电针刺激加速大鼠中枢脑啡肽的合成

应用放射免疫分析法测定大鼠纹状体、下丘脑、丘脑、桥延脑内甲啡肽和亮啡肽样免疫活性物质(Ir-MEK,Ir-LEK)的含量。脑室注射氨基肽酶抑制剂 bestatin(B)或“脑啡肽酶”抑制剂 thiorphan(T)各50μg 并不影响脑内 Ir 脑啡肽含量,合并应用 B T 各50μg 仅引起下丘脑 Ir-MEK 含量轻度上升。这说明安静状态下中枢脑啡肽的更新率不高。给大鼠电针30min 使纹状体和下丘脑 Ir-MEK 和 Ir-LEK 含量升高约40%(33—52%)(P<0.01)。在脑室注射 B T 各100μg 以及腹腔注射非特异性肽酶抑制剂 D-苯丙氨酸250mg/Kg的基础上电针,则使 Ir-MEK 和 Ir-LEK 含量升高约120%(94—147%)(P<0.01)。以上结果说明30min 电针刺激既促进脑啡肽的合成,也促进其释放。由于前者超过后者,因此静态含量升高。在中枢脑啡肽含量升高的同时,电针镇痛效果加强。说明由于肽酶抑制剂的保护作用而积聚于脑内的脑啡肽是具有功能意义的。     

内啡素的生成释放和降解

自从1975年Hughes等发现两种脑啡肽(甲啡肽,MEK;亮啡肽,LEK)以来,陆续发现存在于体内具有阿片样作用的肽类物质不下20余种。Simon曾建议用endorphins一词泛指内源性吗啡样肽,中文译为内啡肽。但以后此名称多用作β-趋脂素(β-LPH)分子中的特定片断如β-内啡肽(31肽,β-EP)、δ-内啡肽(19肽)、γ-内啡肽(17肽)、α-内啡肽(16肽)等的总称,而不包括脑啡肽、强啡肽等在内。看来,内源性阿片(吗啡)样     

大鼠脊髓内甲啡肽、亮啡肽和甲七肽在镇痛和电针镇痛中的不同作用

1.给大鼠脊髓蛛网膜下腔注射甲啡肽200—800nmol引起与剂量相关的镇痛效应。注射脑啡肽降解酶抑制剂Thiorphan 50nmol或Benatin 300nmol可加强电针镇痛,注射甲啡肽抗体则可对抗电针镇痛。这些资料说明内源性甲啡肽确实在痛觉调制系统中起着重要作用。 2.脊髓蛛网膜下腔注射亮啡肽800nmol使痛阈升高44％,其镇痛效应尚不及200nmol甲啡肽的作用(痛闻升高61％);注射甲七肽10-200nmol未见痛阈明显改变。注射亮啡肽或甲七肽抗体并不能对抗电针镇痛;注射甲七肽降解酶抑制剂Captopril 1000nmol也不能加强电针镇痛。这些资料说明,脊髓中的亮啡肽和甲七肽存痛觉调制中可能不起重要作用。     

哺乳类游离胃平滑肌细胞上有特异性鸦片受体

最近发现,在哺乳动物,不仅在肌间神经丛,而且在游离的胃平滑肌细胞上,也存在特异性的有高度亲和力的鸦片受体。最近美国Bitar和Makhlouf发现,将新鲜分散的豚鼠胃平滑肌细胞分别置于几种一定浓度的鸦片肽类及吗啡溶液中,可引起平滑肌细胞收缩,与乙酰胆硷、八肽胆囊收缩素和胃泌素引起的收缩现象很相似,其最大收缩反应为30～34％。按照D_(50),五种鸦片肽类的作用强度顺序为:强啡肽>甲硫脑啡肽>D-丙氨酸~2-甲硫脑啡肽(D-ala~2-Met-Eukephalin)>吗啡>亮啡肽。纳络酮可使鸦片肽类引起平滑肌细胞收缩的剂量     

迷走神经对心室功能的调控机制研究进展

自主神经系统由交感神经系统和副交感神经系统（迷走神经）组成,二者相互拮抗,对哺乳动物心脏的功能调控具有重要的作用。副交感（迷走）神经对心房可产生变时、变传导和变力作用,但是对心室的支配及对心室的调控作用还不清楚。一直以来都存在一个误解,认为交感神经支配心脏的各个部位而副交感神经仅支配心脏的室上性组织,对心室没有支配。近年来的研究显示在一些哺乳动物的心脏上,胆碱能神经在心室也有分布,且对左心室的功能有重要的调控作用。本文从解剖及组织化学、分子生物学和功能学三个方面阐述迷走神经对心室的支配及调控证据,并对心章收缩功能的迷走神经（毒蕈碱）调控及其信号转导途径进行综述。     

内毒素休克家兔脑区、脑脊液、血浆中脑啡肽含量的改变及纳洛酮的抗休克作用

本工作在戊巴比妥钠麻醉的家兔上进行。采用夹闭肠系膜上动脉阻断血流方法建立内毒紫休克的实验模型。用放射免疫分析法测定了休克前后脑区、脑脊液及血浆中脑啡肽含量的变化,并观察了脑室或静脉注射纳洛酮的抗休克效应。结果如下:1.休克时,下丘脑、延脑、桥脑的亮脑啡肽含量显著升高,中脑无明显变化、丘脑、纹状体下降。脑脊液和血浆中亮脑啡肽明显增加。外周静脉血与肾静脉血中无显著差别。2.侧脑室或静脉注射纳洛酮,均可使休克动物的血压回升,延长存活时间。脑室注射的升压数值略大,维持升压时间也较长。实验结果提示:脑啡肽参与内毒素休克过程。断阿片样物质的作用,可能是治疗内毒素休克的一个途径。     

抑制伏核内脑啡肽的降解使电针镇痛和吗啡镇痛得到加强

将“脑啡肽酶”抑制剂 Thiorphan 或氨肽酶抑制剂 Bestatin 经慢性埋植套管注入家兔一侧状核内,观察到明显的镇痛作用,在1—4μg 范围内呈现明确的剂量-效应关系。该作用可为伏核内注射纳洛酮或甲啡肽抗体所完全翻转,亮啡肽抗体则无效。表明伏核内注射 Thior-Phan 或 Bestatn 所产生的镇痛效应主要是通过甲啡肽而完成的。伏核内注射微量 Thiorphan 或 Bestatin 使电针镇痛的后效应明显加强,并能增强吗啡的镇痛作用。表明电针和吗啡的镇痛效果至少有一部分是通过在伏核内释放出脑啡肽(特别是甲啡肽)而实现的。     

豚鼠冰水游泳应激后血浆、肾上腺髓质和脑内组织的亮—脑啡肽含量变化

豚鼠冰水游泳应激3min后,用放射免疫法测定血浆、肾上腺髓质和脑内三个脑区组织的亮—脑啡肽(Leu-enkephalin,LEK,)含量和血浆的血管紧张肽Ⅱ(Angiotensin Ⅱ,ATⅡ)浓度变化。结果表明:在冰水中游泳应激组豚鼠的血浆、肾上腺髓质、下丘脑和纹状体组织的LEK含量和血浆的ATⅡ浓度,均较对照组豚鼠明显升高(P值均<0.01)。提示:豚鼠在冰水中紧张、剧烈游泳后,可能激活了中枢神经和周围组织内的脑啡肽能神经元和血管紧张肽原酶—血管紧张肽Ⅱ系统,从而促进LEK和ATⅡ的释放增加。     

刺激大鼠尾壳核对脑内脑啡肽含量的影响

为确定刺激某一脑区时,远隔脑区脑啡肽含量是否改变;如有改变,甲-脑啡肽和亮-脑啡肽的变化是否一致。本工作在乌拉坦麻醉大鼠上,用放射免疫测定方法测定了电刺激尾壳核对六个脑区(下丘脑、纹状体、丘脑、海马、皮层及脑干)两种脑啡肽含量的影响。放射免疫测定的结果表明:(1)动物经乌拉坦麻校舍醉及手术操作后,除纹状体外,其它五个脑区亮-脑啡肽含量均明显降低,甲-脑啡肽含量只有下丘脑和丘脑明显降低,其它脑区无显著变化。(2)在乌拉坦麻醉及手术的基础上,再刺激尾壳核,除丘脑无显著变化外,其它五个脑区甲-脑啡肽含量均明显降低,亮-脑啡肽含量均明显升高,甲-脑啡肽/亮-脑啡肽比值减少(其中纹状体的比值改变无统计学显著性)。以上结果表明,刺激大鼠尾壳核可明显影响远隔脑区脑啡肽含量。关于甲-脑啡肽和亮-脑啡肽反向变化的意义有待进一步研究。     

大鼠心脏的雌激素受体免疫组织化学研究

观察雌激素受体在雌性与雄性大鼠心脏中的表达.取大鼠心房与心室组织制作冰冻切片,应用抗雌激素受体单抗进行免疫组织化学(SP法)染色并进行图像分析.结果显示,雌性与雄性大鼠心脏都存在雌激素受体,且受体的表达无性别差异(P＞0.05);心房与心室都存在雌激素受体阳性表达,其表达也无明显差异(P＞0.05);阳性反应见于心肌细胞和成纤维细胞.结果表明,大鼠心脏存在雌激素受体,心房与心室都可能是雌激素的靶组织;心血管疾病的性别差异与雌性、雄性的受体含量无关,可能与生理条件下受体的活性及功能状态有关.     

下丘脑前区的脑啡肽参与急性心肌缺血减弱颈动脉窦升压反射的效应

家兔急性心肌缺血时,下丘脑等脑区亮啡肽(L-Enk)含量显著升高,延脑未见明显变化,向下丘脑前区直接注射微量L-Enk,同阻断冠脉效应相同,也可减弱窦升压反射。该区注射纳络酮(Nx)可逆转心肌缺血减弱窦升压反射的效应,而对正常兔的窦升压反射没有明显影响。提示:急性心肌缺血时,下丘脑前区的脑啡肽可被激活,并参与窦升压反射的调节。但在正常情况下,这些脑啡肽可能处在非活动状态,在窦升压反射的调节中可能不起重要作用。     

人胚心肌纤维中心房特殊颗粒的分布及心钠素的免疫组化研究

收集胚胎标本共24例（经临床证实孕妇无心血管疾病）,用透射电镜观察各胎龄心脏各部位心肌纤维中心特殊颗粒（ASG）分布及含量变化,同时结合免疫组织化学技术对心脏各部位心肌纤维内心钠素的表达进行研究。结果表明,胚第5周时,心肌纤维便有ASG出现,随着胎龄的增长,心房与心耳的颗粒数量逐渐增多。而心室的颗粒数量却逐渐减少,在同一胎龄,心房内的颗粒数量多于心室,心耳ASG多于心房,免疫组织化学的研究结果表明,胚第7周时,心房与心耳内可出现心钠素样免疫反应阳性的心肌细胞,其阳性反应的变化规律与ASG的变化规律一致。心室中未发现阳性反应。     

阿片样肽、阿片受体和缺血再灌流性心律失常

心脏内含有阿片样肽及阿片受体,阿片受体的活动参与心脏调节。在离体灌流的心脏加入外源性阿片样肽,和缺血—再灌流的心脏一样,均可导致 cAMP 含量增加,并伴有心律失常。根据以上结果可推测:缺血—再灌流导致心脏内阿片样肽的释放增加,引起心脏 cAMP水平增高,激活钙通道而引致心律失常。一、心脏内的阿片样肽Hughes 等用小自鼠输精管生物检定法,首先在兔及大白鼠的心房提取物中发现心内源性阿片样肽。Weihe 等和 Lang 用高效液相色谱披术(HPLC),放射免疫法和大鼠输     

海马内注射脑啡肽对细胞免疫功能及脑内IL－1α基因表达的影响

本文研究了海马内微量注射脑啡肽对大鼠细胞免疫功能及海马内白细胞介素－１α（ＩＬ－１α）基因表达的影响。结果发现：（１）双侧海马内微量注射甲硫－脑啡肽或亮－脑啡肽各１μｌ（１８ｍｍｏｌ／Ｌ）能明显增强ＣｏｎＡ刺激的脾淋巴细胞增殖活性,而双侧海马内微注射脂多糖各１μｌ（５０ｎｇ／μｌ）则起抑制作用。切除双侧肾上腺后,海马内注射脑啡肽仍可增强脾淋巴细胞增殖反应。低浓度亮－及甲硫－脑啡肽（１０￣（－１０）,１０￣（－１１）ｍｏｌ／Ｌ）直接作用于体外培养的大鼠脾淋巴细胞,也明显增强ＣｏｎＡ刺激的细胞增殖活性。（２）双侧海马内微量注射脂多糖各１μｌ（５０ｎｇ／μｌ）,于９０ｍｉｎ后用逆转录－聚合酶链反应技术检测到海马结构内ＩＬ－１α基因表达,而海马内甲硫或亮脑啡肽注射３０ｍｉｎ后再给予脂多糖,则未检测到ＩＬ－１αｃＤＮＡ的扩增条带。上述结果表明,海马结构对机体免疫功能的调节中脑啡肽起着重要作用,其机制可能与抑制海马结构ＩＬ－１α基因表达有关。     

电针可促进前脑啡肽原mRNA在大鼠脊髓和延髓的表达：原位杂交研究

本实验室以往的研究表明电针可促进脊髓脑啡肽释放,本研究进一步利用原位杂交方法观察电针后前脑啡肽原mRNA在脊髓和延髓的表达。结果表明电针刺激(2Hz,1-2-3mA,30)后24h同侧脊髓背角前脑啡肽原(PPE)-mRNA阳性细胞数高于对侧。电针后对侧延髓腹内侧网状结构[包括延髓网状巨细胞核(Gi)及其α部(GiA)和Gi的外侧旁核(LPGi)]PPE-mRNA阳性细胞数高于同侧。我们推测电针诱发前脑啡肽原mRNA表达增加可弥补因脑啡肽释放增多而导致脑啡肽前体物质的损失,从而参与针刺镇痛的长期效应。     

内源性脑啡肽与加巴喷丁的脑皮层镇痛机制无关

本研究为探讨加巴喷丁的脑皮层镇痛机制是否与内源性脑啡肽相关．90只小鼠随机分为对照组（C）、假手术组（S）和模型组（M）,各组再按不同给药分为生理盐水（P）和加巴喷丁（G）两个亚组（最终分为C＋P,C＋G,S＋P,S＋G,M＋P,M＋G6组）．部分坐骨神经结扎2周后开始腹腔给药,给药4周后留取大脑皮层．通过手术侧足机械痛阈和热痛敏的改变来确认神经病理性疼痛模型成功及观察加巴喷丁的疗效．选择S＋P,M＋P和M＋G3组做前脑啡肽原（ppENK）基因表达差异检测,并用Real—Time PCR验证,同时ELISA法测定脑皮层组织脑啡肽含量．M＋P与S＋P相比较、M＋G和M＋P相比较,均未见ppENK基因表达有显著性差异;S＋P,S＋G,M＋P和M＋G组间脑皮层组织中脑啡肽含量也无显著性差异．研究表明,内源性脑啡肽可能与加巴喷丁的脑皮层镇痛机制无关．     

交感神经系统内递质共存及其相互作用

在外周交感神经系统内,神经递质或神经肽类物质主要存在于大、小囊泡内;递质共存的现象在交感神经内不断得以发现．去甲肾上腺素和乙酰胆碱、神经肽Y、脑啡肽、P物质、血管活性肠肽、生长抑素、神经降压素、降钙素基因相关肽等物质共存的证实,扩大了交感神经递质的调节范围,递质之间网络式的相互调节作用有着重要的生理意义。     

交感神经系统内的递质共存及其相互作用

在外周交感神经系统内;神经递质或神经肽类物质主要存在于大、小囊泡内;递质共存的现象在交感神经内不断得以发现,去甲肾上腺素和乙酰胆碱、神经肽Y、脑啡肽、P物质、血管活性肠肽、生长抑素、神经降压素、降钙素基因相关肽等物质共存的证实,扩大了交感神经递质的调节范围,递质之间网络式的相互调节作用有着重要的生理意义。     

在体内有内源性抗鸦片物质吗?

自从1975年Hughes从脑内发现有内源性鸦片样物质以来,有许多作者相继报道从体内分离出许多具有吗啡或鸦片样活性的物质,主要有亮啡肽、甲啡肽,β-内啡肽,α-内啡肽,γ-内啡肽、垂体吗啡样物质,快泳动性吗啡样物质和非肽类的吗啡样物质等近10种。它们总称为内啡素(endorphins)或内源性鸦片样物质(endogenous opiate like substances,OLS)。     

刺激兔下丘脑防御反应区时脑脊液内亮啡肽免疫活性增强

用放射免疫测定法观察到,电刺激兔下丘脑防御反应区时,中脑导水管末端的脑脊液样品内亮啡肽免疫活性明显增强。结果提示,下丘脑防御反应区兴奋时脑内亮啡肽释放增多。