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1.
应用单克隆抗体测定人弓形虫IgM抗体的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
为了检测人血清弓形虫IgM抗体,采用抗人IgM单克隆抗体和特异性抗弓形虫单克隆抗体建立捕获ELISA法,并与PCR方法进行了比较。结果检测1065份献血员血清,检出阳性3例,用PCR方法检测呈阳性结果;检测23例类风湿病人血清及2份弓形虫IgG抗体阳性血清均为阴性反应。说明该方法不受类风湿因子(RF)和特异性IgG抗体的干扰,同时也表明捕获ELISA检测人血清中弓形虫IgM抗体特异性,敏感性良好。 相似文献
2.
本文比较了用HSV-1(IEA)和B病毒(IFA)的方法检查猴B病毒相关抗体和B病毒抗体的结果:IEA检查出的B病毒相关抗体阴性猴,经IFA检查,全部为B病毒抗体阴性。用IFA检查了B病毒相关抗体阴性的恒河猴,在单笼隔离饲养六个月后,有98.3%的动物B病毒相关抗体仍为阴性,表明IRA的阴性结果有较好的一致性。本文讨论了建立无B病毒感染猴群的可行性。 相似文献
3.
恒河猴STLV-1血清抗体流行病学研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的调查我国恒河猴STLV-1流行病学特征.方法用免疫荧光法和蛋白印迹法对537只野捕恒河猴,365只繁殖猴和44只D型逆转录病毒抗体阳性猴作了STLV-1血清抗体检查.结果 10岁以上恒河猴的STLV-1抗体阳性率(15.5%)高于10岁以下的恒河猴(6.2%);雌猴的STLV-1抗体阳性率(17.5%)高于雄猴(5%);D型逆转录病毒抗体阳性猴群的STLV-1抗体阳性率(34.1%)高于野捕猴群(8.8%).结论在我国的野生和饲养恒河猴群中广泛存在STVL-1血清抗体阳性动物,其抗体阳性率与动物的年龄和性别有关. 相似文献
4.
在ELISA对特异性Uu抗体测定的基础上,以90例Uu培养阳性者检测出抗Uu抗体82例(91.1%),其中Ig阳性60例(66,7%),Ig阳性49例(54.4%);与30例Uu多养阴性者比较,抗Uu抗体阳性4例(13.3%),其中IgM阳性1例(3.3%),IgG阳性3例(10.0%),差异显著(P<0.01)。ELISA测定血清抗Uu抗体的特异度为87%,灵敏度96%。该法是临床诊断Uu感染的又一有力手段,且对分析Uu感染的病程有重要参考价值。 相似文献
5.
用DIGFA单盲检测各类胃病患者血清HP特异性抗体,结果表明其敏感性为979%,特异性为915%,诊断效率达947%,youden’s指数为089。通过本法与常规ELISA比较,发现两法前四种诊断指标均无明显差异,但DIGFA简易、快速,无需任何设备,数分钟内即可得出正确结论,因此适合于基层医院查病、胃镜检查前过筛及流行病学调查应用 相似文献
6.
本文报道应用多肽抗体谱印迹法检测风湿性疾病患者的ENA抗体,该法一次可检测7种抗体。应用本法检测SLE85例,其Sm抗体阳性率为20.0%,u1-RNP抗体为41.1%,SS-A抗体为10.5%SS-B抗体为3.5%,抗核糖体为7.0%。检测DLE6例,其山u1-RNP抗体阳性率为33.0%。检测PM/DM15例,其u1-RNP抗体阳性率为13.0%,Jo-1抗体为14.0%。检测RA48例,其u1-RNP抗体的阳性率为33.3%。检测SS21例,其SS-A抗体阳性率为43.0%,SS-B抗体为38.0%,检测PSS9例,其Scl-70抗体阳性率为22.0%。检测MCTD10例,其u1-RNP抗体阳性率为50.0%。健康人对照100例,7种抗体均为阴性。显示应用多肽抗体谱印迹法检测结果与国内其它方法所测得结果基本一致,但可检测的抗体种类多于其它方法。 相似文献
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三种方法检查食蟹猴血清STLV-1抗体的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本文用乳胶凝集试验(PA)、免疫荧光试验(IFA)和蛋白印迹试验(WB)对103份食蟹猴血清作了STLV-1抗体检查。结果表明,13份WB检查为STLV-1抗体阳性的血清,PA和IFA检查均为阳性,而90份WB检查为STLV-1抗体阴性的血清,PA检查有3份为阳性,IFA检查有1份为阳性结果。 相似文献
8.
植物组织粗汁液中的番木瓜环斑病毒的ELISA检测技术 总被引:14,自引:0,他引:14
本研究建立和改进了检测番木瓜和西葫芦组织粗汁液里的番木瓜环斑病毒(PRV)的DAC-ELISA法和Dot-ELISA法。用不同的ELISA方法来检测不同寄主植物粗汁液里的PRV,其所用的合适的制备粗汁液的缓冲液是不同的。用DAC-ELISA法检测西葫芦粗汁液时,以0.5mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.5,内含0.1mol/L乙二胺四乙酸二钠)为宜;而检测番木瓜粗汁液时,则还要加入0.25mol/L脲。用Dot-ELISA法检测时,在上述磷酸盐缓冲液中加入2%聚乙烯吡咯烷铜能提高对西葫芦粗汁液的检测效果。应用合适的制备粗汁液的缓冲液,DAC-ELISA法和Dot-ELISA法的灵敏度分别提高到1/4096和1/1024(稀释度)。本研究还表明,影响DAC-ELISA法的定过测定的主要因素是粗汁液的稀释度和包被液(0.05mol/L碳酸盐缓冲液,pH9.6)的用过。在较高粗汁液稀释度和包被液的用量相同时,粗汁液里的病毒含量与DAC-ELISA法的OD492nm值呈真实的线性关系。 相似文献
9.
表达流行性感冒病毒血凝素蛋白的重组腺病毒的构建 总被引:5,自引:0,他引:5
用RT-PCR方法扩增流感病毒血凝素基因,将其克隆到5型腺病毒载体质粒pAD5C中。用此质粒与EcoRI酶切回收的5型腺病毒基因组片段共转染293细胞,通过PCR初步筛选得到重组病毒。SDS-PAGE电泳、West-ern blot重组病毒能表达流感病毒的血凝素蛋白。此重组病毒经滴鼻免疫Balb/C小鼠,ELISA实验证明能诱导小鼠产生针对流感的循环抗体IgG和分泌型抗体IgA。本实验证明,利用E 相似文献
10.
百日咳杆菌69KDa外膜蛋白的分离纯化及生物学特性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本文发展了一种从百日咳杆菌Ⅰ相菌株中纯化69KDa外膜蛋白的简易方法,将细菌体经加热浸提、乙醇沉淀蛋白、DEAE-Sephadex A50柱层析精制而成。用SDS-PAGE、免疫印迹、光密度仪扫描分析,证明纯化制剂为均一的、特异性的69KDa外膜蛋白,其收率为54.2%,纯度达99.2%,每微克69KDa蛋白制剂中的内毒素含量低于0.85EU;PT残留量小于0.105ng。抗69KDa蛋白抗血清能 相似文献
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抗可提取核抗原(ENA)抗体是一种自身免疫性抗体,主要包括抗核糖核蛋白(RNP)抗体、抗Sm抗体等种类[1]。常用的检测方法为双向扩散(DID)法,该法虽特异性好但敏感性很低,常造成漏检。本文应用国内较少报道的日本新一代ELISA法对264例自身免疫病患者进行了抗RNP抗体测定研究,并与常规的双向扩散法作了对比试验,现报道如下。1 材料与方法11 待检对象;38名混合结缔组织病(MCTD)患者,70名系统性红斑狼疮(SLE)患者,98名干燥综合征(SJS)患者,58名全身进行性硬化症(PSS)患者,180名健康者。12 试剂:ELISA法抗… 相似文献
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应用多聚酶链反应(PCR),直接从SIV感染的猴艾滋病(SAIDS)模型猴的外周血淋巴细胞总DNA中扩增出767bp的SIV核心蛋白P27基因片段。扩增产物经EcoRI及SalI双酶切后,克隆入相同酶切的表达质粒pBV220中,获得含SIV核心蛋白基因片段的重组质粒pBVSG,并进行DNA序列分析。用该重组质粒转化大肠杆菌DH5a经筛选、增殖及42℃温度诱导,SDS-PAGE表明外源基因表达蛋白含量占菌体总蛋白14.5%,Western-blot证实表达产物能被SIVP27单克隆抗体及SAIDS模型猴血清中特异性抗体识别。 相似文献
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用白色念珠菌临床分离株免疫家兔并经纯化获得特异性抗体,建立了检测临床标本中白色念珠菌抗原的ELISA一步法,此法的敏感性为99%,特异性为983%,与其它念珠菌和临床常见细菌均无交叉反应,整个反应只需1小时即可完成,可望成为一种取代培养法的快速诊断方法 相似文献
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用聚合酶链式反应(PCR)从HIV 1gag基因中扩增出衣壳蛋白P24截短体(tP24)基因,插入质粒pGEX 4T3中构成重组表达质粒pGEX tp24,将pGEX tp24转化大肠杆菌BL21后获得了高效表达,表达量占菌体总蛋白量的3438%。经Glutathione-Sepharose4B亲和层析纯化的截短体P24纯度为9277%。纯化的截短体P24在间接ELISA和免疫印迹检测HIV抗体阳性血清和正常人血清中,具有很高的抗原特异性和免疫反应性。 相似文献
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伤寒杆菌SOD抗体对小鼠腹腔吞噬细胞杀灭伤寒杆菌的影响 总被引:3,自引:1,他引:2
为了制备伤寒要直菌SOD抗体,研究该抗体对小鼠腹腔吞噬细胞杀灭伤寒杆菌的影响,探讨SOD与伤寒杆菌抗吞噬作用的关系。采用纯化的伤寒杆菌(Stwl)Fe-SOD免疫农兔制备兔抗Fe-SOD抗体。利用EALISA法检测抗体的效价。免疫电泳、双向琼脂扩散试验和抗体对酶活性抑制试验分析抗体的特性。用不同浓度的抗体预先处理伤寒杆菌,然后进行小鼠腹腔吞噬细胞的吞噬杀菌试验。试验结果抗体的ELIS攻疚价为1:1 相似文献
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为进一步研究HFRS免疫损伤机制,用ELISA法同步测定了108例不同临床型、不同病日、病期HFRS患者血清中特异性IgA、IgE抗体以及HFRS病毒特异性IgA、IgE型CIC的水平及检出率。发现HFRSIgA型抗体在轻型病例高于中、重型病例;HFRSIgE型抗体及IgE型CIC在重型病例高于中、轻型病例。上述差异在病程早期(发热、休克少尿期,或是3~8病日)尤为突出。IgA型CIC则未见到上述差异。 相似文献
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免疫聚合酶链反应技术的建立及其对甲胎蛋白的检测 总被引:1,自引:0,他引:1
免疫PCR是一种新的具高敏感性的抗原检测技术,它类似传统的ELISA法,若与抗体连接的酶用DNA片段代替,则该DNA片段可用于PCR扩增。以链酶亲合素搭桥将生物素标记的抗体与DNA相连建立了免疫PCR技术,并将其用于检测甲胎蛋白(AFP),其敏感性比ELISA法高104。因此,免疫PCR有可能作为一种具高敏感性的检测手段用于临床早期诊断 相似文献
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将抗癌胚抗原(CEA)单克隆抗体的重链可变区与人的恒定区(Cγ3) 连接, 制备抗癌胚抗原嵌合重链用于放免治疗及其他导向治疗, 可减少人抗鼠抗体反应(HAMA) 。为纯化及核素标记抗体, 将嵌合重链基因与核心链霉亲和素基因融合。融合基因在大肠杆菌得到高效表达, 表达量占菌体总蛋白的24 % 。SDSPAGE 和蛋白质印迹图谱显示表达产物分子量为70 kD, 与其基因编码蛋白质的理论推算值相符。以HRP标记的生物素作为抗体进行蛋白质印迹, 在70 kD 处可见表达条带, 表明融合蛋白能特异性地与生物素结合, 使嵌合重链经生物素柱进行廉价纯化成为可能。表达产物在胞内主要以不溶性的包含体存在, 经变性和复性处理后, RIA 表明表达产物具有结合其特异性抗原CEA的能力。 相似文献
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幽门螺杆菌尿素酶抗原的分离及纯化 总被引:2,自引:1,他引:1
本实验采用新型离了交换剂Sourece Q15为分离介质,用氯化钠盐浓度梯度洗脱法,从幽门螺杆菌超声处理上清液中纯化了幽累相菌尿毒酶抗原,所得纯化物经SDS-PAGE电泳分析证明具有良好的纯度,只含有分子量为66000及29500两种蛋白成分,与幽门螺杆菌两种亚基的大小安全相同。以此纯化尿素酶为抗原用于ELISA检测临床确诊的幽门螺杆菌感染者血清12全水感染幽门螺杆者血清18例,其ELISA阳性及 相似文献
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本研究的目的是以昆虫杆病毒为感染为载体表达EB病毒壳蛋白的主要多肽gp125,用间接免疫荧光和免疫的印迹技术证明表达产物的特异性,表达产物位于感染细胞的胞闪内,分子量约100kD,用免疫Dot法检查感染细胞裂解物中存在特异性表达产物的量,重组病毒裂解产物免疫小鼠后,能产生与VCA反应的抗体,重组病毒感染的细胞为靶细胞,与B95-8细胞片平行检查人血清中VC/IgG和VCA/IgA抗体,确定表达产物 相似文献