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超氧化物歧化酶肾上腺素自氧化测定法的研究 总被引:13,自引:2,他引:11
本文研究了超氧化物歧化酶肾上腺素自氧化测定法的影响因素,发现在测试波长480um,反应液pH10.2,测试温度30℃的条件下,测试时间随肾上腺素浓度而相应改变。一份正常人红细胞样品测定20次,其变异系数CV=5.03%,酶提取液在4℃存放72小时,酶比活性不变,本方法具有微量、快速、灵敏、稳定及重复性良好等优点。 相似文献
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改良的连苯三酚自氧化测定超氧化物歧化酶活性的方法 总被引:160,自引:2,他引:158
超氧化物歧化酶(superoxide dismutase简称SOD)的测活方法很多。目前,国内外采用的连苯三酚自氧化法,其测定缓冲液均用HCl配制,而Cl~-对SOD有一定的抑制作用。为了提高SOD对超氧阴离子(O_2~-)的竞争能力,本法改用K_2HPO_4KH_2PO_4缓冲液。实验表明,改良法不仅比在TrisHCl缓冲液中测定灵敏度提高了50%,而且因减少了SOD的加入量,使酶被O_2~-所饱和。实验还表明,SOD在自氧化速率30—65%范围内,酶的加入量与抑制率成线性关系,见图1。 相似文献
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用月桂酸对人红细胞超氧化物歧化酶进行化学修饰处到酰化h-SOD,并对Ac-hSOD和h-SOD的稳定性进行了比较。结果表明:Ac-hSOD活力为h-SOD的72%,比活力为4000U/mg,Ac-hSOD的热稳定性,酸碱稳定性及抗蛋白酶水解能力均比天然酶提高。 相似文献
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用电子顺磁共振EPR技术研究铜锌超氧化物歧化酶(Cu·Zn-SOD)与底物(O_2~(·-)反应达到平衡态时铜离子的EPR波谱表明,在平衡态时的铜离子处于还原态。用还原剂H_2O_2、NaBH_4处理Cu·Zn-SOD后,酶活力变化不同,电泳行为也不同。用NaBH_4处理SOD其活性及电泳行为接近天然酶,但经H_2O_2还原后的酶活性损失严重,电泳后出现多条色带。 相似文献
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人铜锌超氧化物歧化酶的大规模生产工艺 总被引:1,自引:0,他引:1
本文以干扰素生产中废弃的人红细胞为原料,采用乙醇-氯份沉淀→磷酸氢二钾盐析→丙酮沉淀手续和DEAE—52层析步骤,进行了人铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)大规模生产工艺的实验研究。结果表明,生产的酶制剂中含量为90.6%,比活性在2000McCord—Fridovich单位/mg蛋白以上,无菌、无热原质、安全性等项指标符合国家卫生部对血液制品的要求。 相似文献
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扬子鳄红细胞超氧化歧化酶的纯化及其性质研究 总被引:1,自引:0,他引:1
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超氧化物歧化酶(SOD)研究进展 总被引:52,自引:0,他引:52
环境胁迫使植物细胞中积累大量的活性氧,从而导致蛋白质、膜脂、DNA及其它细胞组分的严重损伤。植物体内有效清除活性氧的酶类包括超氧化物歧化酶(SOD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、过氧化氢酶(CAT)等,其中研究最深入的是SOD。利用基因工程策略增加这些物质在植物体内的含量,从而获得抗逆转基因植株。 相似文献
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自羊红细胞分离得到一种高等电点的铜.锌-超氧化物歧化酶(Cu.ZnSOD)。其沉降系数(S)为3.23,亚基分子量为16600,等电点为8.50,紫外最大吸收峰位于259nm,酶分子中含有铜和锌,氨基酸组成特点与其它动物来源的Cu.Zn-SOD相同。该酶的比活性为5500U/mg(黄嘌吟氧化酶—细胞色素还原法);对KCN的抑制作用敏感,最适pH值为6。 相似文献
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超氧化物歧化酶(E、C、1.15.1.1)是催化超氧阴离子起歧化反应的金属酶类,血红细胞中的SOD属Cu Zn—SOD。本文详细报道了从鸭血分离纯化SOD的改进方法(同时用猪血作对比研究)。设计了热变性、(NH_4)_2SO_4分级监析、低浓乙醇—氯仿短时去除残留血红蛋白、凝胶层析四步纯化方案,获得高产率电泳纯SOD。用紫外扫描,PAGE电泳后考马斯亮蓝和SOD活性杂色,SDS—电泳,HPLC分离和各电泳带组分的N—端测定等技术检测纯度,并进行性质研究。证明所得SOD是均一的;N—端为Ala;分子量和亚分子量各为32,359和16,500dt;并与猪血SOD对比研究其某些性质;对HPLC出现的多个活力峰及PAGE电泳显现的多条活性带进行了讨论。 相似文献
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用H_2O_2作用于牦牛红细胞铜锌超氧化物歧化酶。观察到酶活性随H_2O_2浓度升高及作用时间增加而下降;酶分子连接的铜和锌有所丢失;PAGE图谱中三条酶活性带成为四条酶活性带;等电点下降;680nm处表征二价铜光学性质的可见光吸收减弱;紫外吸收增加,表现为增色效应;内源性荧光减弱;在含有3.0mol/LKCl的PH3.8—5.4琥珀酸缓冲液中溶解度下降;酶对胰蛋白酶水解的敏感性增加。 相似文献
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根据极谱氧电极法测定SOD活性理论,应用计算机技术,研制出自动SOD活性分析仪器。该仪器采用灵敏的氧电极和放大电路,以单片计算机为核心组成,使SOD活性测试更加快捷,微量和准确,并基本实现自动测试。 相似文献
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等电聚焦表明,北京鸭红细胞铜锌超氧化物歧化酶由等电点分别为5.0,5.3,5.9,6.1和6.5的五个主要的活性组分(电荷异构体)构成,利用分析型聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电流泳进行电荷异构体的制备级分离,采用三氯酸沉淀法快速确定蛋白条带的位置,电渗洗脱法回收蛋白,获得其中两个电荷异构体,对比研究结果表明电荷异构体的活性,在酸组成,二级结构等性质无明显差异。 相似文献
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金属螯合亲和层析法纯化猪红细胞超氧化物歧化酶 总被引:1,自引:0,他引:1
本文报道以Sephadex G-200为基质的金属螯合亲和层析法纯化SOD、其比活为4508U/mg蛋白,收率为90.4%,经酸、碱、SDS-PAGE、考马斯亮兰染色均呈一条带,特异性的SOD活性染色呈阳性。分子量为34,000,氨基酸组成测定表明Tyr含量少,Gly含量高,紫外吸收光谱最大吸收在258nm处,园二色谱结果表明SOD空间结构为β—折迭及无规态,含极少量或几乎不含α—螺旋,等电聚焦电泳测定SOD有微不均一性,等电点分别为5.25,5.35和5.65。 相似文献
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构果原汁超氧化物歧化酶活性及营养成分分析 总被引:12,自引:0,他引:12
构果原汁超氧化物歧化酶活性及营养成分分析郭香凤史国安韩建国赵顺才(洛阳农业高等专科学校,洛阳471003)Analysisofsuperoxidedismutaseandnutritivecompositionintheneatfruitjuice... 相似文献