泡沫病毒载体的研究进展

以逆转录病毒为载体的基因转移系统在80年代得到了一定的发展,迄今用于研究和临床基因治疗的载体种类也日渐增加,应用也逐渐广泛,其中应用最广的是腺病毒和逆转录病毒载体.     

人类泡沫逆转录病毒（Human Spume Retrovirus,HSRV）基因组片段克隆

根据ｐＨＳＲＶ１３全基因组图谱和ｐＢＲＥ３２２质粒载体上限制酶切位点的性质,利用分子克隆技术,使ｐＨＳＲＶ１３质粒上的ｂｅｌ１基因缺失突变并重新构建质粒载体ｐＨＳＲＶ１３－ＢＲ３２２,最后克隆到１株含有目的基因组片段的重组质粒。     

泡沫病毒的基因内部启动子

泡沫病毒的基因内部启动子刘佳建耿运琪（南开大学生命科学学院,天津３０００７１）关键词泡沫病毒内部启动子反式激活因子泡沫病毒在分类上属反转录病毒科（Ｒｅｔｒｏｖｉｒｉｄａｅ）的泡沫病毒属（Ｓｐｕｍａｖｉｒｕｓ）,因其感染细胞后可诱导产生类似泡沫的大量空...     

泡沫病毒基因组结构及其调节蛋白的功能

泡沫病毒（Ｓｐｕｍａｖｉｒｕｓｅｓ）传统上被分为反转录病毒科的泡沫病毒亚科,按１９９１年Ｃｕｌｅｎ的分类系统,泡沫病毒属复杂反转录病毒中的一个属。对泡沫病毒的研究远滞后于其它反转录病毒,这主要是由于至今未能确定其致病性。泡沫病毒可能与神经性病变相关的...     

牛泡沫病毒中国株感染兔的研究

将牛泡沫病毒(BFV3026)感染的细胞经耳缘静脉注射兔子,并以正常细胞注射的兔为对照。1年后处死,病毒挽救实验及PCR检测显示：兔经一次注射即可被BFV3026感染,病毒广泛分布于感染兔的多种脏器中,通过共培养可从感染兔血、肝、脾、肺、肾中拯救出相应感染性病毒颗粒,并在脑、骨髓、心、胰、肠系膜中检到高拷贝BFV原病毒DNA存在。同时,血清学检测表明：感染兔在接受注射一个月后即产生高滴度抗病毒蛋白抗体,并维持该滴度水平直至实验终止,兔未表现任何可观病变。     

泡沫逆转录病毒Bet蛋白的研究进展

泡沫逆转录病毒能长期感染哺乳动物宿主而不引发疾病,这一特点引起研究者们极大兴趣。有研究发现,泡沫逆转录病毒的辅助蛋白Bet不仅能调控病毒的基因表达和感染周期,对病毒慢性感染的建立有重要作用;还能阻止宿主细胞防御因子APOBEC3对病毒复制产生干扰,与病毒持续性感染的维持有关。为了阐明Bet在病毒复制和感染时所发挥的作用,本文对近年来有关Bet蛋白功能的研究进行了分析和总结。     

猴泡沫病毒间接免疫荧光检测方法的建立及初步应用

目的建立检测血清中猴泡沫病毒（SFV）抗体的间接免疫荧光方法,为检测实验用猴群中SFV的感染情况提供参考依据。方法用SFV-1病毒感染BHK-21细胞,待50%细胞出现病变时,用胰蛋白酶消化细胞后以2×107/mL浓度40μL的细胞滴到10孔镀膜的玻片上,丙酮固定。利用制备的抗原片通过间接免疫荧光法对34份猴血清标本进行检测。结果建立了检测SFV抗体的间接免疫荧光染色方法,SFV抗体阳性19例,15例血清检测为阴性。结论本方法具有良好的特异性,可作为SFV检测的可靠方法。     

聚氨酯泡沫固定化黑曲霉P—6021可同时产果胶酶和澄清果汁

以多孔聚氨酯泡沫（PUF）固定化黑曲霉P－6021可以实现菌丝体的摇瓶重复间歇发酵产酶,重复5个批次,菌体数目增多,产酶量上升,发酵液酶活达到664u/ml,以PUF固定化黑曲霉P－6021进行了同时产果胶酶和澄清苹果汁试验,以浑浊苹果汁基质发酵12h后,产酶量可达到643u/ml,苹果汁基本澄清,透光率提高,粘度降低,表明固定化黑曲霉可以同时产果胶酶和澄清苹果汁,实现产酶与澄清过程的耦合。     

牛泡沫病毒两类启动子活性的比较和机制探讨

牛泡沫病毒 (Ｂｏｖｉｎｅｆｏａｍｙｖｉｒｕｓ,ＢＦＶ)属反转录病毒科泡沫病毒属。其基因组两端为长末端重复序列 (Ｌｏｎｇｔｅｒｍｉｎａｌｒｅｐｅａｔ,ＬＴＲ) ,中间部分除ｇａｇ、ｐｏｌ、ｅｎｖ三个结构基因外 ,还有两个重叠的读码框ＯＲＦ 1、2 ,起始于ｅｎｖ基因 3′端 ,终止于 3′ＬＴＲ ,编码Ｂｏｒｆ 1、Ｂｏｒｆ 2等多种调节蛋白[1～ 3 ] 。其中Ｂｏｒｆ 1为ＢＦＶ的反式激活因子 ,可显著激活ＢＦＶＬＴＲ启动子起始的基因表达。近年来 ,在泡沫病毒家族成员人泡沫病毒 (Ｈｕｍａｎｆｏａｍｙｖｉｒｕｓ,ＨＦＶ)和猴泡沫病毒(…     

牛泡沫病毒BFV3026细胞感染性的确立及包装细胞系的建立

分别将牛泡沫病毒BFV3026接种于胎牛肺细咆(FBL）、牛肺细咆系(BL12)、新生牛肾细胞(NBK)、兔肺细胞(RL)、人乳腺癌上皮细咆(MCF)、293T、HeLa、CV-1、CHO等9种细胞,通过对它们及其传代细胞的病变观察-RT—PCR检测,确立BFV3026对这9种细胞的感染。并以BFV3026原病毒DNA为模板,通过PCR构建以pcDNA3．1(-)为载体的gag—pol、env真核表达质粒共转染BL12细胞,经G418持续筛选,获得8个Neo^R细胞克隆RT—PCR及包装实验证实：其中7个细胞克隆能有效行使包装辅助功能。