茶叶中咖啡碱的快速测定法

咖啡碱是茶叶中主要成分之一,测定方法较多,但各有不足之处。我们通过反复比较、试验,提出一种简便快速的氧化镁浸提-紫外分光光度法,现将测定方法介绍如下: (1)咖啡碱标准液:无水咖啡碱(卫生部药检所),熔点237℃,配制成20微克/毫升水液,在岛津LLV-200型双光束分光光度计上测定273nm处吸收值—A_0。 (2)茶叶中咖啡碱测定:茶叶0.5000克(过20目)加入氧化镁(分析纯)5克,蒸馏水40毫升,搅匀;     

酚-次氯酸钠显色法测定大鼠脑中游离氨-N含量

本文介绍一种用酚-次氯酸钠试剂直接测定动物组织样品中游离氨-N含量的方法,此法简便、灵敏、省时,最小检测量为0.05微克氨-N。酚-亚硝基铁氰化钠试剂:取酚0.6克、亚硝基铁氰化钠5毫克、加水至50毫升,放置24—48小时后使用。次氯酸钠试剂:Na_2HPO_4·12H_2O 1.79克、Na_3PO_4·12H_2O 1.9克、氢氧化钠0.5克、次氯酸钠原液1毫升,加水至50毫升,贮于棕色瓶内。硫酸铵标准液(1毫升=0.05     

金针菇的人工栽培

金针菇((Collybia velutipes)又名冬菇、构菌、朴蕈等。属伞菌目、口蘑科。口味鲜美,营养丰富,特别是人体所必需的赖氨酸和精氨酸的含量比其它食用菌高数倍。另外,它还有抑癌和抗癌的作用。 (一) 培养基和培养料的配制 1.马铃薯培养基:去皮马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂20克,加水至1000毫升。 2.棉籽壳培养料:棉籽壳88％,麸皮10％,葡萄糖     

对弹性组织的选择性染色 (俄西印——新复红法)

1)切片脱蜡,入100%酒精.2)以俄西印——新复红(orcinol-new fuchsin)液于37℃染15分钟。染液配法为:新复红(new fuchsin)(C.I.,No.678)2克俄西印(orcinol)4克蒸馏水 200毫升上液煮佛5分钟,加37.2%三氯化铁溶液(ferricchloride)25毫升,再煮5分钟,待凉,过滤,其沉淀收集于滤约上,并须洗净晾干,将沉淀溶于95%酒精100     

在组织切片中肥大细胞的证明及迅速记数的简单方法

肥大细胞的选择性染色法如下:1)薄片新鲜组织(3—5毫米厚)于下液固定18—24小时,但标本置于此液至少一周尚无显明害处。配法:福尔马林液10毫升;95%酒精90毫升;醋酸钙1克。2)组织以95%酒精洗2次,每次1小时。3)以常法制做石蜡切片(8—12微米厚),粘片,脱蜡,经纯酒精至95%酒精。4)在室温于下液内染1小时。配法:甲苯胺蓝(toluidine blue)0.25克;70%酒精100毫升;浓盐酸     

毛发制备胱氨酸

<正> (一)胱氨酸的制备 C.A.Vol.5,97,1911(J.Biol.Chem.,8,9～10)在园底烧瓶内装入50～500克毛发,按每100克毛发加入200毫升浓盐酸,瓶颈上插一支冷凝管。加热煮沸到双缩脲反应为负,一般约3～5小时。趁热加入过量的醋酸钠,刚果红为负,室温静置几小时,集滤沉淀,冷水洗涤,沉淀溶解在3～5%HCl 中,活性炭脱色,煮沸过滤液,慢慢加入浓醋酸钠,析出沉淀。     

饲养草蛉的几种饲料

1.发面饲料 做馒头的发酵面头充分发透,以粘手为度,摊开、吹干,研细过筛。配方为: 发面干粉35克; 蜂蜜20毫升(或糖10克,蜂蜜10毫升); 水80毫升。 饲养中华草蛉成虫,产卵前期为3天,每雌平均产卵672—831粒,成虫寿命最长可达2个月。饲养叶色草蛉,大草蛉效果不理想。 2.酵母片饲料 配方:酵母片(医用)……25克;糖……10克;蜂蜜……10毫升;水……100毫升。 饲养中华草蛉成虫,在27℃恒温下,产卵前期4—     

介绍一种培养衣藻的新方法

最近,我用琼脂培养基培养衣藻效果很好,其配方如下:硝酸钾1克、氯化钾0.25克、硫酸镁0.25克、磷酸氢二钾0.25克、1％的硫酸亚铁0.2毫升、水1000毫升。以上各盐类溶于1000毫升水中,再加10克琼脂,加热溶解后,倒入试管中(占1/4)高压(1.5kg/cm)灭菌40分钟,取出摆成斜面,自然冷却后在无菌条件下,用接种环将衣藻接种在斜     

用印片法制青霉和曲霉的永久封片

(一)材料和方法 1.菌种:青霉(Penicillium chrysogenum),黑曲霉(Aspergillus niger) 2.培养:将青霉和黑曲霉斜面制成悬液,吸0.1ml于马铃薯培养基(马铃薯200克,蔗糖20克,琼脂粉11克,水1000毫升,15磅/吋~2灭菌30分钟)平板上涂布,于28℃培养2天。 3.制片:取两块干净载玻片,在其中一块上涂一层薄胶层(胶为光学树脂),然后用解剖针在青霉或曲霉平板上挖一小块带菌琼脂(约0.5厘米~2),将琼脂块放在薄胶层上(培养面朝下),用另一块载玻片在琼脂块上轻轻按压,然后将琼脂块小心弃去。将印有菌迹的载玻片     

“遗传学和进化”实验

实验4 单基因杂种杂交 (一)实验器材 1 培养管的真实遗传野生型雄果蝇;1培养管的残翅处女雌;2培养管的培养基(每管贴有一空白标签);孵化箱(调至25℃);其它器材见实验3。注释: 下列配料可为100个培养管提供足够的培养基:120克玉米粉;20克琼脂;20克黄糖;80克红糖;20克酵母;3克尼巴精(nipagin,一种霉菌抑制剂),1升凉水。配制时用约20毫升凉水,使玉米粉呈糊状。把琼脂放入剩余的凉水中加文火。逐渐加入糊状玉米、黄糖和红糖,充分搅拌混合液。沸     

应用~3H-胸腺嘧啶核苷测定血淋巴细胞转化的方法

本文介绍了应用微量血液测定DNA合成的方法:0.1毫升肝素抗凝血液灌入3毫升含PHA的Fagle’s生长培养液中,培养54小时后注入~3H-TdR 0.6微居里,再培养16小时,吸弃上清液,沉淀用生理盐水洗涤两次,5％三氯醋酸洗一次。然后沉淀加0.5毫升5％三氯醋酸置90℃水浴15分钟,离心后吸取上清液0.2毫升加到5毫升闪烁液中进行测量。闪烁液配方:PPO 3克,POPOP 0.4萘克、110克、二氧六环1000毫升。10例健康人血平均~3H-TdR掺入率为10.8％。     

实验8 质粒DNA的提取

一、氯化铯超速离心提取法 1.在LB培养基(10克蛋白胨,5克酵母膏,10克氯化钠,15克琼脂粉,溶解于水后,用1N NaOH调节pH至中性,加水至1,000毫升,高压蒸汽灭菌)上划线接种含有待抽提的质粒的细菌。37℃培养过夜。如果质粒上带有抗性基因,则在培养基内加入相应的抗菌素,例如20微克氨苄青霉素/毫升,12.5—15微克四环素/毫升。 2.挑出单菌落接种在10毫升LB培养液(除不加琼脂粉外,成份与LB培养液相同)中,37℃培养过夜。     

蝴蝶兰花梗腋芽的离体培养

植物名称:蝴蝶兰(Phalanopsis hyorid) 材料类别:花梗腋芽及花序顶端。培养条件:蝴蝶兰开花约一个月后,剪取其花梗顶端及各个花梗腋芽,用漂粉精溶液分两级消毒后,切成2—3厘米长的切段(每段带一胶芽),基部向下插于培养基上。诱导花梗腋芽启动的培养基(A): Hyponex(7—6—9)3克蔗糖 35克胰蛋白胨 2克琼脂 15克水 1000毫升 PH=5.0     

青霉素酰化酶产生菌的筛选和大肠杆菌AS 1.76产酶条件的研究

为筛选较优的产青霉素酰化酶的菌种,我们从9个属的232株纽菌中选出了19株产青霉素酰化酶的大肠杆菌,其中,AS 1．76和E 110为最好。还对大肠杆菌AS 1.76的产酶条件进行了研究。结果表明,最适的培养基成分是(％)：蛋白胨l,苯乙酸0．2,玉米浆0．3,氯化钠0．5;在250毫升的三角瓶中装30毫升培养基时,通气量正合适：培养基的初始pH以7.0为佳;培养时间15小时。在未加玉米浆的培养基中,少量的Fe2+(5馓克／毫升)对酶形成有刺激作用,过量的Fe2+(大于10教克／毫升)是不利的;在培养基中添加0．3％的玉米浆能降低Fe2+对酶形成毒害作用。     

去氧核醣核酸,多醣类,蛋白质的三色染色

甲)材料及固定:哺乳类、两栖组织,包括甲状腺、肾、小肠、胃、睾丸;昆虫的精巢,肌组织;及数种植物组知,固定于 Carnoy 氏液,福尔马林液,Helly 氏液,或 Smith 氏液皆可。乙)试剂试剂 T:天青 A-schiff 液——溶0.5克天青 A(azureA)于100毫升漂白液内(见下)可保持数周,用前加100%偏亚硫酸氢钾(K-me(?)abisulfite)数滴。试剂Ⅱ:漂白液——1N盐酸5毫升;10%偏亚硫酸氢钾或钠5毫升;蒸馏水90毫升;新鲜制备。试剂Ⅲ:高碘酸液(periodic acid solu)——高碘酸0.8克;蒸馏水90毫升;0.2M醋酸钠10毫升;新鲜配制。试剂Ⅳ:硷性复红 schiff 液——根据 Stowell 氏法(1945)配制,溶液置冰箱内可保持数月。     

草履虫的纤毛染色方法

(一)杀死固定 1.固定液配制酒精95％5毫升,苦味酸(饱和液)15毫升,冰醋酸20毫升,甲醛60毫升,蒸馏水100毫升。将上面四种药物混合后,再加等量的蒸馏水稀释,即成200毫升的固定液。如要少配或多配,可依次按1∶3∶4∶12∶20的比例进行。此固定液可长期保存,效果不变,也适应其他原生动物和动物组织的固定。 2.固定的方法用吸管吸取培养草履虫的烧杯边缘的培养液,可得到高浓度的草履虫,投入离心管中,然后以9∶1的比例加入固定液(即草履虫培养液9份,固定液1     

标本采集、实验观察材料准备工作月历(8月)

┌──┬─────────────────────┬──┬──┬─────┬───┬────────┐│准备│工作内容和方法 │所需│使用│用途 │使用 │备注 ││时间│ │时间│时间│ │方法 │ │├──┼─────────────────────┼──┼──┼─────┼───┼────────┤│/又 │ 1.雨后在林间采到花褚伞(狗尿台),浸在固 │ │月 │认识几种 │课后 │供明年观察用 ││月 │定液固定(福尔马林4毫升、翻酸3克、水 │ │下 │食用与有 │观察 │ ││上 │400毫升),然后放在保存液中(12一1…     

松树某些外生菌根真菌对防治油松幼苗猝倒病的作用

从油松根部分离到的外生菌根真菌:牛肝菌之一种(Boletus sp.)和厚环粘盖牛肝菌(Suillus grevillei)除对油松(Pinus tabulaeformis)幼苗猝倒病有防治作用外,还能促进幼苗生长,其显著性水平P=0.01。引起油松幼苗猝倒病的病原菌主要是立枯丝核菌(Rhizoctonia solant)和尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。在盆栽接种试验中,用牛肝菌和厚环粘盖牛肝菌接种,油松幼苗发病率比对照降低21.0—36％;在田间接种试验中,松苗发病率比对照降低16.3—25.8％。用扫描电镜对接了种的油松幼苗进行观察,发现在油松营养根表面形成密集的菌丝套,而根尖则没有。用石腊切片观察到围绕在菌根皮层细胞周围的哈蒂氏网。采用500毫升的广口瓶,盛入草炭150克、细砂50克、玉米粉9克、红糖1克、麦芽汁(1.03波美)300毫升的配方,接种牛肝菌菌丝体,置30℃,10天左右产生山蘑菇子实体。     

纸层析法测定庆丰霉素

我们通过试验,找到了一种测定庆丰霉素的纸层析法,此法简易、快速、较准确。现介绍如下。一、试剂层析溶剂:正丁醇:冰乙酸:蒸馏水=2.8:1:1。显色剂:0.3克茚三酮,5毫升吡啶用95%的乙醇定容为100毫升配成。春雷霉素溶液(作定量标准用):贮备液为2毫克/毫升,用时以蒸馏水稀释为500微克/毫升。贮备液可在冰箱中保存三个月。     

15种獐牙菜属植物中主要药用成分的高效液相色谱测定

对青藏高原和云贵高原的15种獐牙菜属植物进行了3种苦味苷,即獐牙菜苦苷(swertiamarin)、龙胆苦苷(gentiopicroside)、苦龙苷(amarogentin)、一种黄酮苷-当药黄素(swertisin)、及5种口山酮苷-芒果苷(mangiferin)、当药醇苷(swertianolin)、7-O-[a-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃木糖]-1,8-二羟基-3-甲氧基口山酮(7-O-[a-L-rhamnopyranosyl-(1-2)-β-D-xylopyranosyl]-1,8-dihydroxy-3-methoxyxanthone)、7-O-β-D-吡喃木糖-1,8-二羟基-3-甲氧基口山酮(7-O-β-D-xylopyranosyl-1,8-dihydroxy-3-methoxyxanthone)、3-O-β-D-吡喃葡萄糖-1,8-二羟基-5-甲氧基口山酮(3-O-β-D-glucopyranosyl-1,8-dihydroxy-5-methoxyxanth-one)等9种主要药效成分同时进行了高效液相色谱的含量测定(Kromasil C18柱,甲醇一水梯度洗脱,二级管阵列检测);并对其主要药效成分的分布进行了比较。