树脑β－内啡肽能神经元胞体和纤维分布的研究

本文用免疫组织化学方法和免疫电镜方法对１４只树脑β－内啡肽能神经元胞体和纤维的分布及其在细胞器的定位进行了研究。结果表明，本文首次报道在Ｂｒｏｃａ斜角带观察到β－内啡肽免疫反应阳性神经元胞体，电镜观察到β－内啡肽免疫反应物质定位于大颗粒囊泡内的小颗粒上和粗面内质网上。下丘脑弓状核及其附近区域观察到β－内啡肽免疫反应阳性神经元胞体。在室周区、室旁核、第３脑室室管膜下层及室管膜上皮细胞间、内侧基底下丘脑及其外侧区、正中隆起内带和外带部可见到β－内啡肽免疫反应阳性纤维和串珠状的膨体。对β－内啡肽的释放途径及其调节因素作了探讨。     

下丘脑室旁核内NPY神经元与CCK神经元相互关系的免疫电镜双标研究

应用包埋前免疫电镜双标技术对大鼠下丘脑室旁核的神经肽Y(NPY)和胆囊收缩素(CCK)神经元的相互关系进行了研究。用Norgren法进行免疫电镜双标染色。结果在电镜下观察到:在室旁核内侧部,NPY样免疫反应产物呈电子密度高的颗粒状或絮状,弥漫分布于胞浆;CCK样免疫反应产物则呈电子密度高的针状或块状,散在分布于胞浆,偶见于核内。有时,在一个神经末梢内既有浓重的颗粒状DAB反应产物,又有典型的针状TMB反应产物。在室旁核内,NPY和CCK神经元胞体互相混杂、交错存在,两者均为中等大细胞。在超微结构水平,NPY和CCK神经元的树突和轴突可由非NPY、非CCK神经末梢接受传入突触联系;CCK神经元的树突还可接受其他CCK神经末梢的传入性自调节突触;CCK神经元胞体可接受NPY神经末梢的传入性突触,后者的突触前成分内可能有CCK与NPY共存。     

神经肽Y和β—内啡肽样免疫阳性物质在文昌鱼神经系统和哈氏窝的分布

用免疫组织化学方法首次发现,神经肽Y（NPY）和β－内啡肽（β－Ep)样免疫阳性物质分布在文昌鱼神经系统和哈氏窝。NPY样免疫阳性神经元出现在端脑前部和中部、中脑前部和中部以及后脑,NPY样免疫阳性神经纤维在文昌鱼脑的各部分与神经元交错呈网状密集分布。神经管的背面与中部均可观察到NPY样免疫阳性神经元及其阳性性纤维。β－Ep样免疫阳性神经元及其神经纤维定位在中脑前部和中部以及神经管,且分布范围明显小于NPY。文昌鱼哈氏窝也有NPY和β－Ep样免疫阳性物质分布。这些结果表明,NPY和β－Ep可能作为脑内的一种神经递质,像鱼类那样,参与调节文昌鱼哈氏窝促性腺激素分泌细胞的分泌活动,这为文昌鱼脑－哈氏窝复合体的密切关系提供新的形态学证据。     

中国树鼠句伏隔核促肾上腺皮质激素释放激素能神经元免疫组织化学研究

应用免疫组织化学碱性磷酸酶标Ａ蛋白（ＰＡＡＰ）技术在光镜水平研究中国树鼠句伏隔核内促肾上腺皮质激素释放激素（ＣＲＦ）能神经元的形态和分布特点。结果显示,该核内ＣＲＦ免疫反应阳性神经元胞体多数呈多边形、圆形或卵圆形,梭形极少;直径多数为１３－１９ｕｍ,少数＜１３ｕｍ;胞质免疫反应强度不等。对左右侧伏隔核内ＣＲＦ免疫反应阳性神经元数目、胞体大小、形态和免疫反应强度进行分析,除免疫反应强阳性神经元计数项（Ｐ＜００１）外,其他项都无显著意义。ＣＲＦ免疫反应阳性神经元在伏隔核内分布不均,主要位于该核的前半段背侧区,核芯区较少     

大鼠下丘脑内一氧化氮合酶阳性神经元的分布

用ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学方法观察了大白鼠下丘脑内一氧化氮合酶（ＮＤＳ）阳性神经元的分布及形态特征。结果显示：在视上核、室旁核的大细胞部、环状核、穹窿周核、下丘脑外侧区、下丘脑腹内侧核、下丘脑背内侧核、乳头体区大部分核团均可见一氧化氮合酶阳性神经元聚集成团。在视前内侧区、视前外侧区、下丘脑前区、下丘脑背侧区、下丘脑后区、室周核、室旁核小细胞部及穹窿内可见散在的一氧化氮合酶阳性神经元。室周核内可见呈阳性反应的接触脑脊液神经元的胞体及突起。一氧化氮合酶阳性神经元大多可见突起,有的突起上可见１～２级分支,并可见膨体。下丘脑大部分区域内可见阳性神经纤维。弓状核内可见许多弧形纤维连于第三脑室室管膜和正中隆起。     

大肠癌细胞GST-Pi免疫细胞化学的超微结构定位

探讨GST－Pi在大肠癌细胞内亚微结构定位及其与大肠癌发生的关系。应用免疫电镜技术（免疫胶体金法）对6例大肠腺癌及3例正常大肠粘膜细胞进行GST－Pi的定位观察。6例大肠癌细胞内均出现GST－Pi胶体金阳性颗粒,主要分布于胞浆的线粒体、溶酶体、近胞膜部位的胞头中,也分布在核内和核膜上。金颗粒呈团状、点灶状分布,图象清晰。3例正常粘膜细胞内未见GST－Pi的金颗粒阳性表达,结果表明,GST－Pi在癌细胞内的特异性表达可作为大肠癌的诊断指标之一。     

自发性高血压大鼠下丘脑加压素能神经元形态学研究

本文用光、电镜和免疫组织化学方法观察了自发性高血压大鼠（ＳＨＲｓ）下丘脑加压素能神经元的形态结构。电镜下ＳＨＲｓ加压素能神经元胞体大,电子密度高,核大有皱褶细胞质内密集充满各种细胞器。可见膜包神经分泌颗粒。ＰＡＰ法显示精氨酸加压素（ＡＶＰ）阳性细胞主要分布于视上核（ＳＯＮ）腹外侧部及室旁核（ＰＶＮ）内。在ＳＯＮ和ＰＶＮ之间尚有一个ＡＶＰ阳性细胞的密集核团。说明ＳＨＲ下丘脑也有产生ＡＶＰ功能。ＳＯＮ和ＰＶＮ之间的核团是否与ＳＨＲｓ下丘脑－垂体－肾上腺轴ＡＣＴＨ的异常有关？有待进一步研究。本文为探讨ＳＨＲｓ正常生理功能及高血压的发生提供形态学资料。     

大鼠第三脑室及中脑水管多巴胺能触液神经元的分布

目的观察大鼠第三脑室、中脑水管及中缝背核内多巴胺能触液神经元的分布情况.方法应用CB逆行追踪、TH免疫组织化学和CB/TH免疫荧光双重标记技术,观察多巴胺能触液神经元在间脑及中脑内的分布情况.结果 TH免疫阳性触液神经元分布在第三脑室尾侧部和中脑水管全程的腹侧室管膜上及室管膜内,其胞体呈倒置梨形、圆形或椭圆形、多角形和梭形;在中缝背核内可见少量CB/TH免疫荧光双重标记的远位触液神经元;另在正中隆起部位TH免疫阳性神经末梢含量丰富.结论大鼠第三脑室、中脑水管及中缝背核内存在多巴胺能触液神经元,其在脑-脑脊液之间的信息传递中有着重要的作用.     

树鼩室旁核血管加压素免疫阳性神经元的电镜观察

用免疫组化 PAP 技术,对树鼩(Tupaia Belangeri)室旁核血管加压素(VP)免疫阳性神经元进行电镜观察。发现室旁核 VP 阳性神经元核固体内的 VP 阳性反应物主要与高尔基复合体、神经分泌颗粒有关。但在粗面内质网未见 VP 阳性反应物,这与前人对大鼠的研究报告不同。     

烫伤对大鼠下丘脑视上核、室旁核AVP神经元的影响──免疫电镜观察及形态计量分析

为研究加压素与应激的关系,我们曾应用免疫细胞化学（ＰＡＰ）方法结合图像分析技术观察到烫伤应激后２小时视上核、室旁核加压素神经元免疫反应阳性物质的总体积减小最明显。本文采用免疫电镜技术,进一步观察了烫伤后２小时视上核、室旁核加压素神经元超微结构的变化,并运用体视学方法定量分析了对照组及烫伤后２小时组视上核、室分校加压素神经元各２４０张照片的粗面内质网、高尔基复合体及线粒体的体积密度（Ｖｖ）、面积密度（Ｓｖ）、面数密度（Ｎａ）等。结果显示：烫伤后２小时组视上核、室旁核加压素神经元的粗面内质网的Ｖｖ．Ｓｖ显著增大,说明合成功能已开始增强,但是,高尔基复合体的Ｖｖ、Ｓｖ及阳性分泌颗粒却显著减少,因而引起总体积的缩小。从超微结构水平进一步证实加压素参与应激过程。     

下丘脑室旁核β－内啡肽在大鼠烫伤休克中的作用

以１００℃沸水接触雄性大鼠去毛的背部２０ｓ,形成占体表面积２０％的三度烫伤。收集下丘脑室旁核推挽灌流液测定β－内啡肽免疫活性物质的含量;向下丘脑室旁核微量注射β－内啡肽或其抗血清,观察烫后心血管功能指标的改变及存活时间。结果表明,烫后下丘脑室旁核灌流液中β－内啡肽免疫活性物质含量显著升高,有两个峰值。烫后给予β－内啡肽抗血清,可显著改善心血管功能指标（ＭＡＰ,ｄＰ／ｄｔｍａｘ,Ｌｖｓｐ和ＨＲ）,延长存活时间;给予β－内啡肽则作用相反。上述观察表明下丘脑β－内啡肽的过量增多是促使休克加重和加快死亡的重要原因之一。     

神经肽Y和β-内啡肽样免疫阳性物质在文昌鱼神经系统和哈氏窝的分布

用免疫组织化学方法首次发现,神经肽Y(NPY)和β-内啡肽(β-Ep)样免疫阳性物质分布在文昌鱼神经系统和哈氏窝。NPY样免疫阳性神经元出现在端脑前部和中部、中脑前部和中部以及后脑,NPY样免疫阳性神经纤维在文昌鱼脑的各部分与神经元交错呈网状密集分布。神经管的背面与中部均可观察到NPY样免疫阳性神经元及其阳性纤维。β-Ep样免疫阳性神经元及其神经纤维定位在中脑前部和中部以及神经管,且分布范围明显小于NPY。文昌鱼哈氏窝也有NPY和β-Ep样免疫阳性物质分布。这些结果表明,NPY和β-Ep可能作为脑内的一种神经递质,像鱼类那样,参与调节文昌鱼哈氏窝促性腺激素分泌细胞的分泌活动,这为文昌鱼脑-哈氏窝复合体的密切关系提供新的形态学证据。     

下丘脑室旁核β—内啡肽在大鼠烫伤休克中的作用

以１００摄氏度沸水接触雄性大鼠去毛的背部２０ｓ,形成占体表面积２０％的三度烫伤。收集下丘脑室旁核推挽灌流液测定β－内啡肽免疫活性物质的含量;向下丘脑室旁核微量注射β内啡肽或其抗血清,观察烫后心血管功能指标的改变及存活时间。结果表明,烫后下丘脑室旁核灌流液中β－内啡肽免疫活性物质含量显著升高,有两个峰值。烫后给予β－内啡肽抗血清,可显著改善心血管功能指标,延长存活时间;给予β－内啡肽则作用相反。上述     

β-内啡肽在齐口裂腹鱼消化道和脑中的定位分布

β-内啡肽属内源性阿片肽,广泛存在于胃肠道及脑组织中,发挥着多种生理功能。本文采用链霉亲和素-生物素复合物免疫组织化学技术研究β-内啡肽在齐口裂腹鱼(Schizothorax prenanti)消化道和脑中的定位分布。食道、后肠呈β-内啡肽阴性反应,口咽腔、前肠及中肠呈β-内啡肽阳性反应,阳性细胞多分布于黏膜上皮之间,呈圆形、卵圆形、蝌蚪形、梭形、锥形等。β-内啡肽阳性细胞分布密度在前肠最高,中肠次之,口咽腔最低。β-内啡肽定位于间脑、中脑、小脑神经元及中脑神经纤维中,其阳性神经元密度在中隆起最高,下丘脑中叶前球核、下丘脑下叶次之,侧膝核、前圆核、下圆核、中纵束旁及小脑瓣浦肯野氏细胞层较低,下丘脑下叶乳头体、中脑基部上缘最低。β-内啡肽在消化道的分布与该鱼食性及消化道结构、功能密切相关;β-内啡肽在脑区的分布特性,推测与其参与调节不同脑区的神经内分泌活动有关。综上所述,β-内啡肽广泛分布于齐口裂腹鱼消化道及脑内,进一步证实它是一种双重分布的脑肠肽。本研究为β-内啡肽可能参与调节消化、神经内分泌活动提供了形态学证据。     

缺氧诱导体外培养大鼠海马神经元c-fos的表达及人重组白细胞介素-1β的影响

采用免疫组化方法,观察缺氧诱导体外培养大鼠海马神经元ｃ－ｆｏｓ的表达及人重组白细胞介素－１β（ｒｈＩＬ－１β）的影响。结果显示,缺氧后海马神经元中Ｆｏｓ染色阳性胞核的百分率随缺氧时间的延长而显著增加。图像分析的结果显示,缺氧后Ｆｏｓ染色阳性胞核的平均光密度亦随缺氧时间的延长而显著增加。经ｒｈＩＬ－１β孵育的神经元缺氧后Ｆｏｓ染色阳性胞核的百分率和Ｆｏｓ染色阳性胞核的平均光密度均明显低于对照组。本结果表明,缺氧能诱导体外培养海马神经元ｃ－ｆｏｓ表达,ｒｈＩＬ－１β能抑制缺氧神经元ｃ－ｆｏｓ表达。提示ｒｈＩＬ－１β对海马神经元缺氧损伤具有一定调控作用。     

友鼠外侧膝状体中继神经元HRP示踪结合谷氨酸免疫组织化学研究

采用 HRP逆行追踪结合谷氨酸免疫组织化学方法观察大鼠外侧膝状体背侧核 (d L GN)中继神经元的化学递质。光镜下 HRP标记细胞与谷氨酸免疫阳性细胞清晰可辩。HRP单标记细胞位于外侧膝状体背侧核内 ,胞浆及树突基部充满棕色颗粒。免疫金银法 (IGSS)单标记的谷氨酸免疫阳性神经元分布于外侧膝状体背侧核与腹侧核 ,胞体内充满黑色银颗粒。在外侧膝状体背侧核内可见 HRP和谷氨酸双标记细胞 ,其数目占 HRP标记细胞总数的 70 .9± 6 .4%。本文提示 ,谷氨酸可能是外侧膝状体背侧核投射至视皮质的中继神经元的神经递质之一。     

缺氧诱导体外培养大鼠海马神经元c—fos的表达及人重组…

采用免疫组化方法,观察缺氧诱导体外培养大鼠海马神经元ｃ－ｆｏｓ的表达及人重组白细胞介素－１β（ｒｈｌＬ－１β）的影响,结果显示,缺氧后海马神经元中Ｆｏｓ染色了性胞核的百分率随缺氧时间的延长而显著增加。图像分析的结果显示,缺氧后Ｆｏｓ染色阳性胞核的平均光密度亦随缺氧时间的延长而显著增加。经ｒｈＩＬ－１β孵育的神经元缺氧后Ｆｏｓ染色阳性胞核的百分率和Ｆｏｓ染色阳性胞核的平均光密度均明显低于对照组。本结     

P物质受体在大鼠纹状体边缘区内的表达

我们以前的工作观察到纹状体边缘区内有密集的P物质纤维及终末分布,本用原位杂交和免疫组织化学方法研究了大鼠纹状体边缘区内P物质受体（SPR）的表达及分布,原位杂交结果发现P物质mRNA阳性杂交信号在纹状体内的分布不均匀,尾壳核内只有少量中等大小的阳性胞体,苍白球内只有少量较大的阳性胸体,而在尾壳核和苍白球之间的边缘区部位则可见许多中等大小的梭形阳性神经元胞体,并呈现密集的带关分布。免疫组织化学结果观察到P物质阳性神经元胞体在纹状体内的分布与原位杂交结果一致。推测大鼠纹体边缘区内可以合成P物质受体,具有接受和整合P物质神经递质的功能,推测边缘区内SPR神经元可能对SP递质的接受、调节有重要作用。     

5—羟色胺和一氧化氮合酶在大鼠中脑导水和周围灰质和中缝核簇神经元内的共存

实验采用NADPH组织化学和5－HT免疫组织化学双重显色方法研究了5－HT和一氧化氮合酶在大鼠中脑导水管周围灰质（PAG）和中缝核簇神经元的分布特征及共存情况。结果表明：（1）在PAG腹外侧区中观察到大量的NOS阳性神经元和5－HT样免疫阳性神经元,但是NOS／5－HT双标神经元较少,仅占该区5－HT样免疫阳性神经元20.1%,并且主要分布在该区的内侧部;在PAG的背外侧区中观察到密集的NOS阳性神经元,但是几科未见5－HT免疫阳性神经元分布。（2）在中缝核簇的大多数亚核内均可观察到大量的NOS神经元和5－HT免疫阳性神经元。在中缝背核的内侧部、中缝背核的尾侧部、中缝正中核、尾侧线形核、中缝大核和中缝隐核内双标神经元分别占所在部位中5－HT免疫阳性神经元的44.6%、53.4%、44.4%、26.2%、26.7%和21.8%。然而在中缝苍白核内仅偶见少数双标神经元,研究结果表明,在PAG和中缝核簇的一些神经元内5－HT可以与NOS共存,提示这两种神经活性物质在功能上可能存在着某种相关性,有关这些双标神经元的功能意义尚需进一步研究。     

猕猴颈髓的GABA能神经元分布

应用免疫组织化学方法观察猕猴颈髓的γ-氨基丁酸（GABA）能神经元的分布,观察结果：除第X层外,在脊髓RexedⅠ-Ⅸ层可见GABA样免疫反应的胞体和纤维,标记的GABA胞体为卵圆形,三角形和多角形,可分为大、中、小型,在Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ层GABA阳性胞体较多,GABA阳性纤维以后角处最多,白质内也有GABA免疫反应阳性的胶质细胞和神经纤维。结果提示GABA能神经元不仅调节感觉信息的传导而且也调节运动信息的传导。