有关糖复合物的分级纯化、结构确定、生物活性的几个问题

有关糖复合物的分级纯化、结构确定、生物活性的几个问题张翼伸（东北师范大学生物系,长春１３００２４）关键词糖复合物,多糖,纯化近十多年来,我们一直从事糖复合物的研究工作,主要是确定多糖链的化学结构,包括一级结构与构象,也涉及到化学修饰、生物活性、糖络合...     

人食管鳞状上皮癌糖复合物表达的研究

凝集素可与其相对应的糖复合物特异性结合。在癌症形成过程中细胞表面经历着显著的变化,本文用十种生物素化凝集素即ＵＥＡ－Ｉ、ＲＣＡ－Ｉ、ＤＢＡ、ＰＳＡ、ＰＮＡ、ＢＳＬ、ＬＣＡ、ＷＧＡ、ＣｏｎＡ和ＳＢＡ作为探针,对正常食管上皮和食管鳞状上皮癌进行研究,以确定正常食管上皮和食管鳞状上皮癌中糖复合物的改变,结果发现,ＰＮＡ和ＰＳＡ在正常食管和食管鳞状上皮癌中均无反应,ＲＣＡ－Ｉ、ＤＢＡ、ＢＳＬ、ＬＣＡ、ＣｏｎＡ和ＳＢＡ受体在正常和癌组织中有着特征性变化,ＢＳＬ和ＤＢＡ在食管中无反应,ＬＣＡ、ＳＢＡ和ＲＣＡ－１正常食管和食管鳞状上皮癌中反应方式不同,ＣｏｎＡ和ＷＧＡ则在同一癌组织的不同部位都显示出不同的反应。尽管ＵＥＡ－Ｉ在正常食管和食管鳞状上皮癌均呈阳性反应,但似乎未表现出有意义的变化。上述结果提示食管癌的发生与含α－Ｄ－ＧａｌＮＡｃ（ＤＢＡ和ＳＢＡ）、β－Ｄ－Ｇａｌ／β－Ｎ－ａｃｅｔｙｌ－Ｄ－Ｇａｌａｃｔｏｓａｍｉｎｅ（ＲＣＡ－Ｉ）、α－Ｄ－Ｇｌｃ／α－Ｄ－Ｍａｎ（ＬＣＡ和ＣｏｎＡ）、［β－（１－４）－Ｄ－ＧｌｃＮＡｃ］２／ＮｅｕＮＡｃ（ＷＧＡ）和α－Ｄ－Ｇａｌ（ＢＳＬ）等的糖复合物的改变有较为密切的关系。     

蟋蟀精子表面LCA及ConA结合糖复合物的分布变化

LCA and ConA-binding glycoconjugates on cricket (Teleogryllus emma) sperm surface were detected with fluorescence microscope after FITC labelling for better understanding of the distribution of glycoconjugates during spermatogenesis and spermiogenesis. FITC-LCA and FITC-ConA were bound on the spermatocytes, and their distribution changes in the process of spermiogenesis were observed .In the testis sperm, FITC-LCA and FITC-ConA were mainly bound on the head and neck region. That is different from the mark pattern of spermatophore sperm, in which the nucleus, neck region and front of the tail showed obvious fluorescence mark, especially the acrosome complex and neck region exhibited stronger mark. The mark patterns of FITC-LCA and FITC-ConA were similar,though the former was distinctly clearer than the latter. But a little difference still exists in both of them. For example in the ninth stage of spermatid, FITC-LCA mark is located on the spermatid head and neck region, and FITC-ConA mark on the spermatid head, neck and front of the tail region. When fixed germ cells were treated with PBS instead of lectin solution, or fixed cells were incubated with lectin solution, which have been treated with 0.1 mol/L specific sugar inhibitor, i.e.α-D-mannose for FITC-LCA and FITC-ConA, and α-D-glucose for FITC-ConA, no mark was observed on the cells. Those results indicate that FITC-LCA conjugated glycoconjugates has the α-D- mannose residue, and FITC-ConA conjugated glycoconjugates has the α-D-mannose and α-D-glucose residue. The investigations show that the changes in glycoconjugates distribution of cricket sperm is similar to those of other insects and mammals. The evidence exhibit that a common rule of the glycoconjugates distribution on the sperm surface is followed by most of animal sperm which may relate to the function of sperm physiology.     

蜜环菌糖复合物的糖链降解及其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

目的：对蜜环菌菌索中提取出的水溶性糖复合物糖链进行部分酸降解,从中筛选出对α-葡萄糖苷酶具有抑制活性的片断。方法：通过柱层析等方法对蜜环菌糖复合物进行纯化;按正交表设计酸水解条件,将糖链降解成适宜的片断,从中筛选出最佳水解条件;再进行α-葡萄糖苷酶抑制活性的研究。结果：降解后的糖复合物片断具有α-葡萄糖苷酶抑制活性。结论：结构改造对糖复合物的生物活性有一定的影响。     

短额负蝗卵子发生过程中糖复合物的动态分布

以生物素标记的凝集素(UEA-I、SBA、PNA)为探针,利用凝集素组织化学方法对短额负蝗(Atracto-morphasinensis)卵子发生过程中滤泡细胞和卵母细胞内糖复合物的分布进行了定位研究。结果表明,在卵子发生的各期滤泡细胞和卵母细胞中没有UEA-I受体的表达,SBA和PNA受体以不同的分布模式呈阶段性表达。两者首次出现于卵母细胞生长期,随后PNA受体消失,SBA受体大量表达;在卵黄形成期前期SBA受体和重新出现的PNA受体表达于卵黄颗粒形成部位,卵黄形成期后期两者均为阴性表达;成熟卵子中两种受体又以不同程度重新出现于卵黄膜。两种受体在滤泡细胞内均大量表达。提示,N-乙酰半乳糖胺和半乳糖-β-(1,3)半乳糖胺复合物的修饰和变化与卵母细胞的发育、卵黄物质的形成及滤泡细胞的增殖分化密切相关,卵黄膜上的糖复合物可能与精卵识别有关。     

酸奶中糖肽复合物的分离纯化

对酸奶中的肽类物质进行了提取、纯化和初步分析,认为该肽类成分是一种糖肽复合物。     

胎儿发育过程中食管上皮糖复合物的改变

采用十种生物素化凝集素 U EA- I、 DBA、 PSA、 BSL、 PNA、 L CA、 RCA- I、SBA、 Con A及 WGA分别对 8W、1 4 W、 2 0 W　 2 8W及 32 W的人胎儿食管上皮进行研究 ,以确定胎儿食管上皮在发育过程中凝集素的结合位点以及结合方式随年龄的变化。结果提示 ,BSL、 RCA- I、 WGA的染色强度及特性不受年龄影响 ,而与之相对应 ,U EA - 1在除 2 0 W以外的食管上皮显色 ;含α- D- Glc NAc的糖复合物 (DBA受体 )只在 2 0 W表达 ;含α- D- man/α- D- Glc的糖复合物 (PSA受体 )则只出现于 32 W;Con A受体虽在胎儿食管上皮各年龄组都表现阳性反应 ,但在 2 8W 时受体在上皮各层细胞中的分布方式及染色强度出现了有意义的变化 ,即腔面细胞染色阴性 ,中层细胞染色强阳性 ,基底细胞弱阳性 ,而在其他时间腔面反应强阳性 ,中层中等阳性 ,基底弱阳性 ;PNA、SBA及 L CA在各年龄组均呈阴性反应。这些结果表明 ,在胎儿食管上皮发育过程中存在着多个凝集素结合位点 ,含 α- L- Fucose、 α- D- Gal NAc、α- D- Man/ α- D- Glc残基的糖复合物在分布方式和 /或量上存在着发育相关性改变 ,即糖复合物的改变具有阶段性。总之 ,本实验资料提示 ,胎儿食管上皮在发育过程中表现出不同的结合位点 ,RCA- 、 BSL、 WGA受体似与年龄变     

羊栖菜中褐藻糖胶的组分分离及分析

为了确定羊栖菜褐藻糖胶中的活性组分 ,用分子量结合硫酸化程度的分级方法将其分成不同组分。经热水抽提的羊栖菜多糖 ,将去除褐藻胶、海带淀粉后剩余的褐藻糖胶经过DEAE—Sepharose离子交换色谱柱和Sepharose 4B凝胶层析柱被分成 5个褐藻糖胶组分。 5个组分中硫酸基和岩藻糖近似的分子数量之比分别为 1.863、0 .0 68、1.2 2 9、1.62 9,1.0 10 ;平均分子量分别为 2 .0× 10 4 、2 .2× 10 4 、8.2× 10 4 、2 1.4× 10 4 、32 .0× 10 4 ;百分含量分别为 8.6%、2 2 .9%、4 8.5 %、5 .7%、14.3%。     

糖复合物与肿瘤细胞的诱导分化

糖复合物与肿瘤细胞的诱导分化吴兴中陈惠黎（上海医科大学生化教研组,上海２０００３２）关键词肿瘤细胞糖链变化肿瘤细胞的分化与许多因素有关。分化后的肿瘤细胞,基因型和表型均有显著改变。糖链结构作为细胞识别的分子机制和某些细胞分化标志的结构基础,在肿瘤分化...     

糖蛋白糖链的分析

糖蛋白是蛋白与糖类的共价复合物,结合于蛋白肽链上的糖链具有重要的生物学功能。对糖蛋白上的糖链进行分析,要经过糖链释放、分离不同类型糖链、相对分子质量测定及糖链测序等步骤。本简要介绍糖蛋白糖链分析各步骤的常用方法、各种方法的特点、适用范围等。     

中坝鹅掌叶附子中的生物碱成分

从中坝鹅掌叶附子(Aconitum carmichaeli Debx．)的块根中分离得到6个二萜生物碱,根据波谱方法分别鉴定为：songoramine(1)、次乌头碱(hypaconitine,2)、karakanine(3)、宋果灵(songorine,4)、尼奥宁(neoline,5)、附子灵(fuzline,6)。其中化合物3为首次从该植物的块根中分离鉴定。     

附子多糖FI的分离纯化及部分理化性质研究

白附片经热水抽提、Sevag法脱蛋白、乙醇沉淀、DEAE- C32柱层析分离 ,再通过 Sephadex G- 2 0 0柱层析进一步纯化 ,得到一种纯白色粉末状多糖 ,糖含量为 97% ,平均分子量为 2 .6× 10 5,熔点为 2 70℃。经完全酸水解、薄层层析、红外光谱分析 ,证明为葡聚糖。     

四川江油附子生物碱和新的强心成分研究

从四川江油附子(Aconitum carmichaeli Debx.)的生附片中分离出海帕乌头碱(hypeconitine)、乌头碱(aconitine)、美沙乌头碱(mesaconitine)、尼奥灵(neoline)、卡拉可林(karakoline)、北乌碱(beiwutine)、附子灵(fuziline)、江油乌头碱(jiangyouaconitine)、去氧乌头碱(deoxyaconitine)、附子亭(fuzitine)、新江油乌头碱(neojiangyouaconitine)、宋果灵盐酸盐(songoring.HCl)和尿嘧啶(uracil)。其中新江油乌头碱和附子亭为新化合物;去氧乌头碱、北乌碱、宋果灵盐酸盐和尿嘧啶为本植物中首次发现。尿嘧啶对蟾蜍离体心脏具有明显的加强心肌收缩作用,作用随剂量增加与时间延长而逐渐增强,且不影响心率,认为是一种新型的强心成分,为首次发现。本文对附子的强心、止痛及抗炎的活性及其开发新药加以讨论。     

紫乌头中的二萜生物碱研究

从紫乌头(Aconitum episcopale Levl.)全草中分离出五个二萜生物碱,其中一个为首次从自然界得到,通过光谱分析鉴定为 deacetylbeterophy-lloidine(?),其余四个化合物分别鉴定为 heterophylloidine(?),song-orine(?),talatisamine(?),14-acetyltalatisamine(?),均为首次从该植物中分离得到.     

多根乌头生物碱成分的研究

从新疆产多根乌头AconitumkarakolicumRap.块根中分得五个二萜生物碱,经理化常数测定和光谱分析,分别鉴定为：乌头碱、脱氧乌头碱、新乌碱、准噶尔乌头碱和12-表-欧乌碱。其中12-表-欧乌碱系首次从该植物中获得。     

敦化乌头的二萜生物碱成份

从敦化乌头(Aconitum dunhuaense S.H.Li)的根中分得6个单体二萜生物碱成份,经光谱分析及同标准品对照,鉴定它们分别为乌头碱(aconitine,1)、下乌头碱(hypaconitine,2)、尼奥灵(nepline,3)、去氧乌头碱(3-deoxyaconitine,4)、中乌头碱(mesaconitine,5)和阿康诺辛(aconosine,6)。     

展毛短柄乌头中的一个新二萜生物碱

从展毛短柄乌头(Aconitum brachypodum var.laxiflorum Fletcher et Lauener)根中分离鉴定了五个二萜生物碱,其中四个为已知成分,分别为乌头碱(aconitine)、3-去氧乌头碱(3-deoxyaconitine)、3-乙酰乌头碱(3-acetylaconitine)、雪乌碱(penduline),另一个为新成分,命名为丽鲁碱(laxiconitine),其结构通过光谱分析及化学反应测定如(1)。     

深裂黄草乌二萜生物碱研究

深裂黄草乌(Aconitum vilmorinianum var.altifidum W. T.Wang)又名西南乌头、紫乌头、藤乌,主要分布于云南东北部、贵州西部和四川西部(泸定、天全)海拔2800m的山地。块根可祛风散寒、除湿止痛,民间也用于解乌头中毒。其化学成分未见报道。本文从深裂黄草乌全草中分离鉴定了3个二萜生物碱,一个为C-19骨架类型,两个为C-20骨架类型。其中一个为新化合物,是C-20骨架类型二萜生物碱,命名为深裂黄草乌碱vilmorinianine(Ⅰ),另两个化合物是denudatine(Ⅱ)和deoxyaconitine(Ⅲ),均首次从该植物中得到。