环磷酸腺苷促进泰和乌骨鸡皮肤黑色素细胞黑色素合成

该实验旨在研究环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,c AMP)作为α-黑色素细胞刺激素(α-melanocyte stimulating hormone,α-MSH)-黑素皮质素受体1(melanocortin 1 receptor,MC1R)通路的下游信号分子对泰和乌骨鸡皮肤黑色素细胞黑色素合成的影响。利用体外培养的泰和乌骨鸡皮肤黑色素细胞,观察不同浓度c AMP(0、1×10–5、1×10–4、1×10–3 mol/L)及其抑制剂、腺苷酸环化酶(adenylate cyclase,AC)抑制剂对乌骨鸡皮肤黑色素细胞酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)活性和黑色素含量的影响。结果表明,与不添加c AMP的对照组相比,不同浓度的c AMP均极显著提高泰和乌骨鸡皮肤黑色素细胞TYR活性(P0.01),10–4 mol/L组提高的幅度最大。不同浓度的c AMP可不同程度地促进黑色素细胞黑色素的合成,1×10–5 mol/L和1×10–4 mol/L组黑色素含量分别显著(P0.05)和极显著(P0.01)高于不添加c AMP的对照组。c AMP抑制剂Rp-c AMPS预处理黑色素细胞显著抑制c AMP(1×10–4 mol/L)作用下酪氨酸酶活性(P0.01)和黑色素含量的升高(P0.05)。Rpc AMPS和AC抑制剂NKY80预处理黑色素细胞均显著抑制α-MSH(2.5μg/m L)引起的TYR活性、c AMP含量和黑色素含量的升高(P0.01或P0.05)。c AMP作为α-MSH-MC1R信号通路中的第二信使或下游信号分子在泰和乌骨鸡皮肤黑色素细胞黑色素的合成中发挥重要作用,其浓度的升高可提高泰和乌骨鸡皮肤黑色素细胞酪氨酸酶活性以及黑色素的合成。     

酪氨酸酶的应用研究进展

酪氨酸酶具有重要的生理生化特性,在医药、环境、食品、精细化工等领域具有广泛的用 途。酪氨酸酶可以氧化L-酪氨酸合成L-多巴和黑色素,L-多巴用于帕金森症的治疗,黑色素能够 杀死HIV病毒。酪氨酸酶可用于环境工程领域处理含苯酚及胺类废水,用于精细化工领域催化 有机合成反应。综述了酪氨酸酶在各个领域的应用概况,阐明了其在工业生产领域的应用前景。     

一步法纯化乌骨鸡皮肤酪氨酸酶

酪氨酸酶(EC.1.14.18.1)是黑素细胞内形成黑色素一个关键的酶。它做为一个含铜酶广泛地存在于自然界中。酪氨酸酶既能催化L-酪氨酸的羟化形成L-多巴(羟化酶的活性)又能催化L-多巴的氧化形成多巴醌(氧化酶的活性)。多巴醌进一步自动氧化形成黑色素。     

酪氨酸酶的研究进展

酪氨酸酶(EC 1.14.18.1,tyrosinase)是一种含铜需氧酶,广泛存在于微生物、动植物及人体中,具有多种特征性催化活性和生理功能,受到国内外诸多学者的广泛关注。结合近年来国内外的研究成果,对酪氨酸酶的机制、制备、应用等研究现状进行了综述与展望。     

酪氨酸酶高产菌株的快速、简便筛选方法

报道了用含酪氨基酸的平板和培养液筛选高产酪氨酸酶菌株的方法。     

软体动物和甲壳动物酚氧化酶的研究进展

软体动物和甲壳动物的很多品种都是重要的经济养殖品种.随着养殖业集约化程度的提高,各种病害频繁发生,造成了巨大的经济损失.于是越来越多的人开始关注软体动物和甲壳动物的免疫防御系统,并对其进行研究.酚氧化酶(phenoloxidase,PO)是一种含铜的氧化酶,广泛存在于微生物、动物和植物体内.作为酚氧化酶原激活系统的重要一员,PO在无脊椎动物的先天免疫机制中起着重要的作用,有关其生物化学、免疫学和分子生物学特性的研究一直以来受到广泛关注,尤其在节肢动物中进展很快.作者对酚氧化酶在软体和甲壳动物中的功能、组织定位及表达、基因克隆和序列分析及其系统演化等几个方面的研究进展进行了综述.基因序列分析和系统进化树证据均表明,催化功能相同的软体动物酪氨酸酶与节肢动物PO的基因有较大差异.该结果对目前被广泛接受并使用的酪氨酸酶专门用于哺乳类,酚氧化酶专门用于无脊椎动物的分类法提出了挑战.因此作者建议,将酚氧化酶专门用于节肢动物,酪氨酸酶用于软体动物等非节肢动物和脊椎动物.     

葛根有效成分抑制酪氨酸酶活性的研究

为了探讨葛根对酪氨酸酶的抑制作用,将葛根用75%(v/v)的乙醇水溶液回流提取,用不同极性的溶剂萃取,经硅胶柱层析和重结晶后,分别检测对酪氨酸酶的抑制率.结果表明,在萃取物中,葛根的乙酸乙酯萃取物对酪氨酸酶的抑制率最高,为61.2%;硅胶柱层析分离得到的一部分层析物对酪氨酸酶的抑制率为89.2%,它对酪氨酸酶的抑制作用明显强于其它柱层析组分,该层析物纯化后得到的葛根素对酪氨酸酶的抑制率与浓度呈非线性变化,以熊果苷为阳性对照物.上述研究为进一步开发葛根中的美白成分提供了依据.     

太平洋牡蛎酪氨酸酶基因家族的系统发生分析

文章利用生物信息学方法对太平洋牡蛎(Crassostrea gigas Thunberg)酪氨酸酶基因家族的氨基酸序列特征、分类及系统发生进行了分析。结果表明, 太平洋牡蛎酪氨酸酶基因家族在进化过程中存在基因扩张现象, 其主要方式是基因重复。太平洋牡蛎酪氨酸酶可分为3种类型：分泌型 (Type A), 胞内型 (Type B)和具跨膜结构域型 (Type C)。根据太平洋牡蛎酪氨酸酶进化树分析, 发现Type A酪氨酸酶中, tyr18与其他Type A酪氨酸酶分化较大, 可能是较早分化出来的酪氨酸酶; Type B酪氨酸中的tyr2和tyr9以及Type C中的tyr8为较早分化出的酪氨酸酶。系统发生树分析发现太平洋牡蛎酪氨酸酶的聚类受酪氨酸酶类型以及基因位置的影响, 其分泌型酪氨酸酶首先与头足类分泌型酪氨酸酶聚在一起, 然后与线形动物门分泌型酪氨酸酶聚在一起, 与腔肠动物门分泌型酪氨酸酶分化明显。太平洋牡蛎胞内型酪氨酸酶自身分化较大, 总体上与线性动物门、其他软体动物胞内型酪氨酸酶聚为一支, 与扁形动物门、脊索动物门、腔肠动物门胞内型酪氨酸酶分化较大。太平洋牡蛎具跨膜结构域型酪氨酸酶与扁形动物门、环形动物门以及脊索动物门具跨膜结构域型酪氨酸酶分化明显, 与合浦珠母贝具跨膜结构域型酪氨酸酶聚为一支。这表明双壳类的Type C型酪氨酸酶与其他物种的同源酶的进化差异较大。文章首次探讨了太平洋牡蛎酪氨酸酶家族分类、分化及系统发生, 以期对太平洋牡蛎酪氨酸酶基因家族的理论研究和实际应用提供依据。     

酪氨酸酶活性的微量分析

本文介绍了两种灵敏、精确和较简便的酪氨酸酶活性的微量分析技术。其中之一是[³H]-酪氨酸分析,直接测羟基化的酪氨酸量。根据测得的“总dpm”、“酶样品dpm”和“空白dpm”计算出微量样品中酪氨酸酶的活性。另一种方法是将各个含酶样品通过SDS-PAGE分离和适当处理,放入含多巴的磷酸缓冲液中染色,待深棕色的酶带完全显现后,再经过固定等,直接将凝胶进行光密度扫描,根据各酶带吸收峰的高度即可测出酶活性的相对变化。     

雪峰乌骨鸡自然群体遗传多样性的微卫星分析

雪峰乌骨鸡是具有独特遗传特性的优质肉药兼用地方家禽品种.为了评价雪峰乌骨鸡现有品种资源的遗传背景、群体遗传结构等,提出合理的保种方法和措施,本研究筛选了家鸡基因组23条染色体上的23个微卫星标记,对采自湖南怀化的50只纯种乌骨鸡个体进行了多态性检测.结果表明:23个微卫星座位共检测到79个等位基因,所有座位都呈现出多态性,每个座位的等位基因数在2-6个之间,平均为3.435个.群体表现出较高的平均杂合度和平均多态信息含量,分别为0.6285和0.5496,说明雪峰乌骨鸡自然群体具有较丰富的遗传多样性.研究结果将为雪峰乌骨鸡种的保护和利用提供重要的理论依据.     

酚氧化酶及其酶原的生化特性与分子生物学研究进展

酚氧化酶(简称PO),又称为酪氨酸酶(tyrosinase,EC1.14.18.1),是一种含铜的酶.它能够分别催化单酚羟基和二羟基酚氧化成二酚(如多巴)和醌,醌在非酶促条件下形成最终的反应产物黑色素.PO在脊椎动物和无脊椎动物中都广泛存在,被认为是一种参与免疫的重要因子.本文就酚氧化酶及其酶原的生化特性和分子生物学特性研究的进展情况予以综述.     

16种长白山野生植物提取物对酪氨酸酶抑制作用

测定16种长白山野生植物对酪氨酸酶活性的影响.选用16种长白山野生植物为材料,以L-酪氨酸为底物,加入植物乙醇提取物和蘑菇酪氨酸酶,测定吸光度值,计算酪氨酸酶的抑制百分率.结果表明:葛根的抑制百分率最高为61.461%,藜芦、独活、东北延胡索等也有抑制作用.     

添加黄芩对灵芝发酵液中酪氨酸酶抑制剂活性的影响

本文以酪氨酸酶抑制率为指标,对添加黄芩的灵芝液体发酵培养基进行优化并考察其发酵过程.结合正交实验和响应面分析,优化的培养基组成为(g/L):黄芩 6.3,麸皮12.0,蛋白胨6.0,玉米粉 15.6,葡萄糖 6.86,豆饼粉11.3.在此条件下,发酵产物的酪氨酸酶抑制率理论最大值为52.87%.磷酸二氢钾的最适添加浓度为1.5 g/L,而硫酸镁添加后,酪氨酸酶抑制率持续降低,呈现出负效应.添加黄芩的灵芝发酵过程中pH变化较未添加黄芩时缓和;灵芝发酵液的酪氨酸酶抑制活性显著提高,酪氨酸酶抑制剂的产生与细胞的生长呈现部分偶联型.     

黑线仓鼠及其白化突变系酪氨酸酶基因的克隆与序列分析

目的 对黑线仓鼠及其白化突变系酪氨酸酶基因进行比较研究,揭示黑线仓鼠白化突变系白化性状产生的分子机理.方法 根据小鼠与大鼠的酪氨酸酶基因保守区设计3对引物,利用RT-PCR方法,从黑线仓鼠及其白化系皮肤总RNA中扩增得到酪氨酸酶的cDNA基因,并对其二者进行克隆测序.结果 成功获得了黑线仓鼠及其白化突变系的酪氨酸酶基因,对二者的序列比较分析结果表明,二者的编码区没有差异.结论 黑线仓鼠白化突变系白化性状产生的原因与已知小鼠的白化性状产生原因不同,并不是由酪氨酸酶基因编码区突变造成的,其白化性状产生的机理有待进一步的研究.     

葛根提取物对酪氨酸酶活性的影响

研究了葛根不同提取物对酪氨酸酶活性的影响,结果表明:葛根水提物及乙醇提取物在60 mg/mL时对酪氨酸酶的激活作用最强,激活率分别为101.4%和137.7%.两者对酪氨酸酶的激活作用与其葛根素含量无明显相关性.葛根水提物及醇提物能使酪氨酸酶对底物结合的亲和力明显增强(Km/Km′=5.89,Km/Km″=6.43),同时使最大酶促反应速度有了明显提高(Vm′/Vm=2.088,Vm″/Vm=2.354),两者的激活作用都表现为混合型.     

香水莲花提取物抑制酪氨酸酶活性的研究

本实验以L-酪氨酸为底物,从马铃薯中提取酪氨酸酶,以熊果苷为阳性对照,采用比色法测定了香水莲花醇提物、水提物及总黄酮提取物对酪氨酸酶的抑制率,以探讨香水莲花醇提物、水提物及总黄酮提取物对酪氨酸酶的活性的抑制作用。结果表明,三种提取物对酪氨酸酶活性的抑制效果从高到低依次为总黄酮提取物、醇提物、水提物,说明其有效成分为醇溶性物质;总黄酮提取物对酪氨酸酶活性的抑制效果明显高于醇提物和水提物对酪氨酸酶活性的抑制效果,可以考虑将其作为一种新型的植物源美白剂,应用于化妆品行业。     

不同念珠藻的提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用

研究了Nostoc sp.FACHB87、 Nostoc paludosum FACHB89等10株念珠藻的甲醇提取物对酪氨酸酶的抑制作用.结果表明,随着提取物浓度的升高,对酪氨酸酶的抑制作用也增强.其中Nostoc sp.FACHB892的甲醇提取物对酪氨酸酶抑制作用最强,在33.3 μg/mL的最高测试浓度下,抑制率可达到60.54%;Nostoc sp.FACHB95、 Nostoc sp.FACHB106、 N.punctiforme FACHB252、N.calcicola FACHB389和N.parmiloides FACHB392的甲醇提取物,在33.3 μg/mL的最高测试浓度下, 抑制率分别为41.55%、 37.58%、46.94%、52.12%和47.95%.Nostoc sp.FACHB892的甲醇提取物对酪氨酸酶的抑制作用表现为可逆抑制,抑制类型为非竞争型抑制.     

三叶木通(Akebia trifoliata)果实乙醇提取物对酪氨酸酶体外活性的影响

以人工栽培条件下三叶木通(Akebia trifoliata)果实为试材,用80%乙醇分别提取果皮、果肉、种子中的有效成分,经离心过滤后,于旋转蒸发仪上减压蒸馏浓缩,再经真空干燥处理得到三叶木通乙醇提取物.以L-DOPA为底物,熊果苷作阳性对照,分析测定了该提取物对酪氨酸酶活性的抑制百分率.结果表明:不同部位的三叶木通果实乙醇提取物对酪氨酸酶活性均有一定的抑制作用,其中果肉对酪氨酸酶活性的抑制作用最佳,中等浓度的果肉乙醇提取物(200 μg/mL)与270 μg/mL的熊果苷对酪氨酸酶活性的抑制率相当.     

中国地方品种鸡白细胞介素2基因的克隆及遗传进化分析(英)

鸡白细胞介素 2 (chIL 2 )是近年来新发现的一类细胞因子 .根据Sundick等发表的鸡IL 2基因序列设计一对特异性引物 ,从ConA体外激活的脾淋巴细胞中提取mRNA ,通过RT PCR方法分别扩增和克隆了我国仙居鸡、丝羽乌骨鸡两个地方品种和艾维茵商品肉鸡IL 2cDNA .仙居鸡、丝羽乌骨鸡和艾维茵商品肉鸡IL 2基因的编码区均由 42 9nt组成 ,编码一个由 143个氨基酸组成的前体蛋白 .基因 5′端含有 17个核苷酸 ,3′端含有 2 85个核苷酸组成的非编码区 ,3′ UTR中含有 5个重复的“ATTTA”序列 .编码蛋白氨基酸与来自GenBank的Kestrel、Obese和SC品系的来杭鸡比较 ,氨基酸的突变主要发生在 2 8～ 3 2位 .而这一区域仙居鸡和丝羽乌骨鸡的编码氨基酸序列与Kestrel来杭鸡相同 ,艾维茵商品肉鸡与Obese和SC来杭鸡相同 .基因系统进化树分析表明 ,仙居鸡、丝羽乌骨鸡和Kestrel来杭鸡具有很近的亲缘关系 ,艾维茵商品肉鸡与Obese和SC来杭鸡具有很近的亲缘关系 .中国的药用鸡品种———丝羽乌骨鸡在非常保守的 13 3位发生了氨基酸突变     

绞股蓝皂苷-硒配合物对酪氨酸酶的活性影响及动力学分析

为考察绞股蓝皂苷及其硒配合物对酪氨酸酶的动力学参数和作用机理。本研究采用体外酶促反应,以L-酪氨酸和L-DOPA为底物,模拟了酪氨酸酶单酚和二酚酶的体外催化氧化过程。绞股蓝总皂苷在50%、70%乙醇洗脱段和50%、70%乙醇洗脱绞股蓝皂苷-硒配合物在酪氨酸酶上的Ki值分别为1. 533、1. 767、1. 312和1. 210 mmol/L。Ki值越低,对酪氨酸酶的抑制作用越强,单酚酶的氧化阶段越快,表明硒元素显著提高了绞股蓝皂苷对酪氨酸酶的抑制作用。酶反应动力学分析表明,四种绞股蓝皂苷及其硒配合物对酪氨酸的抑制作用均为混合竞争抑制。其独特的药理化学特性为绞股蓝及硒系美白化妆品的进一步研究开发提供了理论依据和参考。