紫鸭跖草花粉母细胞减数分裂细胞核和染色体含有F—肌动蛋白

肌动蛋白间接免疫荧光标记实验观察到紫鸭跖草花粉母细胞减数分裂前期Ⅰ细胞核,中期┘染色体,二分体和四分体均发现较明亮的黄绿色荧光,说明其中含有肌动蛋白。经ＴＲＩＴ－Ｃ鬼等环肽荧光标记后,减数分裂前Ⅰ细胞核,二分枝及中期Ⅰ染色体均发现较明亮的红色荧光;ＣＤ处理后细胞核和染色体的荧光明显减弱或没有荧光,说明其中存在Ｆ－肌动蛋白。     

共聚焦荧光镜检术揭示大蒜鳞片细胞间期核中的F肌动蛋白网络

采用免疫荧光和荧光分子探针技术与共聚焦激光扫描显微镜观察相结合,对大蒜（Ａｌｌｉｕｍ ｓａｔｉｖｕｍ Ｌ．）鳞片细胞间期核中是否存在Ｆ肌动蛋白进行了研究。结果表明,以兔抗肌动蛋折抗体为一抗、ＦＴＴＧ－羊抗兔ＩｇＧ抗体为二抗进行免疫荧光标记实验,在荧光镜下观察到蒜瓣薄壁组织的细胞核及表皮细胞核均发出明亮的黄绿色荧光经共聚焦激光扫描显微镜进一步检查,整个细胞核呈黄绿色荧光,说明其中含有肌动蛋白。经ＴＲ     

ScⅡ类似蛋白是洋葱根端细胞核、染色体和染色体骨架的组成成分

采用机械破碎和蔗糖梯度离心方法从洋葱根端分生组织中分离出细胞核并制备出核 骨架。细胞核ＳＤＳ－ＰＡＧＥ谱带中１３５ｋＤ处有一多肽,免疫印迹实验结果表明,该多肽可被抗 鸡ＳｃⅡ抗体标记,核骨架中没有此多肽。经抗ＳｃⅡ抗体和ＦＩＴＣ偶联的二抗标记后,细胞核 发出代表ＳｃⅡ的特异性荧光,而核骨架中无荧光发出。经抗ＳｃⅡ抗体和蛋白Ａ胶体金处理 后,金颗粒特异性地结合在核内染色质区域。说明ＳｃⅡ类似蛋白是洋葱根端细胞核的组分, 且位于核内染色质上,但该蛋白不是核骨架成分。免疫荧光和免疫电镜实验结果还说明ＳｃⅡ 类似蛋白是洋葱根端细胞染色体和染色体骨架的组成成分。     

肌动蛋白存在于蚕豆细胞核和染色体中

以兔抗肌动蛋白抗体为一抗,FTTC偶联的羊抗兔IgG抗体为二抗进行间接免疫荧光实验,观察到蚕豆(Vicia faba L.)根端分生组织中完整的细胞核和染色体均有明亮荧光。用抗肌动蛋白抗体和蛋白A-胶体金进行标记的免疫电镜实验结果表明,金颗粒分布在蚕豆细胞核中,集缩染色质和核仁中金颗粒较多。经DNaseI消化和2 mol/L NaCl处理得到去除DNA和组蛋白的细胞核和染色体。免疫荧光实验结果指出,去除DNA和组蛋白的细胞核和染色体与抗肌动蛋白抗体呈阳性反应。上述结果说明,肌动蛋白不仅存在于完整的蚕豆细胞核和染色体中,而且存在于去除DNA和组蛋白的蚕豆细胞核和染色体中。另外,用抗原肌球蛋白抗体所做的免疫荧光标记结果表明,原肌球蛋白也存在于蚕豆细胞核和染色体中。对高等植物细胞核和染色体以及核骨架和染色体骨架是否含有肌动蛋白等问题进行了讨论。     

ScⅡ类似蛋白是洋葱根端细胞核,染色体和染色体骨加的组成成分

采用机械破碎和蔗糖梯度离心方法从洋葱根端分生组织中分离出细胞核并制备出核骨架。细胞核ＳＤＳ－ＰＡＧＥ谱带中１３５ｋＤ处有一多肽,免疫印迹实验结果表明,该多肽可被抗鸡ＳｃⅡ抗体标记,核骨架中没有此多肽。经抗ＳｃⅡ抗体和ＦＩＴＣ偶联的二抗标记后,细胞核发出代表ＳｃⅡ的特异性荧光,而核骨架中无荧光发出。经抗ＳｃⅡ抗体和蛋白Ａ胶体金处理后,金颗粒特异性地结合在核内染色质区域。说明ＳｃⅡ类似蛋白是洋葱根端细     

HeLa细胞核和核骨架含有肌动蛋白

提取HeLa细胞核并制备核骨架标本,以抗肌动蛋白抗体为探针,采用SDS－PAGE、免疫荧光和免疫印迹等方法,对HeLa细胞细胞核和核骨架中的肌动蛋白进行了研究,并用鬼笔环肽荧光染色方法研究了其中的F－肌动蛋白。在荧光显微镜下观察到：代表肌动蛋白的特异性荧光分布在细胞核和核骨架中,说明肌支蛋白是细胞核和核骨架的固有成分;代表F－肌动蛋白的特异性荧光存在于细胞和核骨架中,说明细胞核和核骨架含有F－肌动蛋白。免疫印迹结果进一步肯定了细胞核和核骨架中肌动蛋白的存在。     

肌动蛋白存在于车蝗精母细胞核和染色体中

以兔抗肌动蛋白抗体为一抗,FITC偶联的羊抗兔IgG抗体为二抗进行间接免疫荧光实验,观察到车蝗（Oedaleus asiaticus）精母细胞核及减数分裂Ⅰ细线期、终变期、减数分裂Ⅱ中期染色体上均发出明亮的黄经发色荧光,说明其中含有肌动蛋白。本文结果证明肌动蛋白是车蝗减数分裂细胞核和染色体的组成成分。     

ScII类似蛋白是洋葱根端细胞核、染色体和染色体骨架的组成成分

采用机械破碎和蔗糖梯度离心方法从洋葱根端分生组织中分离出细胞核并制备出核骨架。细胞核SDS-PAGE谱带中135kD处有一多肽,免疫印迹实验结果表明,该多肽可被抗鸡ScⅡ抗体标记,核骨架中没有此多肽。经抗ScⅡ抗体和FITC偶联的二抗标记后,细胞核发出代表ScⅡ的特异性荧光,而核骨架中无荧光发出。经抗ScⅡ抗体和蛋白A胶体金处理后,金颗粒特异性地结合在核内染色质区域。说明ScⅡ类似蛋白是洋葱根端细胞核的组分,且位于核内染色质上,但该蛋白不是核骨架成分。免疫荧光和免疫电镜实验结果还说明ScⅡ类似蛋白是洋葱根端细胞染色体和染色体骨架的组成成分。     

肌动蛋白存在于金黄地鼠联会复合体中

以金黄地鼠精母细胞为材料,以抗肌动蛋白抗体为探针,应用免疫荧光和免疫胶体金技术有ＳＣ有无肌动蛋白的问题进行了研究。免疫荧光结果表明,经抗肌动蛋白抗体标记后,减数分裂粗线期标本中ＳＣ发出特异性荧光,说明肌动蛋白存在于ＳＣ中,免疫电镜结果表明：实验组ＳＣ的胶体金颗粒密度远高于对照组的金颗粒密度,说明ＳＣ含有肌动蛋白。观察到,常染色体ＳＣ和性染色体ＳＣ以及偶线期和粗线期ＳＣ中都含有肌动蛋白,肌动蛋白分布     

肌动蛋白是多头绒泡菌细胞核骨架和染色体骨架的组成成分

自多头绒泡菌(Physarum polycephalum Schw.)的原质团中分离细胞核和染色体,分别经DNaseⅠ消化和2 mol/L NaCl抽提后制备成细胞核骨架和染色体骨架。以抗肌动蛋白的抗体作一抗、FITC标记的羊抗兔IgG抗体作二抗进行的间接免疫荧光实验结果显示,细胞核骨架和染色体骨架都分别与抗体呈阳性反应。间接免疫斑点印迹实验结果进一步证实,细胞核骨架和染色体骨架的蛋白质成分中存在与肌动蛋白抗体呈阳性显色反应的抗原。以抗肌动蛋白的抗体作一抗、金颗粒标记的蛋白A作二抗的间接免疫电镜实验结果表明,在实验组间期细胞核的核仁、集缩染色质和核基质以及中期染色体上都有很多金颗粒分布。上述结果证明,肌动蛋白是多头绒泡菌细胞核和染色体及其骨架的组成成分。     

肌动蛋白在丝瓜花粉管顶端生长中的作用

用非固定荧光标记的鬼笔环肽作为肌动蛋白探针观察并证明了丝瓜未萌发的花粉粒和不同生长时期花粉管中肌动蛋白纤丝的分布及其形态变化。又用细胞松弛素Ｂ（ＣＢ）、氯丙嗪（ＣＰＺ）及Ｎ－乙酰马来酰胺（ＮＥＭ）证明了丝瓜花粉管伸长与肌动蛋白暨有密切的关系，也受Ｃａ＾２＋的调节。     

增强UV-B辐射对小麦根尖分裂期细胞肌动蛋白的影响

以增强UV-B（10．08kJ·m^-2·d^-1）辐射后的小麦根尖细胞为材料,异硫氰酸荧光素标记的鬼笔环肽（FITC-Ph）为探针,利用激光共聚焦扫描显微镜,观察分析小麦根尖分裂期细胞肌动蛋白在分裂周期的分布及形态变化。结果表明：uV-B辐射处理后,问期细胞肌动蛋白纤丝排列紊乱;前期细胞周质中肌动蛋白纤丝变为短的片段,点状荧光随机分布在周质;中期细胞荧光强度明显减弱,明亮的肌动蛋白片段消失,点状荧光消失;有丝分裂后期到末期,成膜体区域肌动蛋白纤丝或成弥散状或完全消失,且出现落后染色体、染色体桥、不均等分裂及三束分裂等染色体畸变类型和异常分裂现象。     

2003年国际生物奥赛理论试题(A)(续)A部分

A13.鬼笔环肽是一种剧毒物质,可以从一种蘑菇中分离出来。它对肌动蛋白多聚物有很高的亲和力。鬼笔环肽可以与种荧光物质共价结合而被标记,如与荧光素结合,但不改变与蛋白的亲和性质。 如果含有荧光标记的鬼笔环肽的精子的显微切片用甲醇固定(洗去多余的试剂),那么在荧光显微镜下能发现精子的哪一部分?     

肌动蛋白存在于金黄地鼠(Mesocricetus auratus)联会复合体中

以金黄地鼠精母细胞为材料,以抗肌动蛋白抗体为探针,应用免疫荧光和免疫胶体金技术对ＳＣ有无肌动蛋白的问题进行了研究。免疫荧光结果表明：经抗肌动蛋白抗体标记后,减数分裂粗线期标本中ＳＣ发出特异性荧光,说明肌动蛋白存在于ＳＣ中。免疫电镜结果表明：实验组ＳＣ的胶体金颗粒密度远高于对照组的金颗粒密度,说明ＳＣ含有肌动蛋白。观察到,常染色体ＳＣ和性染色体ＳＣ以及偶线期和粗线期ＳＣ中都含有肌动蛋白,肌动蛋白分布于ＳＣ的端部和侧生组分上,代表肌动蛋白的胶体金颗粒在ＳＣ上往往成簇存在。对ＳＣ含有肌动蛋白的意义进行了讨论。     

人膀胱癌细胞纤维肌动蛋白共聚焦激光扫描显微镜观察

探讨膀胱癌细胞纤维肌动蛋白（F－actin)的空间结构。采用共聚焦激光扫描显微镜光学切片技术结合异硫酸氢荧光素－鬼笔环肽（FITC－phalloidin)标记纤维肌动蛋白和碘化丙啶（PI）和标记核酸的荧光探针双重标记技术对膀胱癌细胞纤维肌动蛋白进行形态学观察,结果可见膀胱癌细胞内纤维肌动蛋白微丝形态完整,成细束或细丝状,平行排列地整个细胞或细胞突起,在胞质边缘处较密集。     

肌动蛋白在丝瓜花粉管顶端生长中的作用

用非固定荧光标记的鬼笔环肽作为肌动蛋白探针观察并证明了丝瓜未萌发的花粉粒和不同生长时期花粉管中肌动蛋白纤丝的分布及其形态变化。又用细胞松弛素B（CB）、氯两嗪（CPZ）及N-乙酰马来酰胺（NEM）证明了丝瓜花粉管伸长与肌动蛋白既有密切的关系,也受Ca2 的调节。     

大麦细胞核及染色体肌球蛋白免疫细胞化学定位

对去除DNA、组蛋白和大部分非组蛋白的大麦(Hordeum vulgare)细胞核和染色体间接免疫荧光标记实验结果表明:抗肌球蛋白抗体的荧光标记弥散分布在整个细胞核和染色体上;进一步应用免疫胶体金技术分析肌球蛋白在细胞核和染色体的分布情况,发现在染色体中散布着大量的胶体金颗粒;间期细胞核中胶体金颗粒主要分布在核仁和染色质中。上述实验结果表明:肌球蛋白是细胞核及染色体非组蛋白组成成分。本文还对肌球蛋白在细胞核和染色体中的分布规律进行了讨论。     

荧光显微镜下感染了李斯特菌的成纤维细胞

大多数感染的扩散是由于被感染的细胞溶解导致细菌或病毒释放而发生的 ,其中一些细菌和病毒的释放是由聚合的肌动蛋白丝末端介导的 ,以李斯特菌为例 ,它是一种可经母婴垂直传播的细菌 ,当其感染哺乳动物细胞时 ,可以在胞浆中以近 11μm/min的速率移动。肌动蛋白是如何调节细菌运动的假想是经 1个显微注射实验提出的 ,它把荧光标记的 G-肌动蛋白注射入被李斯特菌感染的细胞 ,在显微镜下可观察到被标记的单分子结合在细菌邻近的羽状网织结构中。如图所示每个细菌的后部都有个肌动蛋白尾 ,并被荧光染料鬼笔环肽染成绿色 ,细菌被细菌膜特异性抗…     

测量细胞内吞过程中膜受体流动性的新方法

本文首次提出用ＡＢＣ（ＡｖｉｄｉｎＢｉｏｔｉｎＣｏｍｐｌｅｘ）法标记细胞膜受体,通过ＦＲＡＰ（ＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅＲｅｃｏｖｅｒｙＡｆｔｅｒＰｈｏｔｏｂｌｅａｃｈｉｎｇ）技术,测量细胞内吞过程中受体流动性变化的方法。实验选择巨噬细胞ＣｏｎＡ受体,比较了用ＣｏｎＡ－Ｂｉｏｔｉｎ＋Ａｖｉｄｉｎ－ＦＩＴＣ（ＡＢＣ法）和ＣｏｎＡ－ＦＩＴＣ（直接法）标记的膜表面ＣｏｎＡ受体荧光强度和内吞过程中受体的流动性测量结果。结果显示ＣｏｎＡ－Ｂｉｏｔｉｎ＋Ａｖｉｄｉｎ－ＦＩＴＣ标记的巨噬细胞膜受体的平均荧光强度比用ＣｏｎＡ－ＦＩＴＣ标记的平均荧光强度高大约３倍;ＡＢＣ法标记的受体,测量结果误差小、灵敏度高;ＣｏｎＡ刺激１５ｍｉｎ后,巨噬细胞膜表面ＣｏｎＡ受体的扩散系数和荧光恢复率较静息状态时明显下降。讨论了两种标记方法对测量结果的影响     

增强UV-B辐射对小麦叶肉细胞核内F-actin的影响

以增强紫外线B(UV-B)处理的小麦幼苗叶肉细胞核为材料,以异硫氰酸荧光素标记鬼笔环肽(FITC-Ph)荧光标记后,利用流式细胞仪以及激光共聚焦显微镜,对核内肌动蛋白丝(F-actin)进行研究。结果表明:小麦细胞核内确实存在F-actin; 以FITC-Ph标记后用流式细胞仪检测显示,以10.08 kJ·m^-2·d^-1增强的UV-B处理后的小麦叶片细胞核内F-actin的含量升高; 激光共聚焦技术显示细胞核内F-actin的分布,发现小麦叶肉细胞核核仁处F-actin含量较高。推测可能是增强UV-B辐射导致细胞质内F-actin骨架断裂进入细胞核。究其具体作用还待进一步研究,该研究推测其与“分束分裂”有关。