天花粉蛋白引起猕猴滋胚层细胞损伤的超微观察

前言天花粉蛋白已成为终止中期妊娠和治疗宫外孕及滋胚层细胞增生性疾病的重要药物(上海市天花粉科研协作组,1976)。通过病理检查和作用机制的探索,提出天花粉蛋白具有损伤胎盘绒毛滋胚层细胞的专一作用(上海实验生物研究所第二研究室,1976;王应天等,19769 熊用周等,1976),分化程度高的合体滋胚层细胞敏感,分化程度低的细胞滋胚层细胞不敏感。天花粉蛋白对滋胚层细胞的损伤作用是原发性的,而凝血是继发性的,可能是     

无花粉蛋白在体内定位的放射自显影研究

天花粉蛋白是从中草药发掘出来的一个植物蛋白性的中期引产和抗增生性滋养层细胞疾病的药物。在临床应用中已累积了大量经验。关于作用机理的研究也进行了各方面的工作(上海实验生物研究所第二研究室,1976)。在小白鼠以间接荧光标记抗体法,追踪了给药后不同时间,“纯制天花粉”抗原分布的动态。结果证明,天花粉蛋白的原     

天花粉蛋白引产和内源前列腺素的关系的初步研究

天花粉蛋白中期引产的实验研究,证明胚盘的形态和功能损伤是引产过程的原初的和关键的变化(上海实验生物研究所第二研究室,1976)。然而,还必须注意到,只有当这些变化导致发动宫缩等一系列分娩活动时,才能将胎儿和胎盘排出,完成流产。因此,胎     

天花粉蛋白引产原理的探讨

天花粉粗提物是从葫芦科植物栝楼的根提取出的中期引产药物,其纯化的引产有效成分为分子量约18,000的碱性蛋白质,称为“天花粉蛋白”。经鉴定对中期妊娠有很好的引产效果。同时,对宫外孕、葡萄胎、恶性葡萄胎有独特的疗效,对绒毛膜上皮癌也有一定的疗效, 根据对天花粉蛋白的原初作用部位,胎盘和离体培养的人滋养层细胞的形态和功能损伤,以及抑制前列腺素合成对天花粉蛋白引产的影响等方面的研究结果,互相印证,初步阐明了天花粉蛋白引产作用原理:(1)天花粉蛋白直接作用于胎盘的滋养层细胞,并有一定的细胞专一性:(2)天花粉蛋白能选择地使胎盘绒毛合体滋养层细胞变性坏死,解体的细胞碎片留在血窦中,引起凝血,造成循环障碍和进一步的大量组织坏死,胎盘绒毛坏死是原发的,循环障碍是继发的:(3)胎盘绒毛的损伤反映在功能方面,HCG和甾体激素迅速下降到先兆流产的临界水平以下。由于胎盘形态和功能严重损伤的结果,破坏了母体和胎儿之间的内分泌关系和代谢物的交换,并假定可能通过尚未弄清楚的机制,引起前列腺素合成的增加,发动宫缩而导致流产。总之,天花粉蛋白是从中草药发掘出来的一个植物蛋白性的中期引产和抗增生性滋养层细胞疾病的药物。天花粉蛋白引产作用原理的初步阐明,在实践上为提高和扩大天花粉蛋白的     

天花粉蛋白研究讨论会在京举行

1986年4月22日至25日,中国科学院在北京举行了天花粉蛋白研究讨论会。天花粉蛋白是我国科研人员于20多年前从民间流传的引产中药天花粉中发现并提取出来的一种单链碱性蛋白质。经过科学院有机化学所和细胞生物所(前实验生物所)与一些医疗部门(如上海龙华医院、瑞金医院等)结合临床多年研究和改进,发现结晶天花粉蛋白能有效而安全地用于抗早孕、中期引产和治疗葡萄胎、宫外孕甚至抑制一些肿瘤。动物实验证明,天花粉蛋白能相当专一地损伤胎盘滋养层合体细胞,从而在细胞水平初步阐明了引产机理。为了进一步从分子水平深入开展研究,有机所从1973年左右开始了天花粉蛋白氨基酸序列     

注射用天花粉对早孕兔子宫收缩的作用

天花粉针剂中期引产的成功,是中西医结合、整理和提高祖国医药学遗产的一项重要成果。据报道,天花粉蛋白的引产原理,主要作用于胎盘绒毛的合体滋养层细胞。由于药物引起滋养层细胞的变性和坏死,破坏其功能,从而导致胎儿死亡,以达到引产目的。但是关于天花粉蛋白使滋养层细胞损伤,如何引起宫缩发动的问题,尚缺乏针对性研究。目前,天花粉针剂在临床上用于早孕流产,出现了可喜的苗头;以天花粉针剂和15甲基前列腺素 F_(2α)联合用药终止早孕,更取得显著进展。开展天花粉蛋白对妊娠     

天花粉蛋白对胚泡影响的超显微观察

天花粉蛋白引起中期流产的机制,在于它对胎盘滋养层细胞具有一定的损伤专一性;这种专一性也表现在离体培养的实验。天花粉蛋白能否用于抗早孕,是一个值得探讨的问题。早期胚泡由围绕囊胚     

天花粉蛋白对滋养层细胞专一损伤机制的研究

在体外培养条件下,天花粉蛋白胶体金以受体介导的内吞方式进入滋养层细胞和绒癌细胞,最终进入胞质溶胶附着在核糖体上。经相同处理的肝癌细胞,绿猴肾细胞和正常鼠胚肝细胞,金颗粒既不与这些细胞表面结合,也没有被专一内吞的现象。分别用BSA,转铁蛋白活化的胶体金处理滋养层细胞和绒癌细胞的比较观察,也证明滋养层细胞和绒癌细胞对天花粉蛋白的专一亲和性。更有趣的是:天花粉蛋白肝癌单抗胶体金结合物进入绒癌细胞的方式与天花粉蛋白的结果相同;先以旰癌单抗处理也不影响天花粉蛋白肝癌单抗结合物进入绒癌细胞。然而,对于旰癌细胞,天花粉蛋白肝癌单抗胶体金颗粒则专一地结合在细胞的微绒毛表面,这种结合因先以肝癌单抗处理而明显地被竞争抑制。这些实验结果相互印证地提供天花粉蛋白对滋养层细胞和绒癌细胞高度专一的亲和性,并证明天花粉蛋白对靶细胞的原初损伤部位是核糖体。进一步探讨天花粉蛋白在靶细胞表面结合位点的化学性质以及这种蛋白在靶细胞内的转运机制将是重要的问题。     

荧光标记抗体追踪天花粉蛋白引产作用部位的研究

目前,天花粉粗提物作为中期引产药物,虽然在临床已广泛使用,但是对天花粉蛋白中期引产的原理还不甚了解。根据临床引产下来的胎盘病理观察,发现滋养层细胞广泛坏死,绒毛间隙有大量的纤维蛋白沉着。天花粉粗提物对宫外孕、葡萄胎、恶性葡萄胎和     

天花粉蛋白R122G突变体的构建及活性研究

天花粉蛋白Ｒ１２２Ｇ突变体的构建及活性研究袁惠东１柯一保孔梅柯欣永夏其昌１张祖传１聂慧玲＊（中国科学院上海细胞生物学研究所,上海２０００３１;１中国科学院上海生物化学研究所,上海２０００３１）关键词天花粉蛋白;突变体;ＲＮＡＮ－糖苷酶天花粉蛋白（ｔｒ...     

米非司酮对恒河猴母胎界面细胞凋亡和凋亡分子p53表达的影响

胎盘形成过程中发生活跃的细胞增殖、迁移和凋亡等活动。p53蛋白是参与调节细胞周期和凋亡过程的原癌基因。本实验用原位末端标记、蛋白印迹和免疫组织化学方法研究正常和米非司酮(RU486)处理后恒河猴母胎界面绒毛和蜕膜组织细胞凋亡及p53蛋白表达。在正常妊娠的恒河猴母胎界面,凋亡信号主要集中在合体滋养层和细胞柱内的一些滋养层细胞;p53蛋白主要定位于细胞滋养层。在母体蜕膜中,也在部分基质细胞中检测到细胞凋亡和p53蛋白表达。经过RU486处理2d后,胎盘绒毛和母体蜕膜中凋亡细胞数都显著增加,绒毛中增加的凋亡信号集中于细胞滋养层。同时,RU486处理也导致绒毛细胞滋养层和蜕膜基质细胞中p53表达明显增加。以上结果提示,在正常妊娠中,生理性的细胞凋亡和p53表达可能是控制细胞滋养层细胞增殖、保持胎盘组织动态平衡的一个重要机制;RU486终止早孕的可能途径之一是促进母胎界面细胞凋亡,推测p53参与这一过程。     

简便快速分离天花粉毒蛋白的一种方法

 简便快速分离天花粉毒蛋白的一种方法孙建忠,季瑞华,王克夷（中国科学院上海生物化学研究所,上海２０００３１）天花粉是由多年生草质藤本植物栝楼（ＴｒｉｃｈｏｓａｎｔｈｅｓｋｉｒｉｌｏｗｉｉＭａｘｉｍ,Ｃｕｃｕｒｂｉｔａｃｅａｅ）的块茎制成,天花粉毒蛋白是...     

^1HNMR法研究天花粉蛋白的伸展

~１ＨＮＭＲ法研究天花粉蛋白的伸展胡红雨,鲁子贤,杜雨苍（中国科学院上海生物化学研究所,２０００３１）关键词天花粉蛋白;Ｈｉｓ_（５１）残基;~１ＨＮＭＲ;肽链伸展天花粉蛋白（Ｔｒｉｏｈｏｓａｎｔｈｉｎ,ＴＯＳ）是分子量为２８０００,共有２４７个氨基酸?..     

天花粉蛋白引起敏感细胞膜上G蛋白激活的初步研究

天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS)是一种单链核糖体失活蛋白,具引产、抗肿瘤、抗HIV等多种生物学功能。天花粉蛋白专一性杀伤敏感细胞的机制一直未被研究清楚。本文首次以生物分子相互作用分析(BIA)证明在天花粉蛋白敏感的细胞膜上存在着能与天花粉蛋白专一结合的组分。我们进一步利用[~(35)S]GTPγS结合实验发现天花粉蛋白能够激活敏感细胞膜上的G蛋白,而对不敏感细胞没有相应的G蛋白激活。这些结果表明了在敏感细胞膜上天花粉蛋白特异受体的存在。     

天花粉蛋白对滋养层细胞专一损伤机制的研究

在体外培养条件下,天花粉蛋白胶体金以受体介导的内吞方式进入滋养层细胞和绒癌细胞,最终进入胞质溶胶着在核糖体上,经相同处理的肝癌细胞,绿猴肾细胞和正常鼠胚肝细胞,金颗粒既不与这些细胞表面结合,也没有被专一内吞的现象。分别用ＢＳＡ,转铁蛋白活化的胶体金处理滋养层细胞和绒癌细胞的方式与天花粉蛋白的结果相同,先以肝癌单抗处理也不影响天花粉蛋白的结果相同,先以肝癌单抗处理也不影响天花粉蛋白的肝癌单抗结合物进     

单增李斯特菌感染致妊娠失败的研究进展

单增李斯特菌(Listeria monocytogenes, LM)是一种在自然界广泛存在的食源性人兽共患病原菌,妊娠动物和孕妇感染后会导致妊娠失败。研究显示,LM感染后随着血液循环到达胎盘,在其毒力因子(内化素A、李斯特菌溶血素O、肌动蛋白聚合蛋白、InlP蛋白等)的作用下,首先靶定绒毛膜外滋养层细胞,再穿过合体滋养层细胞或绒毛细胞滋养层细胞到绒毛基质,再通过胎儿毛细血管感染胎儿;在此过程中,LM诱导的胎盘细胞凋亡、母胎界面细胞因子表达水平的改变和胎盘细胞炎性体的激活导致了妊娠失败。该文对上述问题就国内外最新研究进展进行综述和探讨。     

具靶向性的转铁蛋白—脂质体的制备

具靶向性的转铁蛋白──脂质体的制备杨静平,王瓞,林其谁（中国科学院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室,２０００３１）关键词脂质体;人转铁蛋白;靶向性;癌细胞;天花粉蛋白利用正常细胞和癌细胞表面受体或抗原物质的差异,用相应配体修饰脂质体表面,使...     

天花粉蛋白对体外培养不同种类细胞的作用

本文进行了天花粉蛋白对离体培养的葡萄胎细胞、早孕蜕膜细胞、人胎儿肾皮质部细胞、HeLa细胞和鼻咽癌上皮细胞的损伤作用的比较研究。为了探索天花粉蛋白选择损伤细胞是否存在专一结合细胞的可能性,又以不敏感的蜕膜细胞为材料,应用辣根过氧化物酶标记技术进行了天花粉蛋白与细胞结合和进入细胞内定位的实验。此外,并以肝癌细胞为材料研究了对细胞增殖率的影响。结果表明葡萄胎合体滋胚层细胞和胎盘合体滋胚层细胞一样都是最敏感的细胞,经1微克天花粉蛋白处理即出现形态上损伤,至50微克则大多数细胞呈现不可逆的退化损伤,而其它类型的细胞则表现出有相当大的抗性。过氧化物酶标记追踪天花粉蛋白在细胞内分布的结果表明天花粉蛋白与蜕膜细胞有一定的亲和力,提示天花粉蛋白似乎不存在严格的细胞结合专一性;而天花粉蛋白在细胞内的分布一般仅限于细胞质,这一现象似乎提示细胞质区可能就是天花粉蛋白直接作用的靶的范围。细胞增殖率的实验结果表明50微克以上的药物剂量对肝癌细胞增殖率有一定的抑制作用,剂量增加抑制作用也增加。但是,经过一定的修复期以后,细胞增殖率又可得到完全恢复,反映了对细胞生长抑制的可逆作用。上述实验结果进一步加强了天花粉蛋白对滋胚层细胞具有一定细胞损伤专一性的结论。本文并对细胞损伤专一性问题进行了讨论。     

刚地弓形虫RH株感染对小鼠胎盘滋养层细胞周期的影响

目的 研究刚地弓形虫RH株对体外培养的孕期小鼠胎盘滋养层细胞周期的影响及相关机制.方法 制备小鼠胎盘滋养层细胞并分别接种于不同细胞培养皿,对照组加入DMEM高糖培养基孵育,实验组加入相同体积不同数量(2×104/mL、4×104/mL、8×104/mL)弓形虫速殖子培养6h、12h、24 h;以MTT法检测滋养细胞增殖率;流式细胞仪检测细胞周期;Western印迹法检测细胞周期相关蛋白cyclinA、cdk2表达或活性.结果 MTT法检测结果显示刚地弓形虫RH株抑制滋养层细胞增殖,且呈时间剂量依赖性;流式细胞仪检测24 h感染组细胞周期在S期产生阻滞,8×104/mL数量组S期细胞比例高达68.73％±1.76％;Western印迹方法分析感染弓形虫组滋养层细胞的cyclin A、cdk2蛋白表达量较对照组明显下降(P＜0.05).结论 刚地弓形虫RH株能够抑制小鼠胎盘滋养层细胞增殖并通过调节cyclinA、cdk2等蛋白表达或活性改变引起细胞S期阻滞.     

人胎盘滋养层细胞原代的体外培养与改进

目的:建立与改进纯度较高的适于实验研究的人绒毛膜滋养层细胞。方法:采用胰蛋白酶消化法消化人正常妊娠6～8周胎盘组织,以35%、45%2个Percoll密度梯度进行分离纯化,并用免疫组化及透射电镜等技术对其生物学特性、细胞内部结构进行观察。结果:胎盘组织中滋养层细胞角蛋白染色阳性,血管内皮细胞及基质成分波形蛋白染色阳性,经该法分离纯化的细胞角蛋白染色阳性者(滋养层细胞)占90%以上,透射电镜观察示所获细胞有典型滋养层细胞结构。结论:该法简便易行,可获得合乎实验要求的人滋养层细胞,可供后续实验研究。