从明胶中分离L-脯氨酸和L-羟脯氨酸的新方法

<正> 许多研究者报道,市售 L—脯氨酸含有微量 L—羟脯氨酸,曾取5个样品,按 Neu-man 和 logan 方法试验以致含3.5%的羟脯氨酸。以往是以其生成复盐来从明胶中制备 L-脯氨酸,操作冗长且产率低。虽采用了亚硝酸处理明胶水解液来制备 L-脯氨酸和 L-羟脯氨酸,但仍然产率低或者产物不纯.现在简便有效的分离 L-脯氨酸和 L-羟脯氨酸的方法,是利用亚氨基特性,应用大柱,将不纯的市销产物加以纯化。     

酪氨酸酚裂解酶的固定化与转化条件的优化

以欧文氏菌(Erwinia herbicola)来源的酪氨酸酚裂解酶的重组大肠埃希菌Escherichia coli BL21为研究对象,研究固定化大肠埃希菌生产L-酪氨酸的条件。以海藻酸钠为载体,采用单因素实验分别考察了载体材料、明胶浓度、反应时间、苯酚浓度和辅助剂(二氧化硅、硅藻土和碳酸钙)等因素对L-酪氨酸生产的影响,发现明胶浓度、反应时间、苯酚和碳酸钙等因素的影响较为显著,进而通过正交实验探索最优条件。结果表明,生产L-酪氨酸的最优条件:载体为4%海藻酸钠与6%明胶的混合载体,苯酚浓度0.08 mol/L,反应时间8 h,于载体中添加0.6%碳酸钙。此条件下,连续反应9次后L-酪氨酸的产量达到64.5 g/L,比优化前提高了451.3%。     

耦合固定化技术在天冬氨酸转氨酶反应体系中的应用

对卡拉胶与明胶形成的耦合固定化体系进行了优化,并探讨海藻糖和金属离子（Mg^2＋）等辅助因子在该体系中对酶转化过程的影响。结果表明将该法应用于L-苯丙氨酸转化体系中,保护了天冬氨酸转氨酶的活性,显著提高了酶活回收率,天冬氨酸转氨酶的活力回收达到了93．6％,较文献报道有明显提高。     

基于串联质谱的鱼皮明胶鉴别研究

在胶原蛋白序列比对基础上,以虹鳟鱼明胶、猪明胶和牛明胶为模型,利用高效液相色谱－串联质谱技术（HPLC-MS/MS）研究了3种明胶降解多肽组成的差异。使用胰蛋白酶将鱼皮明胶进行了酶解处理,使用HPLC-MS/MS对酶解产物中的多肽组成进行了分析,并与猪和牛明胶酶解产物中的多肽进行了比较。结果表明鱼明胶酶解产物中存在特征多肽,通过特征多肽的种类可区别鱼明胶与猪和牛明胶,研究了明胶多肽中脯氨酸羟基化修饰、明胶分子量范围和脱酰胺化对特征多肽识别的影响。研究表明利用HPLC-MS/MS技术通过识别明胶酶解产物中的特征多肽进行鱼皮明胶鉴别具有可行性。     

用明胶-戊二醛法固定大肠杆菌细胞生产L-天门冬氨酸

我们选用大肠杆菌(Escherichia coli)AS1.881菌株,制备固定化大肠杆菌细胞,用于连续生产L-天门冬氨酸,现报道如下。材料和方法一、材料明胶为瑞士Fluka AG公司产品和上海明胶厂照相用明胶。二者无差别。戊二醛为E.     

大鼠动情周期及妊娠早期卵巢中明胶酶A活性变化

用酶谱法测定了大鼠动情周期以及正常妊娠早期和假孕早期不同时间卵巢中明胶酶Ａ活性的变化,并观察了甾体激素对明胶酶Ａ活性变化的影响,结果表明：在不同的周期及妊娠期卵巢中均存在６７ｋＤ为主的明胶酶Ａ,但未发现有明胶酶Ｂ存在。明胶酶Ａ活性变化如下：１）在大鼠的动情前期明胶酶Ａ的活性最高,间情期最低;２）在妊娠早期（１－７天）的卵巢中,明胶酶Ａ的活性在妊娠第４天达到最高,第１－３天及第５、６天其活性也较高,     

酿酒酵母L-阿拉伯糖转化乙醇代谢工程的研究进展

L-阿拉伯糖是木质纤维素原料中一种重要的五碳糖组分,但传统的乙醇生产菌株酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)不能利用L-阿拉伯糖。通过代谢途径工程手段,在酿酒酵母中引入L-阿拉伯糖初始代谢途径可以获得能利用L-阿拉伯糖乙醇发酵的重组菌株。并且,通过代谢途径的疏通以及吸收系统的优化可以强化重组菌株代谢L-阿拉伯糖的能力。笔者从以上角度综述了近年来酿酒酵母转化L-阿拉伯糖生产乙醇的研究进展。     

用吸附柱和离交柱层析法从猪血粉水解液中连续分离七种氨基酸

<正> 本文介绍了采用国产活性炭及阳离子交换树脂两种柱体巧妙地组合,并应用不同类型的洗脱剂,变换其浓度和洗脱速度,相互配合,能成功地从猪血粉水解液中一次连续分离和制取L-苯丙氨酸、L-酪氨酸、L-亮氨酸、L-缬氨酸、L-组氨酸、L-赖氨酸和L-精氨酸。多次提取试验表明,工艺操作简单、稳定可靠,苯丙氨酸与酪氨酸、亮氨酸与缬氨酸分离良好,     

明胶中细菌内毒素的检测

作者通过鲎试验法检测多种来源、多个批号的药用明胶中细菌内毒素含量并进行合格批号的干扰试验,证明明胶对鲎试剂有干扰作用,其作用表现为浓度越高干扰越大。抗增液无助于消除明胶对鲎试剂的干扰,而有效的稀释可克服这种干扰。并对明胶及含明胶成份的生物制品在细菌内毒素检测中的限值确定及其试验影响进行了讨论。     

静电场辅助作用对明胶分子结构转化的影响

为了考察静电场对于明胶结构转化的影响,使用旋光分析法分析不同温度、电场强度、浓度和溶剂条件下明胶溶液的状态。结果表明:静电场在冰浴条件下比室温条件下更有利于明胶多肽分子结构的伸展,且卷曲-螺旋结构转化随着电场强度的升高而升高;静电场的辅助作用随着明胶浓度的升高而显著降低,当明胶质量浓度从0.5上升到8 mg/m L时,静电场的辅助作用降低了近5倍。乙二醇对于复性后的明胶具有稳定其结构的作用,但是只在低浓度(1 mg/m L)时起作用,在高浓度(4 mg/m L)时效果并不明显。     

担载b-FGF的PLGA微球复合明胶支架的体外释放研究

目的:研究担载碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)微球复合明胶支架的外形特征、孔径、孔隙率及体外释放动力学,以期构建具有缓释功能、高孔隙率的担载细胞因子的新型复合明胶支架。方法:本文利用冷冻相分离法和S/O/W法先将b-FGF水溶液包裹于PLGA微球中,然后埋置于明胶溶液中制备为多孔复合明胶支架。分别对微球的形态和复合明胶支架的基本形态、孔径、孔隙率进行表征,通过Elisa法测定b-FGF在复合明胶支架中的体外释放行为。结果:制备成形态良好的三维复合明胶支架,其孔隙率为82.90%±1.45%,孔径范围为150~300μm,复合明胶支架中b-FGF在体外缓慢释放20余天。结论:担载蛋白微球复合明胶支架不仅满足组织工程支架的要求,还能有效缓释细胞因子,为细胞和组织生长提供良好的微环境,为进一步应用于组织工程领域提供了可能。     

细菌把L-山梨糖醇氧化成为L-果糖

美国Nabisco Brands公司R.O.Horwath认为,L-果糖本是作为种饮料中的甜味剂使用的,也可以供糖尿病患者食用的,但由于L-糖类不被代谢,不产生后味,所以他们从一种荧光假单胞菌(Preudomonas fluorescens)的突变株中分离出L-伊地醇脱氢酶,用这种酶来氧化L-山梨糖醇,生产L-果糖。把L-阿拉伯糖缩合,形成L-葡     

亮氨酸和异亮氨酸研究题录选

1　以小什鱼为原料提取亮氨酸的试验 2　猪毛水解物中亮氨酸的离子交换柱分离 3　从猪血水解液中提取亮氨酸 4　以玉米麸质为原料提取L-亮氨酸 5　通过谷氨酸棒状杆菌由α酮异已酸生产L-亮氨酸的微生物生产法 6　L-异亮氨酸生产新技术 7　产L-异亮氨酸新菌株选育及其发酵产物提纯和鉴定 8　生产L-异亮氨酸的新方法 9　异亮氨酸产生菌推理选育思想 10 活细胞反应生产L-异亮氨酸工艺中附产物形成的抑制 11 异亮氨酸生产的新方法 12 L-异亮氨酸产生菌选育的研究 13 L-异亮氨酸质量标准 14 对四种异亮氨质量标准的评价 15 异亮氨酸细菌内毒素和热原检查的探讨 16 从面筋水解物中提取L—亮氨酸 17 从人发中连续提取亮氨酸和胱氨酸工艺初探 　　需要上述资料的读者,请与本刊编辑部联系,编辑部提供复印服务,复印费、邮寄费等共80 元。 　　联系电话：027-87664846 　　邮编：430072 　　地址：武汉市武汉大学《氨基酸和生物资源》编辑部     

氨基酸制备色谱-Dpsc离子交换树脂柱分离发酵L-缬氨酸

从苯乙烯、甲基丙烯酸甲酯、二乙烯苯合成了具有磺酸、羧酸功能基团的新型Dpsc离子交换树脂,并对其表征了选择性、分离度、理论等板高度。用新型Dpsc离子交换树脂在制备规模从发酵缬氨酸液中分离制备了L-缬氨酸,应用0.2mo·L-1NH4Cl和0.5mol·L-1NH4OH,流速6.0mL·min-1,温度25℃,梯度洗脱,减少保留体积4/5。     

由人发制备L-胱氨酸工艺的改进及某些机制探讨

<正> 本文介绍了由人发制备L-胱氨酸的生产工艺。为提高L-胱氨酸生产收率,对原工艺有些工序进行分析研究。作者为了能获得理想水解终点,因而作了不同盐酸浓度对L-胱氨酸收率影响曲线,认为用8.8N～9N盐酸浓度制备L-胱氨酸收率最佳;也做了不同时间水解人发对L-胱氨酸收率影响,对从人发中制备单一L-胱氨酸采用6.5小时水解时间,对L-胱氨酸收率最佳、最经济;水解浓缩液经中和后马上采用连续搅拌结晶;粗制时先采用液碱后用饱     

基质金属蛋白酶-2在酵母系统中表达的初步研究

基质金属蛋白酶-2（明胶酶A）在肿瘤侵袭和转移中具有重要作用,为进一步研究其作用机制,在酵母系统中表达了金属蛋白酶-2通过PCR方法获得明胶酶A的表达序列,酶切和测序结果证明序列正确后,构建明胶酶A的表达载体pPIC9/GelA,电击法转化酵母得到阳性克隆.明胶酶谱分析说明表达产物具有明胶底物特异性,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳表明,表达产物的分子质量为66 ku.     

炭末明胶改良安瓿法应用研究

为了证实炭末明胶改良安瓿管法替代其他方法检测细菌是否产明胶酶,实验中采用营养明胶法、X线胶片法和炭末明胶改良安瓿管法对486株质控菌株、临床分离菌株进行明胶液化试验。结果显示,以营养明胶法培养的359株呈阳性反应,X线胶片法274株呈阳性反应,炭末明胶改良安瓿法423株呈阳性反应。营养明胶法明胶液化平均天数为3.3d,而炭末明胶改良安瓿法明胶液化平均天数仅为1.5d。炭末明胶改良安瓿法由于简单快捷,易于观察,而且试剂用量小、能够室温长期保存,该方法值得推广应用。     

从活疫苗和DTaP中去除明胶

从九十年代早期起,婴幼儿开始接种无细胞百自破疫苗。在此以后接种用明胶作稳定剂的诸如麻腮风这样的活疫苗。随之,含明胶的活疫苗造成的过敏性反应的报道急剧上升。几乎所有这些病例都无一例外接种过三或四次含明胶的DTaP。     

从发酵液中高效提取L-缬氨酸的工艺研究

目的:利用有机膜过滤和离子交换法分离提取发酵液中的L-缬氨酸。方法:通过有机膜过滤,除去发酵液中的菌体及蛋白,滤液浓缩结晶获得L-缬氨酸产品,通过离子交换法从结晶母液中回收部分L-缬氨酸。结果:确定了有机微滤膜和超滤膜去除发酵液中菌体蛋白和色素的操作条件;确定了采用离子交换法提取L-缬氨酸的操作条件:选择732强酸性阳离子树脂,料液pH值为3.0左右,用0.4 mol/L的氨水以1.0 mL/min的速度洗脱,L-缬氨酸的收率为89.2%。结论:通过有机膜过滤和离子交换法分离提取发酵液中的L-缬氨酸,可以提高提取收率和产品质量。     

铁皮石斛和重唇石斛及其杂交子代花的挥发性成分分析北大核心CSCD

为阐明铁皮石斛和重唇石斛及其杂交后代14L-3、14L-6、14L-7和14L-9花挥发性成分的变化,采用静态顶空气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对石斛花进行检测。结果表明,从石斛花中检测出81种挥发性成分,包括烯、酮、醛、烷几大类,铁皮石斛、重唇石斛、14L-3、14L-6、14L-7和14L-9分别有23、12、21、33、23和35种。铁皮石斛花的主成分是α-蒎烯,重唇石斛花是2-十五烷酮,4个子代花中均含有这2种来自亲本的特征成分,α-蒎烯是子代共同的主成分。亲本和子代石斛花共有成分是正己醛。子代14L-3、14L-6、14L-9均与母本铁皮石斛相似性高,相似性以14L-3>14L-6>14L-9,与父本差异性大。14L-7与亲本相似度最均衡。这为石斛育种研究提供了指导。