相思豆毒素及其两个肽链的分离纯化

相思豆毒素是由A、B两条肽链组成的,是对动物细胞毒性最强的蛋白质之一。A链是毒素的毒性部份;B链是毒素的载体部份,它可将A链转运至靶细胞而杀死细胞。本文报道我们提取制备相思豆毒素及其A、B链的方法步骤,以及如何分析鉴定其各个组份。方法上有所改进。     

丝氨酸蛋白酶抑制剂的结构与功能

本文介绍了三种丝氨酸蛋白酶抑制剂。绿豆胰蛋白酶抑制剂与慈菇蛋白酶抑制剂均为双头抑制剂,分别由72与141个氨基酸残基所组成。绿豆抑制剂能被胃蛋白酶降解为活性中心分别为Lys及Arg的两个活性碎片,其抑制剂本身及Lys碎片的晶体结构已阐明。慈菇抑制剂有A、B两个主要组份,两者对不同蛋白酶有不同抑制活性,是一种新类型的抑制剂。天花粉胰蛋白酶抑制剂是迄今已知的最小多肽抑制剂,共含27个氨基酸残基,用2D-NMR研究了它的构象。讨论了上述三种抑制剂的异同。     

大鼠慢性肾功能不全模型两种制作方式的比较

目的比较大鼠肾大部切除与肾结扎两种方法制备的5／6肾切除慢性肾功能不全模型的异同。方法雄性SD大鼠随机分为三组。A组行左肾2／3切除加右肾切除,B组行结扎左肾动脉2／3分支加右肾切除,C组为假手术组。分别于第二次手术后5周、9周及13周测血压,处死大鼠,留取24h尿及肾组织。检测尿蛋白,肾组织切片染色。用半定量法评价肾小球硬化指数。结果第5周时,B组大鼠的收缩压显著升高,而A组与C组相比无显著差异,第9周和13周A组和B组与C组大鼠相比,收缩压均显著升高。肾部分切除术后,尿蛋白随时间进行性增加。B组与A组相比,尿蛋白增加更为显著。A组和B组在各观察点均有不同程度肾小球硬化,B组较A组肾小球硬化程度重。结论肾大部切除和肾结扎两种方法制备的大鼠5／6肾切除模型表现有所不同。     

慈菇中两种结晶的多功能蛋白酶抑制剂的研究

由于蛋白酶抑制剂在生理、生化、病理、药理上都占有很重要的地位,特别是具有多功能的蛋白酶抑制剂被广泛应用于临床,近年来愈来愈受到各方面的重视。本文报道了从慈菇中提取两种结晶的多功能蛋白酶抑制剂,它们都具有两个活力相等的活性中心,这与其他已知的同类型植物蛋白酶抑制剂不同,有它的特殊性。(1)慈菇蛋白酶抑制剂A、B,除能抑制胰蛋白酶外,还能抑制胰凝乳蛋白酶及猪颌下腺的舒缓激肽释放酶。用酰胺、酯及蛋白等不同底物分别求出抑制剂A、B对胰蛋白酶的当量抑制比值及对胰凝乳蛋白酶的半抑制比值。两者对胰蛋白酶的抑制常数在10~(-9)～10~(-10)的范围内,抑制剂B对胰蛋白酶较之A有更大的结合力,但抑制剂A对胰凝乳蛋白酶及舒缓激肽释放酶较之B却有更明显的抑制活力。(2)用葡聚糖凝胶过滤及聚丙烯酰胺凝胶电泳分别测定抑制剂A、B的分子量均在17000左右。从抑制剂A、B对胰蛋白酶的当量抑制比值求得分子量为8500。这说明每一抑制剂分子中具有两个活力相等的活性中心。(3)测定了抑制剂A、B的氨基酸组成,二者除碱性氨基酸及天冬氨酸含量略有差异外其余皆相同,各含有两对二硫键,非极性氨基酸含量较高约占60%左右。由氨基酸组成求得最小分子量约16500。(4)用二硝基氟苯,二甲基氨基萘磺酰氯及氨肽酶M测定抑制剂A、B的N末端,都证实是天冬氨酸。     

质子泵抑制剂兰索拉唑和奥美拉唑对胃溃疡患者MDA，SOD及NO的影响

目的:探讨兰索拉唑和奥美拉唑两种不同质子泵抑制剂对胃溃疡患者治疗效果及对丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及一氧化氮(NO)水平的影响。方法:收取2013年9月至2015年6月之间于我院接受治疗的胃溃疡患者98例作为研究对象,根据随机数字表法将98例患者平均分为A、B两组,两组各包含患者49例。A组患者使用兰索拉唑治疗,B组患者使用奥美拉唑治疗,两组均进行连续30 d治疗。对两组患者治疗效果、症状缓解情况、MDA、SOD及NO水平、不良反应以及治疗费用进行比较。结果:A组患者痊愈率及总有效率分别为63.27%及91.84%,B组患者痊愈率及总有效率分别为61.22%及93.88%。两组患者治疗效果比较无显著差异(P0.05)。治疗后,两组患者腹胀、腹痛、上腹部烧灼及反酸症状与治疗前相较有显著差异(P0.05),但治疗后组间比较无明显差异(P0.05)。治疗后两组MDA显著降低,SOD及NO显著升高,其中A组变化幅度大于B组,差异有统计学意义(P0.05)。A组患者不良反应发生率为20.41%,明显高于B组的6.12%(P0.05)。B组患者质子泵抑制剂治疗费用明显低于A组。结论:兰索拉唑和奥美拉唑两种质子泵抑制剂对胃溃疡患者疗效相当,兰索拉唑在MDA、SOD及NO水平改善上具有优势,但奥美拉唑安全性更高且治疗费用相对较低。应当结合患者具体情况选择适宜的治疗方案。     

慢性肾小球肾炎患者血清MMP-9和TIMP-1的浓度及意义

目的:观察慢性肾小球肾炎血清基质金属蛋白酶9(matrix metalo protein-ase-9,MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制剂1(tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMP-1)的浓度与肾组织中MMP-9、TIMP-1表达的相关性,探讨慢性肾小球肾炎血清MMP-9、TIMP-1对肾脏纤维化的判断价值。方法:通过肾组织活检病理检查,将入选慢性肾炎的病例分增生组(A组)15例,纤维化组(B组)15例,另选10例志愿者作为健康对照组C组。应用免疫组化法观察A、B两组MMP-9、TIMP-1在肾组织中的表达情况,并且进行半定量分析,比较它们之间有无差别。应用ELISA双抗体夹心法检测A、B、C三组MMP-9、TIMP-1在血清中的浓度,比较它们之间有无差别。观察A、B两组MMP-9、TIMP-1在肾组织中的表达水平与在血清的浓度有无相关性。结果:A、B两组MMP-9在肾小球和肾间质少见表达,主要在肾小管上皮细胞浆中表达增高,两组之间表达的强度有显著差异性;A组TIMP-1在肾小球中少见表达,在肾小管上皮细胞增强。B组TIMP-1在肾小球中有少量表达,在肾小管上皮细胞较A组进一步增强,两组之间表达的强度有显著差异性(P0.05)。血清中MMP-9、TIMP-1浓度在A、B组显著高于C组,血清中MMP-9在A、B两组之间无显著差异性,血清中TIMP-1在A、B、C三组间两两比较有显著差别(P0.05)。结论:慢性肾炎患者血清中MMP-9、TIMP-1浓度与肾脏组织中MMP-9、TIMP-1的表达呈正相关。MMP-9、TIMP-1的相关性分析P值小于0.01。血清MMP-9、TIMP-1参与了肾脏纤维化的进展,慢性肾小球肾炎血清中MMP-9、TIMP-1的浓度可在一定程度上反映肾脏纤维化程度。     

慈菇中两种结晶的多功能蛋白酶抑制剂的研究

由于蛋白酶抑制剂在生理、生化、病理、药理上都占有很重要的地位,特别是具有多功能的蛋白酶抑制剂被广泛应用于临床,近年来愈来愈受到各方面的重视。本文报道了从慈菇中提取两种结晶的多功能蛋白酶抑制剂,它们都具有两个活力相等的活性中心,这与其他已知的同类型植物蛋白酶抑制剂不同,有它的特殊性。(1)_慈菇蛋白酶抑制剂A、B,除能抑制胰蛋白酶外,还能抑制胰凝乳蛋白酶及猪颌下腺的舒缓激肽释放酶。用酰胺、酯及蛋白等不同底物分别求出抑制剂A、B对胰蛋白酶的当量抑制比值及对胰凝乳蛋白酶的半抑制比值。两者对胰蛋白酶的抑制常数在10~(-9)～10~(-10)的范围内,抑制剂B对胰蛋白酶较之A有更大的结合力,但抑制剂A对胰凝乳蛋白酶及舒缓激肽释放酶较之B却有更明显的抑制活力。(2)_用葡聚糖凝胶过滤及聚丙烯酰胺凝胶电泳分别测定抑制剂A、B的分子量均在17000左右。从抑制剂A、B对胰蛋白酶的当量抑制比值求得分子量为8500。这说明每一抑制剂分子中具有两个活力相等的活性中心。(3)_测定了抑制剂A、B的氨基酸组成,二者除碱性氮基酸及天冬氨酸含量略有差异外其余皆相同,各含有两对二硫键,非极性氨基酸含量较高约占60%左右。由氨基酸组成求得最小分子量约16500。(4)_用二硝基氟苯,二甲基氨基萘磺酰氯及氨呔酶M测定抑制剂A、B的N末端,都证实是天冬氨酸。     

结核分枝杆菌培养物不同组份蛋白质组研究

将结核分枝杆菌H37RV株在苏通培养基内,37℃培养21d,然后将培养物分成上清液(A)、细胞浆(B)和细胞膜?蛋白质样品。以pH3.0～10.0的IPG预制胶条等电聚焦电泳为第一向,SDSPAGE为第二向进行双向电泳(2DE)、银染。经扫描、计算机处理。A组份的部分蛋白质斑点采用质谱仪进行蛋白质鉴定。A、B和C 3个组份蛋白质斑点总数分别为907、884和681;3个组份蛋白质分子量分布基本相似,约70.5%～74.4%在10～49kD之间;蛋白质等电点(pH)A、B两组份分布基本相似,约80.9%～83.5%在pH3.0～6.4之间,而C组份pH7.6～10.0之间的蛋白质斑点数比A和B两组分略多;A、B和C 3个组份表达丰度较高的蛋白质斑点数占各组蛋白质斑点总数的比例分别为7.8%、27.4%和2.8%,蛋白质等电点90.0%均分布在pH3.0～6.4范围内。B组份蛋白质分子质量73.1%分布在10～49kD之间,比A、B两组份略高。A组份14个蛋白质斑点经肽质量指纹谱分析,其中,9个点有同源性的或推测的蛋白质功能,5个蛋白质功能不清楚。总之,初步获得了结核分枝杆菌H37RV株在上述体外培养条件下收获的培养物的上清液、细胞浆、细胞膜蛋白质组2DE图谱及其特点,为该菌功能基因组研究提供蛋白质组信息。     

斜纹夜蛾在风洞中对性信息素的行为反应及田间诱捕试验

雌蛾腺体内含量最高的组份9,11-14∶Ac（A）在风洞中能引起雄蛾从搜索气迹、定向飞行到撒开味刷企图交尾连续的行为反应,而雌蛾腺体内其它组份单独使用时均不能引起雄蛾上述行为反应。一定量的Z9,E12-14∶Ac（B）对A的活性有增效作用,诱芯中B数量过多,不但失去对A的活性增效作用,还对雄蛾接近诱芯和企图交尾有强烈的抑制作用。9-14∶Ac（C）与11-14∶Ac (D)对雄蛾的定向行为无影响,诱芯中含有50%的C时,反而对雄蛾接近诱芯和企图交尾有抑制作用。A与B在滤纸诱芯中的含量比例与诱芯释放的挥发物比例明显不同,从9∶1（A∶B）诱芯释放的挥发物比例更接近于雌蛾腺体内的天然比例。田间诱捕试验中两组份诱芯的诱捕量随两组份比例不同而变化, 9∶1（A∶B）诱芯的诱捕量最大,1∶1（A∶B）诱芯的诱捕量低于单一的A组份诱芯。     

黑胸散白蚁幼期不同品级的发育和分化

在黑胸散白蚁Reticulitermes chinensis发育和分化过程中,发现有假工蚁、假若蚁两种虫态。假工蚁由6龄和7龄工蚁转化发育而来,假若蚁由4龄和5龄若蚁转化发育而来。显微测量结果表明,黑胸散白蚁的胚后发育主要包括2个龄期的幼蚁期、6个以上龄期的工蚁期、4个龄期的若蚁期和有翅成虫。在此基础上分析了其他虫态的分化来源,发现兵蚁由3～7龄工蚁分化发育而来,翅鳞型和长翅芽型补充生殖蚁由6龄若蚁转化发育而来,短翅芽型补充生殖蚁由4龄和5龄若蚁转化发育而来,微翅芽型补充生殖蚁既可由4～6龄工蚁转化发育而来,又可由假工蚁和假若蚁转化发育而来,无翅型补充生殖蚁由3～7龄工蚁转化发育而来。提出了黑胸散白蚁群体中不同品级个体的可能分化途径。     

黑胸散白蚁幼期不同品级的发育和分化

在黑胸散白蚁Reticulitermes chinensis发育和分化过程中,发现有假工蚁、假若蚁两种虫态。假工蚁由6龄和7龄工蚁转化发育而来,假若蚁由4龄和5龄若蚁转化发育而来。显微测量结果表明,黑胸散白蚁的胚后发育主要包括2个龄期的幼蚁期、6个以上龄期的工蚁期、4个龄期的若蚁期和有翅成虫。在此基础上分析了其他虫态的分化来源,发现兵蚁由3～7龄工蚁分化发育而来,翅鳞型和长翅芽型补充生殖蚁由6龄若蚁转化发育而来,短翅芽型补充生殖蚁由4龄和5龄若蚁转化发育而来,微翅芽型补充生殖蚁既可由4～6龄工蚁转化发育而来,又可由假工蚁和假若蚁转化发育而来,无翅型补充生殖蚁由3～7龄工蚁转化发育而来。提出了黑胸散白蚁群体中不同品级个体的可能分化途径。     

三种粘结剂用于纵折牙粘结的微渗漏研究

目的观察三种粘结材料的封闭性能,为折裂牙选择合适的粘结材料提供试验依据。方法选用健康前磨牙30颗,随机分为3组,制备成后牙纵折模型,分别用Clearfil SE Bond／AP—X（A组）、Super—Bond C＆B（B组）,Single Bond／F2000 Cmpomer（C组）进行粘结,在0．5％亚甲基蓝溶液中染色72h后,在电镜下观察染料渗透深度。结果扫描电镜下观察各组标本的粘结界面均有染料渗入,经单因素方差分析,A组与B组、C组有显著性差异,B组与C组之间无显著性差异。结论Clearfil SE Bond的封闭性能优于其它两组,但三种粘结剂均无法避免微渗漏的发生。     

不同灌注方法对原位肝移植麻醉的临床效果分析

目的:观察下腔静脉逆灌注法与常规门静脉正向灌注法应用于经典非转流原位肝移植手术的临床效果,并比较两种灌注法对新肝期再灌注后综合征的影响。方法:回顾性分析我院行经典非转流肝移植手术的患者60例,按照灌注方法的不同分为两组:A组(30例)采用下腔静脉逆灌注法;B组(30例)采用门静脉正向灌注法。比较两组患者围手术期的血流动力学指标、体温、内环境的改变等情况。结果:①分别在新肝开放即刻、新肝期5分钟及15分钟观察两组患者的平均动脉压、肺动脉压楔压、心率变化程度及心脏指数,A组均小于B组,差异有统计学意义(P0.05);②分别于新肝期5分钟及15分钟观察两组患者的中心静脉压,A组低于B组(P0.01);③观察开放时两组患者的最低温度,A组高于B组(P0.01);④观察血管活性药物用量,A组少于B组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:经典非转流肝移植术中,采取逆灌注方法可减少术后再灌注综合征的发生。两种灌注方式均需要加强对血流动力学、体温、酸碱平衡的监测与调整,做到针对性的麻醉管理。     

腹腔镜与传统开腹手术对胃癌临床疗效、术后并发症及免疫功能的影响比较

目的:探讨腹腔镜与传统开腹手术治疗胃癌的临床疗效、安全性及对患者免疫功能的影响。方法:选择2012年3月至2014年3月在我院行胃癌D2根治术的胃癌患者92例并随机分为两组,开腹组(A组)44例接受传统开腹手术,腹腔镜组(B组)48例接受腹腔镜辅助胃癌根治术,观察和比较两组患者的手术情况以及手术前后患者免疫功能的变化,比较两组患者围术期不良反应的发生情况及临床疗效。结果:B组患者术中切口长度、出血量明显优于A组患者(P0.05),且B组患者较A组患者术后排气时间以及疼痛缓解情况明显较好(P0.05);两组患者接受手术前后,机体的免疫功能有所变化,B组患者术后24hCD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+以及NK细胞相对活性等细胞免疫指标明显高于A组(P0.05),体液免疫指标IgM、IgG以及IgA等免疫球蛋白明显高于A组;两组患者术中并发症的发生率差异无统计学意义(P0.05),B组患者术后并发症的发生率与A组比较明显降低,且差异具有统计学意义(P0.05)。结论:腹腔镜辅助胃癌D2根治术对胃癌患者术中临床疗效有显著改善作用,可降低对机体免疫功能的影响并提高治疗的安全性。     

抗生素治疗感染后咳嗽的临床效果观察

目的研究抗生素应用在感染后咳嗽(post-infectious cough,PIC)治疗过程中的临床效果,为感染后咳嗽的合理用药提供一定的依据。方法将杭州市下城区长庆潮鸣街道社区卫生服务中心2013年7月至2014年7月全科门诊诊治的气道激发试验阴性的感染后咳嗽患者104例随机分为A、B、C三组。A组(35例)采用阿奇霉素治疗,B组(35例)采用复方甲氧那明治疗,C组(34例)采用以上两种药物联合使用治疗方案,疗程均为1周,观察治疗前后各组间患者咳嗽症状的改变情况。结果治疗后三组患者的咳嗽积分均低于治疗前(t=13.795、12.224、17.219,P0.05),咳嗽症状有所好转,治疗后三组咳嗽积分比较差异具有统计学意义(F=4.58,P0.05),C组治疗后咳嗽积分显著性低于A、B两组(t=3.652、4.345,P0.05),A、B两组相比差异无统计学意义(t=1.095,P0.05);C组经治疗后有效率(94.1%)均高于A组(74.3%)和B组(74.3%)(χ~2=10.617、11.968,P0.05),A组和B组间未见明显差异(χ~2=0.130,P0.05)。结论对于气道激发试验阴性的感染后咳嗽使用抗生素具有一定的治疗效果。     

不同诱导源对柞蚕蛹血淋巴及生殖腺中抗菌物质产生的影响

比较了不同诱导源对诱导柞蚕蛹血淋巴中抗菌活力的动力学变化。各种化学试剂包括生理盐水都能诱导产生抗菌物质。在不引起死亡的刺激量下,刺激量愈大,诱导的抗菌活力愈高。不同金属络合剂所诱导产生的抗菌物质组份可有很大区别。如二氮杂菲使P_(9E)及P_(9A)的组份比例增高,而EDTA则可提高P_(9B)及P_(9D)组份的比例。P_(9E)和P_(9A),P_(9D)和P_(9B)的产生分别有对应关系,讨论了是否由两个不同基因所控制。 大肠杆菌诱导后的柞蚕蛹,除在血淋巴中测得抗菌活力,在雌雄的生殖腺内含物中也能测得。摘除生殖腺后虽然在血淋巴中仍能诱导出抗菌物质,但应答较慢,活力也较小,也可能由于手术创伤较大,同样的刺激量容易引起死亡。     

两种用于小型猪胰肾联合移植实验麻醉方法的比较

目的比较静脉复合吸入全麻和静脉全麻两种方法用于小型猪胰肾联合移植实验中的麻醉效果,探讨简单、安全、易行的麻醉方法。方法A、B两组健康贵州小香猪,每组6只,基础麻醉后气管插管,A组：持续吸入异氟醚维持麻醉,根据手术要求间断注入万可松和芬太尼;B组：持续注入氯胺酮,间断静脉注射万可松和芬太尼维持麻醉。观察麻醉持续时间,镇痛和肌松药量,术后拔管和完全清醒时间,监测麻醉过程中血压、心率、脉搏氧的变化。结果A组术中麻醉效果好,血压、心率和脉搏氧稳定,与B组有显著差异（P〈0.05）;B组麻醉效果较差,肌松用药量明显增多,术后完全清醒时间长于A组（P〈0.05）。结论气管插管后静吸复合的麻醉方法是用于贵州小型猪实验安全、合适的麻醉方法。     

西北地区无痛支气管镜的临床应用

目的:观察西北地区开展无痛支气管镜检查方法的优越性。方法:将600例患者随机分为A、B两组,A组为观察组,给予异丙酚复合瑞芬太尼静脉麻醉法,经喉罩人工辅助通气,B组为对照组,给予单纯利多卡因表面麻醉,方法为利多卡因氧气加压口鼻面罩雾化,鼻腔、气管内滴药,连续观察患者在支气管镜诊疗前、过程中血压、心率、血氧饱和度变化及术中、术后反应情况。结果:观察组气管镜操作前、中的血氧饱和度无明显改变,心率、血压有所升高,术后舒适度明显高于对照组。结论:无痛支气管镜诊疗时可以获得满意的麻醉效果,优于常规局麻法,值得临床推广应用。     

单胺氧化酶

单胺氧化酶（monoamine oxidase,MAO）是生物体内一种十分重要的酶,它在大脑和周围神经组织中催化一些生物体产生的胺,氧化脱氨产生过氧化氢（H₂O₂）.单胺氧化酶A和B基因的克隆清楚地证明了这些酶是由不同的多肽组成的.单胺氧化酶A和B的基因定位于X染色体（Xp11.23）,都由15个外显子组成,而且它们的内含子-外显子组织是完全一致的.这些事实表明单胺氧化酶A和B的基因很可能从同一个祖先进化而来.单胺氧化酶A和B具有不同的底物和抑制剂专一性,在生物神经递质代谢和行为方面具有不同的作用.     

两种钙离子拮抗剂联用治疗尿毒症合并难治性高血压的临床研究

目的：探讨联用两种钙离子拮抗剂（calciumchannelblocker,CCB）治疗尿毒症合并难治性高血压的临床疗效。方法：选择广东省湛江市廉江市人民医院血液净化中心2010年10月至2011年9月收治的72例终末期肾病维持性血液透析合并难治性高血压患者作为观察对象,并随机分为A、B、C三组,每组24例,A组和B组病分别用硝苯地平缓释片和苯磺酸氨氯地平治疗8周,C组联合应用硝苯地平缓释片和苯磺酸氨氯地平治疗8周,观察各组血压变化情况及不良反应的发生情况。结果：C组病例治疗完成时收缩压、舒张压、平均动脉压较A组和B组病例治疗前的血压明显降低,总有效率明显高于A组和B组,差异有统计学意义（P〈0．05）。三组治疗过程中,均无严重不良反应发生。结论：联合应用两种CCB治疗尿毒症顽固性高血压,降压效果明显,且可耐受性好。