‘红皮’马铃薯试管苗培养和微型薯诱导

以‘红皮’马铃薯块茎上的芽为材料进行试管苗诱导、增殖及试管微型薯诱导研究。结果表明：在MS + 6-BA 0.5 mg/L +活性炭0.17% + 蔗糖20 g/L培养基中培养30 d,试管苗增殖系数达8.6;MS + 6-BA 0.5 mg/L +活性炭0.17% +蔗糖100 g/L培养基中试管微型薯诱导效果较好,30 d后诱导率达62.5%,试管薯平均直径为4.2 mm。     

正交实验法在香果树种质离体保存中的应用

以香果树带芽茎段为外植体,采用正交实验法研究活性炭、琼脂、封口材料和培养容器对香果树试管苗离体保存的影响。结果表明,香果树带芽茎段用200 ml三角瓶,无菌培养容器封口膜封口,保存于MS+KT 2.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+30 g/L蔗糖+0.5 g/L活性炭+7.5 g/L琼脂培养基上6个月后,成活率可达86.3%。离体保存的试管苗没有发生遗传变异。     

中国石竹离体快繁与试管苗玻璃化研究

研究了培养基组成成分对中国石竹品种Diana F1 White组培程序中种子萌发、诱芽增殖、试管苗玻璃化及生根等重要环节的影响。结果表明:(1)种子适宜的萌发培养基为1/2MS,在此培养基中种子萌发率为83.33%,播种后30d时无菌苗高度达6.99cm,叶片数达26.7。(2)在芽诱导阶段玻璃化苗发生率最高可达53.85%。将光照强度提高至2000lx后,采用培养基MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L+琼脂8.0g/L+蔗糖8.0g/L进行诱芽培养,玻璃化苗发生率降至3.33%,外植体出芽率达到90%,单个外植体出芽数达到7.2个。(3)适宜的生根培养基为1/2MS+1.0mg/LIBA+琼脂8g/L+蔗糖40g/L,培养30d时生根率为100%,平均根条数达到24.7条,平均根长度达到4.7cm。试管苗在消毒后的腐殖土中移栽,成活率达95%。该研究结果为DianaF1试管苗的快速繁殖提供科学依据。     

外源H2O2胁迫对大蒜试管苗玻璃化的影响

以大蒜品种‘二水早’为材料,研究不同浓度外源H2O2胁迫对大蒜试管苗的玻璃化发生及生理生化变化的影响.结果表明,在不同浓度外源H2O2处理下,大蒜玻璃化试管苗百分率、组织含水量、MDA含量、电解质渗透率、SOD和POD活性均高于对照,且随H2O2浓度的增加而升高,叶绿素含量则表现相反的趋势;在同一H2O2浓度下,大蒜玻璃化试管苗的组织含水量、MDA含量、电解质渗透率、SOD、POD和CAT活性均显著高于大蒜正常试管苗,叶绿素含量低于正常试管苗.研究发现,外源H2O2胁迫对大蒜试管苗玻璃化有促进作用.     

蓝莓玻璃化试管苗的显微结构及生理生化特性变化

研究了蓝莓试管苗玻璃化的显微结构、超微结构以及生理生化特性的影响。与正常试管苗相比,蓝莓玻璃化苗的茎、叶显微结构发生了明显的改变：叶片表皮细胞松散、不连续;气孔结构难以辨认;叶片增厚;缺少栅栏组织,海绵组织细胞间隙变大,部分细胞解体;茎的维管组织发育不良;亚显微结构观察发现,玻璃化苗叶肉细胞体积增大,细胞壁变薄;部分细胞缺少细胞核及线粒体;叶绿体数目减少,类囊体解体,缺乏淀粉体。玻璃化试管苗的生理生化特性也发生了显著的改变：玻璃化苗组织含水量显著增加;叶绿素、可溶性糖及可溶性蛋白含量显著降低;O2- 产生速率、H2O2积累量、MDA含量及相对电导率显著升高;活性氧清除酶系中POD活性显著升高,SOD和CAT活性显著降低;PAL活性下降。蓝莓玻璃化苗的形态结构异常,水分及物质代谢紊乱,活性氧清除能力降低,表明玻璃化与氧化胁迫相关。     

甜瓜试管苗继代培养玻璃化现象的研究

试管苗玻璃化现象是甜瓜组织基因转化过程中试管苗继代培养过程中的一大障碍,采用在培养基中提高糖和琼脂的浓度,添加适当的钙离子,细胞分裂素6-BA含量不超过0.2mg/L,生长素IAA用量控制在0.5mg/L,适当的光,光照强度和温度对克服甜瓜玻璃苗玻璃化现象有明显的效果.     

青钱柳组培快繁体系的初步研究

以青钱柳成熟胚为实验材料,对建立青钱柳组培快繁技术体系进行初步研究.结果表明,离体胚在添加30 g/L蔗糖、6.5 g/L琼脂的培养基中培养60 d,成苗率可达到72.67%.通过正交试验筛选出丛生芽诱导增殖的最佳培养基为WPM+0.5 mg/L 6-BA+0.01 mg/L IBA+30 g/L蔗糖,适宜的继代周期为40 d,丛生芽诱导率可达到93.33%,增殖系数最高为4.75,3种激素对丛生芽增殖系数的影响程度依次为IBA>6-BA>KT,其中IBA有显著影响.培养基中添加适当浓度的烯效唑和稀土镧对试管苗的壮苗和生长均有促进作用,其最适浓度分别为0.1 mg/L和5 mg/L.适宜浓度的IBA对试管苗生根有一定促进作用,采用WPM+0.2 mg/L IBA+20 g/L蔗糖培养基进行诱导,生根率为16.67%,经过15 d暗诱导处理,生根率可提高到23.33%.     

外源ABA对大蒜试管苗玻璃化发生和抗氧化系统的影响

以大蒜品种‘二水早’试管苗为材料,从活性氧代谢的角度研究了外源ABA、H_2O_2和H_2O_2+ABA处理下的试管苗玻璃化率、活性氧积累与组织定位和抗氧化系统的响应特征,探讨ABA缓解试管苗玻璃化过程的机理。结果表明:(1)外源H_2O_2处理可诱导大蒜试管苗玻璃化发生,外源ABA处理下玻璃化率最低,可以缓解H_2O_2诱导的玻璃化的发生。(2)试管苗O_2~产生速率和H_2O_2含量在H_2O_2处理下最高,在ABA处理下最低;在添加H_2O_2的培养基中同时添加ABA能显著减少因外源H_2O_2处理引起的O_2~产生和H_2O_2积累。(3)试管苗CAT、POD和APX活性在外源H_2O_2处理前期(0~8d)均上升并显著高于对照,但其CAT、APX活性在处理后期(8~16d)下降,其同期POD活性也增加缓慢;各抗氧化酶的活性在外源ABA与H_2O_2+ABA处理前期(0~8d)均呈直线上升趋势,而它们在H_2O_2+ABA处理后期(8~16d)均显著高于H_2O_2处理。(4)各处理试管苗抗坏血酸和谷胱甘肽含量随处理时间先升高后降低,并以外源ABA处理下最高,外源H_2O_2处理下最低。(5)试管苗O_2~和H_2O_2产生部位主要在基部和叶尖,且外源ABA处理下组织中ROS的积累最少。(6)在ABA+H_2O_2处理下,大蒜试管苗内丙二醛含量和膜相对透性显著低于对照和H_2O_2处理。研究发现,外源ABA处理可有效降低大蒜试管苗的内源O_2~产生速率和H_2O_2含量,提高抗氧化酶活性和抗氧化物质含量,抑制活性氧在试管苗内的产生和运输,显著降低试管苗玻璃化率;外源ABA可通过增强大蒜试管苗抗氧化能力来抑制玻璃化发生。     

甜瓜离体再生继代培养中玻璃化现象的研究

为提高甜瓜离体培养的再生率和转基因效率,以优质甜瓜品种‘伽师瓜’(‘卡拉库赛’)离体再生不定芽为外植体,通过连续多代继代培养,对引起玻璃化苗现象的几个主要因素进行了研究。结果表明,在甜瓜离体再生继代培养中,外植体继代次数是影响玻璃化发生的主要因素,同时培养基中的6-BA浓度偏高、琼脂浓度偏低以及蔗糖浓度偏低或偏高等可导致玻璃化苗的增加。培养基中较低的6-BA浓度(0~0.2 mg/L),琼脂浓度为6 g/L,蔗糖浓度为25 g/L以及添加活性炭等措施可有效地降低甜瓜玻璃化苗的发生。     

试管苗玻璃化现象的生理生化和机理探讨

试管苗玻璃化现象的生理生化和机理探讨梁海曼,周菊华（杭州大学生物系杭州３１００１２）关键词试管苗,玻璃化现象,生理生化特点,机理ＰＨＹＳＩＯＬＯＧＩＣＡＬ,ＢＩＯＣＨＥＭＩＣＡＬＣＨＡＲＡＣＴＥＲＩＳＴＩＣＳＡＮＤＭＥＣＨＡＮＩＳＭＥＸＰＬＯＲＡＴＩ...     

百里香组织培养过程中玻璃化问题的研究

以百里香茎切段为外植体进行组织培养和快速繁殖试验研究,分化率很高,可达100%;但培养过程中玻璃化现象较为严重,解决这一问题的途径,主要是在增殖倍数较高的培养基MS+KT 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L的基础上,加入0.3 mg/L的GA3,增加蔗糖浓度为50 g/L,琼脂8 g/L,可有效控制玻璃化苗的比例和玻璃苗的逆转。     

香蕉离体茎尖超低温保存研究

以香蕉(Musaspp.)试管苗为试材,对其离体茎尖小滴玻璃化法超低温保存的影响因素进行了研究。小滴玻璃化法和玻璃化法超低温保存后再生率的差异表明,香蕉更适合用小滴玻璃化法进行超低温保存。香蕉小滴玻璃化法超低温保存的方案如下:试管苗在60g/L蔗糖的MS培养基上培养1~2个月,剥离带有1~2片叶原基的茎尖,室温下装载30m in(可延长至4h),0℃下PVS2处理40~50m in。6个基因型的14个品种的再生率平均为46.9%。通过SSR分子标记检测,再生植株的遗传稳定性没有发生改变。该结果为香蕉种质资源的长期保存提供了理论依据和技术支撑。     

文心兰试管苗分化及育苗技术研究

文心兰原球茎分化苗过渡驯化培养试验表明,改良1号+椰子汁100g/L的培养基有利于原球茎分化成苗,能促进分化苗生长健壮、整齐度好。壮苗与生根培养试验表明,以改良1号为基本培养基,加入香蕉泥100g/L、活性炭1g/L,在较强光照(2 000~3 000 lx)下培养,植株各项生长指标表现较好,有利于后期炼苗成活;以三角瓶为定瓶容器培养,植株接种效率最高、污染率最低;选取3cm高的植株定瓶,可显著提高文心兰工厂化组培育苗的工作效率。     

GA_3、6-BA、IBA与活性炭对李胚萌发及幼苗生长影响

正交试验结果表明,李胚萌发及幼苗生长的最佳培养基是含有10mg/L的GA_3、5mg/L的6-BA、0.5mg/L的IBA和200mg/L的AC(活性炭),仅培养10d即获得全部萌发且根、茎生长均正常的试管苗。对胚萌发的影响大小依次为GA_3(?)6-BA、AC、IBA,对幼苗生长的影响大小依次为AC、GA_3、6-BA、IBA。     

红芽芋球茎片两步法离体快繁及其再生苗生理和光合特性研究

以江西铅山红芽芋(Colocasia esculenta L.Schott var.cormosus‘Hongyayu’)试管苗为材料,建立了芋球茎片两步法离体快繁体系,并对其再生苗的形态指标、染色体数目、生理和光合特性以及叶绿素荧光特性进行了检测。结果表明:(1)红芽芋球茎片单芽诱导的最佳培养基为MS+KT 2 mg/L+6-BA 1 mg/L+NAA0.1mg/L,诱导培养30d后将单芽从球茎片上分离,再接种到生根培养基(MS+KT 2mg/L+NAA 0.1mg/L)上培养30d即可形成完整植株,移栽成活率高达98%;(2)由球茎片单芽、丛生芽、不定芽离体快繁获得的红芽芋再生苗在形态指标、叶下表皮气孔参数、染色体数目、生理生化指标以及叶片光合特性参数和叶绿素荧光特性方面均无显著差异。说明红芽芋球茎片两步法离体培养的再生苗繁殖系数高、染色体数目稳定,该离体快繁体系可应用于江西铅山红芽芋的工厂化生产。     

长白落叶松体胚发生再生体系优化

以长白落叶松(Larix olgensis)未成熟合子胚为外植体诱导胚性愈伤组织, 通过调节影响体胚发生的营养物质和植物生长调节剂配比, 进行愈伤组织的胚性恢复与保持以及体胚发生再生体系的优化。结果表明: 不同无性系之间胚性愈伤组织诱导率差异显著, 胚性愈伤组织在S+0.2 mg·L ^-1NAA+0.5 mg·L ^-1BA+0.5 mg·L ^-1KT+0.5 g·L ^-1谷氨酰胺+0.5 g·L ^-1水解酪蛋白+30 g·L ^-1蔗糖及3.0 g·L ^-1植物凝胶培养条件下, 可以恢复胚性并长久保持。在S+20 mg·L ^-1ABA+60 g·L ^-1PEG₄₀₀₀+60 g·L ^-1蔗糖及3.0 g·L ^-1植物凝胶条件下分化培养6周, 体胚发生率可达100%。将正常发育的体胚先在WPM+ 6 mg·L ^-1间苯三酚+1.0 g·L ^-1活性炭+3.0 mg·L ^-1VB₁+20 g·L ^-1蔗糖及3.0 g·L ^-1植物凝胶条件下培养2周, 再转接至B₅+ 0.4 mg·L ^-1NAA+1.0 mg·L ^-1IBA+0.5 mg·L ^-1GA₃+2.0 mg·L ^-1VB₁+1.0 g·L ^-1活性炭+20 g·L ^-1蔗糖及3.0 g·L ^-1植物凝胶条件下培养2周, 可见子叶舒展、下胚轴伸长且根系正常的体胚苗。该研究建立了长白落叶松胚性愈伤组织胚性恢复与保持方法, 并进一步优化了体胚发生的植株再生体系, 为林木资源快速繁育和遗传改良奠定了基础。     

巴戟天种质离体保存研究

以巴戟天试管苗为材料,研究不同浓度的无机盐、蔗糖和四种植物生长调节剂(CCC、PP333、ABA、MH)对巴戟天试管苗保存的影响。结果表明:巴戟天试管苗在无生长调节剂的MS、1/2MS、1/4MS三种无机盐浓度培养基上均能保存培养360d,存活率达90%;蔗糖浓度为20~40g/L时,植株生长健壮,能延长保存时间;四种生长调节剂均能诱导试管苗侧芽的生成,抑制顶芽和叶片的生长。其中以PP333促进壮苗效果最好,能提高试管苗素质,在1/2MS+PP3330.5~1.0mg/L+蔗糖30g/L培养基上,试管苗能保存480d,存活率达100%。     

安诺兰无菌播种组培快繁技术研究

安诺兰(Anota hainanensis)种子无菌播种试验表明:在MS+6-BA 0.1 mg/L培养基上种子能形成原球茎团;1/2 MS培养基有利于原球茎增殖,加6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L原球茎增殖效果较佳,增殖率达793.3%;在1/2 MS+IBA 1.0 mg/L+2.0 g/L活性碳+100 g/L香蕉匀浆+100 ml/L椰子水的培养基上,试管苗生根效果最好;试管苗移栽至椰糠上,成活率达91.4%。     

不同保鲜剂对非洲菊切花的保鲜效应

探讨不同保鲜剂对非洲菊切花的瓶插寿命、观赏品质以及生理生化指标的影响。结果表明,在供试7组保鲜剂中,以处理7(T₇):20g/L Suc+200mg/L 8-HQC+150mg/L CA+75 mg/L KH₂PO₄·3H₂O+1g/L CaCl₂的保鲜效果最佳,可显著延长非洲菊切花瓶插寿命;T₇处理有利于减缓花瓣组织pH上升、花青素含量下降及花瓣细胞膜相对透性的上升,从而延长瓶插寿命。     

不同添加物对文心兰原球茎增殖及试管苗生长的影响

以文心兰切花品种‘南茜’原球茎(PLB)及试管苗为材料,在培养基MS＋6-BA 2 mg/L＋Ad 1 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋蔗糖30 g/L基础上,利用增殖系数及不同形态指标加权分析研究马铃薯、芋头、南瓜、香蕉及活性炭(AC)5种培养基添加物及其组合对‘南茜’PLB增殖及试管苗生长的影响。结果表明,适宜文心兰PLB增殖培养的添加物为马铃薯泥50 g/L,培养45 d后,PLB增殖系数是对照的3.64倍;适宜无菌小苗(约1.5 cm)增殖及生长的添加物为香蕉泥50 g/L＋AC 1 g/L,加权总分是对照的1.53 倍;适宜无菌中苗(约2.5 cm)增殖及生长的添加物为马铃薯泥25 g/L＋香蕉泥25 g/L,加权总分是对照的1.55倍。