反基因策略：基因治疗的新方向

合成的富含嘌呤或嘧啶的脱氧寡核苷酸可与双链ＤＮＡ内特定的同聚嘌呤、同聚嘧啶序列结合形成稳定的三螺旋结构（三链ＤＮＡ）。已在体外及体内证实了在靶基因内形成的局部三链ＤＮＡ可抑制其转录,这给肿瘤和病毒感染性疾病的治疗提示了新的方向,人们称之为反基因策略。然而,三链ＤＮＡ的稳定性不够理想和靶序列的选择范围较窄等问题的存在,在一定程度上限制了反基因策略的应用。     

三链DNA的分离纯化

λ－ＤＮＡ Ｈｉｎｄ ＩＩＩ热变性可得到单、双、三链ＤＮＡ等混合物,本文利用ＤＮａｓｅＩ选择性地将其中的单、双链酶解后,经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０分离,得到了纯化的三链ＤＮＡ,并对其进行了ＵＶ、荧光光谱、ＣＤ谱及Ｔｍ等性质测定。     

“三链DNA结构模型和能力学的理论生物学研究”获云南省科学技术一等奖

中国科学院昆明动物研究所刘次全研究员等 ,在中国科学院化学研究所ＳＴＭ实验室首次观察到变性条件下λ噬菌体ＤＮＡ三链辫状结构的直观形貌 ;在此基础上 ,参照ＴＡＴ三碱基体的有关结构参数 ,分别在Ｍ - 2 40 0计算机和ＳＧＩ系统的4Ｄ/ 80ｓ、 4Ｄ/ 2 0Ｇ和ＳＧＩＩｎｄｉｇｏＲ40 0 0上成功的构建了国内外第一个三链辫状结构模型 ;进而就三碱基体模型和能力学 ,ＤＮＡ三链结构模型和能力学 ,以及三链ＤＮＡ碱基配对相互作用三链和三链辫状ＤＮＡ构象比较方面 ,进行了系统的定量和半定量的理论生物学研究。在取得较大进展的基础上 ,又对…     

基因药物的前沿技术

基因药物的直接体内基因治疗发展迅速,新型基因药物不断产生。本文讨论了效果比较肯定的基因疫苗、反义ＲＮＡ药物、三链ＤＮＡ药物这三种新型基因药物技术的基本方法。分析了它们各自存在的优点和问题,并介绍了它们的应用范围及应用研究进展。     

反基因策略及其靶序列的选择

反基因策略及其靶序列的选择刘定燮,王昌才,黄建生（第一军医大学分子生物学研究所,广州５１０５１５）关键词三链ＤＮＡ,反基因策略合成的脱氧寡核苷酸在一定条件下可缠绕于ＤＮＡ双螺旋的大沟内并以氢键与其相互作用形成三链ＤＮＡ结构。一般把这类能形成三链结构的...     

利用Tag DNA聚合酶反转录cDNA第一链的研究

应用ＴａｑＤＮＡ聚合酶直接对ＲＮＡ进行反转录成ｃＤＮＡ第一链,然后用特异引物进行ＰＣＲ扩增,结果表明,反转录达到ＡＭＶ逆转录酶的效果,且可能得到比ＡＭＶ逆转录酶更完整的ｃＤＮＡ第一链。     

抗氧化剂对DNA损伤的保护作用机制的研究

在ＣｕＳＯ４－Ｐｈｅｎ－ＶＣ－Ｈ２Ｏ２－ＤＮＡ化学发光体系中测量了若干抗氧化剂对ＤＮＡ损伤的保护作用。实验发现抗氧化剂对ＤＮＡ有三种保护作用机制：Ⅰ,延迟ＤＮＡ损伤;Ⅱ,抑制ＤＮＡ损伤;Ⅲ,延迟兼抑制ＤＮＡ损伤。不同抗氧化剂有不同的作用机制。本文认为延迟损伤作用代表抗氧化剂的断链性作用,而抑制损伤作用代表抗氧化剂的预防性作用,从而为区别分析抗氧化剂的预防性作用和断链性作用提供了一个简便直观的方法     

DNA连接酶的结构与功能

在ＤＮＡ合成中 ,合成方向为 5′→ 3′ ,即一条链上是连续复制的 ,而另一条链的复制是不连续的 ,必须先合成岗崎片段 (真核细胞的岗崎片段为 10 0ｂｐ ,原核细胞的为 10 0 0ｂｐ)。ＤＮＡ连接酶的作用就是催化岗崎片段的连接以完成ＤＮＡ的合成。另外 ,ＤＮＡ连接酶在ＤＮＡ修复过程中也起重要作用 ,如在切除修复中 ,切除损伤的ＤＮＡ片段 ,以未受损伤的链作为模板合成一条新的ＤＮＡ链后 ,ＤＮＡ连接酶将新合成的ＤＮＡ链与原来的ＤＮＡ链之间的缺口封闭完成ＤＮＡ的修复。ＤＮＡ链未封闭的缺口对细胞具有潜在的危险性 ,所以 ,ＤＮＡ连接…     

Analysis of Quantum Mechanics Microscopic Mechanism on Genetic Mutagenesis of Laser

用量子力学研究了激光对ＤＮＡ的键（或链）的局域相互作用及激光对ＤＮＡ分子系统的相互作用的微观机理。研究结果可以解释激光的遗传诱变效应。     

基因治疗新前沿：反基因技术

反基因技术是以脱氧寡聚核苷酸与双链ＤＮＡ分子序餐特异性结合形成三链ＤＮＡ,从而在转录水平上调控基因的一种基因治疗策略。     

激光的遗传诱变效应的微观机理的量子力学分析

用量子力学研究了激光对ＤＮＡ的键（或链）的局域相互作用及激光对ＤＮＡ分子系统的相互作用的微观机理。研究结果可以解释激光的遗传诱变效应。     

三链DNA结构研究的新进展

本文详细总结了近年来三螺旋ＤＮＡ的结构和应用研究方面的进展，分析了各种因素（例如ｐＨ、抗衡离子、温度等）对三螺旋稳定性的影响，并提出了一些在三螺旋ＤＮＡ中富有挑战性的需进一步研究的问题     

植物分子分类与鉴定综述

以高等植物为对象,首先从ｎＤＮＡ、ｃｐＤＮＡ、ｍｔＤＮＡ三方面对植物分子分类与鉴定的分子基础进行综述,然后阐述ＲＦＬＰ、ＲＡＰＤ、ＡＦＬＰ及ＳＳＲ等分子分类方法的特点及应用。     

肽核酸及其应用

肽核酸（ＰＮＡ）是一咎人工合成的核苷酸类似物。它具有杂交特性,可选择性结合于双链ＤＮＡ,并可通过链置换形成（ＰＮＡ）２－ＤＮＡ三聚体。肽核酸在分子生物学和微生物学研究趴有广泛的用途,如作为杂交引物、ＤＮＡ绘图、ＰＣＲｃｌａｍｐｉｎｇ我杂交及反义药物等。     

流感病毒反向遗传操作及相关分子生物学研究

负链ＲＮＡ病毒由于其基因组ＲＮＡ和ｃＤＮＡ不具备感染性,限制了转染方法的建立和病毒复制及其调控等分子生物学研究。流感病毒核蛋白体（ＲＮＰ）转染方法和反向遗传操作的建立,使负链ＲＮＡ病毒复制及其调控、病毒载体改造和应用等研究成为现实。本文回顾了流感病毒反向遗传操作方法的研究进展及其在流感病毒复制调控和流感病毒载体构建等相关分子生物学研究中的应用。     

三链形成寡聚核苷酸的反基因作用机制

1957年Ｆｅｌｓｅｎｆｅｌｄ等发现一条ＰｏｌｙＡ链能跟两条ＰｏｌｙＵ链形成三螺旋 ,这是三链形成寡聚核苷酸 (ｔｒｉｐｌｅ ｆｏｒｍｉｎｇｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ,ＴＦＯ)研究的开始[1] 。随着ＤＮＡ合成技术的进展 ,人们能合成各种序列的寡聚核苷酸。1 987年ＬｅＤｏａｎ等[2 ] 发现聚嘌呤或聚嘧啶寡聚核苷酸能序列特异地结合于同聚嘌呤 /同聚嘧啶ＤＮＡ双链的大沟内 ,识别的机制包括形成Ｈｏｏｇｓｔｅｅｎ和反Ｈｏｏｇｓｔｅｅｎ氢键。现在常用的包括含 (Ｇ、Ａ) ,含 (Ｇ、Ｔ)或含 (Ｃ、Ｔ)的 3种ＴＦＯ以及它们的类似物。…     

正义-反义多肽的相互作用

遗传学中心法则指出,ＤＮＡ有义链（即正义链,ｓｅｎｓｅＲＮＡｓｔｒａｎｄ）可转录为单链ｍＲＮＡ,其核苷酸序列决定蛋白质的氨基酸序列。虽然ＤＮＡ无义链（即反义ＤＮＡ链,ａｎｔｉｓｅｎｓｅＤＮＡｓｔｒａｎｄ）能以框转录方式转录成反义ｍＲＮＡ,甚至能以框翻...     

三锭DNA结构研究的新进展

本文详细总结了近年来三螺旋ＤＮＡ的结构和应用研究方面的进展,研究了各种因素对三螺肇稳定性的影响,并提出了一些在三螺肇ＤＮＡ中富有挑战性的需进一步研究的问题。     

.OH在博莱霉素A5介导的DNA断链反应中的作用

利用ＥＳＲ技术研究了博莱霉素Ａ５（ＢＬＭＡ５）、Ｆｅ＾２＋,Ｏ２体系中．ＯＨ的产生。并用ＴＢＡ反应检测了该系对ＤＮＡ的断链作用。以Ｆｅ＾３＋,Ｃｕ＾＋或Ｃｕ＾２＋替换Ｆｅ＾２＋,则体系中无．ＯＨ产生,同时也失去对ＤＮＡ的断链作用;一定浓匠．ＯＨ清除剂可完全清除．ＯＨ,地对ＤＮＡ断链影响甚微;还原剂可淬灭体系中的．ＯＨ,却能促进ＤＮＡ的断链反应;ＳＯＤ可清除体系中的．ＯＨ,失活的ＳＯＤ夫此功能,但两     

DNA分子标记技术及其在植物遗传多样性研究中的应用

本文阐述了ＤＮＡ限制性片段长度多态性、ＤＮＡ指纹图谱、单位点小卫星、单位点微卫星及随机扩增多态ＤＮＡ等主要的ＤＮＡ遗传标记技术的基本原理和方法．综述了不同ＤＮＡ标记的优缺点及其在植物遗传多样性研究中的应用前景．