东北细辛资源的开发与综合利用

东北细辛资源的开发与综合利用张秀（内蒙古商都县小海子乡科技站０１３４５７）一、形态特征东北细辛，别名烟袋锅子，细辛（Ａｓａｒｕｍ，ｈｅｔｅｒｏｔｒｏｐｏｉｄｅｓＦｒ，Ｓｃｈｍｉｄｔ，Ｖａｒ．ｍａｎｄｓｈｕｒｉｃｕｍ（Ｍａｘｉｍ）Ｋｉｔａｇ，属马兜铃科...     

浙江北雁荡山野生蕨类植物资源

对浙江北雁荡山的蕨类植物进行专题研究。浙江乐清北雁荡山共有蕨类植物147种,隶属于37科70属。蕨类植物物种密度为42.13/100 km2。比西双版纳的密度1.71/100 km2要高。远大于全国蕨类植物密度0.027/1 000 km2,是我国东南沿海蕨类植物物种密度较高的地区之一。按照用途分为药用、食用、观赏和其他用途4大类型。并记录本地常用蕨类的俗名,统计草药市场药用蕨类资源销售量,为进一步开发利用蕨类植物资源提出建议。     

本溪老母岭野生北细辛群落的稳定性及草本层优势种种间关系分析

目的：分析老母岭北细辛群落的特征和稳定性及草本优势种种间关系,为北细辛中药资源保护和利用提供理论依据。方法：采用样地调查法和数量生态学方法研究北细辛的群落组成、结构和生态位特征。采用方差比率、Fisher确切检验、Spearman秩相关分析草本层种间关系;采用种间联结系数、Ochiai指数、Dice指数、Jaccard指数确定关联程度。结果：物种多样性：草本层>灌木层>乔木层;北细辛与25个种有生态位重叠;草本层种间总体呈不显著负关联;种对间Fisher确切检验和Spearman秩相关正负比为0.498 0和0.491 7;多数种对呈负联结或弱联结;草本层植物频率不符合Raunkiaer频度定律,群落未达到稳定状态。结论：群落草本层种间联结松散关联性较弱,处于不稳定演替状态,北细辛种群有被取代的风险,应加强对北细辛群落保护,避免过多人为干扰;与北细辛呈较强正关联的植物如荨麻叶龙头草、红花变豆菜、北野豌豆等可作为北细辛适生环境的参考。     

北京山区野生花卉资源及开发利用

本文论述了北京山区的野生花卉资源及其利用现状 ,分析了北京山区开发野生花卉的前景 ,指出北京山区在野生花卉的开发利用中应重点加强五个方面 (野生花卉的引种驯化、确定野生花卉的发展方向、保护性的开发利用野生花卉、加强野生花卉的生化毒性研究、加强野生花卉的育种 )工作 ,使之成为北京地区的主要产业之一。     

北细辛年发育与有效成分动态积累相关规律的研究

对栽培６年生北细辛年不同发育期根系和地上部分所含挥发油及其中甲基丁香酚和黄樟醚含量进行测定。结果表明：挥发油主要存在于根素,积累高峰为花期。甲基丁香酚和黄樟醚在根系中两个高峰期,一个是萌动到花期,另一个是果后营养期;地上部分二者高峰均为花期,以后时期依次减少。     

北细辛丁香酚合成酶基因克隆及其表达分析

丁香酚合成酶(eugenol synthase, EGS)是北细辛(Asarum heterotropoides)主要活性成分甲基丁香酚体内合成途径中的关键酶之一。该研究根据北细辛转录组数据库中筛选到的序列设计特异引物,以RT-PCR法扩增获得北细辛丁香酚合成酶基因(AhEGS)的开放阅读框(ORF)序列,进行了相应的生物信息学分析。同时运用实时定量PCR法分析AhEGS在不同发育时期(幼叶期、花期、果期)和不同组织部位(叶、根茎、根)中的表达谱,并进行原核表达分析。结果显示:(1)AhEGS基因ORF序列长为951 bp,编码316个氨基酸,理论分子量为34.93 kD,等电点为6.19,AhEGS蛋白为亲水性蛋白,无跨膜结构,无信号肽序列;同源序列比对发现,北细辛AhEGS与月季RcEGS(AFQ98278.1)同源性最高。(2)实时定量PCR分析表明,AhEGS基因在北细辛幼叶期的根中表达量最高。(3)成功构建了原核表达载体pET28a-AhEGS-BL21,经pET28a-AhEGS重组子转化E.coli BL21(DE3),SDS-PAGE检测显示在大肠杆菌(Escheric...     

北细辛超临界萃取物挥发性成分的GC-MS分析

采用超临界流体萃取法(SFE)和水蒸气蒸馏法分别对北细辛根及根茎进行提取分离,分别得5.5%SFE萃取物和2.8%挥发油。应用GC-MS分析,从北细辛SFE萃取物中鉴定出7种化学成分,占萃取物总量的72.70%,其中甲基丁香酚为44.62%;从细辛挥发油中鉴定出19种化学成分,占挥发油总量的88.53%,其中甲基丁香酚为43.02%。两种方法有6种成分完全相同,其中致癌物质黄樟油素SFE法比蒸馏法低2.8倍。北细辛根及根茎超临界萃取物与水蒸汽蒸馏挥发油主要成分相同,但其化学组成存在较大差异,提示药效亦不相同。超临界流体萃取法是剂型改革的有效方法之一。     

黑龙江省友谊县野生药用植物资源调查与分析

目的：摸清友谊县野生药用植物资源种类及分布状况。方法：依据第四次全国中药资源普查技术规范,通过野外调查与内业整理等方法对友谊县野生药用植物资源的科属构成、生活型、区系分布、入药部位及药用功效等信息进行统计分析。结果：友谊县共有野生药用植物347种,隶属于77科226属,含重点药用植物56种;主要生活型为多年生草本;属的地理成分以温带分布类型及其变型为主,并有热带成分渗透;入药部位以全草类占比最高,药效以清热药为主。样方内重点调查野生药用植物总蕴藏量为122 851.67 kg。结论：友谊县野生药用植物资源丰富,但各重点调查品种蕴藏量差异较大,应注意科学开发与保护利用。     

北细辛不同部位内生真菌的多样性与抑菌活性

为探讨北细辛(Asarum heterotropoides)不同部位可培养内生真菌种群结构的差异,采用植物组织平板分离法分离北细辛根、根状茎、越冬芽三个部位内生真菌,结合形态学和分子生物学方法鉴定菌株,并系统分析和比较其种类和多样性。从北细辛三个部位共分离得到117株内生真菌,其中97株归属于6纲6目8科9属17种。相似性和多样性分析表明,北细辛不同部位内生真菌的组成结构上存在差异,根部内生真菌的多样性指数最高,越冬芽最低。采用菌饼法检测其抑菌活性,G 3-3、G 4-10-1、G 2-2-1、GZJ 2-12-2对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)有抑制作用,G 3-3、G 2-2-1、GZJ 2-12-2、GZJ 1-6、G 3-8对枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)有抑制作用。GZJ 2-12-2对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌(Escherichia coli)、枯草芽胞杆菌均有抑制作用。     

北细辛内生真菌的分离鉴定及代谢产物的生物活性

采用表面消毒法分别从3种北细辛中分离获得10株形态特征不同的优势内生真菌,经形态学和18S rDNA ITS分子分类学分析鉴定为小丛壳属(Glomerella sp.)、叶点霉属(Phyllosticta sp.)、柄孢壳菌属(Po-dospora sp.)、刺盘孢属(Colletotrichum sp.)和镰孢属(Fusarium sp.)。对北细辛优势内生真菌的发酵产物进行体外抗肿瘤和抗菌活性检测,结果表明:除菌株E3、E4和E10外,其余菌株均有不同程度的抗肿瘤和抗菌活性;镰孢属(Fusarium sp.)菌株E9对A549、MDA-MB-231和PANC-1肿瘤细胞抑制率达75%以上;小丛壳属(Glomerella sp.)菌株E1和叶点霉属(Phyllosticta sp.)菌株E2靶向FabI的抗菌活性较强,抑制率达59%。     

北细辛挥发油对二斑叶螨的毒性及其酶的影响

采用气相/质谱分析了北细辛挥发油的化学成分,并研究了北细辛挥发油对二斑叶螨的薰蒸毒性,以及对谷胱甘肽巯基转移酶(GSTs)与Na+,K+-ATP酶活性的影响。结果表明:有9种含量大于1%的化学成分占北细辛挥发油总量的86.1%,其中甲基丁香酚含量最高(22.9%),其次为黄樟醚(19.8%);北细辛挥发油在8μg/mL时对二斑叶螨的熏蒸毒性最强,其24和48 h的螨死亡率分别为72.6%和100%;以4μg/mL北细辛挥发油薰蒸,在24 h内螨Na+,K+-ATP酶活性下降、GSTs活性升高。本研究结果提示北细辛挥发油有开发为农业用杀螨剂的潜在价值。     

Concordant clines and significant correlation between floral and pollen characters in Asarum heterotropoides var. heterotropoides (Aristolochiaceae)

To examine geographic differentiation in Asarum heterotropoides var. heterotropoides in Hokkaido Is. in the northern Japan, in which two putative cryptic species have been suspected to exist, extensive and detailed morphological research on 794 individuals from 44 populations throughout Hokkaido Is. was performed. Among the characters examined, the angle between and tip shape of the calyx lobes and the supratecta of the pollen grains were significantly correlated and were found in similar geographic clines. Among them, the pollen showed two discrete states in almost distinct distribution. Multidimensional scaling analysis showed that individuals within each of the two pollen types had different trends in flower characters. Consequently, we assumed a cline from south to north on Hokkaido Is. For the causes of the cline, the two hypotheses were proposed, primary geographic differentiation or extensive introgressive hybridization between two distinct geographical species existing in the past.     

红花檵木品种资源的研究

通过全省范围的调查收集 ,建立了红花木的品种资源收集圃 ,开展了品种演化关系和遗传稳定性研究 ,利用二元分类方法 ,根据红花木的叶形、叶色、花期、花色及分枝特性等主要观赏特征 ,划分出嫩叶红、透骨红、双面红 3大类 15个型 4 1个品种     

七叶一枝花种质资源在福建地区的适应性评价

针对南方低山丘陵区种植重楼存在资源混杂及可借鉴文献少等的问题，本文对搜集的120份重楼种质资源在福建省的物候期、病害发生和农艺性状进行观测，并对生长较好的资源采用HPLC法对重楼皂苷进行测定，利用主成分分析和权重评分法开展七叶一枝花种质资源适应性评价。结果表明搜集到的西南地区包括云贵川重楼资源在福建省的生育期不完整，物候期及农艺性状等指标较差，而另外有49份表现良好的为七叶一枝花资源，其中符合《中国药典》重楼皂苷含量的占55%。七叶一枝花资源的病害、农艺性状和重楼皂苷含量存在着广泛的变异，南方低山丘陵区种植重楼应选择当地或相似经纬度及地形地貌地区的七叶一枝花优异资源。七叶一枝花种质资源的评价，是以适应性、有效成分及农艺性状为主成分来进行权重评分，总得分越高则适应性越强。     

应用RAPD标记研究野生荔枝种质资源

应用RAPD方法对海南60份野生荔枝进行基因组多态性分析,20个随机引物共产生165条RAPD带,DNA片段大小在200～1500bp之间,其中121条为多态性带,占总带数的73．3％,并利用遗传距离进行聚类分析。结果表明,60份野生荔枝可归为6类,表明种群存在一定的遗传变异,也为分析野生荔枝群体间及群体内的遗传多样性探索了有效方法。     

浙江省葡萄属野生葡萄资源调查与开发利用研究

浙江是中国野生葡萄属资源分布较广泛、种类较多的地区之一,但对野生葡萄属资源的深入研究和合理开发利用不多。我们在野外调查和民间走访的基础上,结合查询文献资料,分析浙江境内野生葡萄资源的特点,并提出野生葡萄资源创新利用的思路。     

利用ISSR和SRAP标记分析细辛资源遗传多样性与亲缘关系

采用ISSR、SRAP分子标记对61份细辛资源进行遗传多样性与亲缘关系进行分析,结果表明:(1)ISSR标记平均每条引物可获得8.35个DNA片段,多态性比率为86.3%,SRAP标记平均每对引物可获得7.85个DNA片段,多态性比率为86.0%。(2)利用相同数量的引物,ISSR标记揭示的多态性略高于SRAP标记。(3)按照种质间相似系数得出聚类图,可将所有细辛资源分开,在依据ISSR标记聚类分析中,生物学上北细辛和汉城细辛的划分,其作用不如地域来源的效应。SRAP分子标记中,大部分资源的聚类与地域性有关,但有4份汉城细辛优先聚类,SRAP分子标记在揭示基因组差异方面有一定的优势。(4)2种分子标记的聚类图中,来自同一产地的北细辛和汉城细辛优先聚类,其亲缘关系更近。聚类图中未出现北细辛与汉城细辛分别聚类。分子标记分类与传统植物学分类不一致。