饲料中添加抗菌肽Surfactin对吉富罗非鱼肠道健康的影响

为研究饲料中添加抗菌肽Surfactin对吉富罗非鱼(GIFT, Oreochromis niloticus)肠道健康指标的影响, 实验将平均体重为(12.010.03) g/尾的320尾吉富罗非鱼, 随机分为4组, 每组4个重复, 每个重复20尾鱼, 分别投喂抗菌肽Surfactin添加水平为0(对照组)、50、100和200 mg/kg的试验饲料7周。结果显示: 与对照组相比, 吉富罗非鱼饲料中添加抗菌肽Surfactin可使肠道皱襞高度显著增加(P0.05), 肌层厚度无显著变化(P0.05); 大肠杆菌数量显著降低(P0.05), 乳酸杆菌数量显著增加(P0.05), 细菌总数无显著变化(P0.05); 显著提高肠道总抗氧化能力水平、谷胱甘肽过氧化物酶活性和超氧化物歧化酶活性(200 mg/kg抗菌肽添加组除外)(P0.05), 显著降低肠道丙二醛水平(P0.05), 对过氧化氢酶活性无显著影响(P0.05); 吉富罗非鱼肠道健康指标以50 mg/kg抗菌肽Surfactin添加组最佳。试验表明, 吉富罗非鱼饲料中适量添加抗菌肽Surfactin可增加肠道皱襞高度、调节肠道菌群和提高肠道抗氧化能力而改善肠道健康状态。     

青鱼不同组织中同工酶的表达模式

采用聚丙烯酰胺垂直板状连续电泳的方法对青鱼（Mylopharyngodonpiceus）的脑、晶体、心脏、肾脏、肝脏、肌肉等六种组织进行了十种同工酶（α－AMY、EST、GOT、C6PDH、TDH、LDHMDH、ME、POX、SOD）的电泳研究,并对各种酶的同工酶位点表达及酶谱表型进行了分析。结果表明α－AMY、EST、TDH、LDH、MDH、ME、POX、SOD、C6PDH存在不同程度的组织特异性,COT无明显组织差异．并对同工酶的组织分布特异性的生理意义进行了讨论。     

吉富罗非鱼雌雄群体遗传差异的SSR分析

为探讨吉富罗非鱼(genetic improvement of farmed tilapia,GIFT)雌、雄群体间的遗传差异,本研究对国家级广西南宁罗非鱼良种场雌、雄吉富罗非鱼进行了遗传差异分析。研究结果表明,选取的11对SSR引物中有10对能获得稳定的目的条带;每个SSR基因座的等位基因数在2～4个之间,雌性罗非鱼的平均等位基因(Na)2.9个,稍高于雄性的2.8个;雌、雄吉富罗非鱼平均观察杂合度(HO)分别为0.4183和0.4154,多态信息含量(PIC)分别为0.4048和0.3932,属中度多态;雌雄个体间的遗传距离和相似性指数分别为0.0908和0.9132。此外,SSR基因座PRL-SO2在雄鱼中偏离Hardy Weinberg平衡(P0.005)。上述结果表明,吉富罗非鱼雌、雄群体的SSR多态性基本相同,推测这两者基因组间的差异较小。     

中国石龙子不同组织三种同工酶的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,研究了分布在广东韶关地区的中国石龙子（Eumeces chinensis）的肝脏、肌肉、心脏、脑、生殖腺5种组织的酯酶（EST）、淀粉酶（AMY）和过氧化氢酶（CAT）3种同工酶,旨在为华南地区中国石龙子的系统分类提供理论依据,结果表明不同的同工酶存在组织特异性,并且分布特征与其生理功能有一定关系.     

吉富罗非鱼leptin基因的克隆及其表达

Leptin为肥胖基因编码产物,是脂肪细胞分泌的蛋白质类激素,在能量平衡、摄食行为调节方面起着重要作用。采用RT-PCR法分离出了吉富罗非鱼(Oreochromis niloticus)leptin基因的部分序列,其cDNA长度为364 bp,编码96个氨基酸。同源性分析显示:鱼类leptin保守性较低。吉富罗非鱼leptin氨基酸序列与斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)的相似性较高,为80.6%,但与虹鳟(Oncorhynchusmykiss)、青鳉(Oryzias latipes)、斑马鱼(Danio rerio)等其他鱼的相似性非常低,均在40%以下。使用realtime PCR法检测leptin在各种组织中的表达量,结果发现,leptin在肝中相对表达量最为丰富,是肌肉中相对表达量的3 000倍,其次为性腺和脑,分别是肌肉中相对表达量的1 250倍和450倍,而肾、肠和肌肉中表达量较少。     

黄颡鱼不同组织中同工酶的表达模式

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)及特异性组织化学染色技术,研究了黄颡鱼成体眼、心脏、肾脏、肝脏、肌肉及尾鳍等6种组织中的4种同工酶(LDH、MDH、SOD、EST)分化表达模式。结果表明,黄颡鱼的同工酶EST、SOD、MDH具有明显的组织特异性,LDH无明显的组织差异,并对同工酶的组织表达特异性的生理意义进行分析和讨论。     

草鱼同工酶发育遗传学研究——Ⅰ.不同组织器官的同工酶分析

采用垂直淀粉凝胶电泳及特异性组织化学染色技术,研究了草鱼成体脑、眼、心、肾、肌、肝等6种组织中的6种同工酶系统(LDH、MDH、GDH、ADH、LDH、EST)的分化表达谱式。结果表明,草鱼的同工酶系统具有明显的组织特异性。与绝大多数硬骨鱼类相比,草鱼的LDH、m-MDH和ADH同工酶具有特殊的表达谱式:m-MDH和ADH均由两个基因座位编码;肾脏在LDH-A_3B与LDH-A_2B_3之间多出1条LDH酶带(LDH-X)。本文还讨论了草鱼同工酶的遗传基础和亚基组成,以及本实验的某些结果与其他作者的结果不相符的原因。     

普通伏翼不同组织3种同工酶的比较

采用聚丙烯酰胺不连续凝胶垂直板活性电泳,分析了普通伏翼的心、肝、肾、胸肌、肺、胃、小肠、舌8种组织的酯酶(EST)、乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)3种同工酶。结果表明:普通伏翼8种组织的3种同工酶存在差异,其分布具有明显的组织特异性,与器官或组织所执行的功能有关。     

吉富罗非鱼AFLP反应体系的建立与优化

本文以我国水产养殖主导品种吉富罗非鱼(farmed tilapia)为研究材料,进行扩增片段长度多态性(AFLP)反应体系的研究,初步建立了一套适合罗非鱼的AFLP反应体系。对体系中关键环节的优化结果如下:基因组DNA要求无降解和RNA污染,OD260/OD280比值在1.8~2.0之间;基因组DNA EcoRⅠ/MseⅠ37℃双酶切6h、20℃连接20h,连接产物10倍稀释,PCR预扩增产物稀释45倍作为选择性扩增的模板,选择性扩增产物经6%变性丙烯酰胺凝胶电泳检测可获得条带清晰、背景干扰小的图像。该体系的构建为今后进行罗非鱼群体遗传多样性分析、种质鉴定、重要经济性状分子标记的开发及遗传连锁图谱构建等方面研究提供了参考。     

金黄地鼠不同组织碱性磷酸酶同工酶研究

采用聚丙烯酰胺圆盘电泳方法,分析了金黄地鼠血清,肝脏,心脏和骨骼肌4种组织的碱性磷酸酶同工酶。结果表明,在同种动物中不同组织的碱性磷酸酶谱具有明显的组织特异性,并且各部门酶带有重叠现象。在不同组织中碱性磷酸酶具有特异性,这是与各组织的生理功能相适应的结果。     

驼背鲈不同组织5种同工酶表达的差异

运用聚丙烯酰胺垂直梯度凝胶电泳法研究了驼背鲈(Cromileptes altivelis)6种组织(肌肉、心脏、肝脏、肾脏、脑、脾脏)中的5种同工酶(酯酶、乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、苹果酸酶、天门冬氨酸氨基转移酶),并对其同工酶位点及其酶谱表型进行了分析。结果表明,驼背鲈的5种同工酶系统具有不同程度的组织特异性。酯酶检测到3条酶带,由3个基因座位编码。乳酸脱氢酶检测到5条酶带,由3个基因座位编码,其中C位点具有组织特异性。苹果酸脱氢酶检测到3条酶带,由1个基因座位编码,6组织均有相同的3条酶带,组织差异性不显著,而且只发现了上清液型,线粒体型的苹果酸脱氢酶没有发现。苹果酸酶有4条酶带,由2个基因座位编码。天门冬氨酸氨基转移酶在6种组织都有发现,只有一条酶带。     

四种园蛛同工酶的比较研究

本文采用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,对叶斑园蛛、角类肥蛛(黑、白2种体色)、大腹园蛛、黑斑园蛛4种园蛛科蜘蛛的酯酶(EST)同工酶、乳酸脱氢酶(LDH)同工酶、超氧化物歧化酶(SOD)同工酶进行了比较研究。结果表明,4种园蛛的EST、LDH具有明显的种族特异性,而SOD在种间基本没有差别。不同种蜘蛛都有各自的EST、LDH同工酶谱型,可以用它们作为识别物种的附加指标。     

盐胁迫下小麦过氧化物酶同工酶、全蛋白变化的研究

以蛋白质含量不同的两种小麦幼苗为材料,研究了经高浓度的盐胁迫后过氧化物酶(POD)同工酶、全蛋白质的变化。结果表明,植物处于高盐环境时,会诱导或抑制某些同工酶的产生,控制蛋白质的增加和降低,以适应盐胁迫下细胞内特殊的代谢反应,从而达到抵抗盐渍侵害的目的。     

龙舌兰麻种质的过氧化物同工酶研究

以23份龙舌兰麻种质的嫩叶为材料,采用聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳,分析它们的过氧化物(POD)同工酶酶谱特征,为杂交育种亲本选择提供依据.结果表明,23份材料显示出3～10条不等的酶带,有22种不同的酶谱类型,说明过氧化物同工酶酶谱可鉴定除'粤西117'和'东292'之外的21份龙舌兰麻种质;Rf为0.37的酶带为所有供试材料的共有谱带.DPS聚类分析结果表明,23份材料根据亲缘关系远近可分为3大类:第一类为包括'金边弧叶龙舌兰'、'弧叶龙舌兰'等在内的9份种质;第二类为包括'多叶普通剑麻'、'南亚2号'等在内的5份种质;第三类为包括'假菠萝麻'、'银边假菠萝麻'等在内的9份种质.     

Simultaneous Single-Sample Determination of NMNAT Isozyme Activities in Mouse Tissues

A novel assay procedure has been developed to allow simultaneous activity discrimination in crude tissue extracts of the three known mammalian nicotinamide mononucleotide adenylyltransferase (NMNAT, EC 2.7.7.1) isozymes. These enzymes catalyse the same key reaction for NAD biosynthesis in different cellular compartments. The present method has been optimized for NMNAT isozymes derived from Mus musculus, a species often used as a model for NAD-biosynthesis-related physiology and disorders, such as peripheral neuropathies. Suitable assay conditions were initially assessed by exploiting the metal-ion dependence of each isozyme recombinantly expressed in bacteria, and further tested after mixing them in vitro. The variable contributions of the three individual isozymes to total NAD synthesis in the complex mixture was calculated by measuring reaction rates under three selected assay conditions, generating three linear simultaneous equations that can be solved by a substitution matrix calculation. Final assay validation was achieved in a tissue extract by comparing the activity and expression levels of individual isozymes, considering their distinctive catalytic efficiencies. Furthermore, considering the key role played by NMNAT activity in preserving axon integrity and physiological function, this assay procedure was applied to both liver and brain extracts from wild-type and Wallerian degeneration slow (Wld^S) mouse. Wld^S is a spontaneous mutation causing overexpression of NMNAT1 as a fusion protein, which protects injured axons through a gain-of-function. The results validate our method as a reliable determination of the contributions of the three isozymes to cellular NAD synthesis in different organelles and tissues, and in mutant animals such as Wld^S.     

Isozyme Patterns of Lactate Dehydrogenase from Tissues of Mink and Arctic Fox during Postnatal Development

Isozymes of lactate dehydrogenase extracted from heart, kidney, and liver of mink (Mustela vison Briss.) and Arctic fox (Alopex lagopus L.) during postnatal development were separated by agarose gel electrophoresis. Tissue-specific isozyme pattern of lactate dehydrogenase can be revealed at the age of one month, while the definitive pattern is formed at the age of four months. The isozyme patterns of lactate dehydrogenase in the studied tissues of mink and Arctic fox share the properties specific for animal species of various ecogenesis.     

五龄家蚕若干组织器官蛋白质数据库构建

为构建家蚕蛋白质数据库,达到从蛋白质水平研究基因的表达及表达产物的加工修饰的目的,采用五龄家蚕休体壁、中肠和脂肪为材料获取蛋白质样品,用蛋白质双向电泳技术分离、纯化蛋白质,对其中的40个蛋白质斑点进行了氨基酸序列分析及同源性检索,发现其中58.5％的蛋白质与果蝇的有关蛋白质具有较高同源性,36.5％与其他生物的蛋白质具有较高同源性,只有5％与家蚕已知蛋白拷贝产高同源性,研究发现有27个蛋白质的N－末端氨基酸序列在家蚕中是第一次被检测到,并通过互联网向SWISS－PROT数据库进行了登录。研究证明利用蛋白质数据库的结果,可以得到基因表达及其产物修饰的信息。     

抽提大豆各组织总DNA方法的比较研究

 抽提大豆各组织总ＤＮＡ方法的比较研究忻骅袁卫明顾其敏（上海复旦大学生物化学系,上海２００４３３）十六烷基三甲基溴化铵（ＣＴＡＢ）选择性沉淀ＤＮＡ的方法被广泛用于抽提生物组织,特别是植物组织的总ＤＮＡ,它简便快速,所得ＤＮＡ的纯度好,适用于进一步的酶切...     

广西地区罗非鱼外寄生车轮虫的形态分类学及多样性研究

采用活体观察、吉姆萨与干银法染色等技术,运用国际间统一特定方法及齿体定位描述法对采自广西地区的罗非鱼(单性鱼吉富、奥尼系列)的外寄生车轮虫进行详细的形态分类学与多样性研究,研究结果共计获得车轮虫属2种,拟车轮虫属与三分虫属各1种,分别为:刺纹车轮虫Trichodina centrostrigata Basson et al.,1983、异齿车轮虫Trichodina heterodentata Duncan,1977、非洲拟车轮虫Paratrichodina africana Kazubski&El-Tantawy,1986与直齿三分虫Tripartiella orthodens Basson&Van As,1987。其中,非洲拟车轮虫为中国新纪录,刺纹车轮虫和直齿三分虫为中国广西地区新纪录。非洲拟车轮虫表现出寄主和寄生部位的专一性;进一步应用SPSS统计软件对非洲拟车轮虫进行了种群差异性分析。