金黄色葡萄球菌耐药基因及新型抗菌药物的研究进展

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus),简称金葡菌,是一种临床常见致病菌,可引起皮肤化脓性感染、肺炎、心包炎、败血症及脓毒血症等多种疾病。目前临床上金黄色葡萄球菌的多重耐药情况已十分严峻,特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的出现,已成为临床抗感染治疗的棘手难题,严重危害人类健康。本文主要介绍金黄色葡萄球菌基因水平的耐药性、新型抗菌药物的研发及临床治疗金黄色葡萄球菌感染三方面的进展,为金黄色葡萄球菌的耐药性研究及耐药菌株的临床有效治疗提供科学依据。     

金黄色葡萄球菌所致肺部感染的耐药特点及其Panton—Valentine杀白细胞素基因的携带状况分析

目的分析金黄色葡萄球菌所致肺部感染的耐药性特点及其Panton—Valentine杀白细胞素基因的携带状况。方法回顾性调查了温州医学院第一附属医院2005年1月至2006年1月医院感染的金黄色葡萄球菌所致肺部感染患者132例,对其体外药敏试验进行分析;并利用多重PCR检测其PVL基因,应用多位点基因序列分型（multilocus sequence typing,MLST）技术对PVL基因阳性的菌株进行序列分型。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA）的SCCmec基因分型采用多重聚合酶链反应。结果致肺部感染的132株金黄色葡萄球菌的耐药现象较为严重,仅对万古霉素、呋喃妥因及复方新诺明等药物的敏感率较高;其中经多重PCR筛选出10株携带PVL基因的金葡菌,全部为MRSA菌株,3株为ST239-SCCⅢ,2株为ST398-SCCmecⅢ,2株为ST398-SCCmecⅣ,ST25-SCCmecⅢ、ST59-SCCmecⅠ和ST88-SCCmecⅢ各1株。结论肺部感染的金黄色葡萄球菌对多种抗生素耐药,呈多重耐药性;其携带PVL基因占一定比例。     

体外诱导耐万古霉素金黄色葡萄球菌及分子机制

【目的】通过前期体外诱导获得耐万古霉素金黄色葡萄球菌,从基因突变方面对万古霉素耐药性菌株进行研究。【方法】通过低浓度万古霉素逐步诱导13株敏感性金黄色葡萄球菌,用琼脂稀释法和E-test法检测所有菌株对万古霉素的耐药性(最低抑菌浓度,MIC),PCR扩增与万古霉素耐药性密切相关的4个重要基因:rpo B、vra S、gra R和gra S,并测序分析,比较诱导前后不同菌株的基因序列。【结果】通过60 d的体外诱导实验,13株对万古霉素敏感性金黄色葡萄球菌中有6株被诱导为中介耐药金黄色葡萄球菌(Vancomycin intermediate Staphylococcus aureus,VISA),7株菌被诱导之后对万古霉素仍处于敏感状态,MIC4 mg/L。检测诱导前后所有菌株的rpo B、vra S、gra R和gra S基因发现:有3株VISA的rpo B基因同时有L466S和H481N的突变,gra S基因同时有R232K的突变。【结论】对万古霉素敏感的金黄色葡萄球菌经过较长时间的体外诱导可发展为VISA。在已检测的重要基因中,rpo B和gra S的突变对耐药性的发展很可能起关键作用,而vra S和gra R对这一过程没有显著影响。     

2008-2010年舟山某院金黄色葡萄球菌的分布及耐药性变迁

目的 分析舟山医院三年来金黄色葡萄球菌分布及耐药性变迁,并对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)与甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)的耐药性差异做对比.方法 用ATB Expression半自动微生物分析仪进行菌株鉴定及药敏试验,用K-B法测红霉素、克林霉素、头孢西丁、苯唑西林直径,比较耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)与甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)的耐药性差异.结果 金黄色葡萄球菌对苯唑西林、庆大霉素、红霉素、四环素和克林霉素的耐药率有上升的趋势;MRSA对苯唑西林、庆大霉素、复方新诺明、克林霉素、红霉素、青霉素、喹奴普汀-达福普汀、利福平和四环素的耐药率都明显高于MSSA的耐药率,二者间差异有统计学意义(P＜0.01),D-试验阳性71株,占72.45％.结论 金黄色葡萄球菌的耐药性逐渐升高,特别是对MRSA应引起临床的重视,检测克林霉素诱导型耐药具有重要的临床应用价值.     

克林霉素诱导试验在金黄色葡萄球菌药敏检测中的应用CSCD

目的 研究金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S. aureus)对克林霉素的诱导型耐药情况,为临床合理用药提供依据。方法 采用VITEK-2 Compact微生物分析系统对临床分离的S. aureus菌株进行鉴定和药物敏感性测定。采用微量肉汤稀释法检测诱导型克林霉素耐药情况。结果共分离得到428株S. aureus,其中耐甲氧西林S. aureus(MRSA)占23.13%(99/428),甲氧西林敏感S. aureus(MSSA)占76.87%(329/428)。对红霉素耐药、克林霉素敏感的S. aureus有237株,其中克林霉素诱导试验阳性174株,占73.41%。结论 S. aureus克林霉素诱导型耐药发生率较高,临床微生物试验室应加强对葡萄球菌的克林霉素诱导耐药检测,以指导临床合理选用抗菌药物。     

mecA基因PCR扩增法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的 应用mecA基因PCR扩增法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin resistant staphylococcus aureus,MRSA）。方法 临床分离的70株金黄色葡萄球菌,应用mecA基因PCR扩增法鉴定MRSA,并与苯唑西林纸片扩散法进行比较。结果 70株金黄色葡萄球菌用PCR扩增法和纸片扩散法有6株鉴定有差异,4株。mecA基因阳性而纸片扩散法鉴定为敏感,1株mecA基因阳性纸片扩散法鉴定为临界耐药,1株mecA基因阴性却表现为苯唑西林耐药,2种方法符合率为91．43％。结论 mecA基因PCR扩增法可以准确、快速判定MRSA,特别是对隐匿型或低水平耐药菌株的检出有重要的价值。     

Complete genome sequence of methicillin-sensitive Staphylococcus aureus containing a heterogeneic staphylococcal cassette chromosome element

Staphylococcus aureus is a common human bacterium that sometimes becomes pathogenic,causing serious infections.A key feature of S.aureus is its ability to acquire resistance to antibiotics.The presence of the staphylococcal cassette chromosome(SCC) element in serotypes of S.aureus has been confirmed using multiplex PCR assays.The SCC element is the only vector known to carry the mecA gene,which encodes methicillin resistance in S.aureus infections.Here,we report the genome sequence of a novel methicillin-sensitive S.aureus(MSSA) strain:SCC-like MSSA463.This strain was originally erroneously serotyped as methicillin-resistant S.aureus in a clinical laboratory using multiplex PCR methods.We sequenced the genome of SCC-like MSSA463 using pyrosequencing techniques and compared it with known genome sequences of other S.aureus isolates.An open reading frame(CZ049;AB037671) was identified downstream of attL and attR inverted repeat sequences.Our results suggest that a lateral gene transfer occurred between S.aureus and other organisms,partially changing S.aureus infectivity.We propose that attL and attR inverted repeats in S.aureus serve as frequent insertion sites for exogenous genes.     

MRSA中mecA及femB基因的检测与耐药相关性

研究femB、mecA基因在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中的表达与耐药的关系.运用PCR对MRSA的femB、mecA基因进行检测,MRSA耐药检测采用头孢西丁纸片法.40 株金黄色葡萄球菌(下简称金葡菌)通过头孢西丁纸片法,检出 30 株耐头孢西丁的菌株,通过PCR检测这 40 株金葡菌mecA基因,30 株MRSA全部为阳性, femB基因在 30 株MRSA中全部表达,而甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)的未表达.结果可见,PCR能快速准确地鉴定MRSA, mecA基因是MRSA的耐药基因,femB基因是MRSA的耐药相关基因.     

性病患者金黄色葡萄球菌感染耐药性调查

目的：分析和探讨性病后泌尿生殖系统金黄色葡萄球菌及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染及其对各类抗生素的耐药性,以协助指导临床合理用药。方法：采用常规培养鉴定方法和1999年美国NCCLS药敏试验纸片扩散法检测泌尿生殖系标本中金黄色葡萄球菌、MRSA分离率及其对抗生素的敏感性。结果：427例标本共分离出金黄色葡萄球菌236株,其中MRSA占43．6％。金黄色葡萄球菌对常用16种抗生素的耐药率小于20％有万古霉素、呋喃坦啶、阿米卡星、利福平。MRSA对上述外的抗生素均有不同程度的耐药,且耐药性均高于MRSS．呈多重耐药。结论：金黄色葡萄球菌在性病泌尿系统感染占首位,这些菌株对各类抗生素有较高的耐药性,且呈多重耐药．应密切关注MRSA流行和播散。     

金黄色葡萄球菌的耐药性分析及基因分型研究

目的通过分析上海地区院内分离金黄色葡萄球菌的药敏谱型及对耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）进行基因谱型的研究,了解金黄色葡萄球菌的院内流行状况。方法对临床分离出的43株金黄色葡萄球菌进行药敏试验和SCCmec基因盒的多重PCR检测,并将结果整合后用MEGA3．1软件分析其进化相关关系。结果药敏结果显示43株金葡菌对青霉素和甲氧西林的耐药率最高。甲氧西林的耐药率达到62．8％。MecA阳性菌株SCCmec的分型显示均为Ⅱ型或Ⅲ型,且所占比例相近,未见Ⅰ型和Ⅳ型。进化树分析发现了在同一医院中亲缘关系相近的菌株,为院内感染流行株。结论MecA基因介导的MRSA在分离菌株中所占比例高,存在院内感染爆发性流行。     

MRSA筛检培养基的研究进展

自从1961年英国学者JEVONS首次报道耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MR-SA）以来,MRSA感染日益增多,现已成为全球医院感染和社区获得性感染的重要病原菌之一。MRSA具有多重耐药性,且近年已有万古霉素敏感性减低或耐药菌株的报道;     

西安市MRSA 耐消毒剂基因qacA/B 的检测

目的:了解西安市三甲综合医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)qacA/B基因的携带情况,以便掌握其对消毒剂的耐药情况。方法:收集临床分离的152株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,采用聚合酶链反应检测qacA/B基因,并将qacA/B基因扩增产物进行测序,测序结果进行比对。结果:152株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中有11株检出qacA/B阳性,qacA/B携带率7.2%;测序结果比对发现,4株qacA的基因编码序列同一位点均有一个碱基发生突变(C→T),苏氨酸突变为异亮氨酸。结论:该地区临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中qacA/B携带率相对较低,但也存在抵抗消毒剂的风险,临床应加强消毒剂使用的管理,阻止MRSA的传播,减少感染的发生。     

2016-2017年宁夏地区牛源金黄色葡萄球菌的全基因组分析

[目的] 了解宁夏地区奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,SA）代表菌株的基因组序列基本特征,进一步探究其耐药基因型、毒力及进化关系,为兽医临床防治提供理论依据。[方法] 采用纸片法对97株金黄色葡萄球菌临床分离株进行抗菌药物敏感性试验,同时进行葡萄球菌蛋白A（Staphylococcus aureus protein A,spa）分型、多位点序列分型（multilocus sequence typing,MLST）,根据分型结果选取16株代表菌株进行全基因组测序,并对获得的测序序列进行处理分析。[结果] 药敏试验结果显示97株分离株对18种抗菌药物存在不同程度的耐药,其中9株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistantStaphylococcus aureus,MRSA）对青霉素、氨苄西林、苯唑西林、头孢噻呋、磺胺异噁唑、红霉素、庆大霉素和克林霉素等8种抗菌药物完全耐药,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（methicillin-sensitiveStaphylococcus aureus,MSSA）菌株对青霉素、氨苄西林、磺胺异噁唑耐药率较高。耐药基因数据库（antibiotic resistance genes database,ARDB）注释分析显示16株代表菌株共携带21种耐药基因,其中norA、tet38、bacA、mepA的携带率较高,与药敏试验结果具有一定的相关性。毒力基因数据库（virulence factors of pathogenic bacteria,VFDB）注释分析显示所有菌株携带多种与粘附、宿主免疫逃逸、分泌、胞外酶编码、铁摄取等疾病相关的毒力基因,MRSA菌株均携带较多毒力因子,MSSA菌株携带毒力因子数目不等。基因岛预测结果显示16株代表菌株存在不同数量的基因岛且MRSA菌株携带基因岛数目及毒力基因岛较多,但耐药基因岛数目与MSSA差异不明显。SNP分析结果显示部分分离株同源性较高,同源性较高的两株MRSA的全基因组基本序列特征差异较小,携带的耐药、毒力基因情况相似。[结论] 宁夏地区牛源SA分离株耐药性情况严重且具有较高的毒力水平,本研究为家畜相关MRSA（livestock-associated MRSA,LA-MRSA）与MSSA基因组序列信息的比较分析及宁夏地区SA感染的临床防控提供参考依据。     

杭州地区2012～2018年耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子流行病学特征及其变化趋势

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)是威胁全球的公共卫生问题,给社会和患者造成严重的安全威胁,因此明确MRSA耐药性和时空分布的多态性对于其感染的诊治和防控至关重要。本研究通过收集本院162株MRSA菌株,将所有菌株根据标准区分为社区获得性(community-associated) MRSA (CA-MRSA)和医院获得性(hospital-associated) MRSA (HA-MRSA),利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)测定MRSA菌株的多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST),葡萄球菌盒式染色体序列(staphylococcal chromosome cassette mec,SCCmec)、葡萄球菌A蛋白(staphylococcal protein A,spa)基因多态性,以及杀白细胞毒素(Panton-Valentine leucocidin,PVL),分析了杭州地区不同年份(2012～2018年...     

银白色葡萄球菌的发现、分布与致病性

银白色葡萄球菌(Staphylococcus argenteus)是金黄色葡萄球菌(S.aureus)的近缘新种,于2015年正式被鉴定、命名.在此之前,银白色葡萄球菌一直被认为是金黄色葡萄球菌种内的一个远源支系.该物种绝大多数菌株分离自人体,基因组上含有大量与金黄色葡萄球菌同源的毒力基因,可导致与金黄色葡萄球菌类似的...     

携带TSST-1和PVL基因的金黄色葡萄球菌的耐药特点、分布特征及与致病性的关系

目的:探讨携带中毒休克综合征毒素-1(TSST-1)和杀白细胞毒素(PVL)基因的金黄色葡萄球菌的耐药特点、分布特征及其与致病性的关系。方法:收集金黄色葡萄球菌临床分离菌株93株,采用聚合酶链反应(PCR)检测TSST-1基因和PVL基因,采用琼脂扩散法检测金黄色葡萄球菌菌株对青霉素(PEN)、苯唑西林(OXA)、头孢噻吩(CEF)、氨苄西林(AMP)、头孢噻肟(CTX)、阿莫西林/克拉维酸(AMC)、亚胺培南(IPM)、克拉霉素(CLR)、万古霉素(VAN)、环丙沙星(CIP)、庆大霉素(GM)、左氧氟沙星(LVX)和利福平(RA)13种抗菌药物的耐药性。结果:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)占总数的88.2%,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)占总数的11.8%。TSST-1+菌株在MRSA、MSSA中分别占12.2%、0,差异无统计学意义(P0.05);PVL+菌株在MRSA、MSSA中分别占40.2%、9.1%,差异有统计学意义(P0.05)。MRSA存在明显的耐药性,且表现出多药耐药性,而携带TSST-1与PVL基因的MRSA耐药性更严重。结论:MRSA在金黄色葡萄球菌中的分离率高,耐药性严重,携带TSST-1与PVL基因的MRSA耐药性与致病力增加。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及其肠毒素的检测和耐药性分析

目的评价乳胶结合试验检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)及其肠毒素(SE),并进行耐药性分析.方法收集130株金黄色葡萄球菌临床分离株,通过药敏试验将其分为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA),用反向间接血凝试验(RPHA)检测金黄色葡萄球菌肠毒素.结果67株MR-SA产肠毒素,19株MSSA产肠毒素,MRSA产肠毒素率为100%,MSSA产肠毒素率为30%.结论实验室应重视金黄色葡萄球菌肠毒素的检测.     

金黄色葡萄球菌对碘伏、乙醇、高铁酸钾和紫外线的抗性

目的了解临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin resistant Staphylococcus aureus,MR-SA）、甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌（methicillin sensitive Staphylococcus aureus,MSSA）及金黄色葡萄球菌CMCC（B）26003对碘伏、乙醇医院常用消毒剂及紫外线的抗性。方法以临床连续收集的67株金黄色葡萄球菌为实验菌株。测定碘伏、乙醇、高铁酸钾对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）、甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌（MSSA）和金黄色葡萄球菌CMCC（B）26003作用1、2min后的最小抑菌浓度（MBC）及紫外线作用不同时间后的杀菌试验,观察其对碘伏、乙醇、高铁酸钾及紫外线抗性的变化趋势。结果碘伏对MRSA的MBC明显高于MSSA及CMCC（B）26003,而乙醇、高铁酸钾对3种菌的最小抑菌浓度均相近,3种菌对紫外线抗性相近。结论在正常使用浓度范围内碘伏、乙醇、高铁酸钾对金黄色葡萄菌中无论是MRSA、MSSA都有很好的灭菌作用,且乙醇作用时间越长,抑菌效果越显著。紫外线在作用75min以上时,3种菌全部不能存活。     

金黄色葡萄球菌病防治研究进展

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus, SA)被认为是最常见的食源性致病菌之一,引起人畜的感染性疾病,导致皮肤、软组织和血液感染,引发脓毒症和中毒性休克综合征。随着抗生素的滥用,金黄色葡萄球菌的耐药性逐渐增强,导致耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistant Staphylococcus aureus, MRSA)的出现,并且在全球范围内散播,严重危害公共卫生安全。目前亟需有效控制SA感染的新疗法,因此本文对金黄色葡萄球菌防治技术的研究进展进行综述,并对其防治前景进行了分析,以期对金黄色葡萄球菌尤其是MRSA的控制提供理论指导。     

金黄色葡萄球菌D试验和耐药性分析

目的 了解本地区金黄色葡萄球菌中红霉素对克林霉素诱导耐药表型及其对常用抗菌药物的耐药性.方法 用K-B琼脂扩散法检测耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)及双纸片法(D试验)检测红霉素对克林霉素诱导耐药表型,用VITEK 2 Compact进行菌株鉴定和药敏试验.结果 156株金黄色葡萄球菌中MRSA有51株,占32.7％.红霉素对克林霉素诱导耐药共29株,占18.6％,其中MRSA有10株,甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MRSS)有19株.金黄色葡萄球菌对多种抗菌药物具有不同的耐药性,对青霉素的耐药性超过95％,对万古霉素、奎努普汀/达福普汀、利奈唑烷和替加环素敏感.结论 临床微生物实验室应加强对金黄色葡萄球菌中克林霉素诱导耐药的检测,临床治疗中也应加强抗菌药物的合理应用以防多耐药菌株的产生.