编码叶绿体QB蛋白的psbA基因在E.coli中的转录表达研究(英文)

叶绿体中的psbA是一个编码QB蛋白的光调节基因。我们用带有豌豆psbA基因和lacZ基因融合体的质粒,研究了无光诱导下在E.coli中的表达。结果表明:含有psbA及其上游166碱基的DNA片段能在黑暗中表达。同时还表明,在植物中,psbA基因启动子是潜在的有较高活性的启动子,在黑暗中不能表达可能是由于受到特定的调节机制制约。叶绿体的psbA基因与E.coli的基因上游“pribnow”盒与“-35”盒有较高的同源性。这为叶绿体与光合原核生物有共同的起源提供了证据。     

水稻(Oryza sativa L.)核基因组存在叶绿体psbA基因的同源片段

序列比较说明,重复DNA顺序pRRD9与水稻叶绿体基因组中编码QB蛋白的psbA基因存在高度的同源。用pRRD9亚克隆片段pRRD9R和片段pRRD9L对水稻的叶绿体和核DNA进行Southern杂交分析,揭示了psbA基因同源片段在某个进化时期由叶绿体基因组转移到水稻核基因组,而且两者在水稻进化过程中的变异程度存在明显的差异。利用它们对野生稻和栽培稻总DNA的Southern杂交分析,显示亚洲栽培稻与AA基因组型的野生稻有较近的亲缘关系,以及在部分野生稻产生特异的杂交带谱,说明它可以作为一种分子探针来研究水稻的进化问题。     

毛白杨叶绿体ATP合酶β亚基基因序列

1　Ｓｏｕｒｃｅ　ＴｈｅｓｅｑｕｅｎｃｅｏｆｔｈｅａｔｐＢｇｅｎｅｗａｓｄｅｔｅｒ ｍｉｎｅｄｆｒｏｍＰＣＲｐｒｏｄｕｃｔｏｆｃｈｌｏｒｏｐｌａｓｔｇｅｎｏｍｉｃＤＮＡｏｆＰｏｐｕｌｕｓｔｏｍｅｎｔｏｓａ .2　Ｎａｍｅａｎｄｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ＴｈｅｃｏｄｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｏｆｔｈｅａｔｐＢｇｅｎｅｏｆＰｏｐｕｌｕｓｔｏｍｅｎｔｏｓａｉｓ 1 497ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｌｏｎｇｔｈａｔｅｎｃｏｄｅｓ 498ａｍｉｎｏａｃｉｄｓｏｆＡＴＰａｓｅｂｅｔａｓｕｂｕｎｉｔｏｆｃｈｌｏｒｏｐｌａｓｔ.ＩｔｓＤＮＡ…     

不同光质对黍子叶绿体光系统发育及psbA基因转录物稳态含量的影响

本文以一种Ｃ４植物－黍子为材料,在白光、红光、蓝光、远红光和黑暗５种不同条件下培养黍子幼苗,叶片采收后用于叶绿素积累、叶绿体吸收光谱、叶绿体低温荧光发射光谱和高分子量ｃｐＲＮＡ积累的测定以及ｐｓｂＡ基因的Ｎｏｒｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ分析。结果表明：白光、红光和蓝光下生长的黍子,它们的叶绿体都有功能完善的光合系统;而远红光下生长的黍子,已有光系统Ⅱ的发射峰,只是强度和波长都与白光、红光和蓝光下的有所不     

水稻（Oryza sativa L.）核基因组存在叶绿体psbA基因的同源 …

序列比较说明、重复ＤＮＡ顺序ｐＲＲＤ９＾＊与水稻叶绿体基因组中编码ＱＢ蛋白的ｐｓｂＡ基因存在高度的同源。用ｐＲＢＤ９亚克隆片段ｐＲＲＤ９Ｒ和片段ｐＲＲＤ９Ｌ对水稻的叶绿体和核ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析,揭示了ｐｓｂＡ基因同源片段在某个进化时期由叶绿体基因组转移到水稻核基因组,而且两者在水稻进化过程中的变异程度存在明显的差异。     

高粱叶绿体psbA基因的结构特征及其5'-非编码区的调控效应

报道高粱叶绿体光系统ⅡpsbA基因的结构特征及其5'-非编码区的调控效应.比较分析表明,C4植物高粱与C3植物水稻psbA基因的核苷酸序列及其推测的氨基酸序列的一级结构之间,存在着高度的同源性.高粱psbA基因5'-非编码区,含有类似原核的-10和-35保守的启动子元件,以及类似于真核的TATA盒启动子元件,但与水稻的相比,前者比后者在mRNA的前导序列区多出了一段7 bp的额外序列,这在有关文献中尚未见报道.应用体外分析体系,证实在高粱叶绿体蛋白质提取物中存在着与psbA基因5'-非编码区特异性结合的蛋白质因子.荧光素酶表达量的检测结果是,在大肠杆菌中,带有高粱psbA基因前导序列区的表达质粒pALqs,其荧光素酶表达量,要比带有水稻相应结构的表达质粒pALqr的高出2～5倍.     

不同光质对黍子(Panicum miliaceum)叶绿体光系统发育及psbA基因转录物稳态含量的影响

本文以一种C4植物——黍子(Panicum miliaceum)为材料,在白光、红光、蓝光、远红光和黑暗5种不同条件下培养黍子幼苗,叶片采收后用于叶绿素积累、叶绿体吸收光谱、叶绿体低温荧光发射光谱和高分子量cpRNA积累的测定以及psbA基因的Northern Blot分析。结果表明:白光、红光和蓝光下生长的黍子,它们的叶绿体都有功能完善的光合系统;而远红光下生长的黍子,已有光系统Ⅱ的发射峰,只是强度和波长都与白光、红光和蓝光下的有所不同;不同光质促进叶绿素积累和高分子量cpRNA积累的效率是平行的,其中红光较蓝光和远红光有效,而复合光(白光)的作用效果最好。当以白光诱导的积累量为100％时,可以分别求出不同光质诱导叶绿素积累和高分子量cpRNA积累的相对量,结果表明,高分子量cpRNA的积累对光的依赖性要比叶绿素积累对光的依赖性大得多。psbA基因的Northern Blot分析表明,不同光质下psbA转录物的积累与高分子量cpRNA的积累是一致的。据此我们推测,在黍子叶绿体的光诱导发育过程中,psbA的转录过程可能不受光信号的直接调控,而是受叶绿体整体发育状态的控制。     

小麦叶绿体psbA基因PCR扩增及其克隆

利用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction)对小麦叶绿体的psbA基因进行特异性扩增,并以pBSD+质粒为载体将完整的psbA基因克隆到E.c oli中。通过分子杂交,PCR反应和酶切分析证明,重组质粒pTD1Ⅱ中含有完整的小麦叶绿体psbA基因。     

基于叶绿体psaA和psbA基因的中国熊野藻属植物系统发育分析

以中国产熊野藻属Kumanoa的两个种, 绞扭熊野藻K. intorta (=绞扭串珠藻Batrachospermum intortum), 弯形熊野藻K. curvata (=弯形串珠藻B. curvatum)和其他6种淡水红藻为实验材料, 对其psaA和psbA基因进行扩增和测序, 并与GenBank中相近序列进行比对分析, 以贝叶斯法、最大似然法和邻接法分别构建了单基因和联合基因系统发育树. 结果表明, 3种方法构建的系统树具有相似的拓扑结构, 反映的系统发育关系基本一致, 熊野藻属中的两个种聚为一支, 与串珠藻属相分离, 支持该属的建立; 中国产的熊野藻属分子学研究结果与来自南美洲及澳洲的该属植物结果一致, 说明该属的建立具有广泛的地理适用性. 系统发育树聚类结果也明确反映了熊野藻属与串珠藻属较近的亲缘关系, 根据果胞枝形态特点, 推测熊野藻属进化地位晚于串珠藻属植物, 而早于顶丝藻目和红索藻目. 此外, 胶串珠藻与其他串珠藻组植物分离, 支持将其单独分组, 红索藻目植物与串珠藻目植物分离, 支持红索藻目的建立. 同时也表明psaA和psbA基因用于淡水红藻分析, 能够较好地反映其系统发育关系.       

龙葵叶绿体的阿特拉津抗性基因psbA的核苷酸序列及有关分析

对克隆在psb135质粒上的来自龙葵阿特拉津抗性生物型的psbA基因进行DNA序列分析,测得长为1384个核苷酸的全序列,包括该基因的全部编码区和5′上游顺序。该基因的核苷酸序列与另一个独立来源的龙葵阿特拉津抗性基因的核苷酸序列完全相同,在由核苷酸推导的氨基酸序列的基础上,比较了分别由龙葵抗阿特拉津和对阿特拉津敏感的psbA基因编码的32kD蛋白质的二级结构,并对其可能的含意进行了讨论。     

油菜叶绿体基因ndhB的序列

1　Ｓｏｕｒｃｅ　ＴｈｅｓｅｑｕｅｎｃｅｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｆｒｏｍａＰＣＲ ｐｒｏｄｕｃｔ,ｗｈｉｃｈｗａｓｌｉｇａｔｅｄｔｏｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ( )ｖｅｃｔｅｒ (ｎａｍｅｄａｓｐＳＮ) ,ｆｒｏｍｔｈｅｃｈｌｏｒｏｐｌａｓｔｇｅｎｏｍｉｃＤＮＡｏｆＢｒａｓｓｉｃａｎａｐｕｓ(Ｏｉｌｓｅｅｄｒａｐｅ)ｃｖ.Ｈ1 65.2　Ｎａｍｅａｎｄｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　Ｂｒａｓｓｉｃａｎａｐｕｓｃｈｌｏｒｏ ｐｌａｓｔｇｅｎｅｎｄｈＢｉｓ 2 4 67ｂｐｌｏｎｇｗｉｔｈｔｗｏｅｘｏｎｓｔｈａｔｅｎｃｏｄｅ 51 0ａ…     

油菜叶绿体16SrRNA基因的一级结构分析

本文报道了油菜叶绿体16S rRNA基因的全顺序及其5′端上游的156bp和3′端下游的101bp的核苷酸顺序。油菜叶绿体16s rRNA基因长为1491bp,和烟草、玉米相比,同源程度分别为98.5％、96.1％。油菜叶绿体16S rRNA基因5′端上游及3′端下游的顺序能互补而形成一个较大的茎环结构,但与烟草相比,由于3′端下游顺序有79bp的缺失,因此,该结构中的茎部分大小仅为烟草的二分之一。     

烟草叶绿体分裂基因NtFtsZ1-2的启动子序列

1 Source The sequence was isolated from nuclear genomic DNA of Nicotiana tabacum by polymerase chain reaction.     

Purification and biochemical properties of glutathione S-transferase from Lactuca sativa

A glutathione S-transferase (GST) from Lactuca sativa was purified to electrophoretic homogeneity approximately 403-fold with a 9.6% activity yield by DEAE-Sephacel and glutathione (GSH)-Sepharose column chromatography. The molecular weight of the enzyme was determined to be approximately 23,000 by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis and 48,000 by gel chromatography, indicating a homodimeric structure. The activity of the enzyme was significantly inhibited by ShexylGSH and S-(2,4-dinitrophenyl) glutathione. The enzyme displayed activity towards 1-chloro-2,4-dinitrobenzene, a general GST substrate and high activities towards ethacrynic acid. It also exhibited glutathione peroxidase activity toward cumene hydroperoxide.     

口蹄疫抗原决定簇融合基因转化生菜及表达

以3-5天苗龄的散叶大速生生菜(Lactuca sativa var.capatata)无菌苗子叶为外植体,通过根癌农杆菌介导,将携带O型和A型口蹄疫抗原决定簇融合基因O21-O14-A21-HBcAg导入生菜.研究结果表明,含有20 mg·L-1潮霉素(Hyg)的S2培养基(MS 1.5 mg·L-1 6-BA 0.2 mg·L-1IAA 20 mg·L-1Hyg 300 mg·L-1Cb)为子叶外植体转化后诱导愈伤和芽再生的最适培养基,经抗性筛选,将抗性芽切下于S3培养基(1/2MS 20 mg·L-1Hyg)上诱导生根.通过PCR和Southern杂交分析证明,基因已经整合到生菜基因组中.RT-PCR检测初步表明,O21-O14-A21-HBcAg基因可以在生菜中正常转录.     

Molecular cloning and characterization of 4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase gene from Lactuca sativa

Vitamin E has been found to be associated with an important antioxidant property in mammals and plants. In photosynthetic organisms, the enzyme 4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase (HPPD; E.C. 1.13.11.27) plays an important role in the vitamin E biosynthetic pathway. The full-length cDNA encoding HPPD was isolated from Lactuca sativa L. by rapid amplification of cDNA ends (RACE). The cDNA, designated as LsHPPD, was 1743 base pairs (bp) long containing an open reading frame (ORF) of 1338 bp encoding a protein of 446 amino acids. Sequence analysis indicated that LsHPPD shared high identity with HPPD from Medicago truncatula L. Real-time fluorescent quantitative PCR (qPCR) analysis revealed that LsHPPD was preferentially expressed in mature leaves compared with other tissues and that the LsHPPD expression was sensitive to high light and drought stress treatments. Transient expression of LsHPPD via agroinfiltration resulted in 12-fold increase in LsHPPD mRNA expression level and 4-fold enhancement in α-tocopherol content compared with the negative control. A decrease in chlorophyll content and inhibition of photosystem II were observed during stress treatments and agroinfiltration.     

Development of Stomata in Lactuca sativa L.

The structure of the epidermis on various parts of the plantof Lactuca sativa Linn. is described. Development of stomatais studied in young leaves and stems. Tognini (1897) has previouslymentioned that the stomata on stems of L. virosa develop froma meristemoid with four cutting faces but the present studypoints out that the meristemoid cuts off only two mesogene neighbouringcells and the two others are perigene.