呼吸道感染临床实验室检查标本的评价

急性呼吸道感染(RTIs)是临床常见多发病,其病原体对抗生素耐药率的增加对诊断微生物学构成了严峻的挑战。临床微生物室对感染病原体的检出率较低,一般只有50%,且不同部位感染所采集的标本,其结果差异很大。本研究将评述呼吸道感染实验室检查标本采集的影响因素和常见病原体肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、肺炎支原体、卡他莫拉菌、肺炎衣原体、嗜肺性军团病杆菌、呼吸道病毒、尿抗原试验的临床意义。     

恒温扩增芯片法在重症监护病房肺部感染患者诊断中的应用

目的评价恒温扩增芯片法在重症监护病房肺部感染患者下呼吸道感染病原体检测中的效果。方法收集合格痰标本146例,通过恒温扩增芯片法和细菌培养法检测病原体,对两种方法检测结果进行分析。结果 146例痰液标本中,恒温扩增芯片法检出阳性标本114例(阳性率为78.1%),其中单一致病菌感染42例,2种及以上致病菌混合感染72例。45例标本检测到mecA基因,其中13例为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。146例痰标本中,有109例痰标本同时进行了痰培养检测,痰培养阳性率为67.9%(74/109),相应的恒温扩增芯片法检测阳性率为82.6%(90/109);痰培养结果阴性共计35例,与之相符合的恒温扩增芯片法检测阴性共计16例(阴性符合率45.7%)。恒温扩增芯片法对肺炎链球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、流感嗜血杆菌的阳性检出率明显高于痰培养,差异具有统计学意义。恒温扩增芯片法检测到2例结核分枝杆菌复合群、1例军团菌、1例肺炎支原体,痰培养检测到3例奇异变形杆菌。结论本实验室所开展的恒温扩增芯片法在重症监护病房肺部感染者下呼吸道病原体检测方面的优势体现在阳性率高、检测时间短,可为临床肺部感染诊断提供及时准确的参考依据。     

肺部真菌病的实验室诊断——血清学诊断

诊断肺部真菌病主要依靠实验室检查,它不但有助于确定肺部感染的有无,而且可明确感染病原体。通过药物敏感试验,可指导抗真菌药物的合理选用、比较治疗前后病原体检查结果、还有助于判断抗真菌治疗效果。因此,肺部真菌病的实验室检查对确立诊断、合理选用抗真菌药物及判断疗效均有重要意义。正因为如此,肺部真菌感染的病原学诊断问题已引起临床医师的普遍重视。十多年来,国内外许多学者做了大量工作,取得了一定的进展。在肺部真菌感染的诊断中,病原学检查是一项必不可少的手段。有关病原体的检测,多年来主要依靠在受染者体内或分泌物中寻找…     

单纯疱疹病毒1型引起的发热出疹性疾病需要与手足口病进行鉴别

对2008年在甘肃省发生的一起疑似手足口病(HFMD)的发热出疹性疾病的流行进行病原体的实验室检测,明确引起这起传染病流行的病原体。从4名发热出疹患者采集的8份临床标本中(每个患者采集咽拭子和疱疹液标本),首先将临床标本接种到RD和HEp-2细胞上进行病毒分离,对病毒分离阳性的标本提取病毒核酸,然后使用荧光定量-逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)进行人肠道病毒(HEV)核酸的检测。对HEV检测结果阴性的标本采用序列非依赖的单引物扩增技术(SISPA)进行"未知病原体"的鉴定。分离到的6株病毒均鉴定为单纯疱疹病毒I型(HSV-1),结合分析这起流行中患者的临床表现、流行病学调查结果以及实验室检测结果,表明HSV-1是引起这起发热出疹性疾病流行的病原体。6株HSV-1的gG区核苷酸和氨基酸水平上差异都较小,同源性分别高达98.8%和97.9%,说明这起疫情是由同一个病毒传播链引起的。HSV-1等病毒引起的发热出疹性疾病需要与HFMD进行鉴别诊断,由于仅从临床症状和流行病学资料上判断引起发热出疹性疾病的病原体是非常困难的,因此,必须依赖于实验室的诊断。     

用复合PCR检测淋球菌、沙眼衣原体和解脲支原体的感染研究

在性传播疾病中,泌尿生殖道感染的主要病原体是淋球菌、沙眼衣原体和解脲支原体,目前临床上常有多种病原体混合感染[1],其临床症状相似或无明显症状,给确诊和治疗带来不便。因此我们应用多重引物ＰＣＲ(ｍｕｌｔｉｐｌｅｘＰＣＲ),一次实验能从临床标本中检测出三种病原体…     

用复合PCR检测淋球菌、沙眼衣原体和解脲支原体的感染研究

在性传播疾病中,泌尿生殖道感染的主要病原体是淋球菌、沙眼衣原体和解脲支原体,目前临床上常有多种病原体混合感染[1],其临床症状相似或无明显症状,给确诊和治疗带来不便。因此我们应用多重引物ＰＣＲ(ｍｕｌｔｉｐｌｅｘＰＣＲ),一次实验能从临床标本中检测出三种病原体...     

肾移植术后肺部感染的鉴别诊断

肾移植术后并肺部感染是重症监护病房患者死亡的重要原因,感染的症状及体症呈复杂多样化,变化迅速。肾移植后因长期使用免疫抑制剂,肺部感染的病原体多为混合性感染,常见的病原体如铜绿假单胞杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯氏杆菌、金黄色葡萄球菌、尤其是耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌、结核杆菌、麻疹病毒、巨细胞病毒、呼吸道合胞病毒、真菌、军团菌及卡氏肺孢子虫等病原体引起的肺部感染,尤其是军团菌及卡氏肺孢子虫在免疫抑制患者中感染逐渐增加。从临床表现判断肺部感染病因的诊断较困难,病原学检查需要特殊的检查手段如肺泡灌洗及保护性样本刷取样,胸部X线表现具有一定的参考价值,尤其早期CT检查更有意义。为了明确肺部感染的病因学,患者表现、实验室检查结果及X线表现进行综合考虑是十分必要的,这有利于肺部感染的预防及控制。     

阴道微生态评价在妇科门诊中的应用价值CSCD

目的探讨阴道微生态评价对妇科门诊患者的临床应用价值。方法选择上海交通大学附属第一人民医院妇科门诊352例患者的阴道分泌物标本进行常规白带检测,同时采用中华医学会妇产科学分会感染性疾病协作组推荐的阴道微生态评价方案进行评价,并对结果进行对比分析。结果经阴道微生态评价检测,352例标本中48例健康体检女性标本微生态评价正常,也未发现相关病原体;304例有阴道炎症状的患者其标本均存在微生态失衡,其中180例检测到相关病原体(假丝酵母感染112例、细菌性阴道病56例、滴虫感染8例、需氧菌感染44例、支原体感染8例,混合感染48例);其余124例标本无病原体,但存在阴道菌群密集度、多样性、优势菌、pH和乳杆菌功能等异常。112例假丝酵母感染标本中传统白带检测仅发现84例;304例有阴道炎症状的标本中常规白带检查判断清洁度正常(Ⅰ~Ⅱ度)者216例,但经阴道微生态评价发现其中120例应评定为Ⅲ~Ⅳ度。结论阴道微生态评价具有一定的优势,可为临床诊治提供更多信息。     

合肥市孕期妇女阴道分泌物湿片镜检与五项生化检验结果分析

目的探查合肥地区孕期妇女生殖道感染特点,为临床诊断提供参考。方法选取2017年11月-2018年9月来我院行孕期检查的孕妇969例,采集阴道分泌物分别进行镜检和五联检法联合检测,分析孕妇分泌物清洁度及病原结果。结果 969例孕妇阴道分泌物中,正常清洁度(Ⅰ～Ⅱ)占标本总数36.22%,病原体检出率6.84%,异常清洁度(Ⅲ～Ⅳ)占标本总数63.78%,病原体检出率44.66%,不同清洁度病原体检出率差异有统计学意义(Ps0.05)。病原体阳性者300例,其中真菌感染158例(16.31%),细菌感染157例(16.20%),毛滴虫感染5例(0.52%),混合感染20例(2.06%)。清洁度Ⅰ～Ⅱ度白细胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶阳性率分别为17.23%、0.52%、0.93%,清洁度Ⅲ～Ⅳ度白细胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶阳性率分别为61.40%、8.36%、17.34%,检测结果差异有统计学意义(Ps0.05)。结论合肥地区孕妇阴道分泌物病原体检出率较高,湿片镜检和五联检法联合检测可提高阴道炎诊断的准确性,在临床工作中应加强对孕期妇女的健康指导及生殖道感染的监测,做到早发现、早诊断、早治疗。     

肺炎支原体实验室检测方法研究进展

肺炎支原体(Mycoplosma pneumonia,MP)为人类非典型肺炎的病原体,是引起呼吸道感染的重要病原体。但是支原体肺炎与其他病原体感染的肺炎,在临床症状、影像学上并无特异性差别,且其对一般治疗肺炎、上呼吸道感染的药物有耐药性,因此肺炎支原体及时、准确的实验室检测对于支原体肺炎的诊断治疗显得尤为重要。目前MP的实验室检测方法不断推陈出新,但各种方法均有其优势与不足,临床可选择两种不同的方法同时检测。比如:血清学抗体的检测结合MP快速培养药敏的方法;血清学抗体的检测结合PCR的方法,不同方法相互补充为临床的早期诊断、治疗提供依据。而MP药敏试验的检测和耐药机制的研究对于临床用药方案的选择,减少耐药株的产生和流行具有重要意义。     

支气管扩张合并感染患者病原体分布及其与病情的关系

目的探讨支气管扩张合并感染患者病原体分布及其与病情的关系,为该类患者的治疗提供参考。方法选取2018年6月至2019年6月我院收治的76例支气管扩张合并感染急性加重期患者为研究对象,对所有患者痰液标本进行病毒PCR检测,同时进行细菌培养以及实验室检查,分析所有患者病原体分布。比较不同病情程度患者病原体分布情况,同时比较不同病原体感染患者白细胞(WBC)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平。结果共采集76份合格痰液标本,送检率100.00%。76份标本中检出细菌55株,其中革兰阳性菌10株(13.16%),主要为金黄色葡萄球菌(7株,9.21%);革兰阴性菌45株(59.21%),主要为铜绿假单胞菌(20株,26.32%)。成功分离出病毒26株,占34.21%,主要为鼻病毒(15株,19.76%);轻度、中度、重度支气管扩张患者分别分离出13、15、27株病原菌,不同病情程度患者病原体分布差异有统计学意义(均P0.05)。单纯细菌阳性支气管扩张患者WBC水平明显高于病原体阴性、单纯病毒阳性、病毒细菌混合感染患者(均P0.05)。CRP、IL-6水平由低到高分别为病原体阴性、单纯病毒阳性、单纯细菌阳性、病毒细菌混合感染患者(均P0.05)。TNF-α水平从高到低依次为单纯病毒阳性、病毒细菌混合感染、单纯细菌阳性、病原体阴性患者(均P0.05)。结论铜绿假单胞菌、肺炎链球菌以及鼻病毒是支气管扩张合并感染患者常见病原体。重度支气管扩张患者易发生感染,病毒细菌混合感染支气管扩张患者全身炎症反应更严重,临床应引起重视。     

肺部感染近平滑念珠菌的临床分布与耐药性分析

<正>随着广谱抗菌药物长期滥用和机械通气等创伤性治疗手段的增加,肺部念球菌感染尤其是近平滑念珠菌感染逐年增加[1-2]。了解肺部感染近平滑念珠菌的分布及药敏情况,可为临床防治近平滑念珠菌肺部感染提供参考。1资料与方法1.1菌株来源收集2012年1月~2014年7月医院感染管理科微生物实验室与检验科细菌室从本院临床各科标本中分离的近平滑念珠菌菌株及患者资料。剔除同一名患者同一部位多次分离到的相同菌株。     

新的布尼亚病毒是在中国出现的发热伴血小板减少综合征的病原体

从2009年起,一种未知病因导致的急性发热伴血小板减少综合征(SFTS)引起了人们对急性发热性疾病的关注。感染嗜吞噬细胞无形体曾被认为是病因之一,但实验室检测发现大多数患者中并不存在这种病原体。该研究从中国6个省份采集了有SFTS症状的患者血样,接种细胞并培养以分离病原体,通过聚合酶链反应检测病毒RNA,通过电镜观察病原体形态,同时对病原体核酸测序。采用酶联免疫吸附试验、间接免     

肺炎支原体和沙眼衣原体致儿童急性下呼吸道感染的研究

本文旨在研究儿童社区获得性急性下呼吸道感染(ALRTI)中肺炎支原体(MP)和沙眼衣原体(CT)的感染特征。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测2006年10月～2008年2月因ALRTI收入复旦大学附属儿科医院的患儿呼吸道标本中MP和CT的DNA,并分析2种病原体感染患儿的临床特征与实验室检查结果。在1312份深部鼻咽分泌物标本中,MP和CT检出率分别为7.85%(103/1312)和2.97%(39/1312)。MP在5岁以上患儿中的检出率为33.33%(30/90),而CT在3个月以内患儿中的检出率为6.28%(31/494)。MP感染后易出现40℃以上高热,较少发生发绀与重症呼吸道感染;白细胞计数常无明显升高,但C反应蛋白升高较多见。CT感染后40℃以上高热和重症呼吸道感染少见,C反应蛋白升高也较少见。结果提示,在5岁以上儿童的社区获得性ALRTI中,MP是重要的病原体;而在3个月以内儿童中,CT为常见病原体之一。     

0~7岁住院儿童九项呼吸道非细菌性病原体IgM检测分析

目的分析患儿九项病原体血清IgM检测结果,初步得出本地区的感染谱及流行特征,为临床诊治提供依据。方法检测标本来自2013年11月至2014年3月住院的0~7岁儿童,共1 150例,间接免疫荧光法检测血清中IgM,统计分析各病原体的阳性率以及混合感染情况,比较不同性别、年龄组感染率差异。结果 1 150例检测标本,共检出阳性461例,阳性率为40.1%;阳性率前三位的分别是:肺炎支原体(24.6%),腺病毒(11.3%),甲型流感病毒(10.3%);阳性标本中单一感染率为65.9%(304/461);女性儿童感染率(48.0%)显著高于男性儿童(34.4%),2~7岁组主要的4种病原体阳性率均显著高于0~1岁年龄组。结论肺炎支原体、腺病毒、甲型流感病毒是本地区住院儿童呼吸道感染主要的非细菌性病原体,女童较男童更为易感,2~7岁较0~1岁更为易感。     

DNA技术与传染病的快速诊断

<正>DNA探针在最近被常规用于微生物实验室,它可使临床诊断更迅速,此技术理论简单,故有充分时理由利用此新技术。传统方法鉴定微生物如分枝杆菌、病毒、寄生虫、肺炎衣原体和其他新的生长慢的病原体(eg,Mobiluncus Curtissii)需要几周时间。探针的产生使小实验室不仅具有鉴别较广范围传染病原的能力,且可减少向中心实验室送标本的费用,而探针最大的吸引力在于能直接且准确地从临床标本中检测病原体、精确地选择抗微生物药物以减少严重传染病的死亡。     

多聚酶链反应存在的问题与解决办法

<正>将分子诊断技术用于传染病的诊断,是以鉴定病原体DNA或RNA中的特殊标记序列(SignatureSequences)为其依据。所以,如从临床标本中检出特征性的核酸,大多表示有新近感染。尽管核酸探针已被广泛用于病原体的检查,但将之作为常规检查的实验室还相当少。其主要原因是,技术要求高,难于自动化,而且常缺乏微生物学标本所需要的敏感度。故多数病原体探针仍然是用来确证培养物,所以,尚离不开原始培养。     

利用高通量测序快速检测疑似感染患者体内未知病原体

采用第二代高通量测序技术从复杂的疑似感染患者组织标本中直接快速检测未知病原体.方法:取临床和实验室均不能确诊的病人血液和淋巴组织,进行病毒DNA和RNA的提取,直接用于第二代高通量测序,将测序结果用于生物信息学分析,与本地化的病毒核酸数据库进行比对,寻找潜在的病毒序列.结果:生物信息学分析显示,3901条序列reads与人内源性病毒K113同源;当使用K113特异性引物对经过Dnasel处理的患者和正常个体进行荧光定量RT - PCR时,发现在患者体内K113病毒基因的表达远远高于正常个体,提示该患者可能存在K113病毒的感染.结论:第二代高通量测序可能用于快速检测未知病原体.     

咽外A群链球菌感染:快速抗原检测法诊断的准确性和实用性

抗原检测法(ADT)已在临床上广泛地用于咽部A群链球菌(GAS)感染的快速诊断,但很少用于检测咽外其他部位如皮肤的GAS感染,而常用的皮肤标本细胞培养实验需要24～72h,很多实验室也没有条件开展。本文作者对239名平均年龄4．9岁、怀疑为GAS皮肤感染的患者,共采集患处皮肤拭子247次,每次采集3个拭子,分别用3种ADT试剂盒     

儿童泌尿系感染的病原学分析

探讨目前儿童泌尿系感染病原体的变化趋势,为临床治疗提供实验依据。分析2008年1月至2009年10月住院治疗的357例尿细菌培养、支原体体外培养、衣原体检测阳性的泌尿系感染患儿病原体的分布情况。结果显示,尿细菌培养和支原体体外培养、衣原体检测前未应用过抗生素的患儿其阳性率为82.2%,而应用过抗生素的患儿其阳性率为31.8%,两者相比具有统计学意义(P0.01)。在检测的357例阳性标本中,革兰阴性杆菌占74.7%,其中以大肠埃希菌为主,占46.2%;革兰阳性球菌占14.8%,其中肠球菌占10.9%;真菌占3.1%,支原体占4.8%,衣原体占2.5%。临床要密切关注儿童泌尿系感染病原体的分布变迁情况,以便于为临床的诊断和治疗提供可靠的实验依据。