正常及白血病小鼠白细胞染色质和DNA的酶切分析

 本文应用的核酸酶为DNaseⅡ、微球菌核酸酶与限制性内切核酸酶BstNI、EcoRⅡ、HpaⅡ和MspⅠ,将它们作用于正常小鼠615和可移植性白血病小鼠L7712脾脏白细胞染包质及其DNA,根据酶切电泳谱及水解动力学分析表明:1.白血病小鼠染色质相对正常小鼠染色质易被DNaseⅡ微球菌核酸酶水解;2.白血病小鼠染色质比正常小鼠者易被MspⅠ水解,但其DNA的MspⅠ酶切电泳谱无明显差别;3.白血病小鼠染色质及其DNA较正常小鼠染色质及其DNA易被EcoRⅡ水解。这些观察说明,白血病小鼠脾脏白细胞染色质有较活跃的构象状态;其染色质DNA的CCATGC区段内有较低的甲基化程度。     

用绿豆芽根做根对矿质离子交换吸附实验效果好

1　促使绿豆生根　在实验前的三四天 ,将绿豆用温水浸泡 1夜 ,再用布料包裹住放入花盆内 ,置于温暖处并早晚各用温水冲 1次。经三四天的时间 ,根长可达 3cm以上 ,可供实验之用。2　将绿豆根染色　剪取 6条绿豆根 ,浸入亚甲基蓝溶液中 ,约 2 min左右 ,根被染成蓝色。然后将根取出用蒸馏水反复冲洗 ,去掉浮色备用。3　对比实验　取两个小烧杯 ,贴上标签。烧杯 1中加入约 5 m L的 Ca Cl2 溶液 ,烧杯 2中加入约 5 m L的蒸馏水。用镊子夹取 3条根放入烧杯 1中 ,夹取另 3条根放入烧杯2中。4　实验结果　小烧杯 1中的溶液在几秒钟内便由无色变成…     

靶向FTL基因的shRNA真核表达载体的构建及鉴定

目的:为了构建铁蛋白轻链(ferritin light chain,FTL)的短发夹小干扰RNA表达载体,并提供进一步研究FTL功能的平台。方法:针对小鼠FTL基因的特异性位点设计并合成特异性长度约65bp的短发夹状小干涉RNA(shRNA)寡核苷酸序列,退火形成双链后将其插入真核表达载体pRNA-U6.1/neo的限制性内切酶HindⅢ和Bam HⅠ之间中,构建成FTL基因的干扰载体(FTL shRNA)。经测序鉴定正确后,用lipofectamineTM2000将FTL shRNA及其对照空载体pRNA-U6.1/neo分别转染到小鼠腹腔单核巨噬细胞(RAW264.7)中,提取蛋白后利用Western blot技术检测细胞中FTL蛋白的表达。结果:得到与预期目的片段大小相似的重组载体,测序结果显示所构建的小鼠FTL shRNA质粒序列正确。细胞内的FTL表达被FTL shRNA成功干扰,效率高达80%。结论:实验成功构建了小鼠FTL基因的短发夹小RNA干扰表达载体FTL shRNA。     

嗜肺巴氏杆菌在实验大鼠和小鼠中的传染性研究

目的观察不同来源的嗜肺巴氏杆菌在实验大鼠和小鼠中的传染性.方法取源于野鼠、实验大鼠和小鼠的嗜肺巴氏杆菌3株,对30只受试大鼠和小鼠进行交叉人工感染,并于感染后不同时期取咽拭子分离培养,对感染前后菌株,应用RAPD-PCR、SDS-PAGE和Western blot进行基因型、蛋白和抗原成份比较,以及生物学特性的比较.结果受试实验动物对3株嗜肺巴氏杆菌均易感,被接种的动物能稳定携带嗜肺巴氏杆菌直到试验结束,重新分离的嗜肺巴氏杆菌在生物学特性、蛋白成份、抗原性和基因型方面无明显改变.结论同一株嗜肺巴氏杆菌能在实验大鼠和小鼠中相互传染.     

观察植物细胞有丝分裂实验的两点改进

1.切取洋葱根尖3-5毫米,用刀片纵切成数片,这样便于把根尖压成单层细胞.2.离析、漂洗、染色均在载玻片上进行,此法不用镊子夹取根尖,避免夹破根尖或染色时找不到根尖.具体方法是:把切好的根尖放人载片中央,滴10%盐酸     

HIV-1感染的小动物模型

在生物医学领域,用小动物建立有关人类免疫系统的病毒感染模型是一个重要的目标,尤其是HIV-1感染的研究。这是因为HIV-1的易感性局限于人类。C.B-17-scid/scid小鼠由于T细胞受体基因和免疫球蛋白基因缺陷性的重新整合导致缺乏成熟的T、B淋巴细胞。现已在scid小鼠身上建立了两种人淋巴细胞chime-ra。第一种已经取得了成功。人胎儿肝脏和胸腺移植到肾囊内,最终在小鼠体内发育成正常的人胸腺组织。这种带人淋巴组织的scid小鼠被确认为scid-hu小鼠,它的胸腺组织易被HIV-1感染。看起来HIV-1的感染局限于新的胸腺组织。另一个人类淋巴组织s…     

原矛头蝮蛇毒对小鼠器官形态的影响

目的:观察原矛头蝮(P.mucrosquamatus)蛇毒对小鼠脏器形态结构的影响,从组织学角度探讨该蛇毒的致病机理。方法:用原矛头蝮攻击小鼠,待小鼠死亡后,立即进行解剖,观察心脏和大血管内部血栓形成情况。取心脏、血管、周围神经、肾脏、肝脏、脾脏和肺,观察外形,并进行石蜡切片,H.E染色观察。用健康小鼠相同器官为对照,比较二者的差异。结果:被原矛头蝮攻击致死小鼠的心脏、肝脏和肺发生了显著收缩;心腔和血管腔被血栓堵塞;在心脏、肝脏和肾脏组织血管中观察到了血栓;脾脏中白细胞显著增多;肺泡收缩,细支气管严重收缩致管腔堵塞;股动脉血管内膜发生了脱落;在股神经中发生了脱髓鞘现象。结论:急性凝血和窒息是导致小鼠死亡的重要原因;原矛头蝮蛇毒兼具血循毒和神经毒的特征;原矛头蝮蛇毒可导致多种脏器内部结构发生改变。     

观察植物下表皮和气孔的好材料--菠菜

我在指导学生实验课中 ,发现菠菜叶是一种观察植物下表皮和气孔的好材料。用菠菜叶制备植物叶下表皮和气孔临时装片的方法步骤如下 :1)准备好洁净的载玻片和盖玻片 ;2 )取洗净的新鲜的菠菜叶 ;3)用左手拇指和食指捏住菠菜叶的尖端 ,然后用右手的拇指和食指捏紧带叶柄的一端斜着向上撕 ,即可得到菠菜叶的下表皮 ;4 )先在载玻片的中央滴 1滴清水 ;5 )用镊子夹取任意一块菠菜叶的下表皮 ,置于载玻片的水滴上 ,用解剖针展平 ,然后用镊子夹取盖玻片盖在水滴上 ;6)将制好的临时装片放在目镜为 10×、物镜为 10×的显微镜下观察 ,可以看到在不规则…     

髓过氧化物酶与大剂量顺铂所致小鼠肝功能变化关系的探讨

目的利用大剂量顺铂（Cisplatin,DDP）诱发小鼠急性肾功能衰竭的动物模型,了解大剂量DDP在引起肾损伤的同时对小鼠肝的毒性作用,探讨髓过氧化物酶（Peroxidase,MPO）与DDP所致小鼠肝功能变化的关系。方法 C57BL/6小鼠50只,雌雄各半,依体重随机分为DDP用药组和生理盐水（NS）对照组。15 mg/kg DDP单次腹腔内注射,等量NS对照。分别取对照组小鼠和DDP用药后6、12、24和48 h小鼠各10只,称重后乙醚麻醉,内眦静脉取血检测肝、肾功能;剖腹取肝、称重、计算肝系数,并取少量肝组织行HE染色、形态学观察;检测血浆和肝组织匀浆中MPO活性,统计学分析。结果大剂量DDP用药后48 h,小鼠出现急性肾功能衰竭。DDP用药后6 h血清谷丙转氨酶（ALT）含量达（91.0±11.3）IU/L,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,随后血清ALT含量持续维持在高水平。DDP用药后各组小鼠肝系数明显升高,光镜下见肝细胞广泛变性水肿,肝小叶中可见点状坏死及炎细胞浸润。DDP用药后6 h,小鼠肝组织匀浆MPO含量显著升高,达（1.54±0.45）U/g,与对照组（0.58±0.28）U/g差异有统计学意义（P〈0.01）,随后MPO含量降至正常水平;DDP用药后小鼠外周血MPO含量缓慢增高,用药后48 h达（12.78±2.78）U/L,与对照组（8.06±1.89）U/L比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论大剂量DDP在诱发小鼠急性肾功能衰竭的同时还可引起小鼠急性肝细胞的破坏,其发生可能与肝组织内白细胞的激活及MPO的释放有关。     

乌贼墨黑色素对小鼠脏器系数的影响及排铅效果的研究

本文研究了乌贼墨黑色素对小鼠脏器系数的影响以及对铅中毒小鼠的排铅效果,采用腹腔注射醋酸铅溶液建立铅中毒小鼠实验模型,对铅中毒小鼠进行乌贼墨黑色素灌胃治疗,24 h后取眼球血,断颈处死并取肝脏及脑组织,用电感耦合等电子体发射光谱(ICP-AES)测定小鼠血液、肝脏以及脑组织中的铅含量。结果表明,乌贼墨黑色素对小鼠肝脏和脑的脏器系数无显著影响;小鼠染铅30 min后,用乌贼墨黑色素灌胃1次进行治疗,治疗组小鼠的肝、血液中的铅含量与铅模型组相比差异极显著(P0.01),脑铅下降不明显。小鼠染铅24 h后,用乌贼墨黑色素灌胃1次进行治疗,治疗组小鼠的肝、血液中的铅含量与铅模型组相比差异极显著(P0.01),脑铅下降差异显著(P0.05)。乌贼墨黑色素对24 h内铅中毒小鼠有显著的排铅效果。     

乌贼墨黑色素对小鼠脏器系数的影响及排铅效果的研究北大核心CSCD

本文研究了乌贼墨黑色素对小鼠脏器系数的影响以及对铅中毒小鼠的排铅效果,采用腹腔注射醋酸铅溶液建立铅中毒小鼠实验模型,对铅中毒小鼠进行乌贼墨黑色素灌胃治疗,24 h后取眼球血,断颈处死并取肝脏及脑组织,用电感耦合等电子体发射光谱(ICP-AES)测定小鼠血液、肝脏以及脑组织中的铅含量。结果表明,乌贼墨黑色素对小鼠肝脏和脑的脏器系数无显著影响;小鼠染铅30 min后,用乌贼墨黑色素灌胃1次进行治疗,治疗组小鼠的肝、血液中的铅含量与铅模型组相比差异极显著(P<0.01),脑铅下降不明显。小鼠染铅24 h后,用乌贼墨黑色素灌胃1次进行治疗,治疗组小鼠的肝、血液中的铅含量与铅模型组相比差异极显著(P<0.01),脑铅下降差异显著(P<0.05)。乌贼墨黑色素对24 h内铅中毒小鼠有显著的排铅效果。     

抗草鱼免疫球蛋白单克隆抗体的研究

为了更好地了解鱼类的免疫特性,并为鱼类传染病的诊断提供标准试剂,我们进行了抗草鱼免疫球蛋白单克隆抗体的研究工作。用硫酸铵盐析法及DEAE-纤维素离子交换层析法从草鱼血清中提纯草鱼免疫球蛋白,用提纯的草鱼免疫球蛋白免疫Balb/c小鼠。经三次腹腔接种后,取免疫小鼠的     

SPF小鼠群中绿脓杆菌感染的快速检查法

SPP小鼠及无菌小鼠被绿脓杆菌感染后,无临床症状。但进行医药、生物制品实验时,常影响试验结果。为迅速测出SPF小鼠体内是否被绿脓杆菌感染,我们用噬菌体裂解试验     

IFN α2b抗流感病毒的作用

用流感病毒攻击小鼠建立动物模型,观察了重组干扰素α2b抗流感病毒的作用。小鼠采用滴鼻和腹腔注射途径分别给予40μL干扰素α2b,取40μL致死剂量(LD50)流感病毒攻击小鼠,观察IFNα2b抗流感病毒的效果。结果显示,干扰素可提高小鼠生存率。可见干扰素具有抗流感病毒的作用。     

TCR基因修饰淋巴细胞体内抗肿瘤作用的研究

建立荷人肝癌细胞BEL-7402的SCID小鼠模型,用脂质体介导进行基因转染,流式细胞术检测TCRVβ7.1基因表达,分别以尾静脉注射,肿瘤周围皮下注射以及腹腔注射三种方式给予荷瘤免疫缺陷小鼠(SCID鼠)转染TCRVβ7.1基因的人外周血淋巴细胞,24h后处死小鼠取各组织用免疫组化方法来检测淋巴细胞在小鼠体内的分布的情况.通过检测瘤重、肿瘤体积大小,并计算肿瘤抑制率,观察该基因对SCID荷瘤小鼠的抑瘤作用,为该基因用于肿瘤的临床治疗提供动物实验数据.     

前列腺素介导胸腺素的免疫调节作用

胸腺素具有促T淋巴细胞分化和成熟的功能。它通过什么环节发挥作用呢?近年来,根据国外不少实验研究结果,如:胸腺上皮细胞内前列腺素(PGs)含量增加;胸腺细胞对PGs敏感性增强;PGs可影响T淋巴细胞的分化和成熟;PGE_2同类物可恢复被抑制的小鼠体内的免疫反应;抗PGE血清能抑制细胞免疫反应,等等。有人认为,PGs可能是胸腺素作用的介质。Garaci等为证实上述假设,观察了胸腺素和PGs的关系。他们采用出生4—8周的雄性小鼠,利用放射免疫测定法进行了三步实验。首先,取正常小鼠和去胸腺小鼠的脾细胞,分别和100μg胸腺素片段5(Fr5)孵育,并与加入消炎痛的组对照。5min后,测PGs的释放量。其次,用正常小鼠脾细胞和去胸腺小鼠脾细胞,分别与不同浓度的Fr5孵育,15min后,测PGs的释放量。最后,用3×10~6去胸腺小鼠脾细胞、不     

眼镜蛇毒及其组分C对大鼠实验性肝癌抗癌作用的病理学研究

目的 观察眼镜蛇毒及其组分Ｃ抗小鼠肝癌的病理学改变。方法 采用不同剂量眼镜蛇毒及其抗癌活性组分Ｃ与ＢＡＬＡ／ｃ小鼠腹水型肝癌细胞体外孵育,空白对照组用生理盐水与肝癌细胞孵育,然后取孵育液接种于小鼠前肢腋下,接种后第１０ｄ坏死,解剖取出瘤结,进行病理组织学研究。     

乙酰胆碱在钩吻素己致小鼠中毒死亡中的作用

本文旨在探讨全血乙酰胆碱浓度与钩吻素己致昆明小鼠中毒死亡的关系。给昆明小鼠腹腔注射生理盐水、钩吻素己或不同剂量的氯化乙酰胆碱溶液,并对注射钩吻素己和中剂量氯化乙酰胆碱的小鼠给予阿托品解救。中毒死亡小鼠死后即时取血;存活小鼠在注射药液后20 min处死取血。用试剂盒测定小鼠全血乙酰胆碱浓度与乙酰胆碱酯酶活性,计算各组死亡率并分析其死亡情况。结果显示,相对于生理盐水对照组,腹腔注射半数致死量(0.15 mg/kg)的钩吻素己后,小鼠全血乙酰胆碱酯酶活力降低,全血乙酰胆碱水平升高,但其中死亡小鼠的全血乙酰胆碱浓度显著低于中剂量氯化乙酰胆碱组死亡小鼠的水平,而与中剂量乙酰胆碱组存活小鼠的水平无差异。阿托品可有效解救氯化乙酰胆碱中毒小鼠,但对钩吻素己中毒小鼠的抢救效果不明显。以上结果提示,钩吻素己可引起小鼠全血胆碱酯酶活力下降,乙酰胆碱浓度升高,但体内乙酰胆碱堆积可能并不是钩吻素己致小鼠中毒死亡的主要或唯一原因。     

一种简易植物细胞无丝分裂的观察实验

大蒜用水培法长出幼苗。取幼苗叶鞘内表皮,放入酸酒精中固定0.5—1分钟,用镊子夹至载玻片上摊开,再用0.25％龙胆紫染色2分钟,盖上盖玻片即可镜检。细胞质呈浅蓝色,细胞核为紫蓝色,核仁折光性强。可清晰看到细胞无丝分裂的几种形态:①     

小鼠和兔原代乳腺上皮细胞的培养

目的：对小鼠和兔的原代乳腺上皮细胞进行培养。方法：取小鼠和免的乳腺组织,用加葡萄糖的PBS稀释胶原酶Ⅲ作消化液、分三个阶段进行消化,选择离心后的小细胞团,用含激素的培养液培养。结果：在基本培养液中添加10ng／ml的表皮生长因子和5μg／ml的胰岛素可以使乳腺上皮细胞富集．结论：成功地培养出了小鼠和免的原代乳腺上皮细胞。