混合Ribozyme联合切割小鼠腺苷脱氨酶mRNA研究

采用计算机辅助设计得到针对小鼠腺苷脱氨酶ｍＲＮＡ的４种ｒｉｂｏｚｙｍｅ,它们均能在各自的切点切割ＲＮＡ分子,４种ｒｉｂｏｚｙｍｅ经组合后成混合ｒｉｂｏｚｙｍｅ,它们分别含有２种、３种和４种ｒｉｂｏｚｙｍｓ。通过对体外转录靶ＲＮＡ分子的联合切割研究表明,随着ｒｉｂｏｚｙｍｅ种数的增加,其中以（Ｒｚ２６２＋Ｒｚ４５５＋Ｒｚ５８３）组成最为理想,由此证明混合ｒｉｂｏｚｙｍｅ中,各种ｒｉｂｏｚｙｍｅ不仅保     

固定化锤头状ribozyme的初步研究

用共价连接方式将专一切割苜蓿夜蛾核多角体病毒多角体蛋白ｍＲＮＡ片段的锤头状ｒｉｂｏｚｙｍｅ（ｈａｍｍｅｒｈｅａｄｒｉｂｏｚｙｍｅ）固定在ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－４Ｂ上,ｒｉｂｏｚｙｍｅ与载体之间有１９个原子的距离,研究并比较了该固定化ｒｉｂｏｚｙｍｅ与游离（非固定化）ｒｉｂｏｚｙｍｅ的底物专一性、催化活性、最适反应温度以及热和保存稳定性。讨论了固定化ｒｉｂｏｚｙｍｅ与固定化酶在性质上的相似性以及固定化ｒｉｂｏｚｙｍｅ研究在理论和应用上的可能意义。     

用ribozyme抑制增殖细胞核抗原的表达对HeLa细胞增殖的影响

增殖细胞核抗的（ＰＣＮＡ）是ＤＮＡ聚合酶δ的辅助蛋白,它是细胞染色体ＤＮＡ复制所必需的。人工设计的ｒｉｂｏｚｙｍｅ具有可特异地切割ＰＣＮＡｍＲＮＡ的性质,将此ｒｉｂｏｚｙｍｅ的自剪体内表达质粒导入ＨｅＬａ细胞,从细胞决ＲＮＡ中分离相应部分能在体外切割靶ＲＮＡ片段,证明此表达质粒在细胞内能表达出有活性的ｒｉｂｏｚｙｍｅ分子。与对照相比,导入ｒｉｂｏｚｙｍｅ表达质粒的ＨｅＬａ细胞进入Ｓ期的时间从１２ｈ     

固定化锤头状ribozyme的初步研究

用共阶连接方式将专一切割苜蓿夜蛾核多角体病毒多角体蛋白ｍＲＮＡ片段的锤头状ｒｉｂｏｚｙｍｅ（ｈａｍｍｅｒｈｅａｄｒｉｂｏｚｙｍｅ）固定在ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－４Ｂ上,ｒｉｂｏｚｙｍｅ与载体之间有１９个原子的距离,研究并比较了该固定化ｒｉｂｏｚｙｍｅ与游离（非固定化）ｒｉｂｏｚｙｍｅ的底物专一性,催化活性,最适反应温度以及热和保存稳定性,讨论了固定化ｒｉｂｏｚｙｍｅ与固定化酶在性质上的相似性及固定     

伙伴随时间而改变──Ribozyme的进化

伙伴随时间而改变──Ｒｉｂｏｚｙｍｅ的进化Ｒｉｂｏｚｙｍｅ能在没有蛋白质的情况下催化化学反应。但在许多已知事例中,ｒｉｂｏｚｙｍｅ在体内是与蛋白质结合在一起才能有效地执行功能的。根据“ＲＮＡ世界”假说,一般认为,在进化过程中,这些蛋白质会逐渐取代ｒｉ...     

Ribozyme阻断体内基因表达的研究

利用ｒｉｌｏｚｙｍｅ专一水解ＲＮＡ的特性,设计ｒｉｂｏｚｙｍｅ定点切割基因表达的中间物ｍＲＮＡ以及病毒ＲＮＡ,可以阻断基因表达和抑制病毒复制,从而达到治病和防病的目的。自１９９０年以来,利用ｒｉｂｏｚｙｍｅ技术,已经对爱滋病、肿瘤等疾病进行了大量的研究。本着重介绍ｒｉｂｏｚｙｍｅ体内阻断基因表达的应用和一些规律性问题。     

基因治疗的新武器Ribozyme

在当今基因干预和基因治疗领域里,有两项极为引人注目的技术,那就是反义核酸技术和ｒｉｂｏｚｙｍｅ技术。而二的完美结合,则成为基因治疗的强劲武器。本对目前已经发现的ｒｉｂｏｚｙｍｅ作了简要介绍,并描绘了这一武器在现代基因干预和基因治疗中的应用用现状和应用前景。     

发夹核酶的研究与应用

核酶 (ｒｉｂｏｚｙｍｅ)是既能特异识别又能特异切割小分子ＲＮＡ的核酸内切酶 ,其本身也是ＲＮＡ ,主要包括发夹核酶、锤头核酶、丁肝病毒、链孢霉属ＶＳ和铅依赖性ＲＮＡ ,共同特点是可逆地切割底物ＲＮＡ的磷酸二酯键 ,生成 5′ ＯＨ和 2′ ,3′ 环磷酸末端。虽然催化产物相似 ,但它们的结构和催化机制却是很不相同的。发夹核酶 (ｈａｉｒｐｉｎｒｉｂｏｚｙｍｅ)发现于三种不同植物ＲＮＡ病毒 ,即烟草环点病毒 (ｔｏｂａｃ ｃｏｒｉｎｇｓｐｏｔｖｉｒｕｓ) ,菊苣黄色斑点病毒型 (ｃｈｉｃｏ ｒｙｙｅｌｌｏｗｍｏｔｔｌｅｖｉｒｕｓｔ…     

非核糖体肽合成酶催化的非常规装配模式

非核糖体肽合成酶(NRPSs)催化形成复杂肽类天然产物, 其中很多显示了很好的生物学活性和医疗价值。常规NRPSs具有模块化和线性催化的特点, 然而在生物合成研究过程中也发现了很多具有非常规装配模式的NRPSs。本文针对其中4种非常规装配模式: 重复使用、非线性、模块跳跃和非核糖体前肽模式, 结合一些代表性例子做一小型综述。     

核酶的抗病毒作用

反义核酸技术（ａｎｔｉｓｅｎｓｅｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄｓｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）是根据核酸杂交原理设计的以选择性地抑制特定基因表达为目的的一类核酸研究新技术,它包括反义ＲＮＡ（ａｎｔｉｓｅｎｓｅＲＮＡ,ａｓＲＮＡ）、反义ＤＮＡ（ａｎｔｉｓｅｎｓｅＤＮＡ,ａｓＤＮＡ）及核酸（ｒｉｂｏｚｙｍｅ,Ｒｚ）三大技术领域,反义核酸技术同基因治疗一样已经成为一项引人瞩目研究领域。本文对核酸作用的原理和在抗病毒方面的研究进展作一综述     

自旋捕捉结合液相色谱/电子自旋共振/质谱联用技术用于检测多不饱和脂肪酸过氧化过程中产生的自由基(英文)

ω-6和ω-3类多不饱和脂肪酸是两种人体所需的重要营养物质。人体内的很多生理病理过程均涉及到这些多不饱和脂肪酸,以及它们在环氧合酶(cyclooxygenase,COX)和脂氧合酶(lipoxygenase,LOX)催化下产生的过氧化代谢物。环氧合酶和脂氧合酶催化的多不饱和脂肪酸的过氧化是复杂的生化过程,会产生一系列的自由基产物。这些自由基产物又会与蛋白质、DNA和RNA结合,从而导致很多生理功能的改变。然而一直以来,缺乏合适的分析方法来有效分离和鉴定这些自由基产物,限制了人们对环氧合酶和脂氧合酶,以及多不饱和脂肪酸的过氧化在生理作用方面的研究。直到最近,才出现了对COX/LOX催化产生的活泼自由基定性和定量分析的报道。这里将对一种可以用来鉴定体外脂类过氧化产生的自由基产物的自旋捕捉-LC/ESR/MS联用技术的发展与改进过程进行综述。这种新颖的LC/ESR/MS联用技术首次使得直接检测多不饱和脂肪酸代谢产生的自由基成为可能,这对自由基的生理学作用研究是一个重大突破,为人们在多不饱和脂肪酸的生理作用以及环氧合酶和脂氧合酶催化的脂质过氧化方面的研究带来了极大便利。     

聚ADP核糖聚合酶的结构及基因表达和调控

聚ＡＤＰ核糖基化反应是在细胞内聚ＡＤＰ核糖聚合酶（ＰＡＲＰ）的催化下,以ＮＡＤ为底物,将聚ＡＤＰ核糖多聚体共价连接到接受体蛋白上去的过程．这种蛋白质的转译后修饰形式参与细胞内很多重要的生物事件．本文对催化聚ＡＤＰ核糖基化反应的ＰＡＲＰ酶的结构特性、编码ＰＡＲＰ基因的表达与调控,以及ＰＡＲＰ酶对细胞内其它基因表达的影响进行了综述。     

崔化RNA 寻找真核细胞生物基因组中隐藏的核糖酶

多亏了新的研究工具,我们发现了很多以前认为生物体内少量存在自身催化的RNA酶一核糖酶。现在科学家除了研究这些酶特殊的化学属性之外,还将能够在一些可用的模型动物中找出核糖酶,将这个领域带向更深的层面来探索核搪酶在基因调控中起到的巨大作用。     

作为人造极端酶的交联酶晶体

作为人造极端酶的交联酶晶体林影卢荣德郭勇（华南理工大学生物工程系,广州５１０６４０关键词交联酶晶体极端酶酶作为生物催化剂,催化效率高,立体选择性和底物专一性强,是普通化学催化剂所不可比拟的。然而,在酶的应用过程中还有很多令人不满意之处,如在环境中常常...     

谷酰胺合成酶在生物固氮中的作用

谷酰胺合成酶(Glutamine Synthetase E.C.6.3.1.2,简称GS)是催化从谷氨酸和氨合成谷酰胺的一个酶,它在自然界氮的循环,细胞氮的代谢里起着关键的作用。因此,很多对生物固氮作用感兴趣的生物学家很自然地把GS与固氮作用联系起来,研究GS在微生物固氮中所起的作用。     

ErbB途径研究进展

ErbB是与癌症有关的典型的受体酪氨酸激酶,正常情况下在器官发生过程中介导细胞间相互作用。ErbB信号转导途径是配基与单体受体酪氨酸激酶结合,通过受体二聚体化和酪氨酸残基的自磷酸化激活细胞质的催化功能,ErbB途径同时具有接收激素,神经转化因子和淋巴因子等的作用,其家族成员已有很多并仍有新的发现。     

非编码RNA对基因转录的调控

非编码RNA是各种不作为翻译蛋白质的模板的RNA的统称,参与很多生命活动的调控并扮演着重要的角色。它们参与m RNA翻译、RNA剪切、化学反应催化,以及参与DNA复制修复、基因转录调控、发育和细胞分化调控等。现针对哺乳动物细胞内非编码RNA调控依赖于RNA聚合酶II,产物为m RNA的转录进行综述。     

海绵体动物中trans-AT聚酮合成酶来源的聚酮化合物的生物合成

海绵体动物分离到的聚酮类化合物很多是由其共生或附生微生物体内的trans-AT聚酮合成酶催化产生的。利用宏基因组技术克隆具有生物活性的聚酮化合物的生物合成基因簇,不但能阐明活性化合物的生物合成路径,而且可以通过异源表达获得目标化合物。本文综述了海绵体动物来源的trans-AT聚酮合成酶产生的聚酮化合物生物合成及其基因簇的研究进展。     

ARTP诱变技术在食品和饲料加工生物催化剂改造中的应用进展

食品和饲料的生物催化转化和发酵技术成为保障餐桌安全及绿色发展的重要领域,其用酶量在工业酶制剂市场中占比最大,且增长最快。性能优良的酶制剂能显著缩短发酵周期,降低生产成本,提高目标产物的转化率,进而提高市场竞争力。食品和饲料加工产业除了应用分离提取的酶制剂外,很多发酵过程仍以微生物为细胞工厂进行多种酶催化转化。该发酵过程通常涉及复杂的代谢网络和调控机制,且很多体系不能采用基因工程技术,因此理性基因工程改造通常难以满足应用需求。诱变育种仍然是食品和饲料加工用酶及微生物菌株改造的主要手段,需要与时俱进不断发展新技术。近年发展起来的常压室温等离子体(ARTP)诱变育种技术因其具有操作简单、安全、环境友好、突变率高、突变库容大等特点,在食品和饲料加工微生物育种中得到了广泛应用,取得了良好的成效。重点介绍近年ARTP在食品与饲料加工酶制剂及发酵微生物改造中的相关应用进展。     

生物过程酶反应及产品技术研究

生物过程酶反应技术具有催化效率高、环境友好等优点,发展势头迅猛,得到了越来越广泛的应用。综述了近年来单酶催化、多酶催化、化学酶法耦合催化,以及酶的混沌催化等方面的研究现状、重大突破及其在重要医药化工产品合成方面的应用,并对其发展趋势进行了展望。