豚鼠胆囊SP免疫组织化学反应特点及电镜观察

研究采用ABC免疫组化方法及电镜观察发现;豚鼠胆囊含有SP免疫反应的神经元,神经纤维及肥大细胞,这些神经纤维束是被神经膜细胞完全或不完全包裹的无髓神经纤维。其神经纤维内含有的突触小泡形态大小不一。电镜下分可为3种类型;（1）以小型无芯小泡为主以及少量大型有芯小泡。（2）以小型有芯小泡为主以及少量无芯小泡和大型有芯小泡。（3）以大型有芯小泡为主以及少量小型无芯小泡。用SP免疫电镜组化方法观察。豚鼠胆囊的SP免疫反应阳性神经纤维内散在分布的突触小泡多为第3种。但在血管,淋巴管周围SP免疫反应阳性神经纤维内的突触小泡多为小型有芯小泡,胆囊除了受肾上腺素能神经支配外,尚受SP等肽能神经的支配。本研究对豚鼠胆囊SP免疫组织化学反应阳性神经纤维分布特点及神经纤维内突触小泡的超微结构特点进行了研究。     

地塞米松对哮喘豚鼠肺内VIP分布的影响

为探讨哮喘豚鼠肺内血管活性肠肽（ＶＩＰ）的分布及地塞米松对其分布的影响,将豚鼠随机分成哮喘组、地塞米松组和对照组三组,采用兔抗ＶＩＰ多克隆血清,免疫组织化学ＡＢＣ法和葡萄糖氧化酶－ＤＡＢ－镍染色技术,发现对照豚鼠肺内各级气道壁均可见ＶＩＰ免疫反应（ＶＩＰ－ＩＲ）阳性纤维分布。在平滑肌层中,纤维成束走行,且有较多分枝;而在基底膜和气道上皮内,纤维成单根行走。随气道口径的变小,纤维分布密度也逐渐变小。哮喘豚鼠肺内ＶＩＰ－ＩＲ消失。地塞米松处理后使ＶＩＰ－ＩＲ部分恢复。上述结果提示,豚鼠经反复抗原攻击后,肺内ＶＩＰ－ＩＲ阳性纤维消失,这在实验性哮喘的发生过程中可能起一定作用。     

P物质、脑啡肽在豚鼠耳蜗的分布——免疫组织化学观察

本研究应用免疫组织化学方法系统地观察了P物质(SP)、亮氨酸脑啡肽(L-ENK)在豚鼠耳蜗的分布以及SP、L-ENK免疫反应阳性神经纤维与Corti's器毛细胞之间的关系,结果表明:SP的免疫反应活性(SP-IR)存在于耳蜗螺旋神经节的部分神经细胞及传入神经纤维中,在Corti's器的毛细胞下方亦可见SP免疫反应阳性纤维;L-ENK的免疫反应活性(ENK-IR)存在于耳蜗的传出神经纤维中。节内螺旋束、内螺旋束、隧道螺旋束、横贯纤维均含有大量的L-ENK免疫反应阳性纤维,Cort's器中的L-ENK免疫反应阳性终末与毛细胞之间具有密切接触,由此提示,SP可能为听觉初级传入神经递质之一;L-ENK作为传出神经递质或调质对听觉传入起调控作用。     

侧脑室注射R-α-四基组胺对哮喘豚鼠呼吸道P物质样免疫反应物的影响

目的　应用免疫组织化学方法观察侧脑室注射组胺H3 受体激动剂R α 甲基组胺对哮喘豚鼠气道内P物质样免疫反应物的影响。方法　豚鼠首先腹腔注射卵蛋白致敏 ,给药组给予豚鼠股静脉注射卵蛋白激发哮喘发作后 ,再侧脑室注射组胺H3 受体激动剂R α 甲基组胺 (5 μg)。哮喘组豚鼠在诱发哮喘发作后侧脑室注射等量生理盐水。对照组豚鼠腹腔注射等量生理盐水。经肺动脉灌注 4 %多聚甲醛 ,取气管、支气管和肺组织 ,冰冻切片 ,做P物质免疫组织化学染色。结果　气管、支气管和肺泡间隔内的P物质样免疫反应物在哮喘发作组明显多于对照组 ,在给药后 10min组明显少于哮喘组 ,给药后 2 0min组已接近正常组。结论　经侧脑室途径激动中枢组胺H3 受体后 ,哮喘豚鼠呼吸道内神经源性炎症介质P物质减少 ,提示中枢组胺H3 受体参与对哮喘气道神经源性炎症的调控。     

豚鼠肺内NOS之分布及实验性哮喘对其活性的影响

用组织化学方法对豚鼠肺内一氧化氮合酶（NOS）进行定位研究．并观察正常对照组和支气管哮喘组豚鼠肺内NOS分布及活性变化。结果显示;（1）正常豚鼠各级支气管、肺泡管、肺泡囊上皮细胞均成NOS阳性反应,气道上皮下平滑肌细胞呈NOS阴性反应。（2）哮喘豚鼠各级支气管、肺泡管、肺泡囊上皮细胞呈NOS强阳性反应,气道上皮下平滑肌细胞里NOS阳性反应。（3）两组肺泡上皮细胞均呈NOS阴性反应。（4）两组肺内动,静脉血管内膜均呈NOS阳性反应。结果提示一氧化氮不仅对肺具有一定的生理作用,而且可能参与哮喘的病理生理过程。     

胰岛淀粉样多肽在豚鼠胰腺分布的免疫组织化学研究

本文用免疫组织化学ＡＢＣ法,研究了胰岛淀粉样多肽（Ｉｓｌｅｔａｍｙｌｏｉｄｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ,ＩＡＰＰ或称Ａｍｙｌｉｎ）在豚鼠胰脏的分布,并用邻片免疫组织化学双标记法,观察了ＩＡＰＰ与胰岛素（Ｉｎｓｕｌｉｎ,ＩＮＳ）、生长抑素（ＳｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎＳＳ）的共存关系。结果显示,豚鼠胰岛内绝大多数细胞都呈ＩＡＰＰ阳性免疫反应,在胰外分泌部的腺泡和导管内也散在分布有ＩＡＰＰ免疫反应阳性细胞。多数ＩＡＰＰ免疫反应阳性的细胞都显示ＩＮＳ免疫反应阳性,胰岛内少数ＩＡＰＰ阳性细胞也呈ＳＳ免疫反应阳性。说明ＩＡＰＰ主要分布在豚鼠的胰岛内．但也少量存在于外分泌部。ＩＡＰＰ主要和ＩＮＳ共存于Ｂ细胞内。但也和ＳＳ共存于Ｄ细胞内,提示ＩＡＰＰ可能通过自分泌途径调节ＩＮＳ和ＳＳ的分泌。     

5-羟色胺在豚鼠胰腺分布的免疫组织化学研究

本研究用ABC免疫染色法,结合葡萄糖氧化酶-DAB-硫酸镍铵(Glucose oxidase-DAB-Nickle,GDN)显色技术,在Bouin液固定的常规石蜡切片上,研究了5-羟色胺(5-hydroxytryptamin,5-HT)在豚鼠胰腺内的定位和分布,并用相邻切片免疫双标记,观察了它与胰岛素的共存关系,结果发现,在豚鼠胰腺内,外分泌部均有5-HT免疫反应细胞分布。在胰腺内分泌部(胰岛)5-HT免疫反应细胞分布均匀,大部分胰岛细胞呈阳性5-HT样免疫反应,用相邻薄切片免疫双标记技术证明,胰岛内的5-HT免疫反应细胞主要是B细胞。在胰腺外分泌部,5-HT免疫反应细胞呈单个分散或聚集分布,主要位于腺泡和导管等处,偶见于结缔组织间隔中。本文对研究5-HT在胰腺的生理作用及其机制提供了形态学依据。     

侧脑室注射R-α-甲基组胺对哮喘豚鼠呼吸道P物质样免疫反应物的影响

目的:应用免疫组织化学方法观察侧脑室注射组胺Hs受体激动剂R-α-甲基组胺对哮喘豚鼠气道内P物质样免疫反应物的影响。方法：豚鼠首先腹腔注射卵蛋白致敏,给药组给予豚鼠股静脉注射卵蛋白激发哮喘发作后,再侧脑室注射组胺Hs受体激动剂R-α-甲基组胺(5μg)。哮喘组豚鼠在诱发哮喘发作后侧脑室注射等量生理盐水。对照组豚鼠腹腔注射等量生理盐水。经肺动脉灌注4％多聚甲醛,取气管、支气管和肺组织,冰冻切片,做P物质免疫组织化学染色。结果：气管、支气管和肺泡间隔内的P物质样免疫反应物在哮喘发作组明显多于对照组,在给药后10min组明显少于哮喘组,给药后20min组已接近正常组。结论：经侧脑室途径激动中枢组胺Hs受体后,哮喘豚鼠呼吸道内神经源性炎症介质P物质减少,提示中枢组胺Hs受体参与对哮喘气道神经源性炎症的调控。     

大鼠心脏的雌激素受体免疫组织化学研究

观察雌激素受体在雌性与雄性大鼠心脏中的表达.取大鼠心房与心室组织制作冰冻切片,应用抗雌激素受体单抗进行免疫组织化学(SP法)染色并进行图像分析.结果显示,雌性与雄性大鼠心脏都存在雌激素受体,且受体的表达无性别差异(P＞0.05);心房与心室都存在雌激素受体阳性表达,其表达也无明显差异(P＞0.05);阳性反应见于心肌细胞和成纤维细胞.结果表明,大鼠心脏存在雌激素受体,心房与心室都可能是雌激素的靶组织;心血管疾病的性别差异与雌性、雄性的受体含量无关,可能与生理条件下受体的活性及功能状态有关.     

产毒性大肠杆菌毒素在豚鼠肠道定位的免疫组织化学研究

研究利用免疫组织化学方法对产毒性大肠杆菌（ETEC）感染豚鼠小肠组织中ETEC肠毒素的定位进行了研究,本研究结果表明,发病豚鼠从空肠到回肠明显充血,肿胀,但盲肠,结肠和直肠外观与对照组差别不明显,光镜下见到发病动物肠组织病变主要出现在空肠和回肠,以回肠最为严重。主要病理改变为水肿,炎症细胞浸润和充血,病变部位可以出现在粘膜层,粘膜下层,肌层和浆膜层,取回肠组织切片作免疫组织化学显示ETEC不耐热肠毒素（LT）和耐热肠毒素（ST）、可见回肠粘膜表层,粘膜肌层,肌层及浆膜层均呈LT和ST阳性反应,分布弥漫,空白对照和正常豚鼠回肠组织均呈阴性结果。本研究表明,ETEC主要作用于空肠和回肠,尤其是回肠;回肠组织各层都有病变,且与肠毒素的分布一致,证明毒素的作用并不仅限于肠粘膜细胞。     

雌激素受体在小鼠睾丸表达的免疫组织化学研究

观察雌激素受体在小鼠睾丸的定位与分布。取Ａ／Ｊ系小鼠睾丸, 制备石蜡切片。用间接酶标免疫组织化学和高温处理抗原暴露技术显示雌激素受体的所在部位。睾丸所有Ｌｅｙｄｉｇ 细胞和约２０％ 的肌样细胞的胞核呈雌激素受体阳性反应。睾丸支持细胞和生精细胞为阴性。本研究首次用免疫组织化学技术证明了睾丸中雌激素受体的存在,并定位于Ｌｅｙｄｉｇ 细胞和部分肌样细胞的胞核。为研究雌激素对雄性生殖功能的调节提供了形态学依据。     

八肽胆囊收缩素在猪,大鼠和豚鼠肠道的免疫组织化学定位和分布

实验采用ＡＢＣ免疫组织化学方法研究了八肽胆囊收缩素样免疫反应物质在猪、大鼠和豚鼠肠道的定位与分布,并用相邻切片免疫双标记法观察了它与５－羟色胺的关系,结果表明,ＣＣＫ－８－ＩＲ细胞主要位于肠腺的底部,少数位于绒毛上皮。节段性分布上,在猪可见于从十二指肠到结肠全长的粘膜,大鼠和豚鼠ＣＣＫ－８－ＩＲ细胞则见于从十二指肠至回肠的粘膜,但均以十二指肠密度最高;免疫双标记法证实,在三种动物肠道中均有ＣＣＫ＝     

一氧化氮合酶在豚鼠听觉核团的分布

为了研究一氧化氮合酶（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｔｈａｓｅ,ＮＯＳ）在听觉核团的分布特点,探讨一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｅｄｅ,ＮＯ）在听觉径路中的作用,本文采用ＮＡＤＰＨ硫辛酸胺脱氢酶（ＮＡＤＰＨ－ｄ）组织化学方法,研究了豚鼠听觉核团内ＮＯＳ的分布。结果发现,在各级听觉传入核团,均有ＮＯＳ阳性神经元,而上橄榄复合体ＮＯＳ反应阴性。耳蜗核ＮＯＳ阳性神经元主要集中在耳蜗后腹核,为圆形或椭圆形双极神经元。下丘ＮＯＳ阳性反应神经元位于下丘中央核团,胞体形状和大小不一。内侧膝状体背侧核ＮＯＳ阳性神经元相对集中,多为双极神经元,部分神经元突起很长,散在阳性纤维,部分阳性纤维穿行于内侧膝状体背侧核与内侧膝状体之间。本研究提示,ＮＯ可能是听觉中枢的神经递质或调质,参与声信号传递的调节。     

免疫组织化学方法检测脑红蛋白在大鼠中枢神经系统的分布

目的 探讨脑红蛋白（NGB）基因在中枢神经系统中的分布。方法 用免疫组织化学ABC法研究了NGB蛋白在成年大鼠脑内的分布和定位。结果 NGB蛋白在成年大鼠脑中有非常广泛的表达。其分布区域包括大脑皮质,海马,丘脑和下丘脑的部分核团,脑桥及小脑,NGB免疫反应阳性物质定位于神经元的细胞质。结论 NGB蛋白在大鼠脑中有非常广泛的表达,提示NGB基因在中枢神经系统的功能活动中可能起重要作用。     

抗体形成细胞发育的免疫组织化学研究

本文采用辣根过氧化物酶(HRP)作为抗原,与福氏佐剂一起对雄性豚鼠进行二次免疫,追踪腘淋巴结中抗体形成细胞的发育和分化。在二次免疫后的早期(2—3天),淋巴结的皮质区(特别是淋巴滤泡间区)和髓质区几乎同时出现阳性反应的细胞,主要是淡棕色的小淋巴细胞和中淋巴细胞。至6—9天,这二个区域的阳性细胞数明显增加达到高峰,主要是棕色和棕褐色的前浆细胞和浆细胞,皮质区与髓质区的阳性细胞在某些区域相连接。从12天起这二个区域的阳性细胞开始下降,在27—49天,淋巴结中只存在少数分散的阳性细胞,部分细胞萎缩变形成残留的浆细胞。在同一切片视野中除了看到棕褐色浆细胞和淡棕色小淋巴细胞外,还可以看到包括中淋巴细胞和前浆细胞等过渡型细胞。因此,我们认为浆细胞是分别在皮质区和髓质区由淋巴细胞发育而成。