钝脚目全棱齿兽科的分类

本文在重新观察某些亚洲土著钝脚类的基础上,结合前人研究成果,将原全棱齿兽科、古脊齿兽科和牧兽科合并成一个科──全棱齿兽科,分全棱齿兽和牧兽两个亚科,并对其组成做了分析。     

抗反馈抑制的天冬氨酸激酶基因在钝齿棒杆菌中的表达

将来自钝齿棒杆菌（Corynebacterium crenatum）CD945具有AEC抗性的天冬氨酸激酶(AKfbr)基因克隆到穿梭载体pJC1上,构建重组质粒pLY153。用电击法将质粒pLY153转化到野生型菌株C. crenatum AS1.542及其突变株C. crenatum CD945中。携带AKfbr基因的C. crenatum AS1.542菌株能抗浓度皆为12mg/mL的AEC和苏氨酸。AKfbr基因在C. crenatum CD945中得到表达,天冬氨酸激酶活性提高4倍。摇瓶发酵实验结果表明,重组菌在对数前期和中期生长正常,不受抑制;与对照菌相比,赖氨酸终产量提高22％,赖氨酸生产率提高23％。     

乌兰布和沙漠沙冬青种群结构和空间分布

对乌兰布和沙漠不同区域分布的沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)种群结构和空间分布格局进行了研究,根据大小结构图分析沙冬青种群动态,用平均拥挤度(m·)、丛生指数(I)、聚块性指标(m·/m)、Cassie指标(CA)、扩散系数C、负二项分布中的K指标判断格局类型,并根据双项轨迹方差法分析格局规模.结果表明:沙漠中部分布的沙冬青种群年龄结构完整,而其他区域分布种群结构均不完整;各区域分布种群均以中龄级个体居多,种群目前处于相对稳定的状态,但是由于幼龄级个体少,种群更新困难,且部分区域种群有"老龄化"的趋势.在西北边缘和沙漠北部分布的种群为聚集分布类型,而其他区域均为均匀分布;对各样地种群格局规模的分析也表明格局规模存在差异.     

钝齿棒杆菌溶氧诱导型启动子的筛选及其功能验证

[目的]筛选钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)SYPA5-5内源溶氧诱导型启动子,验证其在不同溶氧条件下受溶氧调控的功能.[方法]以本课题组前期利用双向电泳结合质谱鉴定技术分离鉴定出的高低供氧条件下钝齿棒杆菌SYPA5-5胞内的显著差异蛋白(27个)为基础,结合棒杆菌基因组信息分析高低溶氧状态下显著差异蛋白中单位拷贝的表达量,以其中单位拷贝表达量高的蛋白为目的蛋白,克隆目的蛋白编码基因的上游启动子,分别替换棒杆菌-大肠杆菌穿梭表达质粒pDXW-8的外源tac启动子,在大肠杆菌和钝齿棒杆菌中表达报告基因gfp和cat,并检测其表达效率.[结果]筛选出高溶氧上调蛋白转酮醇酶和延胡索酸水化酶作为目的蛋白,克隆其启动子区命名为P-tkt和P-fum.在重组大肠杆菌和重组钝齿棒杆菌中,P-tkt在高溶氧条件下CAT活性是低溶氧条件下CAT活性的2.8和3.2倍.该结果在5L发酵罐中得到验证.[结论]启动子P-tkt为首次筛选到的钝齿棒杆菌内源性高溶氧诱导型启动子,适用于高溶氧条件发酵生产氨基酸的菌株中,有利于在高供氧条件下提高棒杆菌中氨基酸的合成代谢能力.     

抗噬菌体重组钝齿棒杆菌的生理稳定性

为了探索抗噬菌体重组钝齿棒杆菌的应用可行性,对重组质粒pJL23-cglⅠ在钝齿棒杆菌中的稳定性以及其对宿主细胞生长代谢的影响进行了研究。实验结果表明,重组质粒在钝齿棒杆菌中具有较好的稳定性,它在钝齿棒杆菌中的存在对重组菌株的早期生长有些影响,但未影响重组菌株的谷氨酸产生量。     

二甲基亚砜和吐温80对钝齿棒杆菌产生赖氨酸影响的研究

以赖氨酸产生菌钝齿捧杆菌（Corynebacteriumcrenatum）E0.7－66（HS ,AECrr,TArr,ESr）为出发菌种,对菌体进行亚硝酸诱变处理,并且通过提高抗七叶苷[1,2]剂量,筛选得到高抗七叶苷突变株E0.8-26,其L-赖氨酸产量较出发菌株提高了13．1％．在发酵至28h时,加入0．2％的吐温80或0.5％的二甲基亚砜,分别又使L-赖氨酸产量提高12．8％和13．3％。因此通过使用表面活性剂来改变细胞质膜造性,可使产酸量大幅度提高,该途径是筛过高产菌株的良好方法．     

新疆沙冬青AM和DSE真菌的空间分布

2012年6月从新疆阿图什市选取康苏、膘尔托阔依(阳)、膘尔托阔依(阴)和上阿图什4个样地,采集新疆沙冬青(Ammopiptanthus nanus)根围0—10、10—20、20—30、30—40和40—50cm5个土层土壤样品,研究了新疆沙冬青AM和DSE真菌定殖规律以及土壤因子的生态作用。结果表明,AM和DSE真菌平均总定殖率分别为83.2%和53.22%,说明AM和DSE真菌能与新疆沙冬青根系形成良好共生关系。AM和DSE真菌具有明显空间异质性,AM总定殖率最大值在20—30cm土层,样地间表现为康苏=上阿图什膘尔托阔依(阳)膘尔托阔依(阴);DSE土层间无规律性变化,样地间为膘尔托阔依(阳)膘尔托阔依(阴)康苏上阿图什。相关性分析表明,AM菌丝、泡囊和总定殖率与DSE定殖率极显著负相关,AM定殖强度与DSE菌丝和总定殖率显著负相关,丛枝定殖率与DSE菌丝和总定殖率极显著正相关,说明两者间存在生态位竞争。土壤速效P、总球囊霉素和酸性磷酸酶与AM总定殖率极显著正相关,pH与AM总定殖率显著负相关;脲酶与DSE极显著正相关,pH和碱解N与DSE显著负相关。     

沙坡头地区沙冬青AM真菌的时空分布

2007年5月、8月和10月分别从宁夏沙坡头地区豆科植物沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)根围分0-10cm,10-20cm,20-30cm,30-40cm和40-50cm5个土层采集土壤样品。研究了AM真菌时空分布及与土壤因子的相关性,在分离的3属12种AM真菌中,球囊霉属(Glomus)6种,无梗囊霉属(Acaulospora)4种,盾巨孢囊霉属(Scutellospora)2种,3属12种AM真菌在3个时期均有分布。AM真菌定殖率与孢子密度有明显的时空分布规律,并与土壤因子关系密切。孢子密度和泡囊定殖率在8月份最高,丛枝、菌丝和总定殖率10月份最高。土壤采样深度对孢子密度和定殖率有显著影响,AM真菌最高定殖率和最大孢子密度均出现在0-30cm浅土层。孢子密度与土壤有机质、碱解N极显著正相关,与pH显著正相关;菌丝、总定殖率与pH、碱解N和速效P极显著正相关。在评估荒漠生态系统和沙冬青形成菌根的能力时,AM真菌孢子密度、菌根不同结构的定殖程度是十分有用的指标。     

钝齿棒杆菌丙酮酸激酶的克隆表达及其对精氨酸合成的扰动影响

钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)SYPA 5-5是诱变选育的一株高产精氨酸菌株。丙酮酸激酶(pyruvate kinase)是EMP途径的限速酶,对胞内能量产生和代谢流调节方面都有重要作用。为提高葡萄糖消耗速率以缩短发酵周期,以钝齿棒杆菌基因组为模板,克隆得到pyk基因并将其在C.crenatum SYPA 5-5中成功表达,葡萄糖平均消耗速率为1.71 g/L/h较C.crenatum SYPA 5-5提高33.5%,精氨酸产量和最大产率分别为43.32 g/L和0.55 g/L/h较C.crenatum SYPA 5-5分别提高20%和19.5%。结果表明,加强表达丙酮酸激酶能增强EMP途径,提高精氨酸产量。     

氮源对钝齿棒杆菌谷氨酰胺合成酶的调节作用及溶菌酶对破壁作用的研究

钝齿棒杆菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍｃｒｅｎａｔｕｍ）６２８２谷氨酰胺合成酶（ＧＳ）的合成显著受氮源性质的影响,以５０ｍｍｏｌ／Ｌ谷氨酸钠为唯一氮源时,谷氨酰胺合成酶活力最高;ＮＨ对谷氨酰胺合成酶的合成有阻遏作用,谷氨酸钠则具有解阻遏作用。蛋清溶菌酶对于菌株６２８２的细胞超声波破碎具有良好的辅助作用;适宜的细胞破碎条件为０．８ｍｇ／ｍｌ溶菌酶,３７℃保温４～５ｈ,超声波１２０Ｗ处理１２ｍｉｎ。     

金叶日本冬青的组织培养与快速繁殖

1植物名称日本金叶冬青(Ilex crenata),又名钝齿冬青. 2材料类别顶芽和带腋芽的嫩茎段. 3培养条件启动培养基:(1)MS 6-BA 3 mg·L-1(单位下同) NAA 0.01 2,4-D 0.1 蔗糖3%;继代增殖培养基:(2)MS 6-BA 1 NAA 0.2 蔗糖3%;生根培养基:(3)1/2MS NAA 0.6 2%蔗糖.上述培养基均加0.7%琼脂,pH 5.8.培养温度为(25 2)℃,光照度为1500 lx,光照时间12 h·d-1.     

朱砂根的组织培养和快速繁殖

1植物名称朱砂根(Ardisia crenata Sims.),又名富贵籽、大罗伞、黄金万两、凉伞遮金珠等。2材料类别当年生幼嫩茎段。     

岛屿特有种全缘冬青遗传多样性的ISSR分析

全缘冬青(Ilex integra)为岛屿特有植物,主要分布于浙江舟山群岛,被列为浙江省珍稀濒危植物。作者运用ISSR分子标记对舟山群岛的6个全缘冬青种群(5个自然种群和1个栽培种群)共57个个体进行了遗传多样性分析。采用9条随机引物扩增出78条清晰谱带,其中45条为多态性条带,多态位点百分比(PPL)为57.7%。经POPGENE软件分析,全缘冬青种群平均多态位点百分比(PPL)为42.1%,Nei’s基因多样度(HE)为0.153,较其他海岛植物的遗传多样性偏低。5个自然种群遗传分化系数Gst=0.316,AMOVA测度Fst=0.295,Shannon多样性分化系数S=0.304,遗传分化程度较高。全缘冬青种群间地理距离与遗传距离具有正相关性(r=0.649,P<0.05),岛屿间地理隔离对种群间遗传分化产生了较为显著的影响。UPGMA聚类分析显示,朱家尖岛与普陀岛种群亲缘关系较近,而舟山岛栽培种群是由桃花岛自然种群移植而来。针对全缘冬青种群遗传多样性较低及遗传分化程度较高的现状,应加强现有自然种群的就地保护,促进种群自然更新;建立种质资源库,收集不同岛屿的种源进行混合繁殖,促进基因交流。     

ÜberKalanchoë integra (Med.) O.Kuntze und ihre Beziehung zuK. crenata (Andr.)Haworth

Ohne ZusammenfassungHerrn Prof. Dr.Lothar Geitler zum 70. Geburtstag gewidmet.     

枸骨的组织培养与快速繁殖

1植物名称枸骨(flex cornuta Lindl.eX Paxt.),别名鸟不宿,猫儿刺. 2材料类别种子. 3培养条件种胚萌发培养基:(1)I/2MS GA,1.0mg·L-1(单位下同);壮苗培养基:(2)MS BA 1.5 NAA0.5;不定芽诱导培养基:(3)MS BA 2.0 NAA 0.1;增殖与继代培养基:(4)MS BA 3.0 KT 0.5 IBA 0.5;(5)MS BA2.0 KT0.5 113A0.5;生根培养基:(6)I/2MS IBA 0.2 NAA 0.2.以上培养基都加入3%蔗糖和0.7%琼脂粉,pH 5.6～5.8,高压锅121℃灭菌15 min.培养温度为(25 2)℃,光照强度为加40～50μmol·m-2·s-1,光照时间为14 h·d-1.     

蓬蘽的组织培养与快速繁殖

1植物名称 蓬蘽（Rubus hirsutus Thunb．）,又名三月泡。 2材料类别 叶片和茎段。     

冬青的离体培养与快速繁殖

1植物名称冬青(IlexchinensisSims),别名四季冬青。2材料类别顶芽和带腋芽的茎段。3培养条件芽诱导培养基:(1)MS+6-BA1.0mg·L-1(单位下同)+NAA0.05;增殖培养基:(2)MS+6-BA0.5+NAA0.05;生根培养基:(3)1/2MS(MS大量元素减半)+NAA0.4。以上培养基均添加0.6%琼脂粉,蔗糖除生根培养基为25g·L-1外,其余均为30g·L-1,pH5.8。培养温度(25±2)℃,光强约为40μmol·m-2·s-1,光照时间为12h·d-1。4生长与分化情况4.1芽的诱导10月上旬,剪取冬青生长健壮的枝条,流水冲洗30min。置于超净工作台上,用75%的乙醇处理30s,无菌水冲洗2～3次,再用0…     

Triterpenoid Saponins with Potential Cytotoxic Activities from the Root Bark of Ilex rotunda Thunb.

A new 19‐oxo‐18,19‐seco‐ursane‐type triterpeonoid saponin, laevigin E ( 8 ), together with 17 known compounds ( 1 – 7 and 9 – 18 ) were isolated from the root bark of Ilex rotunda Thunb . Their structures were determined by various spectroscopic analysis. Among them, compounds 6 , 9 , 11 , and 18 were isolated from this species for the first time, while compounds 10 and 12 were firstly isolated from the family Aquifoliaceae. Biological activity assay showed that all triterpenoids exhibit moderate cytotoxic activities against MCF7, A549, HeLa and LN229 cell lines. The four triterpenoid saponins ( 3 , 4 , 6 , and 8 ) exhibit slightly better activities compared to the four triterpenoid sapogenins ( 1 , 2 , 5 , and 7 ). Compound 8 showed the best cytotoxicity against A549, HeLa and LN229 cell lines with IC₅₀ of 17.83, 22.58 and 30.98 μm , respectively.     

美洲冬青的组织培养与快速繁殖

1植物名称美洲冬青[Ilex verticillata (Linn.) A.Gray],由美国缅因大学张冬林博士提供。2材料类别带腋芽的嫩茎段。3培养条件启动培养基:(1)MS 6-BA0.5mg·L-1(单位下同) IBA0.1。增殖与壮苗培养基:(2)MS 6-BA1.0 NAA0.5;(3)MS KT1.0 NAA0.5;