超氧化物歧化酶肾上腺素自氧化测定法的研究

本文研究了超氧化物歧化酶肾上腺素自氧化测定法的影响因素,发现在测试波长480um,反应液pH10.2,测试温度30℃的条件下,测试时间随肾上腺素浓度而相应改变。一份正常人红细胞样品测定20次,其变异系数CV=5.03％,酶提取液在4℃存放72小时,酶比活性不变,本方法具有微量、快速、灵敏、稳定及重复性良好等优点。     

改良的连苯三酚自氧化测定超氧化物歧化酶活性的方法

超氧化物歧化酶(superoxide dismutase简称SOD)的测活方法很多。目前,国内外采用的连苯三酚自氧化法,其测定缓冲液均用HCl配制,而Cl~-对SOD有一定的抑制作用。为了提高SOD对超氧阴离子(O_2~-)的竞争能力,本法改用K_2HPO_4KH_2PO_4缓冲液。实验表明,改良法不仅比在TrisHCl缓冲液中测定灵敏度提高了50％,而且因减少了SOD的加入量,使酶被O_2~-所饱和。实验还表明,SOD在自氧化速率30—65％范围内,酶的加入量与抑制率成线性关系,见图1。     

酰化人红细胞超氧化物歧化酶稳定性的研究

用月桂酸对人红细胞超氧化物歧化酶进行化学修饰处到酰化ｈ－ＳＯＤ,并对Ａｃ－ｈＳＯＤ和ｈ－ＳＯＤ的稳定性进行了比较。结果表明：Ａｃ－ｈＳＯＤ活力为ｈ－ＳＯＤ的７２％,比活力为４０００Ｕ／ｍｇ,Ａｃ－ｈＳＯＤ的热稳定性,酸碱稳定性及抗蛋白酶水解能力均比天然酶提高。     

超氧化物歧化酶活性中心中铜离子的氧化还原研究

用电子顺磁共振EPR技术研究铜锌超氧化物歧化酶(Cu·Zn-SOD)与底物(O_2~(·-)反应达到平衡态时铜离子的EPR波谱表明,在平衡态时的铜离子处于还原态。用还原剂H_2O_2、NaBH_4处理Cu·Zn-SOD后,酶活力变化不同,电泳行为也不同。用NaBH_4处理SOD其活性及电泳行为接近天然酶,但经H_2O_2还原后的酶活性损失严重,电泳后出现多条色带。     

超氧化物歧化酶活性测定的影响因素研究

以枯草芽孢杆菌黑色变种为材料．探讨了超氧化物歧化酶活性测定的影响因素。选用黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性．考察细胞破碎条件、细胞保存形式、保存时间以及保存温度对SOD活性测定的影响。结论：细胞破碎条件、样品保存形式、保存时间、保存温度都对酶活性有较大影响。相对而言,保存温度和保存时间的影响比较大。SOD活性测定中以酶液形式低温保存,尽快检测活性为宜。     

人铜锌超氧化物歧化酶的大规模生产工艺

本文以干扰素生产中废弃的人红细胞为原料,采用乙醇－氯份沉淀→磷酸氢二钾盐析→丙酮沉淀手续和ＤＥＡＥ—５２层析步骤,进行了人铜锌超氧化物歧化酶（ＣｕＺｎ－ＳＯＤ）大规模生产工艺的实验研究。结果表明,生产的酶制剂中含量为９０．６％,比活性在２０００ＭｃＣｏｒｄ—Ｆｒｉｄｏｖｉｃｈ单位／ｍｇ蛋白以上,无菌、无热原质、安全性等项指标符合国家卫生部对血液制品的要求。     

超氧化物歧化酶(SOD)研究进展

环境胁迫使植物细胞中积累大量的活性氧,从而导致蛋白质、膜脂、DNA及其它细胞组分的严重损伤。植物体内有效清除活性氧的酶类包括超氧化物歧化酶(SOD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、过氧化氢酶(CAT)等,其中研究最深入的是SOD。利用基因工程策略增加这些物质在植物体内的含量,从而获得抗逆转基因植株。     

羊红细胞超氧化物歧化酶的研究

自羊红细胞分离得到一种高等电点的铜.锌-超氧化物歧化酶(Cu.ZnSOD)。其沉降系数(S)为3.23,亚基分子量为16600,等电点为8.50,紫外最大吸收峰位于259nm,酶分子中含有铜和锌,氨基酸组成特点与其它动物来源的Cu.Zn-SOD相同。该酶的比活性为5500U/mg(黄嘌吟氧化酶—细胞色素还原法);对KCN的抑制作用敏感,最适pH值为6。     

鸭血超氧化物歧化酶(SOD)的纯化及性质研究

超氧化物歧化酶(E、C、1.15.1.1)是催化超氧阴离子起歧化反应的金属酶类,血红细胞中的SOD属Cu Zn—SOD。本文详细报道了从鸭血分离纯化SOD的改进方法(同时用猪血作对比研究)。设计了热变性、(NH_4)_2SO_4分级监析、低浓乙醇—氯仿短时去除残留血红蛋白、凝胶层析四步纯化方案,获得高产率电泳纯SOD。用紫外扫描,PAGE电泳后考马斯亮蓝和SOD活性杂色,SDS—电泳,HPLC分离和各电泳带组分的N—端测定等技术检测纯度,并进行性质研究。证明所得SOD是均一的;N—端为Ala;分子量和亚分子量各为32,359和16,500dt;并与猪血SOD对比研究其某些性质;对HPLC出现的多个活力峰及PAGE电泳显现的多条活性带进行了讨论。     

过氧化氢对铜锌超氧化物歧化酶活性及某些理化性质的影响

用H_2O_2作用于牦牛红细胞铜锌超氧化物歧化酶。观察到酶活性随H_2O_2浓度升高及作用时间增加而下降;酶分子连接的铜和锌有所丢失;PAGE图谱中三条酶活性带成为四条酶活性带;等电点下降;680nm处表征二价铜光学性质的可见光吸收减弱;紫外吸收增加,表现为增色效应;内源性荧光减弱;在含有3.0mol/LKCl的PH3.8—5.4琥珀酸缓冲液中溶解度下降;酶对胰蛋白酶水解的敏感性增加。     

超氧化物歧化酶两种邻苯三酚自氧化测定活力方法的比较

在同一反应条件下,以酵母SOD为原料,对2种邻苯三酚自氧化测定SOD的方法进行了比较,实验结果表明325 nm法测定的酶活力单位与420 nm法测定的酶活力单位的比值约为2.7,考察了不同浓度邻苯三酚对SOD活力的影响。     

自动超氧化物歧化酶（SOD）活性分析仪的研制

根据极谱氧电极法测定ＳＯＤ活性理论,应用计算机技术,研制出自动ＳＯＤ活性分析仪器。该仪器采用灵敏的氧电极和放大电路,以单片计算机为核心组成,使ＳＯＤ活性测试更加快捷,微量和准确,并基本实现自动测试。     

北京鸭红细胞铜锌超氧化物歧化酶电荷异构体的分离和某些性质

等电聚焦表明,北京鸭红细胞铜锌超氧化物歧化酶由等电点分别为５．０,５．３,５．９,６．１和６．５的五个主要的活性组分（电荷异构体）构成,利用分析型聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电流泳进行电荷异构体的制备级分离,采用三氯酸沉淀法快速确定蛋白条带的位置,电渗洗脱法回收蛋白,获得其中两个电荷异构体,对比研究结果表明电荷异构体的活性,在酸组成,二级结构等性质无明显差异。     

氧化性低密度脂蛋白与细胞自噬

氧化性低密度脂蛋白(oxygenized low density lipoprotein,oxLDL)水平的升高不仅引发动脉粥样硬化,还与癌症等疾病的发生有密切关系。研究发现,高水平的oxLDL在引发细胞凋亡的同时,也诱导多种细胞自噬。本文归纳了oxLDL与血管内皮细胞、乳腺上皮细胞、结肠癌细胞、颗粒细胞和神经细胞自噬关系的最新研究进展。     

金属螯合亲和层析法纯化猪红细胞超氧化物歧化酶

本文报道以Sephadex G-200为基质的金属螯合亲和层析法纯化SOD、其比活为4508U/mg蛋白,收率为90.4％,经酸、碱、SDS-PAGE、考马斯亮兰染色均呈一条带,特异性的SOD活性染色呈阳性。分子量为34,000,氨基酸组成测定表明Tyr含量少,Gly含量高,紫外吸收光谱最大吸收在258nm处,园二色谱结果表明SOD空间结构为β—折迭及无规态,含极少量或几乎不含α—螺旋,等电聚焦电泳测定SOD有微不均一性,等电点分别为5.25,5.35和5.65。     

构果原汁超氧化物歧化酶活性及营养成分分析

构果原汁超氧化物歧化酶活性及营养成分分析郭香凤史国安韩建国赵顺才（洛阳农业高等专科学校,洛阳４７１００３）Ａｎａｌｙｓｉｓｏｆｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅａｎｄｎｕｔｒｉｔｉｖｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｉｎｔｈｅｎｅａｔｆｒｕｉｔｊｕｉｃｅ...