不同浓度hUCMSCs对重度烧伤大鼠急性肺损伤的保护作用初探

目的:通过气管内给药的方法比较不同浓度人脐带间充质干细胞气管内移植对重度烧伤致急性肺损伤大鼠的保护作用。方法:建立50%面积全层烫伤大鼠模型,将75只成熟雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组)、生理盐水组(B组)、1×10~5HUCMSCs移植组(C)、5×10~5HUCMSCs移植组(D)、1×10~6HUCMSCs移植组(E),每组15只,B组及移植组(C、D、E组)烫伤后立即液体复苏,B组烫伤后气管内滴注0.2 m L生理盐水,移植组气管内滴注不同浓度h UCMSCs,分别在移植后的天第1、3、7天留取大鼠肺组织标本,HE染色观察肺组织病理变化,MPO、CD68免疫组化染色观察肺组织中性粒细胞及肺巨噬细胞阳性表达情况。结果:肺组织病理切片可见:A组各时间点肺泡腔清晰,肺泡结构完整,偶见少量炎性细胞。烫伤后第1天,B组及移植组(C、D、E组)肺泡间隔增厚,大量红细胞漏出及炎性细胞浸润。烫伤后第3天,各组肺泡结构较前清晰,炎性细胞浸润及红细胞漏出较第一天减少,与B组相比移植组肺泡结构清晰,间隔变薄,移植组各组间改变不明显。烫伤后第7天,移植组肺组织损伤较B组明显减轻,E组损伤肺组织恢复最为明显。MPO染色显示:与A组相比,阳性细胞数在烫伤后第1天明显增加(P0.05),但各组之间无明显差异。在烫伤后第3天,与B组相比,移植组阳性细胞数减少明显(P0.05),E组阳性细胞减少明显(P0.05);在烫伤后第7天E组阳性细胞数量较其他组显著减少(P0.05)。CD68染色显示在烫伤后第1天各组阳性细胞显著增多(P0.05),在烫伤后第3天移植组阳性细胞数减少(P0.05),但各移植组间无明显差异,烫伤后第7天移植组阳性细胞数量较B组明显减少(P0.05),E组较C、D组阳性细胞减少有显著差异(P0.05)。结论:气管内移植HUCMSCs能修复重度烧伤后损伤的肺组织,减少肺组织中性粒细胞及巨噬细胞的浸润,且1×10~6HUCMSCs移植效果更明显。     

卡介苗对哮喘小鼠肺组织中PPAR-γ表达的影响及意义

目的：探讨卡介苗对哮喘小鼠肺组织中PPAR-γ表达的影响及其意义。方法：30只健康雄性昆明种小鼠随机化原则分成正常对照组（A组）、哮喘模型组（B组）和卡介苗干预组（C组）,每组10只。卵蛋白致敏法复制哮喘模型,B组小鼠于实验的第1、8、15天分别给予卵蛋白与氢氧化铝混合腹腔注射。第22天开始给予卵蛋白溶液以压缩雾化器为动力雾化吸入激发哮喘,每日一次,每次30min。连续激发7天;C组小鼠每周一次皮内注射0.025mgBCG,连续3次,距首次皮内注射4周后按B组方法致敏和激发;A组予以等量生理盐水代替致敏液及雾化液进行腹腔注射与雾化吸入。检测细支气管炎症细胞浸润及肺组织病理,RT-PCR和western blotting方法检测肺组织PPAR-γ的表达情况。结果：哮喘组出现了明显气道炎症细胞浸润,上皮脱落、炎性细胞渗出、结构紊乱、PPAR-γ表达下降。卡介苗干预组炎症细胞数下降,炎症反应减轻,PPAR-γ表达明显增加,差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论：卡介苗可通过上调表达PPAR-γ,减少炎症细胞的浸润,抑制炎症反应,从而可能防止气道重塑,该研究为卡介苗提供新的临床应用领域。     

抗炎多肽AF-2对LPS诱导的小鼠急性肺损伤的保护

目的研究抗炎多肽AF-2（antiflammin-2）对内毒素（LPS）诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用。方法Balb/c雄性小鼠37只,随机分为3组,对照组（n=10）、急性肺损伤（ALI）模型组（n=14）和AF-2治疗组（n=13）,模型组和治疗组腹腔注射大肠杆菌内毒素复制小鼠肺损伤模型,治疗组同时注射抗炎多肽AF-2,对照组和模型组注射等量的生理盐水。在0h、6h和12h记录动物的呼吸频率,12h处死动物,肺组织切片观察肺病理变化,ELISA法检测血清细胞因子。结果6h和12hAF-2治疗组动物呼吸频率均低于模型组。肺组织病理显示AF-2对LPS诱导的小鼠ALI肺组织的渗出、炎细胞浸润有一定的抑制作用。AF-2治疗组与ALI模型组比较血清IL-6水平明显下降。结论AF-2对内毒素诱导的小鼠急性肺损伤有一定的保护作用。     

结核感染小鼠肺部病理变化与T细胞免疫关系的实验研究

目的探讨结核病小鼠肺部病理变化与T细胞亚群的关系。方法将60只C57BL小鼠随机分为3组,每组20只。结核病模型组小鼠经球后静脉丛注射人型结核分枝杆菌标准毒力珠（H37RV）;免疫调节剂组结核病模型小鼠于H37RV感染后第3、10、17天分别肌注22.5μg母牛分枝杆菌菌苗（微卡菌苗）;正常对照组小鼠未做处理。感染4周后,留取外周血用流式细胞仪测定T细胞亚群;取肺组织,采用常规苏木精-伊红染色和抗酸染色后病理切片观察病理变化。结果结核病模型组小鼠大部分肺组织实变,多数肺泡腔消失,肺泡隔重度增宽,肺间质内可见大量炎性细胞浸润,浸润细胞以中性粒细胞为主,淋巴细胞较少。残存的肺泡腔中有红细胞、纤维素渗出。肺实变区内分布大量的紫红色结核分枝杆菌,主要存在于单核-巨噬细胞胞质内。外周血T细胞亚群的相对比率明显减少。免疫调节剂组肺组织病变和结核病模型组大致相似,但实变病灶较少,多数肺泡腔存在,肺泡隔内浸润淋巴细胞较多,肺泡腔内有渗出单核-巨噬细胞。肺实变区内结核分枝杆菌明显少于结核病模型组,CD3^＋与CD4^＋T细胞比例增加,能显著增加γδT细胞比例。结论微卡菌苗可增强结核病小鼠的免疫功能,使肺实变病灶较少和病灶内结核分枝杆菌明显减少,肺泡腔内单核-巨噬细胞增多,为免疫调节剂辅助治疗结核病提供理论依据。     

旋转磁场对^60Coγ射线放射损伤小鼠肺损伤影响

目的：探讨旋转磁场对放射损伤小鼠肺损伤的影响。方法：132只雄性BALB／c小鼠随机分为正常组（N）,单纯磁疗组（M）,单纯照射组（R）和照射磁疗组（IHM）4组,R组和R＋M组小鼠接受吸收剂量6．0Gy的^60Coγ射线全身一次照射,M组及N组不予以照射,M组及R＋M组予以磁场处理30d,每天2次,每次1．5h,分别于第9,23、30d测定小鼠湿肺羟脯氨酸含量,并进行小鼠肺光镜、电镜超微结构的观察。结果：N组和M组肺羟脯氨酸含量在3个时间点上都低于R组和R＋M组,有明显差别（P均〈0．05）。R组和R＋M组肺羟脯氨酸含量在3个时间点均无明显差别（P均〈0．05）。苏木精-伊红染色结果显示,N组肺组织结构正常;照射后d9,R组及R＋M组肺泡壁轻度增厚,普遍肺毛细血管扩张、充血,少量淋巴细胞、中性粒细胞浸润。小鼠肺组织透射电镜观察结果显示,照射后d30,N组及M组肺间质胶原纤维正常无增生;R组及R＋M组肺可见肺间质胶原纤维较N组及M组明显增多,但R＋M组与R组比较差别不明显。结论：6．0Cy的^60Coγ射线照射后小鼠的肺受到了损伤,但磁场没有加重这种损伤且磁疗对正常小鼠无明显肺损伤。     

不同手术方法对小鼠同种异基因移植皮片存活的比较

目的采用不同手术缝合方式观察小鼠移植皮片存活及生长情况,以建立一种简单易行、快速经济的小鼠同种异基因皮肤移植方法.方法 受体BALB/c小鼠随机分为3组(Z组、J组和T组),每组20只,通过背-背法进行供体C57BL/6的皮片移植,Z组、J组和T组分别采用四周缝合、对角缝合和粘贴固定的皮片缝合方法.每天监测小鼠体重变化及生长状态,观察26天,实验第3、7、15和26天观察各组受体移植皮片存活情况,其中皮片变硬、结痂脱落或坏死判定为移植排斥.第26天取小鼠皮肤移植组织以及肝脾组织进行病理检测.结果 各组小鼠移植物平均体重变化趋势类似,第6天达到最低水平,移植皮片病理检测结果显示,各组均见移植皮片真皮内淋巴细胞浸润,3组病理结果类似,肝脾病理检测发现淋巴细胞大量浸润,说明造模成功.实验26天后,Z组、J组和T组小鼠皮片分别有7、5和3只受体小鼠皮片仅观察到炎症反应.结论 3种手术方式建模均成功,但采用粘贴固定方式进行小鼠背部皮肤移植具有手术方式简单有效、对皮肤损伤小的优点,是一种较好的小鼠同种异基因皮肤移植手术方法.     

早期大剂量乌司他丁治疗急性肺挫伤的疗效观察

目的：探讨早期大剂量乌司他丁治疗急性肺挫伤的临床疗效。方法：选择102例在湖南中医药大学第一附属医院胸外科治疗的急性肺挫伤患者,随机分为A组（对照组）、B组（常规剂量组）和C组（大剂量组）,每组各34例。A组患者给予常规治疗;B组在对照组治疗基础上给予乌司他丁10万单位加入0．9％氯化钠100mL静脉滴注,每8h1次,连用7d;C组在对照组治疗基础上给予乌司他丁40万单位加入0．9％氯化钠100mL静脉滴注,每8h1次,连用7d。分别测定和比较3组患者在治疗前、治疗第1天、治疗第4天、治疗第7天的动脉血氧分压（PaO2）、动脉二氧化碳分压（PaCO2）、氧合指数（PaO2／FiO2、血清肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白细胞介素-6（IL-6）的水平以及治疗期间3组患者急性呼吸窘迫综合征（ARDS）T2．肺部感染的发生率。结果：治疗后,B组的PaO2水平在第7天较A组升高,C组的PaO2水平在第1、4、7天较A组均有升高,在第1、4天较B组亦有升高（P〈0．05）;B、C两组PaCO：水平在第4天较A组均有升高（P〈0．05）;B组的PaO2／FiO2水平在第7天较A组升高,C组的PaO/FiO2水平在第4、7天较A、B两组均有升高（P〈0.05）。B组的TNF—α水平在第7天较A组降低,C组的TNF-α水平在第4、7天较A组降低,在第4天较B组降低（P〈0．05）;B组的IL-6水平在第7天较A组降低,C组的IL-6水平在第4、7天较A、B组均降低（P〈0．05）。各组ARDS及肺部感染的发生率比较无统计学差异（P〉0．05）。结论：早期大剂量乌司他丁对急性肺挫伤具有明显的临床疗效。     

卡介苗对哮喘小鼠肺组织中PPAR-γ表达的影响及意义

目的:探讨卡介苗对哮喘小鼠肺组织中PPAR-γ表达的影响及其意义。方法:30只健康雄性昆明种小鼠随机化原则分成正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)和卡介苗干预组(C组),每组10只。卵蛋白致敏法复制哮喘模型,B组小鼠于实验的第1、8、15天分别给予卵蛋白与氢氧化铝混合腹腔注射。第22天开始给予卵蛋白溶液以压缩雾化器为动力雾化吸入激发哮喘,每日一次,每次30min。连续激发7天;C组小鼠每周一次皮内注射0.025mgBCG,连续3次,距首次皮内注射4周后按B组方法致敏和激发;A组予以等量生理盐水代替致敏液及雾化液进行腹腔注射与雾化吸入。检测细支气管炎症细胞浸润及肺组织病理,RT-PCR和western blotting方法检测肺组织PPAR-γ的表达情况。结果:哮喘组出现了明显气道炎症细胞浸润,上皮脱落、炎性细胞渗出、结构紊乱、PPAR-γ表达下降。卡介苗干预组炎症细胞数下降,炎症反应减轻,PPAR-γ表达明显增加,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:卡介苗可通过上调表达PPAR-γ,减少炎症细胞的浸润,抑制炎症反应,从而可能防止气道重塑,该研究为卡介苗提供新的临床应用领域。     

小鼠异位气管移植模型中核转录因子NF—κB激活MCP-1诱导闭塞性细支气管炎的研究

目的利用同种异体小鼠异位气管移植模型,研究NF—κB是否激活MCP-1基因参与闭塞性细支气管炎（OB）,探讨OB的发病机制。方法将小鼠异位气管移植模型分成同基因组（BALB／C→BALB／C）和异基因组（BALB／C→C57BL／6）,在术后7、14、21d观察气管移植物是否发生OB;免疫组化染色检测气管移植物MCP-1蛋白表达;EMSA测定各组气管移植物NF—κB的转录活性改变;RT—PCR检测MCP-1的mRNA水平;ELASA检测外周血MCP-1蛋白水平。结果异基因移植实验组气管移植物管腔闭塞率在术后7d仅（6±3）％,14d为（28±）8％,21d达到（74±12）％,而同基因移植对照组管腔闭塞率在术后7～21d均小于3％;与对照组比较,实验组气管移植物NF—κB的转录活性在术后7、14、21d均明显升高;气管移植物MCP-1mRNA及血清中MCP-1蛋白水平术后7、14d升高,术后21d与对照组比较无显著差异。结论同种异体小鼠异位气管移植中,NF—κB转录活性增强,在移植后早期激活其下游靶基因MCP-1募集单核细胞和淋巴细胞攻击移植物,促进闭塞性细支气管炎的发生发展。     

环孢菌素A对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用

目的：探讨线粒体渗透性转换孔道抑制剂环孢菌素A（CsA）对脂多糖（LPS）诱导的小鼠急性肺损伤可能的保护作用。方法：LPS 4 mg/kg气管内滴入复制小鼠急性肺损伤模型,实验随机分为5组（n=24）：分别为正常对照组、LPS组、地塞米松组、CsA组和CsA＋苍术苷组。6 h后小鼠处死,测定各组支气管肺泡灌洗液乳酸脱氢酶（LDH）的含量,酶联免疫吸附法测定肺组织匀浆液TNF-α浓度,测定肺组织湿/干重比和肺毛细血管通透性指数。结果：气管内滴入LPS 6 h后,CsA组与LPS组相比,肺泡灌洗液中LDH活性降低,肺组织匀浆液TNF-α浓度下降,肺组织湿/干重比、肺毛细血管通透性指数均明显下降,但CsA＋Atr组与LPS组相比无明显区别。结论：环孢菌素A对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤有保护作用,其机制可能与其抑制线粒体渗透性转换孔道的开放有关。     

大鼠异基因骨髓移植急性移植物抗宿主病模型的建立

目的建立较稳定的异基因骨髓移植急性移植物抗宿主病动物模型,为异基因骨髓移植后的急性移植物抗宿主病（aGVHD）的相关研究提供实验参照。方法以雄性SD大鼠为供鼠,雌性Wistar大鼠为受鼠,受体大鼠随机分成A、B、C、D、E 5组,移植当天所有受鼠均接受8.5 GY的全身照射（TBI）,于照射后4～6 h内,A组回输等量培养液,B组经尾静脉输注供鼠骨髓细胞（2×10^8个/kg）,C、D、E组分别回输供鼠骨髓细胞（2×10^8个/kg）＋不同比例的脾细胞。观察各组大鼠生存期、外周白细胞计数、及有无aGVHD的临床及病理表现。结果A组大鼠于15d内全部死亡,外周血白细胞计数明显减低,骨髓病理示造血组织减少,提示死于造血衰竭。B、C、D、E组大鼠外周血白细胞计数均有明显恢复,B组大鼠8只存活超过50 d,C、D、E组大鼠均于50 d观察期内死亡,并有aGVHD的临床表现及病理表现,但C组大鼠aGVHD的程度较轻且时间不集中,其中D、E组大鼠可于相对集中的时间内观察到典型aGVHD临床及病理。结论TBI预处理的方式是可行的,单纯输入异基因骨髓细胞不能引起明显的aGVHD,骨髓细胞与脾细胞1∶1及1∶1.5混合组均可作为异基因骨髓移植后理想的aGVHD动物模型。     

不同剂量甲泼尼龙对急性百草枯中毒大鼠早期肺损伤干预研究

目的：探讨不同剂量的甲泼尼龙（Methylprednisolone,MPS）对急性百草枯（paraquat,PQ）中毒大鼠早期肺损伤的疗效。方法：采用腹腔注射20％的PQ溶液制作大鼠急性PQ中毒的模型,随机均分为五组,正常对照组（A组）、染毒组（B组）、5mg／kg甲泼尼龙干预组（C组）、15mg／kg甲泼尼龙干预组（D组）、30mg／kg甲泼尼龙干预组（E组）。分三个不同时间点（24、72、168h）处死大鼠（每组每时间点6只）。观察各时间点大体标本,组织病理、肺系数和氧合指数。结果：光镜下肺组织病理学观察,与B组比较C、D、E组大鼠肺的病理学改变,肺泡腔内出血、渗出,炎性细胞浸润、肺泡隔炎性细胞浸润相对较轻,其中以C、E组减轻最为明显。在各组相同时间点肺系数：在三个时间点的值均比B组低（P〈0．05）,其中E组在24h、72h时间点上与C、D组有显著差异（P〈0．05）。C、D、E组与B组的氧合指数的比较各个时间点上均与B组有差异（P〈0．05）,三组之间相互无明显差异。结论：本实验结果显示甲泼尼龙对急性百草枯中毒大鼠的肺损伤具有保护作用,且30mg／kg甲泼尼龙组要优于5mg／kg、15mg／kg甲泼尼龙组。     

卡介苗干预对哮喘小鼠肺组织IL-17A表达的影响及可能机制研究

目的:观察卡介苗干预对哮喘小鼠肺组织IL-17A的表达、气道炎症的影响,并探讨可能机制.方法:按随机数字表法,24只昆明小鼠分为正常对照(A组),模型组(B组),卡介苗(BCG)干预组(C组).C组小鼠每周一次皮内注射BCG 0.025 mg,连续3次.首次皮内注射4周后,第1、8、15天每只小鼠分别给予鸡卵清蛋白(OVA)与氢氧化铝混合腹腔注射,第22天给予1％ OVA溶液雾化吸入激发.激发后收集支气管肺泡灌洗液(BALF)行细胞总数及分类计数.肺组织HE染色行支气管粘膜下炎症评分.酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测肺组织匀浆中的IL-17A和IFN-γ水平.结果:与正常对照组比较,BCG干预小鼠BALF中白细胞总数及中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞数均高于显著增高,低于模型组小鼠.BCG处理小鼠支气管粘膜下炎性细胞浸润程度较模型组小鼠明显降低(P＜0.01),比A组明显(P＜0.01).与对照组相比,模型组和BCG组小鼠肺组织匀浆中的IFN-γ显著相抵,在模型组小鼠更明显,IL-17A浓度增高,在模型组小鼠更明显(P＜0.05).结论:BCG干预可抑制气道炎症,可能通过上调Th1型免疫反应增加IFN-γ浓度、减少IL-17A在哮喘小鼠肺组织中表达,减少中性粒细胞的募集活化.     

维生素A缺乏大鼠致敏后免疫功能低下对肺炎的影响机制

目的探讨维生素A（VA）缺乏对致敏后免疫细胞发育、功能的影响机制。方法：低VA饲料喂养大鼠8周时用卵蛋白致敏并分组。VAS组隔天口服vA100u,治疗3次;VAD组与正常组口服大豆油。用免疫组织化学法观察细胞角蛋白19（CK19）、病理学检查肺与脾病理变化、ELISA法检查血清Th因子水平等。结果VAD组胸腺萎缩,胸腺上皮细胞（TEC）肥大、聚集、CK19少。血IL—10、IL-4、胸腺索a-1升高。肺感染病灶多,肺泡隔浸润细胞较少与红细胞渗出多。VAS组胸腺细胞增生,TEC内CK193上调,血IFN—γ水平较低、IL-4、IL-10明显下调。小气道单层纤毛柱状上皮正常,管壁淋巴细胞浸润较重,肺泡区巨噬细胞多、渗出红细胞少。结论VA缺乏并致敏后胸腺TEC、胸腺细胞等发育和功能异常。补充VA改善胸腺TEC结构、促进淋巴细胞增生与非特异免疫功能,保护呼吸道黏膜与肺泡上皮。     

脂多糖和石墨粉诱导小鼠急性肺损伤病理形态学比较

目的通过比较脂多糖（LPS）和石墨粉颗粒分别诱导小鼠急性肺损伤的病理形态学差异,探讨不同来源细颗粒物成分导致急性肺损伤的可能机制。方法将140只SPF级18~20 g雄性KM小鼠随机分为7组,除正常对照组外其他组经气管内分别滴注LPS溶液及石墨粉混悬液制备急性肺损伤小鼠。记录各组动物死亡率,光镜和透射电镜下观察各组小鼠不同时间点肺组织病理变化。Western Blot检测肺组织中NE的蛋白表达,实时定量PCR法检测肺组织中MCP-1的mRNA表达。结果与正常对照组相比,G（石墨粉）组和L（LPS）组均有不同程度病理学改变,G组小鼠肺部有大量巨噬细胞渗出,L组小鼠肺部渗出物以中性粒细胞为主;肺组织中NE蛋白表达均高于正常对照组（P〈0.05）,且L组与G组之间差异有显著性（P〈0.05）;肺组织中MCP-1mRNA表达均高于正常对照组（P〈0.01）,且L组与G组之间也有显著差异（P〈0.01）。结论不同来源颗粒物引起肺部的病理损伤不同,可能引起炎症反应的机制也存在差异,即成分复杂的细颗粒物导致急性肺损伤的机制可能存在混合性。     

褪黑素对油酸致大鼠急性肺损伤的防护作用及其机制研究

目的：研究油酸（OA）致大鼠急性肺损伤（ALI）时,P-选择素（Ps）、细胞间粘附分子-1（ICAM-1）和核因子-κB（NF-KB）在肺组织中的表达及褪黑素（MT）对肺组织的保护作用及其机制。方法：将48只SD大鼠随机分为4组（n=12）,对照组（Control）、油酸组（OA）、MT＋OA组,SB203580＋OA组。采用尾静脉注射油酸的方法建立大鼠Au的模型,测定肺系数,光镜下观察大鼠肺组织形态学改变,并通过免疫组织化学染色技术观察肺组织中Ps、ICAM-1和NF-κB的表达变化。结果：与control组相比,OA组大鼠肺系数明显升高（P〈0．05）;肺组织损伤严重,肺泡间隔明显增宽,肺泡腔及肺间质弥漫性炎细胞浸润;Ps、ICAM-1和NF-κB的阳性表达信号明显增强（P〈0．05）;应用MT和SB203580均显著缓解上述变化（P〈0．05）。结论：MT对ALI时的肺组织起明显的保护作用,其保护机制可能与抑制Ps、ICAM-1和NF-κB的表达有关。     

布地奈德对哮喘大鼠气道嗜酸细胞影响机制的实验研究

目的：观察布地奈德（Bud）对哮喘大鼠嗜酸细胞（EOS）在气道局部浸润的影响。方法：复制哮喘大鼠模型,分为正常组（C组）、哮喘组（A组）和Bud组（B组）,用免疫组化检测肺组织NF-κBp65及Eotaxin活性;细胞分类计数法检测支气管肺泡灌洗液中的EOS。结果：A组肺组织NF-κBp65表达量均显著高于C组;B组肺组织NF-κBp65的表达均显著低于A组;B组BALF中EOS的绝对计数和百分比均低于A组;光镜下观察B组气道炎症较A组显著减轻。结论：Bud能抑制EOS在气道局部的浸润,减轻气道炎症。其机制可能与抑制哮喘大鼠肺组织NF-κB的活性从而减少Eotaxin的转录合成有关。     

NF-κB启动的炎症反应在小鼠侵袭性肺曲霉病肺损伤中的作用

为了探讨NF-κB启动的炎症反应在小鼠侵袭性肺曲霉病肺损伤中的作用,将小鼠分3组:正常组、正常 烟曲霉菌接种组、IPA模型组,小鼠鼻吸入烟曲霉菌第4天处死,取肺组织,肺组织切片经HE染色观察病理损伤;比色法测定肺组织MPO活性;免疫组化法评价肺组织NF-κBp65蛋白的活化:RT-PCR法检测肺组织TNF-α、IFN-γ和β-tublin mRNA的表达. 结果显示,正常健康组小鼠肺组织结构正常,未见炎症发生;正常 烟曲霉菌接种组小鼠肺组织有炎症细胞浸润,未见孢子萌芽;IPA模型组小鼠的肺组织病理损伤严重,可见炎症细胞浸润,孢子萌芽生成菌丝.正常 烟曲霉菌接种组和IPA模型组小鼠肺组织的TNF-α和IFN-γ mRNA的相对表达水平、NF-κB p65免疫组化评分和MPO活性均高于正常组小鼠(P<0.05):并且IPA模型组小鼠肺组织NF-κB p65免疫组化评分值和MPO活性均高于正常 烟曲霉菌接种组(P<0.05).结果提示,烟曲霉菌感染可激活小鼠肺组织NF-κB介导的炎症信号通路,诱导下游TNF-α和IFN-γ的表达,募集大量的中性粒细胞于感染组织,是导致IPA小鼠肺组织严重病理损伤的因素之一.     

周围神经再生早期过程中内源性和外源性巨噬细胞数量变化的实验研究

目的：周围神经再生过程中巨噬细胞发挥了重要的作用,然而目前对于神经内内源性和外源性巨噬细胞的具体作用了解的却很少,因此本实验研究了小鼠坐骨神经损伤后早期再生过程中内源性和外源性巨噬细胞数量比例变化的情况,探索周围神经再生的规律。方法：移植CAG-EGFP转基因小鼠的全骨髓有核细胞到骨髓灭活野生型C5781／6小鼠体内建立嵌合体小鼠模型。待移植成功3个月后夹伤小鼠一侧坐骨神经,并在损伤后第2、7、14和28天取材、切片,使用巨噬细胞特异性抗体cD68进行免疫荧光染色,分析损伤神经段中内源性巨噬细胞（CD68＋／EGFP-）、外源性巨噬细胞（CD68＋／EGFP＋）的数量及其比例变化情况。结果：①夹伤骨髓移植模型小鼠坐骨神经后,参与坐骨神经损伤修复的巨噬细胞可分为两类,即内源性巨噬细胞（CD68＋／EGFP-）和外源性巨噬细胞（CD68＋／EGFP＋）;②夹伤坐骨神经后,浸润的总巨噬细胞数量从第2天开始逐渐增加,到第14天达到高峰,约为正常情况下的60倍,随后逐渐减少;③起初外、内源性巨噬细胞间的比例是1：1,差值最大出现在损伤后第14天为4：l。结论：小鼠坐骨神经夹伤后,内外源性巨噬细胞共同参与了受损神经组织远心段的修复和再生过程,损伤初期发挥作用的主要是内源性巨噬细胞,随后大量浸润的外源性巨噬细胞占主导作用。本实验首次连续观察并定量分析了神经损伤后早期内源性和外源性巨噬细胞的数量改变,证实了瓦勒氏变性过程中内源性和外源性巨噬细胞在不同阶段对巨噬细胞总量的贡献作用。     

光,电镜观察小鼠呼吸道合胞病毒性肺炎的免疫病理改变

Ｂａｌｂ／ｃ小鼠经鼻吸入呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）悬液感染成ＲＳＶ肺炎。于感染第５天后连续隔日取肺,光镜与透射电镜检查。感染第５～７天,肺组织病理改变最严重,多数小鼠表现为间质淋巴细胞（ＬＣ）套状浸润,肺泡隔增宽;少数小鼠出现间质内大量ＬＣ浸润与肺泡内大量单个核细胞渗出的两种病理改变。病毒包涵体出现于肺泡上皮细胞内,细胞受感染后发生肿胀、坏死。Ⅰ型细胞核周胞质内有核衣壳复制,表面病毒芽生形成长短不等的丝状体。第９天,肺泡隔增宽与间质ＬＣ浸润逐渐减轻。第１２天,病毒包涵体明显减少。