鸡胚壳外培养的探讨

鸡胚是胚胎学、发育生物学教学及科研的良好材料.鸡的种蛋作为生物学的实验材料,其历史已经相当悠久.鸡的种蛋取材方便,不受季节限制,只要有适当的温度(37.5°-38℃)、湿度(55-70%)、空气就能孵化,继续它的胚胎发育,供教学、科研使用.以前用鸡胚做研究,一般是鸡胚发育不脱离蛋壳,这就需要在蛋壳上开天窗进行手术和观察,不太方便,观察也有局限.如果能在壳外培养,那将提供很大方便.这     

“观察鸡卵的结构和鸡胚的发育”的实验教学

对"观察鸡卵的结构和鸡胚的发育"实验在实验材料的选择、实验装置的改进等方面进行优化。通过实验观察鸡胚的完整发育过程,有助于理解鸡卵的结构和鸡胚的发育,帮助学生构建动物个体发育的概念。     

鸡胚发育后期心电图的无损测定及心率变化

目的：测量鸣胚发育后期心电图,测定鸡胚发育后期心率及其变化.方法：利用壳膜外电极测量鸡胚心电图,根据RR间期计算鸡胚心率。结果：引出了具有较为清晰Q波、R波（振幅在8—20μV波动）、S波的鸡胚心电图。鸡胚的QRs间期在发育后期无明显变化,心率在D14～D20早期的心率变化较小,在D20后期和D21显著增加（P〈0．01）。结论：建立了壳膜外记录鸡胚心电图的方法,鸡胚在啄壳期心率显著增加.     

鸡胚模型在生物研究中的应用进展

实验动物模型在预防、诊断、治疗疾病和探讨疾病的发生机制等方面起到了至关重要的作用。鸡胚发育过程清楚,利用鸡胚本身的结构特点,可作为研究与胚胎发育相关的生物学实验模型。另外,鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）血管丰富,是天然免疫缺陷宿主,可作为血管药理学、肿瘤学等方面研究的一个较为理想的实验模型。本文综述了鸡胚模型在生物实验研究中的应用进展。     

鸡胚壳外培养破壳方法的改进

近年来,鸡胚壳外培养越来越受到重视,因为它能直接观察到胚胎发育的过程,是胚胎学、发育生物学的教学和科研的好材料. 在无壳培养中,常遇到的第一个问题是破壳难,即易使卵黄膜破裂而失败.最早人们使用直接破壳法,成功率低.后来改用挫刀挫壳及胶布粘连、拉开方法,虽说成功率有所提高,但仍不理想,操作也不便.我们在多次试验的     

鸡胚三类组织体外培养细胞的生物学特性分析

采用组织培养的方法获取鸡胚不同组织细胞,利用M199培养基进行原代、传代培养,经形态学观察、生长曲线绘制、分裂指数测定等进行生物学特性分析。实验表明,鸡胚不同组织细胞具有不同的生物学特性,从形态结构到生长周期都有明显差异。获得的躯体来源细胞、心来源细胞为成纤维型,肺来源细胞为上皮型;其中,躯体来源细胞生长能力最强,心来源细胞次之,肺来源细胞最慢,躯体来源细胞倍增时间最短;核型分析表明,该实验体外培养的鸡胚细胞染色体数目为78条。上述结果可为今后鸡胚不同组织细胞的深入研究提供实验材料和依据。     

鸡蛋开窗法导入供体胚盘细胞对家鸡胚胎发育的影响研究

通过4批孵化实验,研究鸡蛋开窗法注射供体胚盘细胞对受体鸡胚发育及孵化率的影响。GLM方差分析表明,开窗处理极显著降低整个孵化期（21d)的活胚比例（P＜0．01）,至21日龄出壳时,处理组的孵化率为.8%-6.0%。导入供体胚盘细胞对受体鸡胚的发育仅为阶段性影响,表现在显著性孵化第8日龄左右的活胚比例（P＜0.05)。而对后期发育的影响不显著（P＞0．05）。因经,鸡蛋开窗处理是降低受体胚胎成活率和孵化率的主要原因,如何降低开窗处理对受体胚胎的应激和不利影响则是今后研究的一个课题。     

鸡胚的多原条

鸡是多精受精的动物,通常孵一个鸡蛋发育出一只雏鸡。在鸡胚发育过程中有时会出现二个或三个原条,曾经有人报导过,这样的鸡卵如能顺利地继续发育下去,可能会孵出2只或3只雏鸡来。但是发生3个以上原条的情况则不多见了。我们在制作鸡胚标本时,曾获得一个有9个原条的标本,它们均匀分布于卵黄的表面,打开卵壳之后,先将整个卵黄     

鸡胚培养与致畸实验在胚胎学教学中的应用

鸡属于卵生动物，整个胚胎发育过程是在一个受精的鸡卵中完成。用鸡胚做实验材料有活体下容易观察、重复性好、经济、卫生等优点，适合学生掌握鸡胚的早期发育和致畸实验。将新鲜受精种蛋按计划好的不同时期放入38℃恒温培养箱中，箱内置一杯水（2～3日更换1次），以维持60-70％的相对湿度，每日开箱通气4次以上保持箱内的氧含量。     

关于鸡胚孵化中的预热时间

在胚胎学、组织细胞培养的某些实验以及鸡胚的生物标本制作过程中,首先需要获得特定发育时期的鸡胚材料,而往往由于种蛋来源、孵化条件、季节的不同,不易获得准确发育期的材料,尤其是以小时计算胚龄的胚胎学材料,如孵化16小时的原条期,18小时的头突起期,20小时的头褶期,24小时的4体节期,33小时的13对体节期等等。常感到取胚的时间很难掌握,取出的鸡胚发育差别甚大,具有代表性的发育期比例很小,不但造成人力、物力上的浪费,而且直接影响教学和科研的顺利进行。     

探索不同发育时期鸡胚营养状况的变化

鸡胚是营养价值很高的食品,受精鸡卵在胚胎发育过程中能产生多种氨基酸、激素、酶免疫球蛋白、及多种RNA等生物活性物质.以鸡胚为营养添加剂,能促进生物体的生长,增强机体抗病能力.本实验探索不同发育时期的鸡胚营养成份对尼罗罗非鱼的发育生长的影响,并研究鸡胚在各时期发育过程中的营养物质变化状况.这能使我们找出鸡胚营养物质的最盛时期,便于开发利用,从而获得较好的经济效益和社会效益.     

鸡胚宫颈癌模型的建立及其生物学特性

目的建立人宫颈癌鸡胚模型,探讨其形态学及生物学特性。方法将Hela细胞接种于鸡胚绒毛尿囊膜,观察影响宫颈癌鸡胚移植瘤成活可能的因素、移植瘤生长特性、形态、生物学特性。结果成功建立了人宫颈癌鸡胚移植瘤模型。移植后瘤易于生长,具有较强的血管诱导作用。光镜下显示移植后瘤具有与人宫颈癌相似的组织结构。结论该模型容易建立,能动态观察宫颈癌诱导血管生成的全过程,可用于宫颈癌的实验研究。     

胚胎的人为致畸实验

切割胚盘实验为了探讨鸟类的发育机理,有目的地进行人工切割胚胎实验。早在三、四十年代,很多学者将鸡或鸭胚用切割或移植组织块的方法,研究早期鸟胚发育的情况。如将胚盘前端纵切,     

鸟类性别决定候选基因在性反转鸡胚中的表达

DMRT1、PKCIW和FET1是鸟类性别决定过程中重要的候选基因。以芳香化酶抑制剂处理的鸡胚为实验材料, 对这3个基因的表达变化进行了研究。结果表明, 在整个性别决定关键时期(E4.5 ~ E10.5), DMRT1在雄性的表达量显著高于雌性, 并且在ZW性反转鸡胚中表达大幅上升, 表明DMRT1的上调表达是与睾丸形成相关的。PKCIW基因在雌性特异表达并在性反转鸡胚表达上升, 这可能与其特殊作用模式有关, 即使性反转鸡胚PKCIW代偿性的表达升高, 却也未能阻止睾丸的形成。此外, FET1为雌性特异表达, 但在性反转鸡胚中表达无变化。综上, 实验结果支持了DMRT1是鸟类睾丸发育决定因子的假说。     

非洲爪蟾（Xenopus laevis）囊胚,神经胚两个cDNA文库的建立

随着分子发育生物学的发展,非洲爪蟾(Xenopus laevis)作为发育生物学,尤其是胚胎诱导、分化机制研究的重要实验材料,受到人们的重视。作者建立的非洲爪蟾囊胚(分期8)和神经胚(分期14)两个不同发育时期胚胎的cDNA文库,为进一步筛选有关的发育基因创造了条件。     

鸡胚早期发育过程中细胞迁移的基因调控

鸡胚是发育生物学研究的经典动物模型,通过基因导入技术调节胚胎发育的基因功能,研究鸡胚早期发育过程中的细胞迁移,有助于更好地诠释相关先天性疾病的发生发展过程。在早期胚胎发育的过程中,原肠胚期三胚层的形成、心管的发生及神经嵴的发育都伴随着显著的细胞迁移过程。该文将结合近年来国内外对该过程的研究进展,介绍这三个不同时期细胞的迁移及相关基因调控。     

青壳鸡蛋与褐壳鸡蛋品质及营养成分比较分析

为了比较青壳鸡蛋和褐壳鸡蛋品质的差异,以苏禽青壳蛋鸡和海兰褐壳蛋鸡2个鸡种为试验素材,采用笼养饲养方式,测定苏禽青壳蛋鸡和海兰褐壳蛋鸡鸡蛋的常规蛋品质和营养成分含量。结果表明：在常规蛋品质方面,苏禽青壳蛋鸡鸡蛋的哈氏单位和蛋黄色泽极显著高于海兰褐蛋鸡鸡蛋（P＜0.01）,蛋黄比率显著高于海兰褐蛋鸡鸡蛋（P＜0.05）,蛋重极显著小于海兰褐蛋鸡鸡蛋（P＜0.01）,蛋形指数、蛋壳厚度和蛋壳强度差异不显著。在营养成分方面,苏禽青壳蛋鸡鸡蛋的干物质、脂肪、胆固醇和卵磷脂含量均极显著高于海兰褐蛋鸡鸡蛋（P＜0.01）,蛋白质和氨基酸含量差异不显著。钙、镁、铜含量两者差异不显著,但苏禽青壳蛋鸡鸡蛋的铁、锌、锰、硒、磷含量均极显著高于海兰褐蛋鸡鸡蛋（P＜0.01）,可见鸡种对鸡蛋常规品质和营养成分均具有一定的影响。     

鸡miR-21的组织表达谱及其功能预测分析

已知miR-21在多种生物学过程中发挥重要的调控作用,然而有关鸡miR-21功能的研究尚未见报道。为了解鸡miR 21的潜在生物学功能,采用qRT-PCR检测了固始鸡5个发育阶段、15种组织中miR-21的表达情况。同时,利用Pictar和TargetScan算法预测了miR-21的靶基因并对预测的靶基因进行了Gene Ontology分析和通路分析。结果显示,miR-21的表达具有明显的时序特征,除14胚龄鸡的小脑和腺胃外,胚胎期各组织中miR-21的表达水平均显著低于出壳后对应组织的表达水平;出壳后鸡的下丘脑、大脑、小脑、小肠、肝脏、胸肌和肾脏等组织中miR-21的表达水平随发育进程均显著上调。生物信息学分析显示,预测的miR-21的靶基因在基因表达调控、大分子代谢调控、转录调控、细胞代谢调控、细胞衰老和增殖、呼吸系统发育、骨骼发育、心脏发育和神经系统发育等广泛的生物学过程中显著富集。总之,鸡miR-21为广泛性时序表达miRNA,可能参与鸡出壳后诸多器官发育相关的生物学过程的调控。     

利用转录组测序筛选鸡蛋褐壳性状相关基因

褐壳鸡蛋在许多国家深受消费者喜爱,消费者通常把蛋壳褐色深浅作为评价鸡蛋品质的重要指标。褐壳鸡蛋蛋壳颜色形成受多基因共同调控,但是具体候选基因及调控机理尚未明确。因此,本研究以纯系褐壳蛋鸡为实验材料,筛选调控褐壳鸡蛋颜色深浅的候选基因。采用转录组测序技术对产深褐壳鸡蛋和浅褐壳鸡蛋的母鸡蛋壳腺组织进行分析,结果显示,共计有8461个基因在蛋壳腺组织表达,其中34个基因在两组之间差异表达。功能分析发现,卵转铁蛋白(ovotransferrin, TF)基因、热休克蛋白70 (heat shock protein, HSP70)基因以及氧化磷酸化通路均与原卟啉Ⅸ合成通路相关,可能影响褐壳鸡蛋蛋壳色素原卟啉Ⅸ的合成和积累。     

羊膜卵和羊膜的实验观察

羊膜动物是真正的陆生脊椎动物,它们所产的卵称为羊膜卵。羊膜卵最早于爬行动物中的出现在脊椎动物进化上是一个巨大的突变,其生物学意义足以同颌的出现或离水登陆相提并论。羊膜的结构和发育特点,尤其是胚胎期形成的羊膜、绒毛膜和尿囊等胚膜,使羊膜动物在个体发育中摆脱对于水的依赖起到极其重要的作用,并有了陆地生活的可能性。本实验通过鸡蛋的解剖和观察,了解羊膜卵的构造及加深羊膜对陆生意义的认识。