八倍体小黑麦耐盐细胞系产生的遗传机制

实验选用来源于八倍体小黑麦（×ＴｒｉｔｉｃｏｓｅｃａｌｅＷｉｔｍａｃｋ）杂种一代Ｂ、Ｃ和原种Ｆ三个品系的成对单倍体和双倍体细胞系,在１％、１．５％和２％ＮａＣｌ水平进行耐盐变异体筛选及其发生机制研究。实验和分析结果表明,未经筛选的细胞系由三类细胞组成,第一类是占大多数没有任何适盐性的细胞,第二类是具有一定适盐性的非变异体细胞,可在继代筛选中被淘汰,第三类细胞是变异体细胞;第二类细胞在杂种材料细胞系中所占比例少于原种细胞系,故杂种细胞较易筛选到耐盐变异体;比较三个级别筛选的变异体频率发现,后一级筛选的变异必须以前一级筛选的变异为基础,即耐盐变异体发生的遗传机制是基因扩增;双倍体细胞中正常同源染色体对基因扩增变异的表达有干扰作用,这种干扰因材料不同在各级筛选中呈现不稳定状态。     

小麦耐盐系愈伤组织细胞的超微结构观察

对用正筛选法选出的耐１％、２％和２．５％ＮａＣｌ的小麦３个耐盐细胞系进行了详细的电镜观察。结果表明,随着耐盐程度的提高,小麦愈伤组织细胞的质体膨胀状态,数量有减少的趋势。耐低盐浓度（１％ＮａＣｌ）的细胞系线粒体结构与对照差别不大,而耐高浓度盐分的细胞系对对照有明显差异。耐盐系细胞的线粒体,粗糙型内质网及核糖体数量比对照细胞增加,高尔基体和内质网膨胀,细胞核核质凝聚,核膜膨胀,液泡发达,细胞壁的生长     

小麦耐盐细胞系对盐胁迫的伤害性反应

通过逐级提高ＮａＣｌ浓度的筛选方法,得到了能在１．５％ＮａＣｌ下生长良好的小麦（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍＬ．）耐盐细胞系。在盐分胁迫下,耐盐细胞系含水量的降低幅度小于不耐盐细胞系（对照）,Ｈ２Ｏ２含量和Ｏ－２产生速率的增加幅度也明显小于对照细胞系。同时,膜的相对透性、膜脂过氧化和脱酯化程度的提高幅度也明显低于对照细胞系。表明盐分对小麦细胞系膜的伤害与活性氧介导的膜脂过氧化和脱酯化有关,而耐盐细胞系比对照细胞系表现出较强的抗活性氧伤害的能力。     

烟草耐盐愈伤组织变异体对盐渍的适应性

用组织培养及逐步增加,NaCl浓度的方法,筛选出烟草耐盐愈伤组织变异体。能耐盐(2％ NaCl)的愈伤组织在2％ NaCl中继代29次,再移入无盐培养基中培养11和20代后不能保持提高的耐盐性,分别退化到只耐1.5％与1.0％ NaCl的水平。耐2％ NaCl愈伤组织产生的再生植株自交后代,其萌发种子、幼苗及成长植株均未能表现出耐盐性,说明用选择胁迫方法所筛选出的耐盐细胞系,其耐盐性的提高属于生理适应性。     

小麦耐盐细胞系及后代耐盐稳定性的生化分析

以离体培养筛选出的耐盐小麦变异系及其后代为材料,对其耐盐稳定性进行有关生理生化特性分析。结果表明：（１）随着耐盐愈伤组织耐盐能力的提高,过氧化物同工酶酶带谱加,与对照相比,三个区域出现了明显差异;（２）从耐盐愈伤组织酯酶同工酶酶谱发现,耐盐愈伤组织具有Ｃ２,Ｃ５,Ｃ９,Ｃ１１新增加酶带;（３）耐盐系后代幼苗能维持较高的Ｋ＾＋／Ｎａ＾＋比值,在盐浓度为０．９％时,其Ｋ＾＋／Ｎａ＾＋为０．７８８,而对     

植物体细胞胚发生与作物育种

评述了植物体细胞胚发生在作物育种中的研究与应用,内容包含有：胚性细胞系的建立与原生质体培养;体细胞胚的形成与人工种子制作;胚性细胞与遗传转化;胚性细胞系与优良种质保存和体细胞无性系变异与突变体筛选等,并讨论了有关机理。     

柑桔种间体配融合及培养研究

“平户”文旦（柚）（Ｃｉｔｒｕｓｇｒａｎｄｉｓ）Ｏｓｂｅｃｋ的四分体经酶解,分离出原生质体。ＰＥＧ（聚乙二醇）诱导这类原生质体与二倍体“伏令夏”甜橙（Ｃ．ｓｉｎｅｎｓｉｓ）胚性悬浮细胞系的原生质体融合。融合后的原生质体培养于ＢＨ３／ＥＭＥ培养基中。２天后,观察到花粉管生长现象。不同处理的结果显示,这一现象来源于异核体细胞。这种具花粉管生长的细胞可进一步分裂,形成多细胞团及球形和心形胚状体。对再生的胚状体进行染色体数检查,证明１３．１％的胚状体为三倍体,２ｎ＝３ｘ＝２７。而起始悬浮细胞系为二倍体,检查的３９２个细胞,未发现有染色体倍性变异。     

药物诱导玉米孤雌生殖植株的倍性变异

实验结果表明,孤雌生殖植株根尖体细胞以二倍体细胞最多,占６８．９％,其次为非整倍体细胞,占２８．７％,其他异倍体和单倍体细胞极少（２．４％）。Ｐａ１植株可分为二倍体和混倍体两类,以二倍体细胞占绝对多数的混倍体植株最多,为８３．５％,这些植株生长发育和结实均正常。在花粉母细胞中正常二倍体频率比根尖体细胞明显提高,提高频率为３５．３一５９．６％,不同材料之间趋势一致。讨论了体细胞染色体变异的来源及其能否延续到生殖细胞。     

应用细胞工程获得受主效基因控制的水稻耐盐突变系

实验以水稻花药为材料,经ＥＭＳ处理或未处理,在ＮａＣｌ胁迫下筛选耐盐突变体。所获变异系耐盐性已稳定遗传到第１３代。回交测定Ｆ２耐盐性呈３∶１的分离,表明耐盐性受一个主效基因控制。实验结果还表明,通过合适的筛选方法,无论诱变处理与否,都能得到稳定遗传的耐盐突变体。     

小麦与高冰草（长穗偃麦草）体细胞杂种株系与其亲本幼苗抗盐 …

利用不同浓度ＮａＣｌ处理高冰草、小麦、小麦和高冰草体细胞杂种Ｆ３代Ⅲ－１、Ⅱ－２的幼苗,５ｄ后观察其形态,计算耐盐系数,测定生长量脯按酸含量,Ｎａ＾＋、Ｋ＾＋、Ｃａ＾＋等生理指标。结果表明,高冰草具有典型耐盐单子叶植物的特征,。亲本小麦属非生植物,抗盐能力较弱,当ＮａＣｌ浓度达０．５％时已有盐害影响,超过后迅速加重甚至死亡,而杂 受害的盐度比小麦高。１．０％以上ＮａＣｌ浓度达０．５％时已有盐害影     

标准差比较法在筛选耐盐变异体中的应用初探

常规培育耐盐作物品种迄今尚少有成效。近年来,植物组织培养技术的进展为选择培育耐盐作物品种提供了一条新途径。不少学者已用高等植物细胞培养技术,进行了箍选耐盐细胞系的研究。本文报道,应用数学方法,确定一步筛选耐盐变异体的时间和有效上限盐浓度。     

运用多步正选择系统筛选木槿耐盐变异体（简报）

采用多步正选择系统,建立起木槿耐盐变异体筛选体系并获得耐盐细胞系和再生植株（分化率高达78％）,分化苗能耐盐。耐盐细胞的体积减小,积累的Na 和K 含量都相对较高,而脯氨酸则与对照差异不大。     

利用组织培养选择烟草耐盐愈伤组织变异体并分化出再生植株

烟草(品种革新一号)叶片为外植体,直接置入含0.5%NaCl的修改MS培养基中,诱发产生耐盐的愈伤组织。然后采取逐步提高NaCl浓度的措施,分别获得耐0.5%、1.0%、1.5%及2.0%NaCl细胞系。耐盐细胞系在无盐条件下,生长9—11代后仍保持其耐盐性。从各个耐盐细胞系均分别获得再生苗。耐2.0%NaCl的04—9细胞系共得到15株再生植株,叶片狭长、多锯齿、并具有较多的花茎,多数花粉粒畸形,经过人工授粉获得少量种子。04-9变异型再生植株水培于含有1.0—2.0%NaCl的Hogland溶液中生长85天,仍然存活。原始型愈伤组织的细胞呈不规则椭圆形,耐盐细胞系的细胞均近似圆形;耐盐浓度愈高则细胞愈小。耐盐细胞系愈伤组织的叶绿素含量随耐盐浓度增高而增加;渗透势则随耐盐水平提高而降低。耐2.0%NaCl细胞系04—9愈伤组织内脯氨酸含量高40.7倍,其再生植株叶片内的脯氨酸含量亦较原始型增加两倍。耐2.0%NaCl细胞系再生植株的幼年与成年叶片的过氧化物同工酶的酶谱与原始型均有显著差别。以上试验结果均说明耐2.0%NaCl细胞系04—9及其再生植株是一个耐盐变异体。     

小麦耐盐细胞系耐盐性分析

通过一步筛选获得了耐盐（１．０％,ＮａＣｌ）的小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ａｅｓｔｉｖｕｍ）细胞系（Ｓｒ１）,当ＳＲ１在含１．０％,ＮａＣｌ的培养基上继代半年后,钭其中的一部分移入无盐培养基代１０次,得到细胞系ＳＲ２。无论是在正常还是办迫条件下,ＳＲ１的鲜重增量／克鲜重、脯氨酸及可溶性蛋白含量均高于原始型（ＳＮ）,而含水量均高于原始型（ＳＮ）,而含水量、Ｋ＾＋及可溶性糖含量却低于ＳＮ。Ｎａ＾＋和Ｃｌ＾     

电融合法产生骆驼刺与鹰嘴紫云英属间体细胞杂种

采用电融合法获得了骆驼刺和鹰嘴紫云英属间体细胞杂种。骆驼刺原生质体来自发根农杆菌A4转化系细胞,并经碘乙酰胺处理;鹰嘴紫云英原生质体从甲硫氨酸抗性系细胞分离。双亲及同源融合产物均不能在无激素的筛选培养基上持续分裂,融合后的杂种细胞由于双亲生理互补效应可恢复持续分裂能力而被筛选出来。本实验优化了电融合参数,如直流脉冲、交流脉冲和脉冲次数。融合产物经培养获得的杂种细胞系经形态学、染色体数目检查、生化及随机扩增多态性DNA分析,鉴定出10个杂种克隆,并从3个杂种克隆再生了小植株。     

几类异质小麦雄性不育系育性恢复性的细胞遗传学研究

系统调查了4类异质(粘果、易变、偏凸、二角山羊草细胞质)1BL/lRS、非1BL/1RS小麦雄性不育系与其恢复系杂种F减数分裂中期Ⅰ出现单价体细胞频率,以及后期Ⅰ出现落后染色体和染色体桥细胞频率,并对中、后期染色体变异率与杂种F自交结实率进行了相关分析.结果表明(1)1BL/1RS型杂种在中期Ⅰ、后期Ⅰ染色体变异率要明显高于非1BL/1RS杂种;(2)4类异源细胞质在非1BL/1RS杂种中有着明显提高单价体细胞频率的作用;(3)在1BL/1RS杂种中,1B@1BL/1RS杂合核型染色体联会松弛,对单价体频率的影响远大于异源细胞质的影响;(4)1BL/1RS型杂种自交结实率与中期出现单价体细胞频率不直接相关,而与后期出现落后染色体和染色体桥细胞的频率呈高度负相关;(5)非1BL/1RS型杂种在减数分裂中、后期染色体行为相对稳定,易恢复且恢复度高,很有实际利用价值.     

通过“供体-受体”原生质体融合将裸燕麦部分核基因组转移给普通小麦(英文)

本文进行了小麦和裸燕麦悬浮细胞原生质体的电融合,并基于双亲失活(用IOA处理受体小麦原生质体,用γ-射线照射供体裸燕麦细胞系),获得可能的杂种愈伤组织。对7块愈伤组织进行了乙醇脱氢酶(Adh)同工酶筛选,发现5块表现出双亲特征酶带。对3个杂种细胞系进行5种同工酶分析,证实它们均为稳定的不对称体细胞核杂种细胞系;它们表现出小麦的完整谱带和裸燕麦的部分谱带。对2个杂种细胞系及亲本的核糖体DNA Southern分析结果表明只有一个杂种细胞系(HB 95)含有双亲的全部谱带。细胞学观察表明,2个杂种细胞系的染色体数目均显著高于双亲。从杂种细胞系HB 94中分化出叶原基等分化结构。Adh同工酶分析表明,这些分化结构具有和母体细胞系完全相同的杂种谱带。     

缺体小麦与黑杂种幼胚愈伤组织再生植株的染色体变异

对中国春６Ａ缺体小麦与黑麦杂种幼胚愈伤组织不同无性世代再生植株体细胞染色体鉴定结果表明,随着愈伤组织培养时间的延长,再生植株染色体变异频率及变异范围明显增加。在分化的共计２２４株再生植株中,发生染色体变异的植株为８０株,占３５．７％,其中３株为染色体嵌合株,１株发生了染色体结构变异。     

棉花组织培养研究的现状和前景

对棉花组织培养中胚珠（幼）培养和杂种植株获得,体细胞无性系变异和抗性突变体筛选,花药培养和单倍体育种,体细胞胚发生和人工种子的制作,离体棉纤维诱导和超级棉生产,原生质体培养和植株再生等研究进展,问题和前景作了概述。     

葡萄耐羟脯氨酸变异细胞系的筛选及其特性研究（简报）

葡萄愈伤组织经甲基磺酸乙酯（EMS）诱变处理后,用羟脯氨酸（HMP）作为选择压力,筛选出耐HYP的变异细胞系。该变异系游离脯氨酸含量比正常细胞系高4．7倍,并且表现出很强的耐NaCl和PEG能力。在盐胁迫下,变异系吸收的K 和Na 含量均高于正常系,而K ／Na 比值仍与正常系相近。