环糊精葡萄糖基转移酶的性质、应用与固定化研究进展

本文总结了环糊精葡萄糖基转移酶的性质、应用与固定化研究的进展情况,引用文献４７篇。     

β-环糊精葡基转移酶的纯化方法及酶学性质的研究

β-环糊精葡基转移酶的粗酶液应用酚酞分光光度法测得该酶的环化活性为11.79U/mL。该粗酶液先经过淀粉-酒精沉淀或淀粉-硫酸铵沉淀初步纯化,然后经Sephacryl S-100凝胶层析后,比活力分别提高了16、21、50倍,由原来的11.44U/mg蛋白质增加到572.67U/mg蛋白质,回收率分别为72.4%、66.4%、40.9%,经SDS-PAGE电泳显示为单一的蛋白带,酶的分子量约为70kDa。酶学性质研究表明该酶的最适pH和最适温度分别为6.0和60℃,在pH6.0~10.0范围内,55℃以下保温30min基本保持稳定。纯化后的β-环糊精葡基转移酶的环化活性每克相当于35727U。     

表达环糊精葡基转移酶基因的重组大肠杆菌发酵条件的研究

表达β-环糊精葡萄糖基转移酶的工程菌E.coli BL21(DE3)在含有不同浓度葡萄糖的LB培养基中进行发酵时,0.2%的葡萄糖浓度使酶活提高2.7倍,0.75%的乳糖诱导时的表达量与1mmol/LIPTG诱导时相当。选择卡那霉素、乳糖、Triton-X、甘氨酸的终浓度这四个因素,分别考察三个水平,由L9正交试验确定影响发酵酶活各因素的最佳浓度,即卡那霉素10μg/mL、乳糖0.75%、Triton-X0.5%、甘氨酸1.0%。     

魔芋葡甘露聚糖新载体制备和对葡萄糖淀粉酶的固定化

把魔芋葡甘露聚糖(KGM)制备成强度高稳定性好的不溶性载体,通过钛活化固定化葡萄糖淀粉酶,检验固定化效果。偶联酶蛋白量通常是30～40mg/g载体,固定化酶的活性保持在50％以上,并且结合过酶的载体可以反复再生固定化酶。将自由酶和固定化酶进行比较,最适pH从4.0变到4.0～4.4,最适温度从50变成50～55℃,K_m从0.16％变为0.28％淀粉液。在45℃连续柱式运转反应,DE值平均98.62％,半衰期151天。结果表明本报道的主要优点是成本低廉、效果显著、操作简单和安全无毒。     

果糖基转移酶及其固定化研究进展

果糖基转移酶能够催化蔗糖水解并通过转果糖基作用产生低聚果糖。本文综述了十几年来国内外对果糖基转移酶及其固定化研究的若干结果和进展。对该领域的发展趋势作了扼要的展望。     

α-环状糊精葡萄糖基转移酶的固定化及其性质研究

研究了一种α-环糊精葡萄糖基转移酶的固定化和固定化酶的性质。通过对戊二醛浓度、酶量和交联时间各单因素的考察,确定了最佳的固定化条件。与游离酶相比,以DEAE纤维素为载体的固定化酶最适pH向酸性偏移,最适温度不变,pH稳定性和热稳定性都有所提高。在40℃、150r/min下反应3h,转化率可以达到32%。固定化酶可以连续使用4次以上。固定化酶在4℃、5mmol/L CaCl2溶液里保存18d,还剩余80%以上的活力。     

来源嗜碱性芽孢杆菌N-227β-环糊精葡基转移酶基因分析及在大肠杆菌中的诱导表达

很多细菌可以产生环糊精葡基转移酶,对来源于嗜碱性芽孢杆菌N-227菌株染色体上一段编码β-环糊精葡基转移酶基因、包含有自己的启动子且能够直接在大肠杆菌中表达的DNA序列进行测序分析,该片断DNA包含有4114bp,从745位点到2883位点包含2139个碱基,为一个推定的编码713个氨基酸的蛋白质阅读框,和来源于Bacillus circulansA11的β-环糊精葡基转移酶氨基酸完全一致;具有环糊精葡基转移酶典型的五个结构域A-E,在A-B结构域中包含有七个属于α-淀粉酶家族的保守区域(I-VII)。对该酶基因进行PCR并克隆到表达载体pET28b上,利用乳糖进行诱导表达,获得了高效表达,环化活性为11.75mg/min/mL。这对于β-环糊精葡基转移酶的应用和降低成本具有重要的价值。     

魔芋葡甘聚糖在固定化领域里的应用

魔芋葡甘聚糖是天然中性多糖,具有良好的成膜、增稠、共混、定型、凝胶和生物相容性等性能,在农业、环境、医药卫生、生物等领域有广泛的应用。鉴于KGM的上述特性以及如今对环保型材料的热点研究,文章总结了KGM作为固定化材料在固定化领域里的应用。另外,就固定化载体的特点及较常见的载体材料、KGM的物理、化学的改性方法等作了简述。近年来,众多研究者已经在载体不溶性的处理、活化、改性、制备KGM微胶囊方面作了许多研究,今后可以注重发掘KGM在精细化工、生物材料等方面的突破点,扩大KGM的应用范围。     

环糊精葡萄糖基转移酶的结构特征与催化机理

随着环糊精在食品、医药等领域的应用越来越广,生产环糊精所必需的环糊精葡萄糖基转移酶(CGT酶)已经成为当今研究的热点。特别是近二十年来,国外对该酶进行了比较深入的研究。首先介绍了CGT酶的功能特性与结构特征。CGT酶是一种多功能型酶,能催化三种转糖基反应(歧化、环化和耦合反应)和水解反应,其中,能将淀粉转化为环糊精的环化反应是特征反应;作为α-淀粉酶家族的成员,CGT酶除了具有与α-淀粉酶相同的A、B、C结构域外,还存在D和E结构域。另外,对CGT酶的催化机理包括底物结合方式、转糖苷反应机理以及环化机理等进行了详细的讨论。     

重组β-环糊精葡萄糖基转移酶生产偶合糖的工艺优化

偶合糖为一种可代替蔗糖的新型甜味剂,因其具有着色性能良好、保水性能优良、抗龋齿等优点,在食品、医药等领域具有良好的应用前景.本研究旨在找到廉价且易获得的供受体,并利用环状芽孢杆菌Bacilluscirculans 251来源的环糊精转移酶(β-CGTase)生产偶合糖,并优化确定制备偶合糖工艺.以蔗糖为受体,分别从加酶...     

魔芋葡甘露聚糖定量分析

用0.1M甲酸缓冲液(pH3.0-3.2)溶胀魔芋粉,在4000转/分离心分离提取魔芋葡甘露聚糖(KGM)溶液,通过比色测定以上溶液中的游离糖和用2N硫酸水解KGM提取液后的总糖,计算出KGM含量。此法不需要純化KGM,且重现性好,准确度高,因此本法简单、准确,很适用于不同等级魔芋粉中的KGM定量分析。     

魔芋葡甘聚糖磷酸酯化反应的研究(Ⅰ)

本文旨在研究干法条件下魔芋葡甘聚糖磷酸化反应,反应温度、时间、pH和磷酸盐用量对酯化反应以及酯化产物粘度的影响.利用红外光谱、X-射线衍射、扫描电镜及旋转粘度计等分析测试手段,探讨酯化产物的结构和性能之间的关系.     

魔芋葡甘露聚糖化学结构及改性研究进展

本文综述了魔芋葡甘露聚糖的理化性质、化学结构及改性的研究进展     

双线雀天蛾生物学及其对磨芋为害的观察研究

首次报道双线雀天蛾是磨芋的主要害虫之一。其幼虫取食叶片,对磨芋造成严重危害,在皖南一年发生二代,危害二次。幼虫期五龄,预蛹期１─１．５天。试验表明,９０％敌百虫１０００─１５００倍液或８０％敌敌畏乳剂２０００倍液对幼虫有较好的防治作用。     

魔芋葡甘露聚糖-丙烯腈接枝共聚反应的研究

本研究以硝酸铈铵作为引发剂,探讨反应时间、反应温度、引发剂浓度和单体用量对魔芋葡甘露聚糖-丙烯腈接枝共聚反应的影响;并利用扫描电镜等分析技术对接枝共聚物结构与性能的关系作了初步探。结果表明,接枝共聚物的粘度比反应前提高了2—4倍;溶胶的相对稳定性提高了近4倍;接枝共聚物成膜更为均匀、细密;且气泡明显减少。     

光合细菌产氢条件的研究

从被有机物污染的土壤及水域中分离得到13株属于红螺菌科的光合细菌,对其在苹果酸、乳酸、葡萄糖、乙酸、丙酸及丁酸中的光致产氢现象进行了研究。最高产氢量为39.8ml·20ml菌液~(-1)·48h~(-1),产氢活性为7.8ml·g生物量~(-1)·h~(-1)”。底物对不同菌株的产氢量与产氢活性均具有影响,pH对产氢过程也有明显的作用,大于6000lx的光强度对提高产氢活性已无明显作用。固定化细胞在静态培养条件下也能提高产氢能力,但延长产氢时间的作用不明显。     

Effect of organic solvents on enzymatic production of cyclodextrins from unliquefied corn starch in an attrition bioreactor

Cyclodextrins were produced from unliquefied corn starch in the presence of water-miscible organic solvents using cyclodextrin glycosyltransferase (CGTase) in an attrition bioreactor. The production yield was singnificatly increased by isopropanol and tertiary butanol, and maximum enhancement was observed to be about 40% by 5% tertiary butnol. Increase in the production of cyclodextrins by organic solvents seems to be due to the fact that organic solvents decreased the product inhibition of CGTase by forming an inclusion complex with cyclodextrins.     

药用植物磨芋的考证

磨芋是具有悠久栽培历史的食用、药用植物,有多个名称。经考证,首载于《名医别录》的由跋,是现今广泛载种的磨芋(A.Konjac),后来的许多本草著作把磨芋的一、二年生苗称为由跋;首载于《开宝衣草》的蒟蒻或蒻头,是指磨芋和疏毛磨芋(A Sinensis),但一般说来,蒟蒻就是磨芋(A.Konjac).“磨芋”这个词最早见于《植物名实图考》,吴其濬置之于“天南星”条下,后人以“魔芋”取代了“磨芋”;磨芋的学名是AmorphophalltlS konjac C.Koch,而Amorphophallus rivieri Durieu是它的同物异名。