含硒银杏叶清除羟基自由基的ESR研究

利用电子自旋共振技术(ESR)研究了含硒银杏叶提取物对H_2O_2-Fe~(2 )体系产生的羟基自由基的清除作用.与SOD、茶多酚相比,含硒银杏叶提取物对羟基自基也有很强的清除效果.增添了有实用价值的天然、无公害的清除羟基自由基的新资源.     

用ESR技术研究含硒蛋白抗羟基自由基作用的活性

用ＥＳＲ技术研究含硒蛋白抗羟基自由基作用的活性。与ＳＯＤ、茶多酚相比较,含硒蛋白对羟基自由基的清除也有显著作用。找到了一种有实用价值,天然无毒,抗羟基自由基的新资源。     

16种伞形科药用植物对超氧自由基的清除作用

采用Ｎａ２Ｓ２Ｏ４ＮａＯＨＬｕｍｉｎｏｌ发光体系,应用智能化学发光法对１６种伞形科药用植物提取物的自由基清除能力和对酪氨酸酶的抑制能力进行筛选。实验结果表明这些伞形科药用植物大都具有清除自由基的作用,其中羌活（ＮｏｔｏｐｔｅｒｙｇｉｕｍｆｏｒｂｅｓｉｄｅＢｏｉｓ．）的“ＳＯＤ样作用”达到２９６７Ｕ／ｍｇ（原生药量）,提示这些植物具有稳定的非酶类清除自由基物质,并且“ＳＯＤ样作用”强弱与其对酪氨酸酶的抑制能力呈明显正相关。     

灰树花提取物清除氧自由基的研究

采用化学发光法比较了灰树花各提取物对超氧阴离子自由基、羟基自由基的清除效果。研究结果表明,灰树花子实体和菌丝体的提取物对羟基自由基均有很好的清除作用,灰树花菌丝体水提物(GFME)、灰树花子实体水提物(GFE)、灰树花子实体水提多糖(GFP)、灰树花子实体碱提多糖(GFAP)清除羟基自由基的IC50均小于1.0 mg/mL,其他提取物清除羟基自由基的IC50也均小于3.0 mg/mL。而对超氧阴离子自由基仅GFME、GFMP、GFE有清除作用,其他的提取物清除作用很弱。     

九种药用植物花黄酮类物质提取及对羟自由基清除能力的研究

微波辅助法提取九种药用植物花中黄酮类化合物,研究其提取物清除羟基自由基(·OH)的能力.九种药用植物花提取物对羟基自由基有不同程度的清除作用,且生态环境对该作用有较大影响,其中旋覆花中总黄酮含量最高,夏至草花总黄酮含量最低;荷兰菊、旋覆花、玫瑰花清除羟基自由基能力较强,清除率在一定浓度范围内与提取物浓度呈正相关.     

羟自由基对心肌线粒体膜的影响及硒的效应

由Ｈ２Ｏ２和ＦｅＳＯ４体系产生的羟自由基（ＯＨ·）作用于大鼠心肌线粒体后,其膜脂双层内产生了脂类自由基。在观测时间内,其脂类自由基与自旋捕捉剂形成的自旋加合物的电子自旋共振（ＥＳＲ）信号强度随着孵育时间的延长而加强。一定浓度的硒代蛋氨酸（Ｓｅ—Ｍｅｔ）或Ｎａ２ＳｅＯ３可明显清除ＯＨ·并抑制脂类自由基的产生。在ＯＨ·的影响下,荧光探针ＤＰＨ在心肌线体膜脂中的荧光寿命和膜脂流动性的测试结果发生了明显变化。与此同时,心肌线粒体膜的能量转换过程（氧化磷酸化效率和呼吸控制率）也发生了显著的改变。１．０μｍｏｌ／Ｌ的Ｓｅ—Ｍｅｔ或２．３μｍｏｌ／Ｌ的Ｎａ２ＳｅＯ３可明显拮抗ＯＨ·的上述影响。前者的作用更为显著。     

金属硫蛋白清除自由基及其对自由基引起的核酸损伤保护作用的研究

通过化学反应体系产生ＯＨ＾－和Ｏ＾－２自由基,采用荧光和化学发光检测体系,比较研究了不同亚型及不同结合金属的金属硫蛋白（ＭＴ）清除自由基能力的大小。结果表明,对于同一亚型,Ｚｎ结合ＭＴ清除自由基的能力大于Ｃｄ结合ＭＴ;同一结合金属的ＭＴ,ＭＴ１清除自由基的能力大于ＭＴ２。通过比较ＺｎＭＴ１与谷胱甘肽（ＧＳＨ）及超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）清除自由基的能力大小发现,ＺｎＭＴ１清除ＯＨ的能力是ＧＳＨ的１０     

金属硫蛋白清除自由基及其对自由基引起的核酸损伤保护作用的研究

通过化学反应体系产生ＯＨ－和Ｏ自由基,采用荧光和化学发光检测体系,比较研究了不同亚型及不同结合金属的金属硫蛋白（ＭＴ）清除自由基能力的大小。结果表明,对于同一亚型,Ｚｎ结合ＭＴ清除自由基的能力大于Ｃｄ结合ＭＴ同一结合金属的ＭＴ,ＭＴ１清除自由基的能力大于ＭＴ２。通过比较ＺｎＭＴ１与谷胱甘肽（ＧＳＨ）及超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）清除自由基的能力大小发现,ＺｎＭＴ１清除ＯＨ的能力是ＧＳＨ的１００倍,清除Ｏ自由基的能力分别是ＧＳＨ和ＳＯＤ的２５和０．０１倍。即ＭＴ是一种很好的ＯＨ自由基清除剂。以ＯＨ对核酸（ＤＮＡ）的损伤为例,研究了ＭＴ对核酸损伤的保护作用,其变化规律与上述结果相一致。     

羟墓自由基引起神经细胞［Ca~（2＋）］i增高的机制和Ebselen的抑制作用

用Ｆｕｒａ－２显微荧光测量技术研究了羟基自由基对单个皮层神经细胞内游离钙离子浓度［Ｃａ２＋］ｉ影响和硒化合物Ｅｂｅｌｅｎ对［Ｃａ２＋］ｉ的抑制作用。结果表明羟基自由基的作用首先引起胞内［Ｃａ２＋］ｉ以时间常数τ＝３８９５．４±５０７．２Ｓ速度缓慢增加,然后加入了以τ＝４２０．６±１２２．０Ｓ的外钙大量涌入。钙通道阻断剂、疏基还原剂、疏基还原制和自由基清除剂对羟基自由基损伤作用的影响提示外钙的大量涌入部分与通道的开放有关,疏基损伤在羟基自由基引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高中起着重要的作用。具有类谷胱甘肽过氧化酶活性的小分子硒化合物Ｅｂｓｅｌｅｎ（１０－５ｍｏｌ／Ｌ和１０－６ｍｏｌ／Ｌ）抑制羟基自由基引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高,推测它可以抑制钙库的释放或促进内钙的外排以及抑制外钙的流入。     

硒拮抗超氧阴离子导致的心肌线粒体膜损伤

由黄嘌呤和黄嘌呤氧化酶体系产生的超氧阴离子作用于心肌线粒体后,其膜脂双层内产生了脂类自由基。在一定时间内,脂类自由基与自旋捕捉剂形成的加合物的ＥＳＲ信号强度随着孵育时间的增加而加强。１．０μｍｏｌ／Ｌ硒代蛋氨酸（Ｓｅ－Ｍｅｔ）或２．３μｍｏｌ／ＬｍＮａ２ＳｅＯ３可显著清除并抑制脂类自由基的产生。在的影响下,荧光探针ＤＰＨ在膜脂双层中的荧光寿合和膜脂流动性发生了明显改变。一定浓度的Ｓｅ－Ｍｅｔ或Ｎａ２ＳｅＯ３可明显拮抗的上述影响,前者的作用更为显著。     

羟墓自由基引起神经细胞［Ca~（2＋）］i增高的机制和Ebselen的抑制作用

用Ｆｕｒａ－２显微荧光测量技术研究了羟基自由基对单个皮层神经细胞内游离钙离子浓度（Ｃａ＾２＋）ｉ影响和硒化合物Ｅｂｅｌｅｎ对（Ｃａ＾２＋）ｉ的抑制作用,结果表明羟基自由基的作用首先引起胞内（Ｃａ＾２＋）ｉ以时间常数τ＝３８９５．４±５０７．２Ｓ速度缓慢增加,然后加入了以τ＝４２０．６＋１２２．０Ｓ的外钙大量涌入,钙通道阻断剂,疏基还原剂,疏基还原剂和自由基清除剂对羟基自由基损伤作用的影响提示外钙的     

超氧阴离子对心肌细胞Ca^2＋平衡的影响及硒的保护作用

在超氧阴离子（Ｏ２＾－）作用下,心肌细胞内游离钙深度（［Ｃａ＾２＋］ｉ）显著升高;心肌细胞膜通透性明显增强;膜脂流动性下降。一定深度的硒代蛋氨酸（Ｓｅ－Ｍｅｔ）亚硒酸钠（ＮａＳｅＯ３）可不同程度地拮Ｏ２＾－的影响。前者作用更为显著。这两种硒化合物也能提高谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）的活性。综上所述,硒缺乏,高自由基及心肌细胞Ｃａ＾２＋平衡失调三者之间存在着相关性。在Ｏ２＾－作用下,心肌细胞内     

用自旋捕集技术研究硒化合物对活性氧自由基的清除作用

亚硒酸钠,硒代甲硫氨酸和硒代硫酸软骨素对黄嘌呤氧化酶体系和人多形核白细胞（ＰＭＮ）呼吸暴发时产生的超氧阴离子（Ｏ）自由基;和Ｆｅｎｔｏｎ反应生成的羟自由基（·ＯＨ）有明显的清除作用,并抑制ＰＭＮ呼吸暴发时对氧的消耗。实验结果说明不同硒化合物不仅能够清除细胞体系产生的活性氧自由基,而且对化学反应生成的活性氧自由基也有清除作用。     

植物中的多酚物质对超氧物自由基的清除作用

芒果、番石榴、松、龙眼等叶片和绿茶中含有Ｏ２（超氧物自由基）的非酶促清除剂,仅０．５—１ｍｇ鲜重或０．２９ｍｇ茶叶就相当一个ＳＯＤ酶单位作用,热处理不能降低清除Ｏ２的能力．用显示酚类物质的喷洒剂（ＡｇＮＯ３－ＮＨ４ＯＨ）和显示ＳＯＤ同工酶带的ＮＢＴ法对电泳后的凝胶分别染色处理,对比显示结果,表明酚类物质与ＳＯＤ活性物质有相似的电泳行为,叶片中的酚类物质可能为非酶促清除Ｏ２的组份．人工合成的酚类化合物（对硝基酚、间苯二酚、愈创木酚）和从植物中分离的鞣酸等,在体外均能有效地清除Ｏ２．     

印度块菌提取物抗氧化活性的研究

对印度块菌Tuber indicum子实体的提取物,包括55%乙醇粗提物(ECE)、石油醚提取物(PEF)和乙酸乙酯提取物(EAF)的清除DPPH自由基和羟基自由基能力、铁离子鳌合能力以及各提取物的总酚含量等进行了研究和测定,结果显示,3种提取物的清除自由基能力和铁离子鳌合能力具有显著差异(P0.05);ECE对DPPH自由基的清除活性最高,其EC50值为1.61g/L;EAF对羟基自由基及铁离子表现出较强的清除或螯合的能力,其EC50值分别为3.31g/L和0.70g/L;EAF的总酚含量(2.964mg GAE/g提取物)最高,其次是ECE,总酚含量为(2.618mg GAE/g提取物);PEF的清除自由基和铁离子鳌合能力较差,其总酚含量也最低(1.124mg GAE/g提取物);总酚含量与印度块菌提取物清除自由基以及鳌合铁离子的能力密切相关。     

超氧阴离子对心肌细胞Ca~（2＋）平衡的影响及硒的保护作用

在超氧阴离子（Ｏ~－_２）作用下,心肌细胞内游离钙浓度（［Ｃａ~（２＋）］_ｉ）显著升高;心肌细胞膜通透性明显增强;膜脂流动性下降。一定浓度的硒代蛋氨酸（Ｓｅ－Ｍｅｔ）或亚硒酸钠（Ｎａ_２ＳｅＯ_３）可不同程度地拮抗Ｏ~－_２的影响。前者作用更为显著。这两种硒化合物也能提高谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）的活性。综上所述,硒缺乏,高自由基及心肌细胞Ｃａ~（２＋）平衡失调三者之间存在着相关性。在Ｏ~－_２作用下,心肌细胞内Ｃａ~（２＋）平衡失调比膜通透性的改变更为敏感。     

红果参提取物的抗氧化活性研究

超声辅助提取红果参中的抗氧化活性物质并用D-101大孔树脂纯化,以原花青素为指标测定抗氧化活性物质含量,研究了提取物对羟基自由基、超氧阴离子自由基和亚硝酸盐体系的清除作用以及对油脂氧化体系的抑制作用。结果表明:红果参果实提取物表现出了对羟自由基、超氧阴离子自由基及亚硝酸盐的优异的清除能力,对油脂氧化有极好的抑制作用,对自由基的清除率及抗油脂氧化能力与提取物中原花青素质量浓度均呈剂量正相关效应。     

小鼠不同负荷游泳后LPO和SOD动态变化研究

本文研究小鼠游泳９０分钟后不同时间ＬＰＯ和ＳＯＤ动态变化及小鼠游泳后２ｈｒ、３ｈｒ、４ｈｒ后对ＬＰＯ和ＳＯＤ水平的影响。结果表明小鼠游泳９０今后ＳＯＤ酶活性高于游泳前，而ＬＰＯ水平在游泳后４ｈｒ内持续低于游泳前。证明游泳１．５ｈｒ使自由基损伤减少（ＣＰ＜０．０５）。小鼠游泳２ｈｒ、３ｈｒ、４ｈｒ后ＳＯＤ酶活性随游泳时间延长而降低，ＬＰＯ则持续增高，表明超负荷运动，机体不能清除自由基，不利于健康。     

李氏块菌提取物抗氧化活性的研究

对李氏块菌Tuber liyuanum子实体的不同提取物,包括甲醇提取物(ME)、乙醇提取物(EE)、丙酮提取物(AE)、正丁醇提取物(BAE)和乙酸乙酯提取物(EAE),进行清除DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基、铁离子螯合能力、还原力以及总酚含量的测定和研究,发现ME对DPPH自由基、超氧阴离子自由基清除及还原力活性最高,EC50值分别为23.37mg/m L、11.65mg/m L和24.47mg/m L;EE对羟基自由基清除和铁离子螯合能力活性最高,EC50值分别为7.24mg/m L和小于0.5mg/m L;ME的总酚含量最高(3.08mg GAE/g提取物),其次是EE(1.34mg GAE/g提取物),提取物总酚含量与抗氧化活性呈现出一定的正相关性。     

樟芝发酵液和菌丝体提取物抗氧化性能研究

采用甲醇、乙醇、异丙醇对樟芝发酵液和菌丝体进行提取,对其不同提取物进行还原力,DPPH、羟基自由基、超氧自由基、过氧化氢清除能力,亚铁离子螯合能力等抗氧化能力的测定。比较发酵液提取物和菌丝体提取物的抗氧化效果,比较不同提取剂提取物的抗氧化效果。结果显示:(1)发酵液提取物还原力最高的为异丙醇提取物,亚铁离子螯合能力最强的为乙醇提取物;DPPH清除能力乙醇和异丙醇提取物最高都达到97.88%;羟基自由基清除能力最高的为乙醇提取物,达到84.22%;3种提取物的超氧自由基清除能力都较高,具有最高清除率的异丙醇提取物达到94.89%;过氧化氢清除能力最高的为乙醇提取物的97.53%。(2)菌丝体提取物还原力最高和亚铁离子螯合能力最强的均为乙醇提取物;DPPH清除能力最高的为乙醇提取物的89.95%;3种提取物的羟基自由基清除能力普遍偏低,最高的仅为异丙醇提取物的37.28%;超氧自由基清除能力则普遍较高,最高为甲醇提取物的90.05%;过氧化氢清除能力最高的为乙醇和异丙醇提取物,最高清除率均为95.06%。抗氧化性能的研究比较,为进一步开发利用樟芝提供了依据。