粳稻花药培养马铃薯简化培养基的研究

为了适应我国水稻单倍体育种工作普遍开展的新形势,对常用合成培养基的成份及配制程序进行了简化的研究。试验中甩马铃薯水提液取代有关合成培养基的基本成份,取得了良好的结果。 1.诱导愈伤组织培养基:用浓度为20—50％的马铃薯水提液即可取代Miller培养基的全部成份。愈伤组织诱导率超过或接近对照,并具有较高的分化绿苗的能力。所取马铃薯的状态(经过贮藏与否,发芽与否)如何,不影响其作用结果。 2.分化培养基:马铃薯浓度以30％为宜,可取代MS培养基全部成份。马铃薯状态对绿苗分化诱导率有很大影响。以贮藏未发芽的效果为好。如果用贮藏发芽的马铃薯块,以挖去其芽和芽眼为宜。 3.绿苗培养基:可用10—20％马铃薯水提液代替White培养基的全部成分。所培养的小苗色绿健壮。     

铁皮石斛同源四倍体工厂化快繁工艺研究

以实验室前期诱导的铁皮石斛四倍体为研究材料,利用气孔、叶绿体、染色体计数及流式细胞仪等方法,对铁皮石斛同源四倍体株系的纯合性进行鉴定,在此基础上利用茎段扩繁和原球茎诱导、增殖、分化两种方案比较增殖效率,并对原球茎的倍性稳定性进行再鉴定。结果表明：（1）实验室的‘花自 2’株系为纯合同源四倍体。（2）茎段扩繁最佳增殖培养基为MS＋2.0 mg/L 6 BA+0.5 mg/L NAA+15%香蕉汁,茎段诱导原球茎最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6 BA+0.5 mg/L NAA+0.2 mg/L KT,诱导率达到76.66%;原球茎增殖最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6 BA+0.5 mg/L NAA+15%马铃薯提取液,原球茎分化最佳培养基为1/2 MS+0.5 mg/L 6 BA+20%马铃薯提取液,原球茎分化率达到85.70%;生根最佳培养基为1/2 MS＋0.5 mg/L NAA＋15%香蕉汁,生根率达到92.77%。（3）原球茎根尖鉴定结果表明,诱导的倍性可以稳定遗传。（4）瓶苗移栽的最佳炼苗时间为5 d,移栽成活率达92.30%。该试验建立了铁皮石斛同源四倍体株系新的快繁技术体系,为四倍体试管苗的工厂化生产和推广奠定了技术基础。     

水稻花药液体培养下影响愈伤组织诱导和分化的一些因素的研究

水稻花药液体漂浮培养能大幅度提高愈伤组织诱导频率,但这些愈伤组织的分化能力很低。为了提高液体培养下愈伤组织的分化频率,试验了5种诱导培养基和4种分化培养基。结果表明,诱导培养基对愈伤组织分化能力的高低起主要作用,其中以过滤灭菌的马铃薯提取液培养基的效果最好,绿苗分化率可高达50％;分化培养基对愈伤组织分化频率的影响较小,且不甚规律。浮在液面上的愈伤组织比沉在培养液底部的愈伤组织有较高的分化能力。愈伤组织转移时间的早晚对分化频率也有很大影响。     

圆叶葡萄'Alachua'叶柄再生体系的建立

以圆叶葡萄'Alachua'的叶柄为外植体,通过对基本培养基、激素种类及浓度组合的筛选,研究圆叶葡萄Alachua再生体系的建立.结果表明:以B5 2.0 mg/L BA 0.5 mg/L 2,4-D诱导叶柄形成愈伤组织效果较好,叶柄诱导率达86%;再分化培养基以B5 4.0 mg/L TDZ效果较好,达到19.32%;诱导生根以培养基WPM 0.1mg/L IBA的效果较好,生根率达90%.移栽至珍珠岩与营养土(3∶1)的混合基质中,成活率达93%.     

籼型稻V20B 高效遗传转化体系研究初报

目的:建立籼型杂交稻亲本V20B成熟胚愈伤组织培养的高效遗传转化体系。方法:以V20B的成熟胚作为外植体,研究比较不同培养基、不同生长物质类型及浓度、不同培养条件对愈伤组织诱导、继代、分化的影响。结果:诱导培养基以N6为基本培养基,添加2.5 mg.L-12,4-D和0.2 mg.L-16-BA,光照条件下诱导,成熟胚愈伤组织诱导率达到93.44%;继代培养基以MS为基本培养基,添加2.0 mg.L-12,4-D,黑暗条件下培养;分化培养基以DL为基本培养基,激素配比为2.0 mg.L-1KT、2.0 mg.L-16-BA、0.2mg.L-1NAA、0.2 mg.L-1IAA;采用农杆菌介导法对该体系获得的愈伤组织侵染后能获得的抗性愈伤组织,经PCR检测潮霉素基因转化率为53.89%。结论:建立了适宜于籼型稻V20B的高效组织培养体系。     

寒兰的快速繁殖技术

以寒兰(CymbidiumkanranMakino)根状茎为外植体,采用B5基本培养基,并附加不同浓度的6-BA、NAA、TDZ(苯基噻二唑基脲-thidiazuron)和S-3307(优康唑-uniconazole),对类原球茎的诱导、继代增殖、分化、生根等进行研究。结果表明:诱导类原球茎的最佳培养基为B5 TDZ0.50mgL-1 NAA0.25mgL-1,诱导率98.3%;继代增殖的最佳培养基为B5 S-33071.0mgL-1 NAA0.2mgL-1 蔗糖3.5%,增殖系数9.4;类原球茎分化的最佳培养基为B5 S-33070.75mgL-1 6-BA1.0mgL-1 NAA0.4mgL-1,分化率87.8%;最佳的生根培养基为1/2B5 NAA0.2mgL-1 活性炭0.05%,生根率达100%。     

阿魏菇菌糠提取液对四种食用菌菌丝生长的影响

目的:解决菌糠再利用技术问题.方法:采用平板培养法,对在PDA培养基中加入不同体积比的阿魏菇菌糠提取液对鸡腿菇、香菇、杏鲍菇和金针菇菌丝生长的影响进行了研究.结果:当PDA培养基中菌糠提取液加入量为10%～50%时,对香菇和金针菇菌丝生长有促进或明显促进作用;而加入量为10%的菌糠提取液对杏鲍菇菌丝生长无显著影响,但当阿魏菇菌糠提取液加入量大于10%时,明显抑制杏鲍菇和鸡腿菇的菌丝生长.结论:可利用阿魏菇菌糠作为栽培香菇和金针菇的培养料.     

无患子愈伤组织诱导的多因子正交试验研究

目的:探寻无患子愈伤组织诱导的最佳外植体、培养基和培养条件。方法:采用5因素混合水平正交设计,用DPS2000统计软件对其结果进行方差分析和多重比较(SSR)。结果:诱导愈伤组织的最佳外植体为当年生枝条水培芽的嫩茎段,用0.2%HgCl2消毒2min,其无菌存活率为98.33%,培养条件为光照或黑暗,最佳培养基配方为:MS(B5) 6-BA 1.5mg.l-1 NAA0.2mg.l-1,其愈伤组织的诱导率为97.78%。结论:激素配比是影响愈伤组织诱导的主要因素。较高的6-BA浓度(1.5~2.5mg.l-1)与较低的NAA浓度(0.2mg.l-1)配比,有利于无患子愈伤组织的诱导。     

‘红皮’马铃薯试管苗培养和微型薯诱导

以‘红皮’马铃薯块茎上的芽为材料进行试管苗诱导、增殖及试管微型薯诱导研究。结果表明：在MS + 6-BA 0.5 mg/L +活性炭0.17% + 蔗糖20 g/L培养基中培养30 d,试管苗增殖系数达8.6;MS + 6-BA 0.5 mg/L +活性炭0.17% +蔗糖100 g/L培养基中试管微型薯诱导效果较好,30 d后诱导率达62.5%,试管薯平均直径为4.2 mm。     

新疆雪莲植株再生体系研究初探

以新疆雪莲叶片、叶柄和根为外植体,诱导新疆雪莲植株再生,获得愈伤组织诱导、分化和生根最佳培养基,并初步建立其再生体系.研究结果表明:所用培养基均能诱导出愈伤组织且诱导率最高可达100%,分化率最高可达78%.对不同外植体的愈伤组织诱导结果表明:叶片和叶柄的诱导效果最好,根的诱导效果较差.其中对叶片愈伤组织诱导效果最好的培养基是MS+NAA0.50 mg/L+2,4-D0.10 mg/L+6-BA1.00mg/L,对叶柄的诱导效果最好的培养基是MS+NAA1.00mg/L+2,4-D0.10mg/L+6-BA0.10mg/L;分化培养基以MS+NAA0.20 mg/L+6-BA1.00mg/L较适宜,生根培养基以1/2MS0+NAA1.00mg/L较适宜.     

翅梗石斛组织培养与快繁技术(简报)

以云南野生翅梗石斛Dendrobium trigonopus种子无菌萌发的试管苗为材料,初步探讨翅梗石斛的组织培养和快速繁殖技术。结果表明：B5 + NAA 0.5 mg·L^-1 + 10%马铃薯汁和B5 + NAA 0.5 mg·L^-1 + 6-BA 0.5 mg·L^-1 + 10%马铃薯汁培养基分别对翅梗石斛种子的萌发与原球茎的增殖效果明显;B5 + NAA 0.5 mg·L^-1 + 10%马铃薯汁+云南松树皮粉末2 g·L^-1培养基对翅梗石斛的生根及壮苗效果较好。成苗后进行简单的药剂灭菌,便可直接移栽至锯末与刨花或锯末与树皮比例为1∶1的基质中,25 d后,成活率达95%以上。     

影响籼稻花药培养诱导率的因素及基因型的作用研究

本文研究了影响籼稻花药培养诱导率的9种重要因素的作用。供试品种和杂种共70余种。结果发现,不同基因型的培养力存在很大差异,这种差异表现在对各种因素上,如基本培养基成分、激素的种类与配比、对低温预处理的时间等等不同反应上。低温预处理是提高籼稻出愈率的有效措施,但由于不同基因型小孢子对低温的耐受力不同,所需的适合预处理时间也就不同。花药接种后先在30℃下培养3天后,再转入26℃下培养,较直接培养在26℃下可大幅度提高花粉檀株的产量。诱导培养基中补加脯氨酸、马铃薯提取液对提高出愈率和绿苗分化率有明显效果。     

伪狂犬病毒gD基因转化马铃薯的初步研究

以可直接饲用的马铃薯作为伪狂犬病病毒糖蛋白基因gD的表达植物,探索用马铃薯茎段作为外植体的再生体系和遗传转化体系.结果表明:添加2 mg/L ZT和0.1 mg/L NAA的MS培养基,可使马铃薯茎段愈伤组织诱导率达70%,出芽率达38%;添加0.5 mg/L的硝酸银可明显减少愈伤组织在继代过程中的褐化程度,并且促进其分化.在农杆菌的菌液OD_(600)值为0.1～0.2,侵染茎段1 h,共培养3 d的条件下转化效果最好,抗性愈伤率达到52.3%.实验共获得21株转化植株,挑选7株进行RT-PCR检测,结果证明gD基因已被整合到马铃薯基因组中.     

“固液双层”培养法诱导马铃薯‘米拉’试管薯的研究

该研究以马铃薯‘米拉’品种的脱毒试管苗为材料,采用"固液双层"的培养方式,通过正交试验对其试管苗壮苗生长阶段和试管薯诱导阶段的培养基进行优化,并通过单因素试验研究蔗糖浓度、光照条件和CCC浓度对试管薯结薯的影响。结果表明:在"固液双层"培养中,‘米拉’壮苗培养阶段优化的培养基为改良MS培养基(硝酸铵为2 000 mg·L~(-1)、硝酸钾为2 000 mg·L~(-1))+500 mg·L~(-1)CCC+0.1%活性炭+0.1mg·L~(-1)DA-6+1 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA+3%蔗糖+6 g·L~(-1)琼脂,pH 5.8。试管薯诱导及生长阶段优化的培养基为MS_1培养基(微量元素和铁盐的用量为MS培养基的2倍)+1.5%活性炭+4 mg·L~(-1)6-BA+8%蔗糖。在试管薯诱导阶段,弱光4 h·d~(-1)培养诱导的试管薯,结薯指数、大薯率、薯块重量均优于暗培养。"固液双层"培养是一种低成本的方法,在组织培养室内就可以大量繁殖‘米拉’试管薯,并且能增加原种的数量,这种方法也能用于马铃薯其他栽培品种试管薯的诱导。     

绣球菌生物学特性若干问题的研究

绣球菌菌丝在蛋白胨培养基中生长最佳,硫酸铵、尿素、复合肥对菌丝生长有抑制作用。选用基础培养基或在基础培养基中添加0.3%蛋白胨作为绣球菌母种培养基较为合适。栽培料中添加淀粉可促进绣球菌的生长,接种50d后观察发现,添加新鲜去皮马铃薯块比马铃薯淀粉效果好,前者100%菌袋出现原基,后者只有50%菌袋出现原基,且原基正处在胶质片时期。添加大米淀粉,小麦淀粉效果与马铃薯块接近,甘薯淀粉与马铃薯淀粉效果接近。     

甘蓝花药培养胚状体诱导形成影响因子研究

用甘蓝F1、F2和自交系S33个世代6种基因型材料进行甘蓝花药培养诱导胚状体形成影响因子研究。结果显示:(1)高浓度蔗糖对甘蓝胚状体形成具有显著的诱导作用,6%蔗糖浓度是甘蓝花药培养的最适浓度,其胚状体的诱导率最高达12.2%;(2)材料基因型是影响花药培养的主要因素,F2和F1代材料胚状体诱导效果好,且胚状体诱导率F2代(F2P192和F2P194)18.9%比F1代(F1S17和F1S13)17.1%较高,但差异不显著,自交系S3代材料很难诱导出胚状体;(3)B5培养基比MS培养基更适合甘蓝花药胚状体的诱导培养。结果表明,甘蓝F2代是其花药诱导培养胚状体的最佳基因型材料,B5 2.0 mg/L 2,4-D 2.0 mg/L KT 6%Suc是甘蓝花药诱导培养胚状体的最适培养基。     

响应面法优化提高萎缩芽孢杆菌E20303抑制马铃薯干腐病病原菌活性的研究

【背景】萎缩芽孢杆菌E20303可以有效地抑制马铃薯干腐病病原菌的活性,而响应面法可在较少的试验次数下优化生防菌发酵培养基配方与发酵条件,获得的最优组合将为马铃薯干腐病生防菌剂的制备与应用提供参考。【目的】以分离自青海察尔汗盐湖湖泥中且对马铃薯干腐病病原菌具有较高抑菌活性的萎缩芽孢杆菌E20303为研究对象,利用响应面法对其培养基配方和发酵条件进行优化,以期提高其对马铃薯干腐病病原菌的抑菌活性。【方法】采用单因素试验、中心组合设计试验及响应面法设计优化萎缩芽孢杆菌E20303发酵培养基配方及发酵条件。【结果】培养基最优发酵配方(g/L):淀粉10.72、酵母粉23.60、七水合硫酸镁16.00、碳酸钙1.14、磷酸二氢钾8.00和磷酸氢二钾16.00,优化后抑菌率由46.51%提高至62.00%;最优发酵条件为装液量102.89 mL、pH 8.64、温度28.73℃、转速200 r/min、培养时间3 d、接种量2%,优化后抑菌率由51.15%提高至72.51%。【结论】实验获得了对马铃薯干腐病病原菌的抑菌活性明显提高的萎缩芽孢杆菌E20303发酵配方及发酵条件,为马铃薯干腐病生防制...     

海洋真菌产抗菌物质培养基及其性质研究

目的:海洋真菌Fy-04产抗菌物质培养基及性质研究.方法:管碟法测定抑菌效果确定海洋真菌Fy-04产抗菌物质的培养基及其性质.结果:海洋真菌Fy-04产抗菌物质对金黄色葡萄球菌抑菌最佳培养基组成为:马铃薯海水浸出液60%,葡萄糖2%,蛋白胨1%,酵母膏0.1%,抑菌圈直径34.6mm;对大肠杆菌抑菌最佳培养基组成为:葡萄糖2%,蛋白胨0.7%,酵母膏0.1%,FePO4 0.04%,抑菌圈直径21.6mm;抗菌物质80℃处理1h,残留活性60%以上,pH稳定范围在pH 6.0～10.0.结论:该菌株代谢产物对细菌有较好的抑菌效果,并能溶于乙醚、三氯甲烷中等极性的有机溶剂中.     

几种野生植物提取物抑菌作用研究

本文以乙醇为溶剂,分别提取了瓦松、泽漆及一组中草药配方的有效成分;室内测定了三种提取液对5种植物病原菌(棉花枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp.vasinfectum;小麦赤霉病菌Fusarium graminearum Schw;西瓜枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp.niveum;仙人掌软腐病菌Erwinia chrysanthemi pv.chrysanthemi;魔芋软腐病菌Erwiniacarotovora pv.carotovora)的抑菌作用.结果表明:三种提取物对镰刀菌均有不同程度的抑制作用,且三种提取物的抑菌效果差异显著,其中瓦松的抑菌效果最强.当在50 mL培养基中加入5mL不同提取液时,瓦松对不同镰刀菌的相对抑制率为91.39%～100%;中草药配方提取液对不同镰刀菌的相对抑制率分别为41.11%～85.37%;而泽漆提取液对镰刀菌的相对抑制率仅为12.86%～21.23%;当在50 mL培养基中加入提取液体积降低为2 mL、1 mL、0.5mL时,三种提取液对三种镰刀菌的抑制效果骤然下降,但下降的梯度不一.对大白菜软腐病菌与魔芋软腐病菌而言也是瓦松的抑菌效果最强,中草药配方次之,泽漆的抑制效果最差.     

TDZ诱导的蓝猪耳根高效再生体系(简报)

研究NAA、6-BA及TDZ等激素对蓝猪耳根脱分化及再生效率的影响,结果发现:NAA和6-BA二者组合诱导根愈伤的效果较差,低于TDZ诱导效果;在1/2MS TDZ1.5mg/L培养基上诱导的愈伤数量和效率较佳,在诱芽培养基上可获得大量分生芽,且生长快,接种到生根培养基上可100%生根,正常生长。