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一种提取银杏中DNA的方法 总被引:19,自引:1,他引:19
对改进的SDS和CrAB两种提取DNA的方法进行了比较试验,通过DNA浓度和纯度测定及琼脂糖凝胶电泳检测,结果显示,用改进的SDS法可从银杏幼叶和愈伤组织中获得DNA,其浓度分别为0.867μg·μ 相似文献
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一种提取野生苎麻总DNA的方法 总被引:9,自引:0,他引:9
用CTAB法提取野生苎麻总DNA ,结合野生苎麻中酚类、黄酮类等次生代谢物质多的特点 ,加入一定浓度的PVP、β—巯基乙醇 ,可以获得高分子量DNA ,经实验鉴定 ,其纯度符合分子遗传实验要求。 相似文献
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花生DNA提取方法比较 总被引:10,自引:1,他引:9
目的:旨在筛选优化花生DNA提取方法。方法:采用SDS法、改进SDS法;CTAB法、改进CTAB法四种方法对花生叶DNA进行提取,并从电泳结果、纯度、得率、等方面对其进行比较研究,从而确定花生DNA提取适用流程;结果:CTAB法DNA平均得率为55.0μg/g.Fw,略小于SDS的60.3,但其A260/A280平均值为1.81,比SDS的1.55更接近标准要求。结论:综合考虑CTAB法是提取花生DNA的最佳方法,可提取到较高质量的DNA,符合分子检测要求;虽然改良CTAB法也相对好于SDS法,但由于步骤增加反而加剧DNA降解。 相似文献
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本研究采用改良SDS法、常规CTAB法和改良CTAB法(1.5×CTAB,2×CTAB,3×CTAB)提取大青杨基因组DNA,并用紫外光普分析、凝胶电泳、限制性内切酶消化和RAPD方法进行鉴定.结果表明:5种方法中,改良SDS法DNA提取率最高,但CTAB法比改良SDS法提取获得的DNA纯度高,OD260/OD280为1.73~1.81.与常规CTAB法比较,改良SDS法和改良CTAB法能有效去除蛋白、多糖、酚类及次生代谢物质.综合分析确定改良2×CTAB法为大青杨基因组DNA的最佳提取方法. 相似文献
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元宝枫叶片总DNA提取方法的优化 总被引:3,自引:0,他引:3
由于元宝枫叶片细胞含有大量的多糖、单宁、色素和酚类物质,严重影响基因组DNA的提取,在提取元宝枫叶片总DNA的过程中,对常用的CTAB法进行了大胆的革新.结果表明,采用细胞核裂解前加入不溶性聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和将加入RNase A消化RNA的步骤改在最后进行等技术,可以从元宝枫叶片快速提取高质量DNA,该研究为从富含多糖、单宁、色素和酚类物质的植物中提取基因组DNA,提供了可行的分析方法. 相似文献
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胡椒叶片基因组DNA提取方法比较 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:研究建立胡椒叶片中提取高质量DNA的方法。方法:采用各种CTAB法和SDS法的改良方法,提取胡椒叶片中的总DNA,并对DNA进行紫外和电泳检测。结果:改良CTAB法4和5提取的DNA经电泳检测,有一条明亮主带,且无拖尾现象,样品槽无荧光出现,说明抽出的DNA纯度较高,一致性好;测定其OD260和OD280值,并计算其比值,OD260/OD280值在1.8-2.0之间,提取率在51.667-60.000μg/g之间,获得的基因组DNA质量高。结论:改良CTAB法4和法5可从胡椒幼叶中提取高质量DNA。 相似文献
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提取得到高质量的DNA样品是进行分子生物学研究的必要前提。为了找到一种适用于提取涡虫基因组DNA的常规方法,我们以东亚三角头涡虫为材料,分别用改良的CTAB法、SDS法、SDS-蛋白酶K法对涡虫的基因组DNA进行了制备,并对3种方法制备的涡虫基因组DNA进行了检测与比较。根据比较结果,我们认为改良的CTAB法最适合于涡虫基因组DNA的快速制备,为涡虫的分子生物学研究打下了基础。 相似文献
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目的:探讨适用于微生物多样性研究的棉田土壤微生物总DNA提取方法。方法:采用4种方法提取不同连作和轮作处理的棉田土壤微生物总DNA,比较其纯度、产率、片段大小,并应用ARDRA技术验证其质量。结果:其中3种方法均可获得23kb的DNA片段,但不同方法提取的DNA的产率和纯度上有明显差异。改良CTAB-SDS法提取的DNA完整性好,得率为24.20μg.g-1干土,纯化后A260/A280和A260/A230为分别为1.80和1.70,纯化回收率可达70.1%,完全适用于后续的PCR分析。结论:采用该法提取棉田土壤总DNA简便而高效。对该法提取获得的棉田土壤微生物总DNA进行ARDRA和DGGE分析,所得图谱能较全面地反映不同处理间微生物多样性及群落结构的差别,为不同栽培体系下棉田土壤微生物的分子生态学研究提供了基础。 相似文献
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CTAB结合DNA凝胶回收试剂盒提取食用菌DNA 总被引:4,自引:1,他引:3
目的:为探索从食用菌子实体中快速分离和纯化DNA的方法.方法:以三种栽培的食用菌为材料,采用CTAB结合DNA凝胶回收试剂盒进行基因组DNA的分离和纯化.结果:与对照相比,结合法提取DNA样品的电泳条带更规则、清晰,并且DNA的酶切效率显著高于对照.结论:该结合法是一种快捷、高效提取纯化食用菌子实体DNA的方法. 相似文献
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苎麻总DNA提取的CTAB法优化方案 总被引:17,自引:0,他引:17
根据苎麻组织自身含有较多的本分类,粘状物及黄酮类等次生代谢物质的特点,对CTAB法进行优化后用于提取苎麻组织总DNA。在研磨过程中加入抗氧化剂PVP,提取缓冲液加入终浓度6%的PVP和4%的β-巯基乙醇,可防止整个提取过程中溶液变褐;在第2次用氯仿/异戊醇抽提时,加入10%的CTAB和4%的NaCl高盐溶液,以除去多糖。经几种改良方案提取总DNA的ISSR-PCR扩增结果验证,以同时加入抗氧化剂和高盐溶液的CTAB-4法效果最好。 相似文献
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抽提大豆各组织总DNA方法的比较研究 总被引:2,自引:0,他引:2
抽提大豆各组织总DNA方法的比较研究忻骅袁卫明顾其敏(上海复旦大学生物化学系,上海200433)十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)选择性沉淀DNA的方法被广泛用于抽提生物组织,特别是植物组织的总DNA,它简便快速,所得DNA的纯度好,适用于进一步的酶切... 相似文献
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目的:研究提取不同时期小麦网腥黑粉菌冬孢子总DNA的最佳方法。方法:应用改良过的四种方法(CTAB法、SDS-CTAB法、SDS法和尿素法)对小麦网腥黑粉菌冬孢子总DNA进行提取。结果:提取当年小麦网腥黑粉菌冬孢子DNA,纯度(OD260/OD280):CTAB法〉SDS-CTAB法〉SDS法〉尿素法=1.876〉1.7815〉1.7789〉1.6095;产率(μg/g):SDS-CTAB法〉SDS法〉尿素法〉CTAB法=796.25〉664〉306〉291.5。提取15年的小麦网腥黑粉菌冬孢子DNA,纯度(OD260/OD280):CTAB法〉SDS-CTAB法〉SDS法〉尿素法=1.91795〉1.8876〉1.65985〉1.55925;产率(μg/g):尿素法〉CTAB法〉SDS法〉SDS-CTAB法=1529.25〉799〉687.25〉372.5。结论:SDS-CTAB法是提取当年小麦网腥黑粉菌冬孢子DNA的最佳方法。CTAB法是提取15年的小麦网腥黑粉菌冬孢子DNA的最佳方法。 相似文献