联苯菊酯对烟粉虱毒力的快速测定技术优化和应用

【目的】烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)是一种外来入侵性的重大农业害虫,化学药剂是防治烟粉虱的主要手段。为了实现对烟粉虱成虫防治用药的科学快速筛选,本文拟研究并优化联苯菊酯对烟粉虱毒力的快速测定技术。【方法】优化了一种烟粉虱成虫对联苯菊酯敏感度的毒力测定方法——玻璃管药膜法。具体方法是:在玻璃指形管的底部1/3处均匀涂抹配制好的一定浓度的杀虫药液,晾干后引入烟粉虱成虫,根据药剂作用特性确定合适的时间来观察试虫的死亡情况。应用该方法测定了联苯菊酯对室内饲养的烟粉虱成虫进行快速毒力测定,确定药剂的诊断剂量,最后检测了制作的玻璃管药膜放置于不同条件下对烟粉虱的检测灵敏度。【结果】优化的玻璃管药膜法测定结果稳定,重复性好,可快速测定化学药剂对田间烟粉虱成虫的毒力;4°C条件下避光存放制作的药膜玻璃管一个月后,仍可以保持其稳定的检测灵敏性。【结论】本研究中优化的玻璃管药膜法,操作及测定方法简便快速,试虫需要量少,1/3玻璃管内部涂药还可减少试验的用药量,该方法也可用于其它具有飞行能力的昆虫毒力测定试验中,为田间害虫的科学选药提供一种快速测定手段。     

二化螟幼虫病原真菌的分离纯化及其对烟粉虱和褐飞虱的毒力研究

通过对罹病二化螟Chilo suppressalis (Walker)幼虫病原真菌的分离纯化,筛选出5种不同真菌,探究不同营养对不同真菌生物活性的影响,并测定其对烟粉虱Bemisia tabaci (Gennadius)和褐飞虱Nilaparvata lugens (Stal)成虫和若虫的室内毒力。选择毒力最强的菌株,通过生物型的初步鉴定,明确高毒力菌株的种类。结果表明：所筛选的5种真菌对两种害虫均具有较高的毒力,其中菌株A26和Bbr14对烟粉虱和褐飞虱具有较强的毒力,在处理后第9 d,菌株A26对烟粉虱成虫和若虫的累计校正死亡率均最高分别达84.69%、77.62%,感染率为91.17%、88.24%,LT50为4.31 d、4.87 d;处理后第10 d对褐飞虱成虫和若虫的累计校正死亡率达87.54%、73.18%,感染率为90.13%、87.13%,LT50为4.27d、5.14 d,而菌株Bbr14的效果仅次于A26。鉴定的结果显示菌株A26为曲霉,菌株Bbr14为球孢白僵菌,曲霉的安全性有待研究,球孢白僵菌的应用技术已较成熟,有望能在防治这两类重要害虫中发挥作用。     

烟粉虱成虫密度自动计数系统

为改善烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)种群密度调查的手段,根据图像识别原理,形成了一套田间烟粉虱成虫密度自动计数系统,该系统通过成像装置采集烟粉虱成虫的图像,测量成像装置与成像对象之间的距离,对图像中的烟粉虱图像进行识别并计数,计算寄主植物叶面积,最后得出烟粉虱成虫密度。应用该系统对烟粉虱成虫密度进行调查,准确率在90%以上。     

一种快速鉴别烟粉虱与温室白粉虱成虫的方法——复眼镜检法

介绍能够快速鉴别2种形态相似的重要农业害虫即烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)和温室白粉虱Trialeurodes vaporariorum(Westwood)成虫的方法——复眼镜检法及其应用。复眼镜检法研究表明,烟粉虱成虫上部复眼、下部复眼之间有一个小眼连接,而温室白粉虱成虫上部复眼、下部复眼是完全分离的。     

三种喷雾助剂与杀虫剂混配防治烟粉虱的减量增效作用

[目的]为明确强力源、有机硅和怀农特3种喷雾助剂对吡虫啉、阿维菌素、苦参碱的减量增效作用.[方法]采用浸虫浸叶法和喷雾法开展烟粉虱Bemisia tabaci室内毒力测定和田间药效试验.[结果]3种喷雾助剂对3种药剂的增效作用从高到低依次为强力源＞有机硅＞怀农特.施用吡虫啉、阿维菌素和苦参碱48 h后,烟粉虱若虫的LC50分别为37.7146、1.8062和10.5632 mg/L,添加强力源后烟粉虱若虫LC50分别降低到13.0188、1.0990和2.7116 mg/L;添加有机硅后烟粉虱若虫LC50分别降低到16.1900、1.2719和3.1609 mg/L;添加怀农特后LC50分别降低到20.0851、1.3247和3.7603 mg/L.田间试验结果表明,3种药剂减量20％和30％添加3种喷雾助剂均显著高于3种单剂的防效,3种药剂减量40％添加强力源和有机硅对烟粉虱的防效显著高于每种单剂,添加怀农特略高于或者与每种单剂的防效持平.施药后3d,各处理对烟粉虱的防效达到最高,吡虫啉、阿维菌素、苦参碱减量20％添加强力源对烟粉虱的防效分别高达97.11％、90.83％、88.17％.施药7d后吡虫啉减量40％添加3种喷雾助对烟粉虱的防效仍保持在75.55％-80.76％,阿维菌素减量40％添加3种喷雾助剂保持在71.84％-79.12％,苦参碱减量40％添加3种喷雾助剂保持在68.60％-75.74％.[结论]3种药剂的常规用量减量20％-30％,并通过添加强力源、有机硅和怀农特3种喷雾助剂可提高对烟粉虱的防治效果.     

烟粉虱成虫空间分布型的研究

对烟粉虱Bemisiatabaci成虫在单株茄子(SolanummelongenaL.)、西瓜(CitrullusvulgarisSchard)和甜瓜(CucumismeloL.)上的分布规律及其空间分布型进行了研究。在植株上中部较幼嫩且已充分展开之叶片上烟粉虱成虫数量最多,成虫呈聚集分布。成虫在黄瓜(CucumissativusL.)上亦呈聚集分布,确定了不同虫口密度情况下的最适抽样数。     

棉田烟粉虱种群动态及杀虫剂的影响

本文记述了烟粉虱(Bemisia tabaci(Gennadius))各龄若虫形态特征、生物学特性,以及1977—1984年八年的田间种群动态及杀虫剂对其影响.烟粉虱是上海郊区常发性棉田害虫,但密度较低,为害不重,除棉花外还为害大豆等作物.烟粉虱从7月上旬在棉田出现,8—9月为发生盛期.一般年份有三个高峰日,每年高峰日出现有一定规律.烟粉虱田间种群积累增长数和10℃以上积温呈S形曲线相关,文中给出不同数量类型年份的相关曲线,可以用于预测种群增长趋势.10月下旬以后种群数量明显下降.调查中发现二种寄生蜂寄生若虫,对粉虱种群有一定影 响.在每年用药7—9次的常规用药田块粉虱种群可以被压制到较低水平,但寄生蜂也全部损失,在每年用药3—4次的控药田块,虽粉虱数量较多,但寄生蜂数量也有上升趋势,而影响粉虱种群数量.     

抗烟粉虱大豆种质资源筛选和抗性机制初探

烟粉虱(Bemisia tabaci Gennadius)近年来发生日益猖獗、危害日趋严重,防治比较困难,却未被列为主要经济害虫.筛选抗性种质和选育抗性品种是防治烟粉虱的有效措施.本研究对223份大豆种质资源进行了抗烟粉虱鉴定,筛选出滑皮豆等6份抗性较强的种质资源.调查了这223份种质资源的茸毛性状,测定了部分抗感烟粉虱品种的籽粒蛋白质和脂肪含量.结果表明,大豆品种对烟粉虱的抗性与叶片的茸毛性状有密切关系,无茸毛型抗性最强,茸毛紧贴型次之,茸毛直立型较差,茸毛斜立型抗性最差.大豆受烟粉虱危害程度与籽粒蛋白质和脂肪含量有密切关系,蛋白质含量越高受害越严重,脂肪含量越高受害越轻.根据鉴定结果,本研究提出了单叶平均感染烟粉虱0头为免疫,0.1～3.0头为高抗,3.1～10.0头为中抗,10.1～20.0头为中感,20头以上为高感的抗性鉴定标准.     

三株球孢白僵菌侵染烟粉虱的比较生长动力学及其毒力

同一种虫生真菌的不同菌株对于特定昆虫宿主的毒力可存在显著差异,真菌在昆虫体内的生长能力不同可能是引起这种差异的原因之一。为了探讨真菌在宿主体内的生长动力学与其毒力的关系,本研究用生测法测定了3株球孢白僵菌（GZGY-1-3、SCWJ-2、WLMQ-20）在高剂量（1×108孢子/mL）和低剂量（1×106孢子/mL）下对烟粉虱4龄若虫的毒力,用实时荧光定量PCR技术对真菌在宿主体内的拷贝数进行了定量,用荧光显微方法观察了白僵菌侵染烟粉虱的过程。生物测定实验结果显示：不论在高剂量还是低剂量下,菌株GZGY-1-3杀死烟粉虱所需的时间最短（在高剂量和低剂量下LT50分别为2.29d和6.10d）,其次是菌株SCWJ-2（LT50分别为3.03d和7.38d）,菌株WLMQ-20所需时间最长（LT50分别为4.13d和9.39d）。对于同一菌株,其高剂量下的毒力显著高于低剂量下的毒力。实时荧光定量PCR实验显示,接触高剂量孢子后烟粉虱获得的孢子数远远高于接触低剂量时的孢子数。接种后,每一菌株和每一剂量下的真菌生长都表现出一个相似的模式。在接种24h后,真菌细胞数量显著下降,在接种后24–48h之间是一个简短的恢复阶段,接种48–72h后是真菌的细胞数略有净增长的稳定时期,在宿主死亡前后的阶段,真菌数量急剧增加,与接种后最初24h相比高了近1 000倍。然而,尽管它们的生长模式相似,但是却存在着量上的差异,由致病性强、剂量高的菌株侵染的昆虫体内的最终真菌菌体数高。荧光显微技术观察到的白僵菌对烟粉虱的侵染过程证实了定量PCR的结果。这些结果说明菌株间毒力的差异在一定程度上是由真菌生长动力学的量化差异所决定的。     

烟粉虱对拟除虫菊酯杀虫剂的抗性机理

通过增效剂生物测定、生化分析以及钠离子通道基因ⅡS4-6 cDNA片段的RT-PCR扩增,探讨了烟粉虱Bemisia tabaci（Gennadius）对拟除虫菊酯杀虫剂的抗性机理。结果表明：对于采自田间的6个烟粉虱抗性品系,磷酸三苯酯（TPP）和胡椒基丁醚（PBO）对氯氰菊酯、溴氰菊酯、氯氟氰菊酯和甲氰菊酯均有显著的增效作用,而DEM对4种拟除虫菊酯杀虫剂均无明显的增效作用。烟粉虱抗性品系的α-NA羧酸酯酶和β-NA羧酸酯酶活性分别是敏感品系的2.16～2.65倍和1.22～1.41倍,抗性品系的谷胱甘肽S转移酶活性与敏感品系没有差异,表明羧酸酯酶和多功能氧化酶在烟粉虱对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性中具有重要的作用,而谷胱甘肽S转移酶与抗性无关。通过RT-PCR克隆了6个烟粉虱田间抗性品系的钠离子通道结构域ⅡS4-6 cDNA片段的序列（420 bp）,发现与敏感品系相比,有2个位点发生突变,分别为L925I突变和I917V突变,L925I突变在所有6个烟粉虱田间抗性种群中均有发生,该位点突变已被证实与拟除虫菊酯类杀虫剂密切相关,表明神经不敏感性可能是烟粉虱对拟除虫菊酯产生抗性的另一个重要因子。     

烟粉虱对几种常见蔬菜寄主的取食选择性

在多种蔬菜寄主同时存在的情况下,烟粉虱对寄主的选择性和嗜好性排序为:黄瓜>节瓜,番茄,菜豆>芥蓝,茄子>甘蓝,苦瓜。     

淡色斧瓢虫对烟粉虱的捕食作用

研究了淡色斧瓢虫对烟粉虱的捕食作用.结果表明,淡色斧瓢虫对烟粉虱的功能反应呈Holling Ⅱ型.随着猎物龄期的增加,淡色斧瓢虫成虫的寻找效率(a)逐渐降低,处置时间(T_h)依次延长;随着淡色斧瓢虫幼虫龄期的增加,其对烟粉虱卵的寻找效率逐渐提高,处置时间依次缩短.淡色斧瓢虫成虫对烟粉虱卵的捕食效应随捕食者间干扰作用的增加而下降,捕食作用率(E)与淡色斧瓢虫数量（P）之间呈幂函数关系,即E=0.5205P^-0.6631.温度对淡色斧瓢虫的捕食效应影响显著,寻找效率和处置时间与温度间的函数关系为:a=- 0.0002T³+0.0166T²-0.3492T+3.2329,T_h=4×10^-7T³-3×10^-5T²+0.0006T-0.0009.     

烟粉虱抗药性的研究进展

烟粉虱是一种世界性的重要害虫,目前已对有机磷、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯等许多常规杀虫剂产生高水平抗性,在一些地区烟粉虱对昆虫生长调节剂和烟碱类杀虫剂的抗性也是十分普遍.文中综述了世界范围内烟粉虱的抗药性现状、抗药性机理、以及抗药性与生物型的关系,并介绍了美国和以色列较为成功的烟粉虱抗药性治理计划.     

江苏地区烟粉虱的越冬研究

通过室内模拟寒潮、越冬大棚内虫量观察,以及冬后田间调查,研究江苏地区烟粉虱的越冬状况。结果表明,在0℃以上的环境温度下,72 h内各虫态烟粉虱均不会造成急性致死,在-2℃的环境温度下,1 h内低龄若虫开始死亡,24 h后高龄若虫开始死亡,6 h后卵全部死亡。在-4℃的环境温度下,6 h后烟粉虱所有虫态均全部死亡。在单膜覆盖的大棚内,烟粉虱成虫在-2.5℃的寒潮下全部死亡,在双膜覆盖的大棚内,烟粉虱可以安全越冬。研究认为,在江苏地区,烟粉虱可以在日光温室或双膜覆盖的大棚内越冬,苏南部分地区可以在单膜覆盖的大棚内越冬。     

烟粉虱对寄主的选择行为

烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)成虫对寄主植物选择行为的实验结果表明,烟粉虱是通过植物广谱的绿色气体识别植物材料,并进一步受到绿色的诱导。通过烟粉虱在适宜与非适宜寄主植物上滞留时间的差异,可以看出烟粉虱是通过口针刺探的寄主评估过程逐渐实现寄主偏好性的,存在一个短的时滞。综合来看,烟粉虱的寄主选择是通过嗅觉、视觉和味觉共同参与的一个决策过程,以寄主植物的气味、颜色和质量为线索,逐步定位到适宜的寄主植物上,因此在寄主选择过程中存在很大的可塑性。     

淡色斧瓢虫(Axinoscymnus cardilobus)对烟粉虱(Bemisia tabaci)种群的控制作用

研究了大田笼罩条件下释放淡色斧瓢虫(Axinoscymnus cardilobus)对变叶木上烟粉虱种群的控制作用.每株释放1对淡色斧瓢虫对不同密度烟粉虱种群的控制效果差异显著.瓢虫和烟粉虱以1∶20比例释放对烟粉虱的防治效果较差,以1∶80比例释放对烟粉虱的防治效果不稳定、总体上看对烟粉虱的种群几乎没有控制效果;而以1∶40的比例释放的防治效果较好、较稳定,防效为35%～95%.释放不同数量的淡色斧瓢虫对同一密度烟粉虱种群的防治效果也差异显著.7周内在1∶40、3∶40、5∶40处理区,瓢虫对烟粉虱种群的防治效果分别为35%～95%、46%～90%和50%～98%.从经济学和生态学的角度综合考虑,瓢虫和烟粉虱以3∶40比例释放比较适宜.     

云南Q型烟粉虱种群的鉴定

利用mtDNACOⅠ基因片段作标记,对采自云南昆明一品红上的烟粉虱Bemisiatabaci(Gennadius)种群生物型进行了鉴定。结果表明,该种群COⅠ基因片段(501bp)与摩洛哥Q型、西班牙Q型烟粉虱的相应碱基序列具有极高的同源性,与2种Q型烟粉虱的COⅠ基因仅分别相差3个和4个碱基,同源性分别达到994%和992%。序列分析表明我国云南昆明一品红上存在Q生物型烟粉虱     

烟粉虱田间种群的抗药性

采用成虫浸叶生测法分别测定了福建省福州、漳州、龙岩、三明、南平、宁德等地烟粉虱田间种群对13种杀虫剂的抗性.结果表明,福建省6个烟粉虱田间种群对氯氟氰菊酯、甲氰菊酯、氯氰菊酯、溴氰菊酯、乙酰甲胺磷、毒死蜱产生了高水平抗性,抗性倍数分别达838.38～2460.52、244.64～834.29、116.02～266.35、81.75～124.18、425.18～875.56和54.53～78.43倍,对乐果产生了中等水平抗性,抗性倍数达14.16～17.66倍,对敌敌畏产生了中等偏低水平的抗性,抗性倍数达6.23～11.25倍,对灭多威的抗性水平较低,抗性倍数仅为4.07～5.66倍.漳州种群已对烟碱类杀虫剂产生了中等水平抗性,对吡虫啉、啶虫脒和噻虫嗪的抗性倍数分别达23.08、10.32和24.60倍,而其它地区烟粉虱种群对吡虫啉、啶虫脒和噻虫嗪的抗性水平较低,甚至不明显,抗性倍数分别仅为1.31～3.28、1.82～7.23和1.39～5.45倍.福建省各地区烟粉虱种群对阿维菌素尚未产生明显的抗药性.