisia annua L.from seventeen locations was compared by optimal pre-column derivation-HPLC method.The optimal derivation condition is selected via comparing of 0.2% NaOH solution addition(3,4,5,6 and 7 mL),derivation temperature(30 ℃,35 ℃,40 ℃,45 ℃ and 50 ℃) and derivation time(0,2,5,10,20,40 and 60 min) during derivation process.The optimal derivation condition is adding 5 mL 0.2% NaOH solution,then insulating in 40 ℃ water bath for 10 min.Differences of artemisinin content in A.annua from seventeen locations are obvious,the general trend is that artemisinin content decreases gradually with location from south to north,in which artemisinin content in A.annua from Youyang of Chongqing is the highest with a value of 7.08 mg·g-1.The method is simple and accurate with good reproducibility,and can be used to determinate artemisinin content in medicinal material of A.annua.     

HPLC法同时测定柠檬中6种水溶性维生素含量

本研究以7个不同品种柠檬为材料,采用高效液相色谱(HPLC)法对不同品种柠檬中6种水溶性维生素(VB1、VB3、VB6、VB9、VB12和VC)含量进行同时测定。样品前处理后,经Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,以0.1%磷酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.9 m L/min;柱温为30℃,在波长267 nm处检测。结果表明,6种水溶性维生素在17 min内完全分离,在0.06~49.60μg/m L(R~2=0.9999~1.0000)呈良好的线性关系,检出限为0.03~0.27μg/m L,定量限为0.08~0.82μg/m L,平均回收率为99.06%~101.72%,RSD为0.49%~0.98%。进一步用该方法对7个不同品种柠檬样本进行检测,结果显示柠檬样本中VC含量远高于B族维生素含量,S_NM中VC含量最高(57.96±0.56 mg/100 g),EUR_D中VC含量最低(27.37±0.27 mg/100 g)。主成分分析揭示了不同柠檬果汁中水溶性维生素的相似性和差异性。S_NM的综合评价指数高于其他6个样品且EUR_D的综合评价指数远低于EUR_C和EUR_Y。该方法操作简单,精密度、重复性、稳定性好及回收率高,可有效检测柠檬中多种水溶性维生素的含量;7个品种柠檬果汁中维生素含量差异显著;主成分值可为柠檬中维生素指标提供理论依据。     

柱前和柱后衍生高效液相色谱分析氨基酸方法进展与评述

柱前和柱后衍生高效液相色谱分析氨基酸方法进展与评述刘惠文中国林业科学研究院分析中心北京１００９１自从１９５８年Ｓｐａｃｋｍａｎｓｔｅｉｎ和Ｍｏｏｒｅ建立了最初的氨基酸分析技术以来,随着高效液相色谱的出现和发展,氨基酸分析方面的探讨也更加广泛和深入［１...     

芦笋茎叶游离氨基酸的提取及含量测定

通过对芦笋茎叶游离氨基酸提取工艺中温度、提取时间、料液比、乙酸浓度等影响因素的试验分析,确定芦笋茎叶游离氨基酸测定过程中的最佳提取条件为：提取温度60℃;料液比为1：35;提取时间为2．5h;并对芦笋茎叶游离氨基酸含量进行了测定,确定芦笋茎叶游离氨基酸含量为76．54mg／100g。     

不同品种药用菊花中游离糖类及游离氨基酸含量的HPLC分析

为比较不同品种菊花的品质特征,本文采用HPLC法测定其游离糖类及游离氨基酸的含量.结果表明,不同品种菊花中游离糖类主要成分是果糖和葡萄糖,蔗糖和麦芽糖未检出,总游离糖类含量约为9.07～18.76g/1O0g,其中黄山贡菊中含量最高,为18.76g/100g,黄菊中最低,为9.07g/100g;其总游离氨基酸含量约为0.563～2.806g/100g,七月菊中含量最高,为2.806g/100g,杭白菊中最低,为0.563g/100g.