白细胞介素-2最新研究进展

白细胞介素-2作为一种细胞生长因子,不仅能诱导T细胞增殖和分化,而且能增强机体的免疫监视功能,在细胞调节中发挥着不可替代的作用。了解白细胞介素的结构、功能及作用机制,更有利于对白细胞性质的研究及应用。重组白细胞介素-2目前在抗肿瘤治疗应用中发挥重要作用,此外关于白细胞介素-2与抗感染、自身免疫疾病等方面的研究也相当广泛。就白细胞介素-2在国内外研究进展进行综述。     

白细胞介素-17

一种由T细胞产生的蛋白被命名为白细胞介素-17(1L-17),它作用于多种细胞表达的受体,其序列首先是从活化T细胞的减法杂交获得的小鼠cDNA序列而被鉴定的,称为CTLA8。CTLA8与一种亲淋巴病毒Herpesvirus saimiri的开放读框13(HVS13)具有57％的同源性。无论是IL-17,还是其受体与已知细胞因子及细胞因子受体均无序列相似性。     

人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8合成基因的修正及修正基因在大肠杆菌中的表达

本文采用寡核苷酸介导的定位诱变技术修正了人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8合成基因中出现的合成错误,在该基因编码区的201位插入了原来缺失的G残基,从而使之恢复正确读框。经对修正基因进行DNA全序列测定,表明定位诱变的结果符合设计要求。在此基础上,利用原核高效表达载体pBV220在P_RP_L串联启动子的控制下在大肠杆菌中对该基因进行了表达,并测定了重组人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8的嗜中性白细胞趋化活性。本工作为开展人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8基因工程及蛋白质工程的研究奠定了基础。     

直组人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8的纯化与鉴定

本文利用SDS-PAGE及蛋白质电泳印迹技术,从带有相应表达质粒的重组大肠杆菌裂解液中,将所表达的重组人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8(NAP-1/IL-8)转移至聚偏二氟乙烯膜上,直接进行N-末端15个氨基酸的序列分析,从而确证该目标蛋白得到高效表达和正确加工。随后采用Bio-Gel P30凝胶过滤层析和Mono-S阳离子交换层析对重组人NAP-1/IL-8进行了分离纯化,纯化产品达到SDS-PAGE纯。利用琼脂糖平板法测定了纯化产品的嗜中性白细胞趋化活性,推算其比活为2.8×10~5U/mg蛋白。又利用SDS-PAGE测出重组NAP-1/IL-8的分子量约为8.5kD,但根据凝胶过滤层析的洗脱时间推定,在溶液中确实存在分子量稍大于14.4kD的NAP-1/IL-8二聚体。     

重组人白细胞介素-11工程菌的发酵条件研究

为了探讨发酵条件对大肠杆菌表达人白细胞介素-11融合蛋白的影响,利用正交实验设计,对工程菌的生长条件和人白细胞介素-11融合蛋白表达进行优化。在摇瓶中研究了培养基中的葡萄糖、蛋白胨、酵母抽提物的浓度、pH及摇床转速、装液量、接种量等。确定了工程菌生长及表达的培养基和培养条件:葡萄糖10g/L,蛋白胨20g/L,酵母抽提物10g/L,pH7.5,接种量10%,装液量10%,摇床转速220r/min及诱导时间为4~5h。然后在BiofloⅢ-5L发酵罐中以优化的发酵条件进行了3批实验,结果表明:工程菌量达到55g/L(DCW),重组人白细胞介素-11融合蛋白表达量为33%左右,为进行中试研究奠定了理论基础。     

白细胞介素-1家族细胞因子研究进展

随着老龄化时代的到来,各种自身免疫性疾病和肿瘤性疾病更加频繁发生,给人类的生命健康和生活质量带来了影响,其中白细胞介素-1(interleukin-1, IL-1)家族成员在这些疾病中起着重要作用。目前,对IL-1家族的研究发展迅速,已鉴定了11种细胞因子和10种受体,其生物学功能、与疾病的关系及应用越来越受到各国科学家的青睐。现对IL-1家族细胞因子、受体、信号通路和生物学功能作一概述,并展望IL-1家族在药物研发和临床治疗方面的应用前景。     

白细胞介素-10、白细胞介素-6对慢性肺源性心脏病预后评价的临床意义

目的:检测慢性肺源性心脏病患者血清白细胞介素-10和白细胞介素-6的水平,探讨细胞因子对慢性肺源性心脏病患者预后评价的临床意义。方法:将我院住院治疗的慢性肺源性心脏病患者40例,按照心功能情况分为肺源性心脏病组21例(对照组)和肺源性心脏病合并心力衰竭组19例(观察组),进行血清白介素-6、白介素-10定量检测。结果:观察组血清白介素-6水平较对照组明显升高,而白细胞介素-10却明显低于对照组(P值均<0.05)。结论:检测白细胞介素-6、白细胞介素-10的水平,可作为监测肺源性心脏病心功能恶化的预测指标。     

用一个简单快速的RT-PCR技术筛选白细胞介素-6作用相关基因

为了研究白细胞介素-6(IL-6)作用相关基因以及一些可能受IL-6调控的基因,利用一个简单快速的以PCR为基础的方案,检测了IL-6处理和未处理的Sko007细胞中基因表达的差异,克隆并鉴定了差异表达基因的cDNA片段.首先用6-mer寡核苷酸引物进行反转录从而最大限度地将mRNA编码区序列生成cDNA;然后用2或3个较长的随机引物进行PCR扩增,并以不同引物组合重复PCR增扩;扩增产物在2%琼脂糖凝胶上电泳分离,回收差异片段并直接用于克隆、测序及进一步分析.在此研究中,获得了3个表达序列标签(EST),其中一个为新的基因片段,反向RNA杂交有力证实了它们与IL-6作用的相关性.进一步的生物信息学分析表明,新基因片段STRF17在多种组织中表达.     

突变型人白细胞介素-2基因在巴斯德毕赤酵母中的表达

为了提高人重组白细胞介素 2的稳定性和活性以及减少毒副作用 ,有必要定向改造rhIL 2的分子结构 .用PCR法从白细胞介素 2 (IL 2 )cDNA全序列中扩增成熟的肽基因片段 ,并利用定点突变技术将人重组白细胞介素 2第 12 5位游离的半胱氨酸编码序列突变为丙氨酸序列 .编码 18位亮氨酸的序列突变为蛋氨酸序列 ;编码 19位亮氨酸的序列突变为丝氨酸序列 .突变型人白细胞介素 2 (MvIL 2 )基因与表达载体pPIC9K重组 ,酶切线性化后用Invitrogen转化毕赤酵母试剂盒导入酵母细胞进行整合 ,经筛选得到一高表达白介素 2的克隆 .SDS PAGE显示 ,表达量约占总量的4 5 7% .经Western印迹验证 ,重组人白介素 2有免疫活性 ;与野生型IL 2相比 ,所获得的突变型IL 2纯品的比活性为 4 0× 10 7IU mg蛋白 ,比天然型IL 2高 4～ 5倍     

类风湿关节炎与白细胞介素-18 的研究进展

类风湿关节炎发病机制不明,许多细胞因子参与了RA的发病机制。近年发现,白细胞介素-18可作用于RA发病的多个参与因素,成为研究RA的新热点。     

白细胞介素-32免疫学特征及与HIV的相关性研究

白细胞介素-32(IL-32)是近年来新发现的前炎症反应细胞因子,在体内分布广泛,而且作用呈多样化,除了具有诱导多种细胞因子产生,导致前炎症反应和自身免疫病,上调TNF-α的表达,介导T细胞活化诱导死亡等作用外,IL-32还可以抑制人类免疫缺陷病毒的复制,增强机体的自然防御能力,因而在疾病预防和治疗方面有重要意义。本文根据国内外的研究结果,综述了IL-32的免疫生物学特征及与HIV的相关性研究。     

白细胞介素2亲和性配体的筛选

白细胞介素2(IL-2)及其受体拮抗剂的研究对免疫抑制药物的研制具有重要作用.抗白细胞介素2受体α链中和性单克隆抗体5G1(抗Tac型抗体)能够特异性地阻断IL-2与其受体的结合.因此,5G1可作为目标分子被用来在噬菌体展示肽库中筛选白细胞介素2的亲和性配体.经过4轮亲和性筛选以及5G1亲和活性的测定,6个具有明显5G1亲和活性的噬菌体克隆被发现.DNA序列分析结果显示出,所得到的肽序列具有明显的保守性,即SSFT(L/P)I.该序列与IL-2受体α链没有同源性.因此,SSFT(L/P)I可能模拟了IL-2受体α链上的一个不连续表位(mimotope),为白细胞介素2亲和性配体片段.     

人白细胞介素-36受体拮抗剂基因的克隆及序列分析

[目的]构建人白细胞介素-36受体拮抗剂(interleukin-36 receptor antagonist,IL-36Ra)的真核表达载体,并对其基因全长编码区进行分析。[方法]提取总RNA,逆转录出IL-36Ra c DNA序列。设计人IL-36Ra基因的上游引物和下游引物。利用热启动PCR扩增目的基因,将扩增出的IL-36Ra基因编码区通过限制性内切酶酶切后,把酶切的目的片段与载体pc DNA3.1连接,转化到感受态细胞大肠杆菌DH5α中。通过氨苄青霉素抗性筛选、双酶切及菌落PCR鉴定,最后选取阳性克隆进行测序。[结果]重组载体pc DNA3.1-h IL-36Ra经菌落PCR和酶切鉴定,最后通过序列分析证实,其序列与Gen Bank中数据一致。[结论]人IL-36Ra基因的重组真核表达载体pc DNA3.1-h IL-36Ra的成功构建,为进一步研究IL-36Ra在免疫性疾病中的作用奠定了实验基础。     

白细胞介素-37与风湿性疾病

白细胞介素(interleukin,IL)-37是近期发现的一种细胞因子,共有a~e五种不同的亚型,IL-37b是目前研究的热点。IL-37可抑制体内多种促炎细胞因子的表达及增强抗炎细胞因子的活性。近期研究发现,IL-37在风湿性疾病中起到重要作用,但其具体作用机制尚不完全清楚。本文主要综述IL-37的生物学功能及其在风湿性疾病中的作用,旨在为风湿性疾病发病机制和诊断积累基础理论资料。     

白细胞介素-8有保护心血管作用

白细胞介素-8(IL-8)是80年代后期发现的一种多源性细胞因子。它不仅来源于单核细胞、T细胞及纤维母细胞,亦可来源于血管内皮细胞。[Ala-IL 8]_(77)是内皮细胞受IL-1或TNF激活后分泌的IL-8,已证明是有效的粒细胞—内皮细胞粘连抑制剂。最近,美国的Lefer等研究了家兔心肌缺血再灌注损伤中,[Ala-IL8]_(77)对内皮功能障碍和心肌损     

白细胞介素-18及其抗肿瘤作用研究进展

白细胞介素18(IL-18)具有多向免疫调节功能。它对T细胞向Th1或Th2分化起有独特的调节能力。最近的研究表明了IL-18的结构、活化形式和调节树突状细胞、NK细胞等方面的重要功能。研究也发现许多肿瘤患者血清IL-18水平显著升高及其在肿瘤发生发展中的作用。本文主要介绍了IL-18的结构、产生与调节、生物学作用及其在肿瘤方面的研究进展。     

白细胞中的糖原

1910年Neukirch 应用碘及Best 氏卡红法在中性粒细胞中看到颗粒状阳性物质的存在,认为这些物质即使是非糖原亦必与碳水化合物密切相关。俟后,特别是随着细胞化学的发展,学者们对白细胞中糖原的研究有过不少报告。本文仅就糖原在白细胞中的分布、来源(糖原的合成)及其意义等方面综述如下。     

人白细胞介素-2功能性受体在小鼠细胞可重建

白细胞介素-2(IL-2)与其受体相互作用,可促进已活化的T 细胞生长,但只当IL-2与高亲和性受体结合才能释放与生长相关的传导信号。作者从正常人用合成的寡聚核苷酸探针筛选出编码IL-2受体特异的基因克隆。筛选出的数个阳性克隆中,P~(IL-2R)-6克隆经分析发现能编码成人T 细胞白血病细胞表达的IL-2受体的全部序列。作者为了使IL-2受体cDNA 在哺乳细胞中稳定表达,构建了一个P~(SVIL-2R)-3质粒,并     

白细胞介素的检测

白细胞介素(Interleukins,简称ILs)是一类在淋巴细胞间传递信息,刺激淋巴细胞或其它前体细胞增殖分化的介质,主要来源于白细胞。到目前为止,正式命名的白细胞介素有四类,分别力白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-2     

维生素D及白细胞介素-6水平在 结直肠癌患者预后评估中的价值

目的探讨维生素D及白细胞介素-6水平在结直肠癌患者预后评估中的价值。方法选取树兰(杭州)医院2016-2017年经病理学证实的结直肠癌患者45例和同期健康体检者53例,检测患者外周血中维生素D、白细胞介素-6水平。根据检测结果,将结直肠癌患者分为维生素D高表达组和低表达组以及白细胞介素-6高表达组和低表达组,分别比较各组患者临床病理参数,并对患者进行预后评估。结果结直肠癌患者外周血中维生素D含量为(6.43±3.71)ng/mL,低于健康对照组的(10.21±3.54)ng/mL,(P0.01);白细胞介素-6水平为17.5(8.97~42.92)ng/mL,高于健康对照组的9.15(3.51~13.79)ng/mL,(P0.01),且二者在结直肠癌组织中的水平可能具有相关性(χ2=7.4,P0.01)。维生素D及白细胞介素-6水平与结直肠癌患者是否发生淋巴结核转移、TNM分期和肿瘤浸润深度密切相关。预后分析发现,血清维生素D浓度与患者预后呈正相关,血清白细胞介素-6水平与患者预后呈负相关。结论维生素D及白细胞介素-6水平与结直肠癌患者预后有关,可作为判断结直肠癌患者预后的新型、有效的生物学指标。