胰腺癌及癌旁组织中提取RNA样品的方法优化及鉴定

摘要 目的：优化胰腺癌及癌旁组织总RNA的提取方法,为胰腺相关疾病的发病机制研究提供高质量的实验样本。方法：采用组织块分离剪碎、RNase清洗及抑制等方法对胰腺癌及癌旁组织进行预处理,液氮研磨及trizol-氯仿抽提的方法提取组织RNA。通过琼脂糖凝胶电泳及生物分析仪鉴定RNA的完整性。使用等量RNA作为逆转录模板,以oligo dT引物对信使RNA（message RNA, mRNA）进行逆转录;以茎环结构引物对微小RNA（microRNA, miRNA）进行逆转录。通过定量PCR的方法检测mRNA及miRNA的表达水平。结果：相较于常规方法,优化方法提取的RNA样品降解程度低,完整性较高。相对于胰腺癌组织,癌旁组织RNA更易降解,mRNA的表达水平出现降低趋势;但miRNA的表达在胰腺癌及癌旁组织中无明显差异。结论：胰腺癌及癌旁组织的预处理可降低RNA降低程度,可为RNA的表达检测提供高质量的实验样本,增加实验准确度。     

实施“优质护理服务示范工程”的实践探讨

目的 探讨“优质护理服务示范工程”的实施及影响。方法 树立“优质护理服务示范工程”护理服务文化理念,制定“优质护理服务示范工程”护理服务标准及实施方法。结果 提高了病人满意度及护理工作质量、健康教育覆盖率及合格率,增进护患感情。结论 开展“优质护理服务示范工程”, 能提高护理质量, 确保护理安全,能扩大医院的知名度, 提升护理服务的品牌。     

《实用植物组织培养技术教程》出版发行

自曹孜义主编的《实用植物组织培养技术教程》于1996年出版以来, 广大读者普遍反映其实用性强,参考价值大,该书已修订并再版3次和印刷5次, 1999年被评为甘肃省优秀教材,并荣获省教学成果二等奖。全书共分十章:第一章,绪论及国内外微繁概况;第二章,植物组织培养的基本知识及操作;第三章,果树试管快繁及脱毒;第四章,观赏植物的试管快繁;第五章,林木组织培养及试管快繁;第六章,药用植物离体培养及试管快繁;第七章,农作物试管快繁和脱毒;第八章,蔬菜组织培养及微繁;第九章,试管繁殖商业性生产及管理; 第十章,植物组织培养的其他应用及前景。该书…     

黑龙江省中医护理队伍现状与对策研究

目的 了解黑龙江省中医药护理队伍建设现状。方法 采用便利抽样法对黑龙江省三级中医医院14家及二级中医医院69家进行问卷调查。结果 2010—2015年,黑龙江省69所二级中医医院及14所三级中医医院,中医护理人员数量、学历结构、职称结构不合理;中医医院护理人员接受中医药知识与技能培训情况不达标,尤其是中医护理骨干及护理管理人员的培养存在缺陷。结论 从创新人事及中医护理人才引入机制入手,加强绩效管理,进行系统化、科学化的中医护理培训。     

BMI1基因下调使宫颈癌和子宫内膜癌对紫杉醇敏感

目的 研究B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1（BMI1）基因对宫颈癌及子宫内膜癌增殖浸润及紫杉醇耐受的影响及其机制。方法 首先利用Cbioportal、TCGA和CPTAC数据库分析BMI1基因在宫颈癌和子宫内膜癌中的突变及表达情况。接着对人宫颈癌组织样本和人子宫内膜癌组织样本中BMI1的蛋白质表达水平进行免疫组化分析。采用蛋白质印迹法（Western blot)检测BMI1敲低后宫颈癌及子宫内膜癌细胞中BMI1下游调控因子的蛋白质水平变化。此外,通过细胞功能实验研究了BMI1在宫颈癌HeLa及子宫内膜癌HEC-1-A细胞中的功能。最后,通过实验评估siBMI1联合紫杉醇治疗的协同抗生长作用。结果 数据库分析结果显示,BMI1在1.5%的子宫颈癌患者及1.9%的子宫内膜癌的患者中存在不同程度的扩增、错义及剪接突变。此外,高mRNA水平的BMI1与宫颈癌的病理类型相关,且高蛋白质水平的BMI1与子宫内膜癌的病理类型和肿瘤分级及较低的生存率相关。进一步的免疫组化分析发现,与正常组织相比,宫颈癌和子宫内膜癌组织中BMI1蛋白水平表达升高,且与肿瘤的病理分化及浸润深度相关。药物敏感性实验显示,BMI1过表达导致HeLa及HEC-1-A细胞对多种抗癌药物的敏感性下降,其中包括紫杉醇。为了进一步分析BMI1与紫杉醇耐受的关系,通过Western blot检测BMI1敲除后HeLa及HEC-1-A细胞中BMI1下游因子的蛋白质水平变化。结果显示,抗凋亡相关蛋白Bcl-2随着BMI1的敲低而表达水平下降,而促凋亡相关蛋白BAX则显著升高。此外,细胞功能实验结果显示,体外过表达BMI1可促进HeLa及HEC-1-A细胞的增殖和迁移,且BMI1低表达的HeLa及HEC-1-A细胞对紫杉醇更敏感。结论 BMI1在宫颈癌和子宫内膜癌患者的肿瘤组织中过表达,BMI1的下调通过调控凋亡通路使CC和EC细胞对紫杉醇更加敏感。     

产蛋白酶枯草杆菌的选育及应用研究——Ⅱ.N1025菌产酶条件与酶性质的初步考察

本文报道产蛋白酶菌株枯草杆菌N1025的产酶条件及酶性质的初步考察。在45℃培养,最适产酶时间为20小时,培养基以自然pH为好,CaCl₂、MgSO₄、FeCl₃及CaCO₃有促进产酶作用,尿素、(NH₄)₂SO₄及NaNO₃对产酶有明显的抑制作用。以酪蛋白为底物,在45℃时,pH7—8酶活性较高;在52—55℃,出现pH 7及9两     

门诊患者满意度测评量表的研制及验证研究

目的 针对当前学术界及实践工作者聚焦关注的患者满意度测评,以及文献综述发现其门诊患者测评量表在医疗服务技术及费用核心要素设计上,普遍存在指标粗略、患者难以理性判断等问题,修正研制完善其测评量表并进行信效度评价。方法 运用文献资料及专题小组讨论法,从患者能够理性体验和客观判断的视角研制该量表,并对浙江省8家综合医院421名门诊患者进行问卷调查,采用内部一致性检验、Spearman相关分析和因子分析等方法评价量表的信效度。结果 量表总体的分半信度为0.96,Cronbach’s α系数为0.94,量表五个维度的Cronbach’s α系数在0.84～0.87之间;因子分析共提取“服务环境”“服务效率”“服务态度”“服务技术”“医疗费用”5个公因子,方差累计贡献率为71.66%。结论 修正研制的门诊患者满意度测评量表侧重及细化设计丰富了医疗服务技术及费用维度的条目内容,总体及各维度信效度均较好,可作为医院门诊医疗服务效果社会评价及治理的参考工具。     

血清Lipocalin-2、Periostin及AGAP2-AS1在非小细胞肺癌中的表达及与病理特征的相关性

摘要 目的：探究血清脂质运载蛋白-2（Lipocalin-2）、成骨细胞特异性因子2（periostin）及长链非编码RNA NR_027032（AGAP2-AS1）表达与非小细胞肺癌（NSCLC）患者临床特征及预后的相关性。方法：选取2015年12月-2017年12月到我院确诊的84例NSCLC患者为研究组,选取同时期在我院健康体检的健康人群为健康对照组,采用ELISA法检测血清Lipocalin-2、periostin水平、采用荧光定量PCR定量检测血清外泌体AGAP2-AS1的表达水平,并分析其表达差异性;分析血清Lipocalin-2、Periostin及AGAP2-AS1水平与NSCLC患者各临床病理特征及预后的相关性。结果：NSCLC组患者血清Lipocalin-2、Periostin及AGAP2-AS1表达水平显著高于健康对照组（P<0.05）,且与淋巴结转移、TNM分期及分化程度具有相关性（P<0.05）,血清Lipocalin-2与Periostin及AGAP2-AS1在NSCLC血液中呈正相关（P<0.01或<0.05）,血清Lipocalin-2、Periostin及AGAP2-AS1高表达组NSCLC患者中位OS分别显著低于低表达（P<0.05）。结论：血清Lipocalin-2、Periostin及AGAP2-AS1在NSCLC患者血液中的表达升高,NSCLC患者血清Lipocalin-2、Periostin及AGAP2-AS1表达水平与分化程度、TNM分期、淋巴结转移及预后具有相关性;有望成为评估NSCLC患者预后的生物标志物。     

鸡舍空气真菌浓度及多样性研究

采用6级Andersen生物空气采样器和常用真菌计数培养基,对鸡舍空气真菌的浓度和多样性进行了研究。空气样本经培养、计数和纯化共鉴定出78种真菌,以有丝分裂孢子真菌为主,优势真菌类群为Cladosporium,Penicillium,Aspergillus,Candida,Alternaria及Fusarium等,其中包括A.flavus,A.fumigatus,A.niger及F.sporotrichioides等在内的10余种禽类病原真菌。鸡舍内空气真菌的平均浓度为2.3×103CFU/m3。A.flavus,A.fumigatus及A.niger在鸡舍空气中的浓度相对较高。鸡舍空气真菌呈对数正态分布,Cladosporium,Penicillium及Aspergillus主要分布在C和D级(3.0~6.0μm),A和B级(>6.0μm)及E和F级(<3.0μm)相对较少。此外,还分离到出现频率较低但对公众健康构成潜在危害的病原真菌,如Candida albicans,Histoplasma capsulatum,Cryptococcus neoformans及Coccidioides immitis等。     

CCU限制陪护制度认知与需求调查分析

目的 了解CCU患者、家属及医护人员对家属限制陪护制度认知的差异,以探讨最佳探视模式,达到既有利于患者康复又有利于治疗的目的。方法 选取符合入选标准的患者200人、家属200人、医护人员80人,在患者入院48小时后采用自制设计调查表进行调查。结果 调查从患者产生不良情绪的最主要因素、患者家属对患者的担忧程度及原因、患者及家属认为CCU最令人不满意的方面、患者和家属以及医护人员对限制陪护的认知及满意度和需求等四个方面进行比较。结果显示在限制陪护对病情的利弊、患者及家属和医护人员对限制陪护制度的认知和需求上存在差异(P＜0. 01)。结论 尽管患者病因不同,但患者及家属的需求是相同的,应高度重视CCU住院患者、家属对限制陪护的反应性及需求, 开展以家庭为中心的全程精细化关护模式,实施分阶段探视制度,制定新型探视模式,寻找制度和人情的平衡点,提高患者的应对能力,更好地配合治疗。     

小油桐籽提取液对作物种子萌发及幼苗生长的影响

研究不同浓度的小油桐籽水提取液及酒精提取液对‘贵杂110号’油菜、‘卓越’黑麦草及‘早麦10号’小麦种子萌发及幼苗生长的影响。结果表明,小油桐籽水提取液对3种作物种子发芽率、幼苗的芽长及根长有抑制作用,且随浓度提高抑制作用增强;酒精提取液对黑麦草与小麦的种子发芽、幼苗芽和根的生长有抑制作用,但特定浓度可促进油菜幼苗芽的生长。     

高效液相色谱法测定葡萄叶中甘氨酸甜菜碱、脯氨酸及葫芦巴碱

甘氨酸甜菜碱、脯氨酸及葫芦巴碱的含量与葡萄的抗逆性能密切相关,应用离子交换树脂提取葡萄叶中的这三种物质,采用Suger-pak1(waters)色谱柱,柱温:85℃;样品测定时间:70min;进样体积:100μL;流速:0.6mL/min;检测波长:195nm;流动相:50mg/LCa-EDTA的HPLC同时分析测定这三种物质,甘氨酸甜菜碱、脯氨酸及葫芦巴碱线性相关系数分别为0.9999,0.9994及0.9994;保留时间分别为20.28,25.66及30.65min;检出限分别为1.35,2.56及1.02ng/mL,回收率为93%~96%。此方法分离效果好,稳定,精确。     

McAbGB2识别的乳腺癌血清抗原性质研究

对抗人乳腺癌血清抗原单克隆抗体GB₂（McAbGB₂）识别的抗原（McAbGB₂抗原）性质及含量进行了研究．结果表明,McAbGB₂抗原是由糖及蛋白质组成的复合蛋白质,不耐热;McAbGB₂抗原决定簇不存在于铁蛋白及癌胚抗原;蛋白质印边检测表明McAbGB₂抗原有两条区带,分子量分别为116及45ku,分布于血液及癌组织;用McAbGB₂进行血清学分析（ELISA试验）,结果表明：乳腺癌阳性符合率达98％（50／51）,正常人及乳腺良性肿瘤病人的假阳性率分别为6％（3／50）及6．7％（1／15）．McAbGB₂抗原可能是新的乳腺癌相关抗原．     

大规模生产重组DNA酵母乙肝疫苗工艺概述

“发展中国家消灭乙型肝炎免疫接种计划实施指南”指出“:世界上四分之三的人口生活在中或高乙肝流行区,因此,唯一的策略就是有效地减少乙肝的流行,最终消灭乙肝……”。世界卫生组织肝炎专家及计划免疫全球咨询组认为:控制全球乙型肝炎及减少死亡的策 略是开展大规模的婴儿及学龄前儿童的乙肝疫苗接种。     

白刺链霉菌（Streptomyces albospinus）CT205产环己酰亚胺含量测定方法的建立

建立白刺链霉菌（Streptomyces albospinus）CT205代谢产环己酰亚胺含量的检测方法,为菌株CT205的开发利用提供技术支持。采用高效液相色谱法（HPLC）、生物活性法和分光光度法等三种检测手段分别测定菌株CT205发酵上清液及粗提物中活性物质环己酰亚胺(Cycloheximide)的含量。三种方法测定环己酰亚胺标准品均具有较好的线性关系,其中相关系数R²_HPLC法（0.999 2）>R²_{生物活性法}（0.993 7）≈R²_{分光光度法}（0.996 5）。HPLC法及生物活性法分别测定CT205发酵液及粗提物中活性物质含量分别为72.87、1 555.70及66.15、1 259.00μg/mL,HPLC法与生物活性法测定的发酵上清液中活性物质含量误差在+6.72 μg/mL。HPLC检测方法的准确性及灵敏度均高于生物活性法,适用于样品含量的准确测定,生物活性法适用于菌株诱变筛选及条件优化实验产生的大批量样品的测定及比较,分光光度法不适用检测杂质含量较多的样品。     

基于医院管理者视角的医学新技术转化应用模式分析

目的 对医院管理者视角下,新技术的引进,引进后的使用与管理及使用后的综合评估与反馈进行综合分析。方法 通过对53名医院管理人员1~1.5小时的半结构式访谈收取定性资料,并进行属性归类分析。结果 研究发现新技术在引入过程中主要考虑的因素涉及新技术的特性及循证依据的情况、新技术引入可能对医生的影响、新技术引入可能为医院带来的影响、新技术引入过程中涉及的相关政策、新技术引入可能对医患关系的影响;明晰了新技术引入的程序、新技术的使用管理及使用后的评估。结论 二三级医院基本已经形成一整套新技术的引进及管理反馈机制,在医院层面新技术的引进及使用过程中,政策因素起到非常重要的作用。     

基于因子分析法的医患信任危机成因研究

目的 探讨导致医患信任危机的多维影响因素与解决策略。方法 运用文献研究、专家咨询、现场调查及因子分析的方法,寻找对医患关系信任构成重要影响的潜在公因子,分析医患信任危机的成因。结果 医疗服务因子、医疗纠纷调解与行业监管因子、社会制度因素及文化价值因子、医患沟通因子是驱动医患信任危机形成的主因。结论 医患信任危机的形成受到医疗服务过程、外部社会制度及文化观念、行业监管及医患沟通和互动等多重因素的影响,需要政府、医疗机构和全社会共同努力,消解医患信任危机的坚冰,促进医患关系修复与和谐。     

中南大学湘雅系统医疗对口支援工作的创新

??????? 目的 探讨大学及附属医院如何在对口支援工作中发挥更好的作用的方法。方法 回顾性分析中南大学及附属医院在国家新医改背景下对医疗对口支援工作模式和机制的创新和效果。结果 该校通过模式和机制创新,医疗对口支援工作取得良好成效。结论 大学及附属医院利用学科建设和人才培养等优势,创新性地开展医疗对口支援工作,可取得更好成效。     

铁死亡相关基因ACSL4、TFRC及Hippo通路关键分子YAP在间皮瘤组织中的表达及意义

摘要 目的：分析铁死亡相关基因长链酯酰辅酶A合成酶4（acyl-CoA synthetase long chain family member 4,ACSL4）、转铁蛋白受体（transferrin receptor, TFRC）及Hippo通路关键分子Yes相关蛋白（Yes-associated protein,YAP）在间皮瘤组织中的表达水平、相关性及意义,观察YAP活化对间皮瘤细胞系211H侵袭转移能力及铁死亡敏感性的影响。方法：应用组织芯片技术和免疫组化法观察ACSL4、TFRC及YAP在30例间皮瘤组织和10例正常组织中的表达,分析蛋白水平及分布的相关性。GEPIA数据库分析基因ACSL4、TFRC和YAP在间皮瘤组织中的mRNA水平相关性。应用逆转录病毒载体于211H细胞中过表达活化型YAP S127A (serine-127突变为alanine),利用实时荧光定量PCR检测ACSL4及TFRC表达;利用划痕实验和transwell侵袭实验检测211H细胞迁移及侵袭能力;利用erastin刺激及SYTOX Green染色检测铁死亡敏感性。结果：间皮瘤组织中YAP细胞核表达、ACSL4及TFRC阳性表达率显著高于正常组织,差异均有统计学意义（P<0.001,P<0.001,P<0.0001）。经Spearman秩相关检验,ACSL4及TFRC蛋白在间皮瘤中的表达呈正相关(Spearman r=0.61,P=0.0003);YAP在细胞核中的表达与ACSL4表达呈正相关(Spearman r=0.4872,P=0.0063)。GEPIA 数据库分析发现,YAP与ACSL4、ACSL4与TFRC在间皮瘤中的mRNA表达水平均呈正相关（Spearman r=0.33, P=0.0019;Spearman r=0.52,P=0.0000）。表达活化型YAP的211H细胞,ACSL4与TFRC mRNA水平与对照细胞相比均上调;迁移侵袭能力增强;铁死亡敏感性增强。结论：YAP、ACSL4及TFRC在间皮瘤组织中表达具有正相关性;YAP活化促进间皮瘤细胞侵袭转移能力,同时通过ACSL4及TFRC提高细胞对铁死亡诱导的敏感性。YAP、ACSL4及TFRC有望成为预测间皮瘤铁死亡敏感性的潜在生物学标志物。     

Genentech开发动向

在医药方面,Genentech已将胰岛素基因工程制品投入市场;人生长激素及α干扰素正在等待食品及药物管理局批准;γ干扰素及血纤蛋白溶酶激活剂(tissue plasminogen activator)正在进行第二期临床试验。