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噬菌体抗体是继多克隆抗体、单克隆抗体之后兴起的第3代基因工程抗体.噬菌体抗体库技术是抗体基因文库技术和噬菌体表面展示技术相结合形成的一项新技术与方法,在生物科学领域极具潜力.现主要就近年来该技术在抗体基因扩增、抗体库的构建、筛选方法等方面的进展进行综述. 相似文献
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噬菌体抗体库技术研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
抗体研究可分多克隆抗体、单克隆抗体和基因工程抗体三个阶段。特别是噬菌体抗体库 (phageantibodylibrary)技术[1 ]可达到不经免疫制备人源性小型化基因工程抗体。这一技术将抗体基因的克隆与表达融为一体 ,是一种新的基因操作技术 ;同时将识别抗原与再扩增能力结合在一起 ,是一种高效的表达和筛选抗体的新一代技术。1 噬菌体抗体库技术的基本原理[2 ,3 ]噬菌体抗体库技术是将抗体VH和VL基因与噬菌体的外壳蛋白Ⅲ (cpⅢ )或Ⅷ (cpⅧ )基因随机重组 ,继而感染大肠杆菌 ,经增殖并在噬菌体表面以抗体片段Fab… 相似文献
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噬菌体抗体库筛选技术 总被引:8,自引:0,他引:8
噬菌体展示技术(Phage Display Technology)为制备高亲和性抗体提供了有力的工具。噬菌体抗体库的筛选是其中关键的环节,为了提高筛选效率,用包被在固体表面的抗原进行筛选的传统方法不断地被改进,如宿主菌直接洗脱和双层膜筛选系统和抗抗体替代抗原筛选系统。将噬菌体感染宿主菌的过程与筛选过程相关联,产生了选择性感染筛选系统。 相似文献
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噬菌体抗体库技术是获得治疗性抗体的一条重要途径。以20份健康人外周血为样本,通过提取淋巴细胞、逆转录-PCR(RT PCR)、抗体可变区基因的扩增、重叠PCR获得单链抗体(ScFv)基因,将ScFv克隆入噬粒载体,通过近300次的电转化获得了库容量为1.3×109的全人源天然ScFv噬菌体抗体库。通过随机挑克隆测序和用5种不同抗原筛选对抗体库进行了初步验证。随机测序表明抗体库具有较好的多样性,用5种不同抗原对其进行筛选,均获得了特异性噬菌体抗体的不同富集,表明成功构建了一个多样性良好的人源天然ScFv噬菌体抗体库。 相似文献
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噬菌体抗体库技术 总被引:3,自引:0,他引:3
徐伟文 《国外医学:分子生物学分册》1998,20(5):218-222
噬菌体抗体库技术用PCR扩增出抗体的全套可变区基因,通过噬菌体表面表达技术,把Fab段或单链抗体表达在噬菌体表面,经过“吸附-洗脱-扩增”过程筛选并富集特异性抗体。 相似文献
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