国外科技简讯

第三代Bt杀虫剂问世 据ANI 1995年3月报道:美国宾夕法尼亚州Ecogen公司已获得美国环境保护局的准许,将重组苏云金芽孢杆菌(Bt)生物杀虫剂“Raven”投入市场。Raven是在美国环境保护局注册的第一种重组Bt,也是第三代Bt生物杀虫剂。该杀虫剂包含了来自不同的Bt株系的复合蛋白,其有效成分为8％马铃薯甲虫活性毒素和2％蠋毒素。由于马铃薯甲虫已对化学杀虫剂产生了抗性,因此化学防治日渐失效。1994年Raven田间防治试验表明效果良好,为此科学家建议将其与化学杀虫剂结合施用。据统计,目前Raven在世界市场上的销售金额已高达5—10百万美元。     

2'-'5-三腺苷酸对巨噬细胞腺苷酸环化酶和cAMP-磷酸二酯酶活性的影响

1989年,我们曾首次证实干扰素作用介导物pppA2＇p5＇A2＇p5＇A(2＇-5＇-三腺苷酸,2＇-5＇P_3A_3)能引起巨噬细胞中cAMP,cGMP水平升高,表明这两种环核苷酸在传递干扰素信息中起着重要作用。在上述研究的基础上,本研究观察了2＇-5＇P_3A_3对腺苷酸环化酶(AC)和cAMP-磷酸二酯酶(cAMP-PDE)两种酶的活性影响,结果发现,1×10~(-6)mol/L的2＇-5＇P_3A_3可显著增加AC的活性,而对cAMP-PDE活性沒有显著影响,这说明2＇-5＇P_3A_3引起的细胞内cAMP水平的升高是由于激活AC而使其生成增多,而不是抑制cAMP-PDE而使其降解减少的结果。     

美国Mycogen公司在日本寻求开发微生物农药的合伙人

美国 Mycogen 公司(加利福尼亚州圣迭戈)正在日本寻找开发微生物除草剂和重组微生物杀虫剂的合伙人并开始销售。计划是提供该公司的所有技术的独占权,并开发适应包括日本在内的亚洲地区的微生物农药。介绍日本企业和 Mycogen 公司合作的是三菱商事公司。Mycogen 公司是一个风险企业,它探索有用微生物和来自微生物的生理活性物质,设法将它们用于农业。它拥有100多株杀虫谱不同的微生物杀虫剂苏云金芽孢杆菌(Bacillus th-uringiensis,Bt),并从60株中克隆化了毒素基因。它发现了对马铃薯甲虫有效的苏云金芽     

蜘蛛毒素型生物杀虫剂在开发中

美国天然产品科学公司(NPS)(犹它州盐湖城)和TMC集团(伊利诺依斯州芝加哥市)正以一种蜘蛛毒素跨入生物杀虫剂竞技场。这种毒素对人无害,但对于主要作物害虫却是致命的。现已将这种毒素的基因克隆于能攻击毛虫(尤其是夜蛾)的重组病毒之中。不过,两公司还必须确定这种杀虫剂在经济上是否能站住脚,以及在大田中的药效持续时间能否与常规杀虫剂相竞争。两公司认为他们至少已经解决了应用蜘蛛毒素时的两个关键问题,即接触或摄食无效、在环境中降解太快,不能象常规杀虫剂那样施用。科学家将此毒素基因插入昆虫病毒中,从而攻破了这两道关卡。喷     

表达蝎毒素的重组斜纹夜蛾核型多角体病毒(SpltMNPV)的构建及毒力

【目的】开发高毒力的重组斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litura multicapsid nucleopolyhedroviruse,SpltMNPV)杀虫剂。【方法】构建编码蜕皮激素UDP-葡萄糖基转移酶(ecdysterioid UDP-glucosyl transferase gene,egt)基因缺失并插入东亚钳蝎神经毒素(B.martensi Karsch,BmK ITa1)基因的重组转移载体,重组转移载体与SpltMNPVⅡ基因组DNA共转染斜纹夜蛾细胞,通过荧光斑法与有限稀释法相结合筛选重组病毒。【结果】成功筛选出缺失egt基因的、早期启动子(ie-1)启动的、表达BmK ITa1成熟肽的重组病毒SpltMNPV-Δegt-Pph-egfp-ie-1-BmK ITa1。生物测定结果显示,重组病毒的杀虫速度(LT50)较野生病毒提前0.7-0.8 d。【结论】通过在SpltMNPV病毒基因组中插入外源毒素基因可明显增强病毒的杀虫效果,结果说明开发高毒力SpltMNPV生物杀虫剂具有可行性。     

核型多角体病毒侵染及其与宿主免疫系统互作的研究进展

核型多角体病毒(Nucleopolyhedrovirus,NPV)应用广泛,已被开发成微生物杀虫剂和用于重组蛋白表达等.NPV具有两种病毒颗粒:包埋型病毒粒子(occlusion-derived virus,ODV)和芽生型病毒粒子(budded virus,BV),两者的构成和组装存在差异.病毒包涵体在肠道中溶解后释...     

重组病毒杀虫剂应用研究进展

应用分子生物学技术可以将昆虫特异性的毒素基因、某些酶基因等外源基因插入昆虫病毒基因组,或通过改造昆虫病毒基因组等方法构建重组病毒杀虫剂,提高杀虫效果。温室及田间释放实验证实,重组病毒杀虫剂可以显著提高现场防治效果。连续多代抗性筛选实验表明,宿主被诱导产生对重组病毒杀虫剂抗性的速度低于野生型病毒杀虫剂。采用在剂型中添加光增白剂等保护剂、在基因组中插入具有增效作用的基因、应用病毒增强蛋白等技术可以提高重组病毒杀虫效果。随着基因工程技术的发展和安全性研究的深入,以重组杆状病毒为主的重组昆虫病毒杀虫剂的应用研究正面临着突破。     

温度对菊酯类杀虫剂在枸杞蚜虫作用机制的影响

【目的】枸杞蚜虫Aphis gossypii Glover是枸杞上的重要害虫,危害枸杞的蚜虫主要是棉蚜,化学防治是最主要的防治方法之一。菊酯类杀虫剂被认为是负温度系数的农药,本文主要研究了温度对菊酯类杀虫剂在棉蚜作用机制的影响。【方法】室内采用药膜法测定了不同温度下3种菊酯类杀虫剂对棉蚜的毒力;采用试剂盒测定了不同温度下3种菊酯类杀虫剂对棉蚜Na~+-K~+-ATPase和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase的活性抑制;采用DPH作为探针,应用荧光偏振的方法测定了温度对菊酯类杀虫剂在棉蚜线粒体膜流动性的影响。【结果】在温度分别为17、27、37℃时,溴氰菊酯对棉蚜的毒力表现为正温度系数,百树菊酯和氰戊菊酯表现为负温度系数。当3种菊酯类杀虫剂浓度为1×10~(-4) mol/L,3种杀虫剂对两种ATPase的抑制均表现负温度系数。在不同温度下,3种杀虫剂对棉蚜线粒体膜流动性的影响表现出相似的变化趋势:低温下影响大,高温下影响小,呈现负温度系数。【结论】影响菊酯类杀虫剂温度系数的机制比较复杂,ATPase和线粒体膜流动性在负温度系数中起着重要的作用。     

防治科罗拉多甲虫的生物杀虫剂

Ecogen Inc.已得到美国环保署(EPA)的批准,可以销售其重组苏云金芽孢杆菌(Bt)产品Raven生物杀虫剂。 Raven的用途是防治科罗拉多马铃薯甲虫(CPB) (Leptinotarsa decemlineata),其世界范围     

杀虫剂轮用和混用对害虫种群抗性演化的影响

杀虫剂轮用和混用是当前害虫抗药性治理中最常采用的两种用药策略。该文用抗性模型和室内试验对轮用和混用延缓害虫抗性演化的效果及轮用最佳间隔期问题作了研究。模型模拟结果表明,在延缓害虫抗性演化方面轮用和混用对抗性演化的影响主要取决于杀虫剂作用强度、抗性基因型个体的适合度大小和杀虫剂混用后的毒理效应类型。两种杀虫剂轮用时,轮用间隔期以1(即两种杀虫剂隔次施用)为佳。以模型昆虫小菜蛾Plutella xylostella在室内试验结果表明,氰戊菊酯单用(I)及与杀虫单轮用(II)和混用(1∶1)(III)连续处理8代后,抗性个体频率为0.01的小菜蛾种群其3龄幼虫对氰戊菊酯的抗性分别上升了75.87(I)、28.67(II)和58.72(III)倍,与模型模拟结果表现出较好的一致性。据此,作者认为抗性模型可用于预测害虫抗性演化和评价抗性治理策略。     

重组GNA对蚜虫的抗生效应

雪花莲外源凝集素(GNA)对蚜虫有强烈的毒性,是防治蚜虫最有希望的植物源蛋白杀虫剂。该试验在获得高效表达GNA的重组大肠杆菌的基础上,测试了重组GNA蛋白对蚜虫的抗生效应。采用5种不同浓度的重组GNA直接喷杀蚜虫,观测蚜虫吸食重组GNA后的成活率,生殖速率和平均繁殖率等生命参数,结果表明浓度为0．2g／L时即对蚜虫有明显的致死性和降低生殖、抑制发育进程的作用,且随浓度升高,毒性作用加强。     

美国生物技术市场预测:重组微生物杀虫剂与重组植物的竞争

目前使用范围受限制的苏云金杆菌(Bt)微生物农药由于重组DNA技术的出台,使用范围会扩大。新技术能向植物体内导入微生物的杀虫成分,所以不需要喷洒农药工作。对它们都存在安全管理上的问题,但通过两者生物技术的应用,都能大幅度减少合成有机杀虫剂的使用量。微生物农药与基因操作植物竞争本预测仅限定作物处理用的杀虫剂,不包括家庭甩、草坪和花坛、森林、家畜、以及非农业的商业利用。表中的1991年杀虫剂使用量的数字是按美国农业部及美国国际贸易委员会的数据和来自产业界方面的资料推算的,重组微生物农药可能取代目前玉米、棉花,大豆三大作物的杀虫剂的25％。同时现在用于     

真菌对rDNA产物越来越有用

利用一种表达系统已在一些丝状真菌中产生出一种组织血纤维蛋白溶酶原激活剂(t-PA)和其它一些重组体蛋白,这种表达系统是由 ZymoGenetics 公司的 Alan Upshall参加的,由工业微生物学会于8月10～15月在旧金山(加利福尼亚)召开的一次年会上叙述的。ZymoGenetics 公司(因研究重组体酵母而十分有名)不是注视重组体丝状真菌的一家唯一公司。Genencor 公司(南旧金山,加利福尼亚)以及或许还有其它一些公司正在注视这些微生物(在工业规模上将长期用来生产传统发酵产品)以生产重组体蛋白。     

乌桕金带蛾核型多角体病毒的理化性质和内切酶分析

1985年我们从自然罹死的乌桕金带蛾(Eupterote sapivora yang)幼虫分离到一株核型多角体病毒,经电镜观察认为是杆状病毒属(Baculovirus)中的一种病毒(简称EsNPV)。研究昆虫病毒的分子遗传学及基因重组和表达,制备安全有效的昆虫病毒杀虫剂等,首先都要纯化病毒,对其理化性质需要有较全面的了解。为此,本文对该病毒的理化性质和限制性     

Amgen公司宣布用促红细胞生成素治疗肾透析病取得进展

Amgen公司(索仁奥克斯,加利福尼亚)宣布,它应用一种由重组体DNA衍生而来的药物治疗贫血症(与慢性肾病患者进行肾透析有关)首次获得成功。美国西北肾脏研究中心(西雅图,华盛顿)正在对人促红细胞生成素(发现于血液中的一种蛋白,这种蛋白可调节和控制红血球生产)进行一些临床试验。按治疗剂量标准接受重组体促红细胞生成素的所有病人经治疗后确有好转,表明他们的     

用载体pUR222分析乙型肝炎病毒基因片段的DNA顺序

将含有乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)的基因片段用核酸外切酶BAL-31消化,加EeoR Ⅰ接头,插入载体pUR222的多克隆接头的EcoR Ⅰ位点,转化受体菌Ecoli K12 BMH 71-18,取3个产生HBcAg水平不一的克隆株重组子作DNA顺序分析,用Sal Ⅰ从接头当中靠近Pst Ⅰ位点一端将重组DNA切开,用(α-~(?)P)dCTP和DNA聚合酶Ⅰ klenow片段,标记3＇末端,并将粘性末端补平,再用pst Ⅰ从靠近此位点(~(?)P)标记的3＇末端切掉四个核苷酸,使只保留一个标记末端,采用Maxam和Gilbert的方法化学降解,由互补链3＇端阅读DNA顺序,发现HBcAg表达水平与mRNA的起始密码前保留发卡结构的长短有很大关系。     

六种常见杀虫剂对西花蓟马和花蓟马的毒力测定

为了明确常用杀虫剂对入侵害虫西花蓟马和本地近缘优势种花蓟马的毒力作用,在室内采用菜豆浸渍饲喂法,分别测定了6种常用杀虫剂对云南昆明地区两种蓟马2龄若虫、雌虫及雄虫的毒力。结果表明:6种杀虫剂对西花蓟马和花蓟马2龄若虫和成虫的LC_(50)以6%乙基多杀菌素的最低,对西花蓟马和花蓟马2龄若虫和成虫LC_(50)值分别为:0.611、0.333 mg/L和1.731、1.202 mg/L;LC_(50)值以10%吡丙醚最高,对西花蓟马和花蓟马2龄若虫和成虫LC_(50)值分别为1238.005、845.819 mg/L和9037.110、4766.376 mg/L。6种杀虫剂对西花蓟马和花蓟马各虫态的毒力作用依次为:乙基多杀菌素阿维菌素溴氰菊酯啶虫脒吡虫啉吡丙醚,且所有供试杀虫剂对西花蓟马LC_(50)均大于花蓟马,对雌虫LC_(50)大于雄虫。说明了蓟马雌虫对杀虫剂的敏感度低于雄虫,且生物源杀虫剂的室内杀虫效果强于化学杀虫剂,是西花蓟马防治中优先选择的杀虫剂。     

杀虫剂混用的毒力测定

<正> 杀虫剂的合理混用不但能提高防治效果,而且是防治抗性害虫的有效手段之一。特别是增效作用的研究,在某些情况下,还可以为我们进一步了解杀虫剂的毒理作用提供线索。 Biss早在1939年就指出,杀虫剂混合时可以出现以下几种情况: (一)相似的联合作用(similar joint action)指二种毒理作用相似的杀虫剂混用,因其作用相似可作用于同一生理部位(如DDT和DDD,艾氏剂与狄氏剂等),因此一种杀虫剂的量若用适量的另一种杀虫剂来代替,可以获得同样的结果。     

小菜蛾海藻糖酶酶学特性及四种杀虫剂对其活性的抑制作用

本试验以4龄小菜蛾Plutella xylostella(L.)体内海藻糖酶为研究对象,研究了其酶学特性以及4种常用杀虫剂在离体条件下对其活性的影响。结果表明,小菜蛾体内海藻糖酶的最适反应pH为6.0,温度50℃,其米氏常数(Km)为(12.57±0.99)mmol/L,最大反应速度(Vm)为(0.775±0.04)mmol/(min·g pro)。在药剂浓度为40mg/L时,4种杀虫剂(丙溴磷、灭多威、仲丁威和多杀霉素)对4龄幼虫海藻糖酶活性均有不同程度的抑制作用,其抑制率分别为25.83%、20.19%、18.99%和18.62%;而且随着药剂浓度的增加,上述4种杀虫剂对小菜蛾海藻糖酶活性的抑制率也逐渐增大。     

HaSNPV几丁质酶基因在大肠杆菌和昆虫细胞中的表达及其产物对Bt杀虫剂的增效作用

为了探索杆状病毒几丁质酶对微生物杀虫剂的增效作用及其利用途径 ,分别在大肠杆菌和昆虫细胞中表达棉铃虫单粒包埋型核型多角体病毒 (HaSNPV)几丁质酶 .用PCR方法扩增出不含N端信号肽编码序列的几丁质酶基因片段 ,并分别克隆至原核表达载体pET2 8a和重组到杆状病毒BactoBac表达系统 ,在大肠杆菌 (E .coli)BL2 1和粉纹夜蛾 (Trichoplusiani)细胞系Tn 5B1 4中分别进行了表达 .在大肠杆菌中表达量约占细菌总蛋白 15 % ,在昆虫细胞中表达量约占细胞总蛋白10 % .将含有几丁质酶的大肠杆菌和昆虫细胞表达产物添加到苏云金杆菌 (Bt)菌液中一起喂食 2龄家蚕 .结果显示 ,HaSNPV几丁质酶基因的 2种表达产物和Bt杀虫剂的混合物使处理的家蚕的致死时间较对照处理均明显缩短 .昆虫细胞和大肠杆菌表达产物与Bt混合物处理的LT50 分别从 93 5h和 95 1h缩短到 5 6 2h及 6 7 2h ,并且供试家蚕的生长速度明显缓慢 .研究结果表明 ,重组的HaSNPV几丁质酶有望作为Bt杀虫剂的增效剂