一种简单快速的拟南芥水培方法的研究

利用１／４ Ｈｏａｇｌａｎｄ溶液为营养液,采用空气压缩机通气,光照度１２０μｍｏｌ／ｍ＾２／ｓ,光暗周期１２／１２小时,光照温度２２℃,黑暗温度１８℃,湿度５０％,对模式植物拟南芥进行了溶液培养。采用这种水培系统培养的拟南芥植株比土培的植株提前三周成熟,而且植株生长非常健壮,苗高可达３０～４０ｃｍ。     

一种拟南芥无菌直播水培技术

一般拟南芥的水培方法多是开放的体系(郁晓敏等2004;赵淑清和郭剑波2000),培养时间长时容易滋生菌类和青苔,影响植株正常生长。Ezaki等(2000)采用尼龙筛网和海绵缝在一起作为     

一种简易可行的拟南芥水培新方法

在国内外拟南芥水培方法研究基础上,结合实际情况,设计一套适合于实验室的需要,能就地取材自己制作的水培装置.这套装置主要由两部分组成:播放种子的塑料管和作为支撑物的不锈钢丝网,盛溶液的容器.实验证明两个拟南芥品种在这种水培装置中生长良好,且培养的费用低,易于管理等.由于有钢丝网作支撑,拟南芥能够顺利完成整个生长周期并且结实饱满,种子萌发率高.     

一种筛选拟南芥突变体的有效方法

经甲基磺酸乙酯（EMS）诱变处理的拟南芥种子,接种于MS培养基上,垂直放置培养4天后,将幼苗转移至胁迫培养基中,以倒置幼苗180°所形成的弯曲生长根作为指标筛选拟南芥耐营养胁迫突变体。利用这种方法,成功地筛选到一个耐低钾的隐性单基因拟南芥突变体。本方法同样适用于其他类型突变体的筛选。 Abstract：his paper introduces a root-bending assay for isol ation of Arabidopsis mutants tolerant to nutrition stress. Seeds of wild-ty pe Arabidopsis thaliana (ecotype Landersberg erecta) were mutagenized wi th ethyl methyl sulfide (EMS),and M2 populations were screened for mutants. Fo ur-day-old seedlings with 1-to 1.5-cm-long roots were transferred from the vertical agar plates onto to a second agar medium that was supplemented with det erminate stress. The seedlings were arranged in rows, and the plates were orient ed vertically with the roots pointing upward. After another 4 days, the root be nding seedlings were selected for putative mutants and transferred to soil to gr ow to maturity.Seeds from the putative mutants were screened again to determine the true mutants.By using this root-bending assay we have isolated a low-K+-tolerant (lkt1) mutant which is caused by single recessive nuclear mutation. F or lkt1 mutant screening,K+concentration of the medium was 100μmol/L because root growth of wild type seedlings was completely inhibited at or below this con centration.This root-bending assay is also applicable to other type of Arabid opsis mutant isolation.     

不同植物激素与培养液对米兰插条水培生根的研究

通过用不同植物激素与培养液的组合对米兰水培生根试验,在实验过程中观察其生根状况,实验中选用4~6年生优质母株上的1年生枝条,剪取10~15 cm长插穗,于5月中旬采用不同营养液分别加旺根(自制生根剂)、国光萘乙酸NAA催根处理,以清水为对照,以揭示米兰水培生根的最佳配方。40天后实验结果表明:在所设计的组合中以营养液B 根旺的处理较为理想。     

喷雾:一种简便的拟南芥转化方法

目的：建立一种改良的且操作更为简便可行的拟南芥转化方法。方法：用含有OD600等于0．8的农杆菌,5%蔗糖和0. 2 ml/L表面活性剂Silwet L-77的MS液体培养基喷洒正在发育的花器官即可实现基因转化。植物生长到高约4cm时进行转化,此时植物具有大量的花和极少数的果荚,可以得到比较高的转化效率。喷洒溶液后将植物用保鲜膜等材料包裹起来以保持湿度,可有利于转化。结果：得到了365棵转化植株,转化效率和花器官浸泡法的基本一致。结论：这种方法可适用于多种生态型的拟南芥植物转化,并且方便大规模的拟南芥植物的转化,便于人们快速获得带有T-DNA标记的植株或基因遗传互补工作的顺利开展。     

袋鼠花水培扦插技术研究

扦插是袋鼠花繁殖的主要方法。本实验采用不同剂量营养液与吲哚丁酸(IBA)不同浓度相结合的方法,以清水为对照,通过测定袋鼠花的生根情况,探讨袋鼠花水培扦插的适宜处理组合。结果表明:营养液方面,清水处理对根条数、根长、根鲜重和生根率的影响明显优于其它处理,有利于袋鼠花的水培生根;IBA浓度为20mg/L时的生根率明显优于其它处理和对照,而当其浓度为40mg/L时对于根条数、根长和根鲜重则明显优于对照和其它处理,最有利于袋鼠花的水培生根。实验结果说明较低浓度的营养液(如清水)与中等浓度(如40mg/L)的IBA激素最有利于袋鼠花的水培生根。因此,本研究为缩短水培袋鼠花的生产周期及突出其观根特色,提高其观赏价值和商品价值提供理论依据。     

镉胁迫对拟南芥幼苗基因组DNA多态性的影响

应用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,检测了镉(Cd)胁迫对拟南芥幼苗叶片DNA多态性的影响,并结合其形态和生理指标,选取Cd污染敏感的生物标记物.结果表明:0.125～3.0 mg·L-1Cd处理21 d后,拟南芥幼苗叶片的可溶性蛋白质含量随Cd浓度的增加呈倒U字型曲线变化,但其鲜重和叶绿素含量变化均不明显;12条寡核苷酸引物中,有5条引物扩增出稳定、特异的PCR产物;拟南芥幼苗叶片基因组的RAPD图谱中,对照组RAPD图谱中分辨出44条清晰的条带;Cd胁迫使拟南芥幼苗叶片基因组的RAPD图谱发生了改变,包括条带的增加、缺失和条带荧光强度的改变,且与Cd剂量相关.实验证明,Cd影响基因组模板的稳定性,即DNA多态性对Cd污染敏感,可以作为检测Cd污染及其相关生物学效应的潜在生物标记物.     

一种改进的诱发拟南芥产生系统抗病性的方法

报告了诱发拟南芥产生系统抗性的改进的方法。通过直接用荧光假单胞菌(Pseudomonas fluores-cent)M18菌悬液浇灌植株根际代替收集菌体与土壤混合的方法、以直接播种替代移苗以及以病原菌喷雾接种法替代蘸叶接种法,在拟南芥(Arabidopsis thali-ana)生态型Columbia中,有效地建立了诱导性系统抗性(induced systemic resistance,ISR)的实验模式。这种改进的方法简化了操作步骤,缩短了试验周期,使大规模筛选ISR突变体成为可能,同时还能避免因移栽引起的各种其他抗性反应的干扰。     

拟南芥钙调素结合蛋白参与胁迫响应的研究

采用实时荧光定量RT-PCR和Northern blotting技术检测了野生型拟南芥中CBP60g基因对丁香假单胞菌和非生物胁迫的响应,并对丁香假单胞菌接种后,野生型拟南芥、cbp60g-1突变体和CBP60g过表达转基因植物中抗逆相关基因的表达变化进行检测。结果显示:(1)在野生型拟南芥中CBP60g基因的表达能被丁香假单胞菌、高盐、冷和机械损伤所诱导。(2)经丁香假单胞菌诱导后病程相关基因PR5和AIG1的表达在过表达转基因植物中明显高于野生型。(3)受干旱和ABA诱导的AtMYB2基因的表达在过表达转基因植物中也高于野生型。研究表明,CBP60g同时参与了拟南芥对生物和非生物胁迫响应。     

A Simple Hydroponic Culture Method for the Development of a Highly Viable Root System in Arabidopsis thaliana

In the studies of nutritional absorption and metal toxicity in the root, it is important to grow plants without technical damage. We established a simple hydroponic culture system for Arabidopsis thaliana to obtain a healthy plant having a well-developed root system with many lateral roots. The phytotoxic effects of Cr, Cu, and Al ions were examined by FDA-PI staining using this culture system. The pattern of root inhibition varied with the ion, suggesting the usefulness of this culture system.     

The role of amino acid metabolism during abiotic stress release

Plant responses to abiotic stress include various modifications in amino acid metabolism. By using a hydroponic culture system, we systematically investigate modification in amino acid profiles and the proteome of Arabidopsis thaliana leaves during initial recovery from low water potential or high salinity. Both treatments elicited oxidative stress leading to a biphasic stress response during recovery. Degradation of highly abundant proteins such as subunits of photosystems and ribosomes contributed to an accumulation of free amino acids. Catabolic pathways for several low abundant amino acids were induced indicating their usage as an alternative respiratory substrate to compensate for the decreased photosynthesis. Our results demonstrate that rapid detoxification of potentially detrimental amino acids such as Lys is a priority during the initial stress recovery period. The content of Pro, which acts as a compatible osmolyte during stress, was adjusted by balancing its synthesis and catabolism both of which were induced both during and after stress treatments. The production of amino acid derived secondary metabolites was up‐regulated specifically during the recovery period, and our dataset also indicates increased synthesis rates of the precursor amino acids. Overall, our results support a tight relationship between amino acid metabolism and stress responses.     

拟南芥miR399耐低磷胁迫研究进展

MicroRNA是一类长21~25nt的内源非编码RNA,可以与目标mRNA结合使之断裂或降解,从而在转录或转录后水平发挥作用。miR399长22nt,在拟南芥中有6个成员,分别是miR399a~f,已在19个物种中发现了118个miR399。现已证明,拟南芥miR399在耐低磷胁迫中有重要作用,现对拟南芥miR399在耐低磷胁迫中的研究进展进行综述,以探索miR399提高大豆及其他植物耐低磷胁迫能力的可能性。     

拟南芥与水稻之间简单重复序列的比较分析

利用Perl,C 语言编写了鉴定和分析简单重复序列的一系列程序,在全基因组水平上分析了拟南芥(ArabidopsisthalianaL.)简单重复序列的分布及简单重复序列和基因的关系。共发现5652个简单重复序列(≥20bp),大约每20.6kb有1个简单重复序列。拟南芥各染色体之间简单重复序列的密度基本一致。拟南芥的27480条编码序列中,只有677条编码序列含有725个简单重复序列,其中的3碱基简单重复序列多数对应的是小的亲水性的氨基酸。在拟南芥和水稻(OryzasativaL.)第4号染色体的高度保守的基因中,简单重复序列却并不保守。通过比较拟南芥和水稻之间简单重复序列的差异,推论出:水稻的全基因组和基因中简单重复序列的密度都比拟南芥大,这可能是水稻基因组序列比拟南芥大的原因之一,水稻基因组中0.21%来自简单重复序列,而拟南芥中只有0.13%;不但不同物种的基因组对简单重复序列的偏好性不同,而且不同物种的基因对简单重复序列的偏好性也不同。在水稻和拟南芥中都发现了一些嵌套性的卫星序列。     

拟南芥与水稻之间简单重复序列的比较分析

利用Peri,C 语言编写了鉴定和分析简单重复序列的一系列程序,在全基因组水平上分析了拟南芥(Arabidopsisthaliana L.)简单重复序列的分布及简单重复序列和基因的关系.共发现5 652个简单重复序列(≥20bp),大约每20.6kb有1个简单重复序列.拟南芥各染色体之间简单重复序列的密度基本一致.拟南芥的27 480条编码序列中,只有677条编码序列含有725个简单重复序列,其中的3碱基简单重复序列多数对应的是小的亲水性的氨基酸.在拟南芥和水稻(Oryza sativa L.)第4号染色体的高度保守的基因中,简单重复序列却并不保守.通过比较拟南芥和水稻之间简单重复序列的差异,推论出:水稻的全基因组和基因中简单重复序列的密度都比拟南芥大,这可能是水稻基因组序列比拟南芥大的原因之一,水稻基因组中0.21%来自简单重复序列,而拟南芥中只有0.13%;不但不同物种的基因组对简单重复序列的偏好性不同,而且不同物种的基因对简单重复序列的偏好性也不同.在水稻和拟南芥中部发现了一些嵌套性的卫星序列.     

拟南芥乙烯突变体在干旱胁迫下的形态学差异

为了揭示乙烯在植物与环境相互作用过程中的生物学功能,以拟南芥（Arabidopsis thaliana）的ein2-5、ein3-1、EIN3ox、EIL1ox 4种乙烯突变体与Col-0野生型为材料,对比研究它们在干旱胁迫条件下的生长和形态学变化。研究发现,干旱胁迫导致莲座叶直径、叶片面积、花序、水势等指标发生显著变化,同时不同突变体的形态适应特点呈现显著差异。这些结果表明,乙烯积极参与了植物形态塑造过程,与植物的抗旱性具有紧密相关性。     

拟南芥室内培养技术

本文报道了室内培养拟南芥的一些简便易行的改进技术.采用我们改进的营养土、蛭石、素沙混合培养介质和直播方式培养拟南芥,并根据其生物学特性在温度、空气湿度、土壤水分和光照等方面给予适当管理,能培养出生长更健壮、更好地满足实验要求的拟南芥植株.此外还介绍了播种、浇水、生育期调节、种子保存、病虫害防治和防混杂等环节的一些技巧措施.与其他培养方法相比,此法不仅简便、效果好,而且适合较简易的培养条件.