测定呼吸道合胞病毒抗体方法敏感性的比较

用ELISA、间接免疫荧光和中和试验三种方法测定兔免疫血清的呼吸道合胞病毒抗体。结果中和试验测定的免疫血清几何平均抗体滴度为1:32;间接免疫荧光试验为1:508,比中和试验高16倍;ELISA测得的抗体滴度1:4,000～1:5,000,为中和试验的125～156倍。以ELISA敏感性最高,间接免疫荧光试验次之,中和试验景差。     

第25届国际生物学奥林匹克竞赛试题 实验2·植物解剖和生理学

正总分:96分时间:90 min该题包含3项任务任务1:测定植物色素(36分)A部分:TLC用薄层层析定性区分色素B部分:用分光光度计定量测定色素任务2:测定植物提取物中的淀粉(21分)任务3:植物结构适应性的观察(39分)材料与器具任务1植物材料2个500μL的叶子酒精提取物,标记为A和B(在1.5 mL小管中)2个1 000μL的叶子酒精提取物,标记为     

血清游离和酯化胆固醇新的简易分别提取法

我们建立了一个新的简易的分别提取血清中游离和酯化胆固醇的方法:用乙醇:水(1:0.55体积比)的溶液首先提取游离胆固醇,然后再用丙酮乙醇提取液提取酯化胆固醇,干燥后分别用三氯化铁冰醋酸-浓硫酸显色法,比色测定。经统计计算,本法同毛地黄苷法所得的结果基本相同,相关系数r=0.929,而且新法的双管重复性显著地优于毛地黄苷法,本法分别测定的游离胆固醇和酯化胆固醇的总和同总胆固醇测定结果也极相接近。     

用氯仿-甲醇抽提法测定鱼体脂肪含量的研究

脂肪含量的测定,是鱼类能量学及营养学的重要环节1。目前最常用的测定方法,是用氯仿一甲醇(2:1)混合液(下面简称C-M液)抽提1。这一方法的基本步骤见图1。不同研究者采用的具体步骤有所差异。如崔奕波1引用的方法系将样品用C-M液匀浆后直接离心,而Hopkins等2对样品不匀浆,仅用C-M液浸泡半小时后离心。这一方法最初是用于医学检验;在生态学研究中。常需要测定大量样品,故方法的简化尤为重要。本研究的目的是探讨不同抽提步骤对测定结果的影响,以期对原方法进行简化;同时将C-M抽提法与我国常用的索氏乙醚抽提法进行比较。       

薄层色谱-荧光分光光度法测定淫羊藿药材中淫羊藿苷的含量

目的 :建立了薄层色谱 荧光分光光度法测定淫羊藿药材中淫羊藿苷的含量。方法 :用 70 %乙醇水浴回流提取 ,用醋酸丁酯 甲酸 水 (1.3∶1∶1)在 10℃以下放置后的上层溶液为展开剂 ,展开 ,分离淫羊藿苷 ,在Ex=4 30nm ,Em=4 80nm条件下测定荧光强度。结果 :线性范围为 0 .8～ 4 .8μg ,相关系数r =0 .9973,平均回收率 97.4 8%。结论 :此法简单、灵敏、准确 ,重现性好。     

类囊体膜生物传感器的固定化研究

本实验以菠菜为材料 ,经过提取 ,用PUA SbQ、海藻酸钙和戊二醛—牛血清蛋白三种固定方法在 4 0孔板上固定得到固定化的类囊体膜 ,用酶标仪连续测定 8周固定化类囊体膜的光合活力变化。结果表明 :PVA SbQ固定方法最好 ,8周后测定的活性仍保持在 6 1 2 2 %左右。     

血清游离和酯化胆固醇新的简易分别提取法

我们建立了一个新的简易的分别提取血清中游离和酯化胆固醇的方法:用乙醇:水(1:0.55体积比)的溶液首先提取游离胆固醇,然后再用丙酮乙醇提取液提取酯化胆固醇,干燥后分别用三氯化铁冰醋酸-浓硫酸显色法,比色测定。经统计计算,本法同毛地黄苷法所得的结果基本相同,相关系数r=0.929,而且新法的双管重复性显著地优于毛地黄苷法,本法分别测定的游离胆固醇和酯化胆固醇的总和同总胆固醇测定结果也极相接近。     

果蔬中有机氯农药残留的分析测定

目的:用高效气相色谱法对蔬菜和水果中的有机氯农药残留进行测定分析.方法:称取一定量的样品,采用丙酮和乙酸乙脂(4:1)提取,旋转蒸发仪上蒸发近干,石油醚和乙酸乙脂(4:1)洗脱过柱净化,再用旋转蒸发仪蒸发近干,5ml石油醚定容,在高效气相色谱仪上进行色谱分析.结果:样品采用匀浆提取法,测定选择BPX608石英毛细管柱,柱温225℃,样品的回收率在92%-105%之间.结论:该法具有简便、快捷、准确的特点,为进一步改进测定方法提供依据.     

《土壤微生物生态研究法》选译(一) 固氮微生物的测定

1、好气性固氮细菌的测定:将1克土壤试料加到100毫升无氮基础培养基中※_1,于25～30℃振温培养,然后用稀释平板法或涂抹平板法等测定细菌。由于最初在培养基中含有非固氮菌,所以要反复多次地移接和培养。再用稀释平板法测定菌落。在固氮微生物中,特别是在对Azoto-bacter(自生固氮菌属)选择培养时,常使用1%的淀粉或鼠李糖。此外,蔗糖也     

小麦各生育期硝酸还原酶活力变化及其与籽粒蛋白质含量的关系

实验于1987～1989年两次在本校农场进行。材料为小麦(Triticum aestvum)品种农鉴1号。试验地为粘壤土,pH值6.8;土壤有机质含量1.3％,速效氮77.5ppm,速效磷61.2ppm,速效钾96ppm;基肥水平纯氮10 kg/亩。测定硝酸还原酶(NR)活力用体内改进法,蛋白质含量用谷物蛋白含量快速测定法。结果(图1)表明:     

脾切除对肝纤维化大鼠肝脏TGFβ1 的表达和血清TGFβ1 水平的影响

目的:研究脾切除对肝纤维化大鼠肝脏TGFβ1的表达和血清TGFβ1 水平的影响,探讨脾切除在肝纤维化中的意义.方法:用CCL,建立50例肝纤维化大鼠模型.于建模第3周,6周,及8周分别取大鼠肝脏和脾脏标本.用免疫组化SP 方法测定其TGFβ1 的表达,HE和姬姆萨染色检测肝纤维化.应用双抗体夹心ELISA 方法测定15 例模型大鼠行脾脏切除前后的血清TGFβ1 水平,以及15 例对照组大鼠的血清TGFβ1 水平,并于术后4周取两组大鼠的肝脏标本,用免疫组化sP 方法测定其TGFβ1的表达.应用CMIAS8 彩色图像系统对阳性目标进行分析和处理.结果:随着肝纤维化程度的进展,大鼠肝脏和脾脏TGFβ1的表达也随之增加(P<0.01).脾切除组大鼠其血清 TGF-β1 的水平显著低于对照组大鼠(P<0.05),且脾切除组大鼠肝脏TGFβ1 的表达低于对照组大鼠(P<0.05).结论:脾切除术在一定程度上可延缓肝纤维化的发展.     

正交试验法优选PP1脂质体的制备工艺

目的:制备PP1脂质体,筛选最优处方。方法:用薄膜水化法制备PP1脂质体,以高效液相色谱法(HPLC)测定PP1脂质体的包封率,以包封率为主要指标,选取药脂比、胆固醇磷脂比、温度和水化时间为因素,用正交试验筛选最优配方。结果:用薄膜水法制备的PP1脂质体的最优处方的组成为:药脂比为1:10,胆固醇与二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)比为1:8,温度为40℃,水化时间为3 min。平均包封率为(63.27±3.32)%。PP1脂质体的平均粒径为(157.73±9.74)nm,Zeta电位为(-4.74±0.44)m V。结论:用薄膜水化法制备出的PP1脂质体包封率高,形态和粒径均匀,重现性好,为研究其在眼部的缓释作用奠定了基础。     

甘草提取物对鼠肝线粒体氧化损伤的保护作用

用60%乙醇回流甘草,得粗提物(RG0),经AB-8大孔树脂纯化RG0得到甘草精提物(RG1),并对RG0和RG1主要活性成分的含量进行测定。为研究RG0和RG1对鼠肝线粒体氧化损伤的保护作用,用Vc-Fe2+诱导线粒体损伤,测定RG0和RG1对ATP酶的活性、线粒体肿胀度和蛋白质羰基含量的影响;用H2O2-Fe2+体系诱导线粒体脂质过氧化,测定RG0和RG1对丙三醛(MDA)含量的影响;用NBT法测定RG0和RG1抑制线粒体产生超氧阴离子的作用。结果显示:RG0和RG1可以显著地抑制线粒体的氧化损伤,并能防止线粒体肿胀和ATP酶活力下降,降低蛋白质羰基化水平,以及具有有效清除线粒体产生的超氧阴离子自由基的作用。因此,RG0和RG1对鼠肝线粒体的氧化损伤具有良好的保护作用,RG1的作用比RG0好。     

三种乌头中生物碱的含量测定

本文采用薄层光密度法对金阳乌头、雷波乌头,丽江乌头中所含的滇乌碱、光翠雀碱、展花乌头碱进行了含量测定。生药用乙醚冷浸提取,GF_(234)板,展开剂:环已烷—乙酸乙酯—二乙胺(8:1:1),反射法直线扫描,本法灵敏度高,重现性好。     

核桃仁内隔膜中总黄酮最佳提取工艺的研究

目的:从核桃仁内隔膜中提取并测定总黄酮含量,选择最佳提取工艺条件.方法:以芦丁为对照品,用分光光度法在最大吸收波长510nm对其含量进行测定.结果:测得样品中总黄酮含量C=6.430%,最佳提取工艺:乙醇浓度为75%、料液比为1:40、超声提取时间为60min、超声提取温度为80℃.结论:选用芦丁为对照品应用于紫外分光光度法测定核桃仁内隔膜总黄酮含量准确度较高,方法简单,可作为测定核桃仁内隔膜中黄酮含量的一种手段.     

提取航天诱变向日葵种子总RNA的一种有效方法

目的:从航天诱变向日葵种子中提取高质量的总RNA.方法:采用改进的SDS法,提取缓冲液与氯仿同时作用液氮研磨材料后,用酸酚-氯仿抽提一次,经LiCl过夜沉淀、DNase I处理、1/2体积的无水乙醇沉淀多糖,最后加入1/10体积的醋酸钠和2倍体积的无水乙醇沉淀总RNA,用琼脂糖凝胶电泳与紫外分光光度法测定产量与纯度,用...     

磁场处理离体小肠对葡萄糖吸收功能的影响

目的 :观察磁场处理离体小肠对葡萄糖吸收功能的影响。方法 :用经 0 .1T和 0 .2 5T磁场处理小白鼠离体小肠 ,分别测定其对葡萄糖的吸收值。结果 :用 0 .1T和 0 .2 5T磁场处理的小白鼠离体小肠浆膜侧吸收葡萄糖的量与对照组比较 ,0 .1T差异显著 (p <0 .0 5 ) ,0 .2 5T的差异极显著 (p <0 .0 1 )。结论 :用0 .1T和 0 .2 5T磁场处理的小白鼠离体小肠对葡萄糖的吸收均有明显的促进作用。     

牛胰岛素的酰胺化反应及其六酰胺产物的分离及鉴定

牛胰岛素用1％三氟化硼甲醇溶液反应后所得六甲酯与饱和氨甲醇溶液反应,在室温下约经144小时可完全酰胺化。反应过程用红外光谱及酰胺含量分析测定。所得酰胺化粗产品经Sephadex G-75凝胶层析可以将胰岛素六酰胺化合物从其聚合物中分离提纯。由红外光谱、紫外光谱及圆二色散光谱测定表明:牛胰岛素的六酰胺化合物的构象与胰岛素有很大不同,其生物活性也丧失殆尽。     

双链核糖核酸免疫化学研究 Ⅰ.双链多聚[I]:多聚[C]的抗原性

用国产多聚肌苷酸和多聚胞嘧啶核苷酸(简称多聚[I]:多聚[C])制备成双链核糖核酸特异性抗血清,用环状沉淀和~3H标记的番茄花叶病毒双链核糖核酸测得抗血清效价分别为1:128和1:6400。用免疫琼脂双扩散、对流免疫电泳和放射免疫测定可测定出多聚[I]:多聚[C]的最低浓度分别为391ng、12.2/ng和10pg/ml抗血清和酵母、TMV、PVX 的单链核糖核酸、小牛胸腺DNA不反应。试验证明用国产多聚[I]:多聚[C]制备的抗血清,可有效地用干双链核糖核酸的免疫化学鉴定。由于在免疫双扩散和对流免疫电泳中抗血清能和微量双链核糖核酸反应并产生可见沉淀线,从而有可能利用这两种简便灵敏的方法测定病毒的双链RNA,单链RNA病毒的RF型RNA,以及双链RNA真菌病毒的筛选。     

CPE对体外培养前列腺癌细胞株的抑制作用

目的:探讨产气荚膜梭菌肠毒素(CPE)对前列腺癌细胞株在体外培养过程中的抑制作用。方法:以细胞免疫荧光染色观察人前列腺癌PC-3细胞株和22RV1细胞株表达Claudin-3情况;并分别用生长曲线测定法及MTT法等测定CPE对PC-3和22RV1细胞活性的影响;分析CPE对肿瘤的生长抑制作用。结果:应用Claudin-3单抗进行免疫荧光染色,证实体外培养的人前列腺癌细胞株22RV1可以特异性高表达Claudin-3,而在PC-3上有弱表达;用相关方法测定经过不同浓度的CPE处理后的前列腺癌细胞株22RV1细胞增殖明显降低,有明显抑制作用;而对PC-3则未产生明显细胞毒性作用。结论:CPE在体外可通过特异性作用于Claudin-3高表达的前列腺癌细胞株对前列腺癌细胞产生抑制作用。