15甲基前列腺素F_(2α)对兔卵巢环磷酸腺苷和孕酮含量的影响

于假孕第7天的家兔,分別静脉注射15-甲-PGF_(2α)、HCG、HCG 15-甲-PGF_(2α),茶碱,茶碱 15-甲 PGF_(2α),观察用药后卵巢内 cAMP 和孕酮含量的变化。结果表明15-甲-PGF_(2α)能使卵巢内孕酮相 cAMP 含量明显下降,HCG 能促进孕酮合成,使卵巢内孕酮和cAMP 含量增加。HCG 和15-甲-PGF_(2α)联合应用则卵巢中孕酮和 cAMP 的含量与对照组比较均无显著差别,这表明15-甲-PGF_(2α)对 HCG 增加细胞内 cAMP 含量和促进孕酮合成均有颉颃作用,以上结果提示15-甲-PGF_(2α)的溶黄体作用与降低卵巢内 cAMP 水平是相关的。注射茶碱后卵巢内 cAMP 和孕酮含量均较对照组显著增加,茶碱是磷酸二酯酶抑制剂,表明茶碱增高孕酮的合成可能与提高卵巢细胞内 cAMP 水平是有关的,也表明磷酸二酯酶促进 cAMP转变为5′AMP 的过程也参与假孕兔卵巢孕酮合成的调节。茶碱与15-甲-PGF_(2α)合并应用后卵巢中 cAMP 和孕酮含量均不增加,与对照组比较无明显差別,表明15-甲-PGF_(2α)有颉颃茶碱使卵巢细胞内 cAMP 含量增加和促进孕酮合成的作用,实验结果进一步支持了15-甲-PG-F_(2a)溶黄体作用机制可能与细胞内 cAMP 水平降低有关。     

c-erbB_2对大鼠黄体细胞hCG诱导的孕酮分泌的影响

采用离体细胞体外孵育法 ,研究反义c erbB2 寡脱氧核苷酸 (antisensec erbB2 ODN)对大鼠黄体细胞hCG诱导的孕酮分泌的影响 ,及其与外源性cAMP和Ca2 以及蛋白抑制剂放线菌酮 (CYX)之间的关系。结果表明 ,反义c erbB2 以剂量相关方式抑制黄体细胞hCG诱导的孕酮的产生 ,同时使c erbB2 蛋白染色阳性的黄体细胞百分数下降 ,无义tatODN没有相应的作用。10 -4 mol/L的二丁酰cAMP能明显反转反义c erbB2 ODN对孕酮产生和c erbB2 表达的抑制作用 ,钙离子通道阻断剂维拉帕米和蛋白抑制剂CYX对此抑制作用有协同效应。该实验说明c erbB2 参于hCG诱导黄体细胞生孕酮作用     

前列腺素F-(2α)与促黄体素对黄体功能的调节控制——颗粒黄体细胞的亚显微结构研究

我们在黄体的组织化学研究中,已经指出了前列腺素F_(2α)(简称为PGF_(2α))有抑制黄体3β-OH-脱氢酶和激活酸性磷酸酶的明显效应。相反,促黄体素(简称LH)能使摘除垂体的孕鼠黄体保持正常3β-OH-脱氢酶活性[中国科学院北京动物研究所内分泌研究室细胞组(以下简称细胞组)1974]。最近黄体的亚显微结构工作逐渐增多,但观察前列腺素对黄体亚显微结构的影响报道较少,结果且不一致,因而,我们在黄体组织化学研究的基础上,进一步阐明PGF_(2α)和LH对黄体的调节控制机理,着重对内质网、线粒体、类脂滴和溶酶体等细胞器进行观察,了解它们是怎样影响细胞结构和这种改变与孕酮合成的形态与功能之间的关系,这可能对于探索前列腺素在控制生育方面的作用机理及临床实践有一定的指导意义。     

大鼠黄体细胞酪氨酸含量及hCG,cAMP和孕酮对含量的影响

经PMSG-hCG处理的未成年雌性大鼠卵巢,用胶原酶-DNA酶溶液消化,制成黄体细胞悬浮液。预培育1h后,加入不同浓度的hCG、cAMP及孕酮;并在加入hCG(10mIU/ml)、cAMP(2.5mmol/L)或孕酮(1nmol/L)的同时分别加入苯丙氨酸或放线菌酮,再培育1.5h,取细胞悬浮液400μl,用薄层层析扫描技术测其酪氨酸含量。结果:黄体细胞内有一定量内源酪氨酸,hCG,cAMP和孕酮均可明显促进酪氨酸的释放(P<0.05).苯丙氨酸对酪氨酸的含量无影响。酪氨酸释放也不依赖蛋白质合成过程。     

阿片肽类物质对大鼠黄体细胞孕酮生成的影响

本文观察了外源性阿片肽对大鼠离体黄体细胞孕酮生成的影响,结果表明:β-内啡肽以剂量-反应依赖方式促进黄体细胞孕酮生成,有效浓度范围是10~(-8)-10~(-6) mol/L;强啡肽仅在浓度为10~(-6)mol/L时才显示刺激孕酮生成的作用;而甲硫-脑啡肽无明显作用。μ-阿片受体激动剂DAGO和乙基吗啡也能明显促进孕酮的生成。纳洛酮可完全阻断β-内啡肽,DAGO和乙基吗啡的作用。由于大鼠血液中β-内啡肽含量较低,而卵巢局部具有较高浓度的β-内啡肽。因此,我们认为,β-内啡肽可能在卵巢局部参与黄体细胞孕酮生成的调节,是卵巢内促黄体因子之一,这种作用可能是由μ-型阿片受体介导的。     

黄体类固醇激素受体的结构功能及其生理调节

在哺乳动物中,黄体的主要功能是合成并分泌孕酮,同时还合成适量的雌二醇。孕酮不但是发情周期长短的主要调节因子,而且也为胚胎植入与发育创造合适条件。这些类固醇激素通过特异性核受体对其靶细胞发挥作用,这些受体又属于受体依赖性转录因子家族。其中,孕酮是通过其核受体亚型A或B对靶细胞发挥生理功能,而雌二醇是通过其α或β受体对靶细胞发挥生理功能。另外,这些类固醇激素还可以通过细胞膜上类固醇激素结合蛋白,迅速激活胞内信号通路发挥功能,包括孕酮膜受体组分1和2、孕酮膜受体α、β和γ,以及G蛋白偶联的雌二醇受体。该文通过阐述黄体类固醇激素受体的分子结构、生理功能及其调节机制,旨在进一步理解类固醇激素受体在黄体生理功能调节中的重要作用。     

血小板活化因子对大鼠黄体细胞孕酮分泌及血管内皮生长因子表达的作用

本文旨在研究血小板活化因子(platelet-activating factor,PAF)对大鼠黄体细胞孕酮分泌及血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)mRNA表达的作用.将未成年(25～28 d)Sprague-Dawley雌性大鼠颈部皮下注射50 IU孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotrophin,PMSG),48 h后注射25 IU人绒毛膜促性腺激素(human chorionicgonadotrophin.hCG)诱导卵泡发育和黄体生成,第6天(hCG注射日为第1天)收集卵巢黄体细胞,体外培养24 h后,不加或加入不同剂量(0.1 μg/mL、1 μg/mL、10 μg/mL)PAF,37℃、5%CO2培养箱内培养24 h.用放射免疫方法测定培养液中孕酮的含量,流式细胞仪和RT-PCR方法检测黄体细胞凋亡以及VEGF mRNA的表达.结果显示,PAF促进黄体细胞孕酮分泌,1 μg/mL PAF作用最强(P<0.05);PAF促进黄体细胞凋亡无明显剂量依赖性,但10 μg/mL PAF显著促进大鼠黄体细胞凋亡(P<0.05):PAF刺激黄体细胞VEGF mRNA表达,1 μg/mL PAF效果最显著(P<0.01).结果提示,PAF可通过调节黄体细胞孕酮的分泌和VEGF mRNA的表达来促进黄体形成.     

羊卵巢细胞质cAMP结合蛋白与细胞核的相互作用

本文从羊卵巢黄体细胞浆分离出50％硫酸铵沉淀的~3H-cAMP结合蛋白复合物。此复合物对细胞核有专一性的结合作用并明显激活细胞核信使RNA的合成。游离cAMP对细胞既天结合作用亦不激活细胞核RNA的合成。表明cAMP在与细胞浆结合蛋白形成复合物以后才具有调节细胞核RNA合成的能     

大鼠GTH细胞内cAMP的改变对LH分泌的影响

将GTH细胞用FSK(cAMP兴奋剂)或SO22,536(cAMP抑制剂兴奋剂)处理后,用GnRH脉冲刺激,再用ELISA法检测其LH分泌量,并与空白对照组比较。结果表明,FSK能显著提高GTH细胞中cAMP含量,SO22,536能显著降低GTH细胞中cAMP含量,FSK和SO22,536都不会影响GTH细胞的PKC活性,GTH细胞cAMP含量显著影响LH的分泌,LH随着cAMP的升高而升高,随着cAMP的降低而降低。cAMP-PKA是GnRH脉冲刺激所引起LH分泌受体后的信号转导途径。     

前列腺素F_(2α)与促黄体素对黄体功能的调节控制——组织化学研究

本研究用组织化学方法着重探讨PGF_(2α)对孕鼠黄体中3β-OH-脱氢酶和酸性磷酸酶活性的影响,并讨论了垂体因素(LH)与黄体酶活性变化和PGF_(2α)的关系。 实验都系妊娠第9天的大鼠;分为五组:(1)PGF_(2α)处理组;(2)对照组;(3)摘除垂 体组;(4)摘除垂体后立即注射外源LH组;(5)摘除垂体后同时注射LH和PGF_(2α)组。五组均在第十二天取材,新鲜冰冻切片,组织化学方法显色。 实验证明,PGF_(2α)与黄体的3β-OH-脱氢酶和酸性磷酸酶都有密切关系,它有抑制前者和激活后者活性的能力,而LH能维持和增强3β—OH—脱氢酶的活性,根据摘除垂体同时注射LH和PGF_(2α)的实验揭示,PGF_(2α)在一定程度上与LH有拮抗作用。因此,认为PGF_(2α)的作用部位在卵巢一级而不通过垂体。实验结果还表明孕鼠经PGF_(2α)处理后,酸性磷酸酶活性比对照组酶活性有显著的增强,由于细胞解体与溶酶体膜的通透性改变和它所释放的水解酶,特别是酸性磷酸酶有密切的关系,而酸性磷酸酶活性变化又与激素有关,因此作者们认为溶酶体在激素调节黄体功能中起着重要的作用,改变或稳定溶酶体膜透性会产生不同的生理效应。因此,认为LH的维持黄体和PGF_(2α)的黄体解体作用都可能是通过对溶酶体的调节控制途径而完成的,PGF_(2α)对3β—OH—脱氢酶的影响是非     

芹菜素对雌性大鼠生殖轴的影响

目的：探讨芹菜素在10-9mol/L浓度时对雌性大鼠生殖功能的影响。方法：应用侧脑室注射方法观察芹菜素对雌性大鼠生殖轴激素含量的影响。在侧脑室注射后第3天取血浆,采用放免技术测定血浆中促性腺激素释放激素（GnRH）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）、孕酮（P）的含量。结果：在给药后第3天血浆中促性腺激素释放激素（GnRH）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）的含量增加而雌二醇（E2）、孕酮（P）的含量降低,差异有显著性。结论：芹菜素抑制雌二醇（E2）合成中芳香化酶的活性实现对雌二醇（E2）、孕酮（P）分泌的抑制。芹菜素通过影响雌激素受体而使下丘脑的促性腺激素释放激素（GnRH）和腺垂体的卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）分泌增加。     

肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对离体兔黄体细胞孕酮分泌的影响及其作用机制

肿瘤坏死因子α(ＴＮＦα)是免疫内分泌网络中引入瞩目的一种细胞因子。近几年来发现ＴＮＦα存在于大鼠、牛、兔和人卵巢中。ＴＮＦα抑制大鼠和人黄体细胞ｃＡＭＰ生成和孕酮分泌。但ＴＮＦα对兔黄体细胞机能活动的影响目前尚未见报道。本实验研究了ＴＮＦα对兔黄体细胞机能活动的作用,并探索其作用机制,旨在了解ＴＮＦα在黄体萎缩中的作用。1　材料和方法(1)药品　重组肿瘤坏死因子α,人绒毛膜促性腺激素(ｈＣＧ)、人促性腺激素(ＦＳＨ)、Ｍ199培养基于粉、孕马血清促性腺激素(ＰＭＳＧ)、孕酮放射免疫测定药盒、ｃＡＭＰ放射免疫测定…     

心房钠尿肽(ANP)对大鼠卵巢细胞生成雌激素与孕激素的影响

应用大鼠卵巢黄体细胞、颗粒细胞培养以及放射免疫分析法,观察了α型心房钠尿肽(α-ANP)对性甾体激素孕酮(P)和雌二醇(E_2)分泌的影响,结果发现,0.1—10ng/ml 浓度的α-ANP 促进离体培养的大鼠黄体细胞分泌孕酮,并呈量效关系。α-ANP 也促进大鼠卵泡颗粒细胞分泌孕酮,但对分泌雌二醇没有影响。说明α-ANP 也影响卵巢分泌功能。     

人工合成寡肽对大鼠黄体细胞孕酮生成的调节及其可能作用机制

本实验比较了合成寡肽抗孕酮生成作用,并进行了相应机制探讨。发现当ＰＨ７．３－７．５时,能较强抑制孕酮分泌的寡肽其结构有共同特点;活性寡肽可对ＰＬＣ信使传递系统产生抑制作用。也可能通过调节黄体细胞内钙离子浓度降低了ｈＣＧ致孕酮的生成作用,甘－丝－赖还升高黄体细胞中ＰＫＣ活性,而降低了ＰＫＡ。可见人工合成寡肽的抗孕酮作用分子机制十分复杂,有待于深入探讨。     

白念珠菌Ras/cAMP/P KA途径研究进展

白念珠菌引起的真菌感染严重威胁着人类健康。Ras/cAMP/PKA途径在白念珠菌菌丝发育、生物被膜形成、有性生殖以及耐药性中起着重要的调控作用,该通路由GTPases(Ras1和Ras2)、腺苷环化酶(Cyr1)、cAMP水解酶(Pde1和Pde2)以及PKA激酶(包括催化亚基Tpk1和Tpk2,调节亚基Bcy1)构成。环境因子通过Ras/cAMP/PKA途径调控下游转录因子,进而调节白念珠菌多种生物学行为。文中综述了近年来白念珠菌Ras/cAMP/PKA信号通路感应胞外环境因子和调控细胞行为等方面的研究进展。     

细胞渗透性神经酰胺可抑制大鼠离体黄体细胞甾体激素生成并诱导细胞凋亡

本文旨在观察神经酰胺对离体孵育的大鼠黄体细胞孕酮分泌及细胞凋亡的影响,以PMSG－hCG处理的雌性Wistar大鼠为模型,分离制备黄体细胞,将外源性细胞渗透性神经酰胺与黄体细胞共同孵育,分别用放免法和流式细胞仪分析神经酰胺对黄体细胞孕酮生成和凋亡的影响,同时还检测了一氧化氮合酶（NOS）活性和一氧化氮（NO）水平的变化,结果显示,神经酰胺可以剂量相关方式抑制hCG－诱导的孕酮分泌,而对基础孕酮没有显著影响,离体孵育12h的大鼠黄体细胞存在自发性凋亡,5umol/L神经酰胺能显著增加亡率（P＜0．05）,流式细胞仪分析可见增强的凋亡蜂,实验还发现,50umol/L神经酰胺能明显促进NOS活性（P＜0．01）和NO生成（P＜0．01）,结果提示,神经酰胺可能通过调节甾体激素生成和细胞凋亡而作为一种重要的信息分子参与黄体退化等卵巢的生理过程。     

人早孕子宫蜕膜催乳素分泌的调节

子宫内膜蜕膜化对胚泡植入与妊娠维持是非常重要的。为探讨蜕膜化维持的调节机制 ,本文研究了妊娠早期人子宫蜕膜细胞催乳素 (PRL)分泌的调节。结果表明 :(1)孕酮显著地刺激PRL的分泌。 (2 )雌激素的作用与其浓度有关 ,生理浓度的雌激素对PRL分泌无明显影响 ,而高水平的雌激素抑制孕酮的刺激作用。合适的雌孕激素比例对蜕膜化的维持是必要的。 (3)RU486明显地抑制PRL的分泌 ,故认为孕酮的作用至少是部分通过受体介导的机制。 (4 )高浓度的cAMP (≥ 10 -5mol/L)显著增加PRL的分泌 ,cAMP信号系统可能在蜕膜化反应中发挥重要作用。     

腺苷三磷酸和环腺苷单磷酸对丝状真菌纤维素酶合成的调节

以虫荧光素酶法检验了四株丝状真菌在葡萄糖—无机盐液体培养过程中的胞内ATP含量。结果表明,只有当胞内ATP浓度低于10~(-S)mg/ml时,真菌才开始合成胞外纤维素酶(FPA)。以不同浓度的各种碳源培养时,菌体胞内ATP含量只要超过10~(-1)mg/ml,FPA的合成即发生阻遏。菌体胞内ATP含量与FPA合成呈显著负相关。以高效液相色谱(HPLC)法检测了菌体培养液中的cAMP含量。在非阻遏条件下,外源cAMP可以提高FPA的合成水平。但外源cAMP不能解除已经发生的酶合成阻遏。菌体ATP和cAMP水平是调节真菌纤维素酶合成的重要因子。     

抑制素α亚基片段P33对大鼠离体培养黄体细胞凋亡的影响

我室先前的工作表明,抑制素α亚基片段Ｐ３３显著抑制离体培养大鼠黄体细胞的孕酮分泌,整体实验显示Ｐ３３促进黄体功能萎缩和细胞凋亡。本实验进一步在细胞水平探讨Ｐ３３促进黄体细胞凋亡的作用机制。应用ＤＮＡ电泳检测技术、ＤＮＡ荧光（ＡＯＥＢＰＩ）染色和流式细胞分析方法观察了Ｐ３３对ＰＭＳＧｈＣＧ假孕大鼠胶原酶ＤＮＡ酶分散的黄体细胞的自发凋亡的影响。结果三种方法一致显示,Ｐ３３（１μｇ／ｍｌ）促进黄体细胞的自发凋亡。阻断酪氨酸蛋白激酶活性（ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ５０μｇ）则抑制Ｐ３３诱导的黄体凋亡;而阻断ＲＮＡ和蛋白质合成（Ｃｙｘ,５０μｇ／ｍｌ;ＡｃｔＤ,５０μｇ／ｍｌ）均不抑制Ｐ３３促进的黄体细胞凋亡。结果表明,Ｐ３３促进培养大鼠黄体细胞的自发凋亡,其作用机制可能与ＴＰＫ途径有关。本实验为抑制素α亚单位或其相关衍生物可能是卵巢局部调节因子之一的假说提供了又一证据。     

胞内膜层系统参与孕酮诱发卵母细胞成熟的启动调控

在两栖类,孕酮诱导的cAMP水平下降既是卵球成熟的早期必要变化之一,同时对成熟启动来说又是充分的条件。cAMP水平下降是中华大蟾蜍卵母细胞成熟启动信号,但其卵质是否能产生MPF,还有赖于其它因子的存在。孕酮的受体不但存在于两栖类卵母细胞的质膜上,在细胞质内同样存在。卵母细胞的质膜不是孕酮诱发成熟的唯一作用位点。中华大蟾蜍卵母细胞的质膜和细胞质中的膜层上都有腺苷酸环化酶活性存在。孕酮不但??能通过抑制质膜上的,而且还能抑制细胞质中膜层上的腺苷酸环化酶活性,降低细胞内cAMP水平,诱发卵母细胞成熟。