宁夏枸杞器官发生和体细胞胚胎发生过程中DNA,RNA和蛋白质合成动？…

After the calli originating from the leaf explant of Lycium barbarum L. were selected and proliferated, the yellowish calli with same origin, similar state were transferred to O medium or E medium and the regenerative systems of organogenesis and somatic embryogenesis might form. By these systems, a comparative study on the synthetic activities of DNA, RNA and protein in the two in vitro regeneration pathways was carried out. The results were as follows: (1) Before meristemoid and embryogenic cells were formed, the synthesis of RNA was activated firstly, followed with the increase of synthesis rates of DNA and protein. During the formation of globular embryo, the synthesis rate of DNA increased quickly and then the activities of syntheses of RNA and protein reached the peak, while it was the contrary during germination of adventitious bud. (2) Components of soluble protein changed regularly. A peptide (153.6 kD) appeared during the initiation of both organogenesis and somatic embryogenesis. Several peptides disappearing gradually in the early-stage of differentiation could regenerate with the formation of shoot primordium and globular embryo. Corresponding to morphogenesis, both regenerative systems had specific peptides (84.9 kD, 46.3 kD and 44 kD, 36.2 kD) as molecular markers of its own development. In addition, the relation and mechanism of the two regenerative systems were discussed.     

红豆草体细胞胚胎发生早期DNA,RNA和蛋白质的合成动态变化

红豆草(Onebrychis viciaefolia Scop.)下胚轴切段在含有1mg/IBA、1mg/1 KT 的 LS培养基上培养,两周后产生愈伤组织,通过筛选、克隆得到大量的具有胚胎发生潜力的非胚性愈伤组织,当将其转移到含1mg/1BA 的 LS 培养基上后可诱导体细胞胚胎发生。应用放射性同位素液体闪烁技术测得在胚性培养的前2天,RNA 合成速度迅速上升,随后下降,第五天后又呈缓慢上升趋势,尔后平稳。蛋白质合成速度在胚性培养的第三天达到高峰,升高很快。而 DNA 合成速度变化平缓,只是在胚性培养的第五天出现一较小的峰。胚性培养过程的 DNA、RNA 蛋白质合成速度均高于非胚性培养。     

宁夏枸杞器官发生和体细胞胚胎发生过程中DNA、RNA和蛋白质合成动态的比较研究

宁夏枸杞(Lycium barbarum L.)叶外植体来源的愈伤组织经筛选、繁殖后,将来源相同、状态较为一致的淡黄色愈伤组织转移至O型或E型培养基上,可以诱导出器官发生和体细胞胚胎发生。利用该体系,对两条离体再生途径进行了比较研究。结果表明:(1)在拟分生组织和胚性细胞形成之前,RNA合成首先被激活,随后DNA、蛋白质合成加速;而球形胚形成期间,先是DNA合成的加快,接着RNA、蛋白质的合成高峰出现,在不定芽形成期间却正好相反;(2)可溶性蛋白组分发生规律性变化;器官发生和体细胞胚胎发生的启动阶段都有-153.6kD多肽出现,一些多肽分子在分化早期逐渐消失,而随芽原基或球形胚的形成又重新合成;与形态发生相对应,两种再生体系都有作为各自分子标记的特异多肽(84.9kD、46.3kD和44kD、36.2kD)的表达。此外,还对两种离体再生体系之间的关系和发生机制进行了讨论。     

枸杞体细胞胚发生中蛋白质和DNA代谢动态的立体计量

本文以宁夏构杞无菌苗叶片为材料,离体培养,并诱导体细胞胚发生。根据细胞形态计量学原理,应用数字图像处理软件计量由光学底片经A/D转换成的数字图像中的蛋白质和DNA大分子,对于构杞体细胞胚发生过程中蛋白质和DNA分子的代谢动态进行了量化处理,并对量化结果分析了蛋白质和DNA代谢动态与体细胞胚发生、发育的关系。     

Thidiazuron对苜蓿愈伤组织的乙烯生成及其体细胞胚胎发生的影响

苜蓿叶柄在Ｂ５Ｈ培养基上诱导并继代所形成的是无色、松软的胚性愈伤组织、内含许多有分生能力的细胞团,当Ｂ５Ｈ中的ＫＴ用ＴＤＺ替换时,愈伤组织变绿变硬,出现管状分子和芽原基的分化,其体胚发生能力失,而且其乙烯生成和ＰＡＬ活性升高。乙烯形成酶的抑制剂ＣｏＣｌ２可以抑制ＴＤＺ的上述作用,部分地恢复愈伤组织的体胚发生能力,ＴＤＺ对愈伤组织的这些作用可能与其乙烯生成有关。     

枸杞体细胞胚发生中DNA代谢动态的立体计量

本文以宁夏枸杞无菌苗叶片为材料,离体培养,并诱导体细胞胚胎发生。根据细胞形态计量学原理,应用数学图像处理软件计量由光学底片经Ａ／Ｄ转换成的数学图像中的ＤＮＡ大分子,对枸杞体细胞胚发生过程中ＤＮＡ分子的代谢动态进行量化分析。结果表明：在整个体细胞胚发和过程中ＤＮＡ代谢呈现动态变化。非胚性细胞与胚性细胞期的量化值分别为１．８２％和１．９１％;在二细胞胚、四细胞胚、多细胞胚时期ＤＮＡ缓慢增长,随着胚性愈     

马唐体细胞胚胎发生过程中生理变化的研究

本文通过对马唐体细胞胚胎发生过程中生理变化的研究后发现,球形胚游离氨基酸种类最少、浓度最低;其过氧化物酶、酯酶和淀粉酶同工酶活性较高、种类较多;其可溶性蛋白质相对浓度最高,并且出现至少两种新带。这说明球形胚已开始分子水平的分化;在这一时期合成的蛋白质(酶),对于马唐体细胞胚胎发生中胚体细胞水平的分化有着重要作用。     

苜蓿胚状体的分离及其发育过程中三种同工酶酶谱分析(简报)

目前,对胚状体发生过程中的生理生化研究表明,这一过程伴随有核酸、蛋白质等大分子物质合成速度的增加及与胚胎发生有关的特异性蛋白的合成;一些同工酶,如过氧化物酶、脂酶、细胞色素氧化酶和谷氨酸脱氢酶     

石刁柏体细胞胚胎发生过程中蛋白质及同工酶变化的研究

本文报道石刁柏胚性愈伤组织的可溶性蛋白质含量与组分、过氧化物酶和酯酶的活力及同工酶带均比其体细胞胚的要少。而在体细胞胚胎发生过程中,过氧化物酶和酯酶活力、可溶性蛋白质含量均以球形胚为最低,子叶分化期胚为最高而呈递增趋势;可溶性蛋白质组分以子叶分化期胚、成熟胚为最多,球形胚、香蕉形胚为最少;过氧化物酶同工酶带以梨形胚为最多,子叶分化期胚、成熟胚为最少;酯酶同工酶则以子叶分化期胚为最多,成熟胚为最少。胚性愈伤组织与体细胞胚均有其特异性可溶性蛋白质及同工酶带,可作为体细胞胚胎发生的分子标记。     

苜蓿豆血红蛋白互补脱氧核糖核酸(cDNA)的合成及其无性繁殖

本文介绍了 cDNA 合成的详细方法。用苜蓿豆血红蛋白 poly A( )mRNA 作模板,在反转录酶作用下合成单股 cDNA(ss-cDNA),然后在 E.coli DNA 聚合酶 I 作用下合成双股 cDNA(ds-cDNA)。采用同聚物尾接方法和合成的内切酶寡核苷酸衔接物连接方法,将 ds-cDNA 与质粒 pBR322 DNA 重组,进行转化,得到对氨苄青霉素抗性(Amp~r)和四环素敏感(TeL~s)的75个转化子。经 cDNA-mRNA 的杂交选择和无细胞体外转译的初筛结果,有两个转化子具有与苜蓿豆血红蛋白 mRNA 有同源性的 cDNA。这种 cDNA 的性质有待于进一步研究.     

小麦组织培养中体细胞胚胎发生的细胞胚胎学及淀粉消长动态的研究

小麦幼胚在附加2,4-D 2 mg/L+KT0.5 mg/L+LH 300 mg/L+3%蔗糖的MS 培养基上诱导出愈伤组织,继代2—3次后,降低2,4-D 的浓度,该愈伤组织约以60%的频率转变为胚性愈伤组织,继而形成不同发育期的体细胞胚。这些体细胞胚是起源于愈伤组织表层或近表层的单个胚性细胞,体细胞胚经球形胚、梨形胚、盾片胚、成熟胚而成再生植株。在胚性细胞内淀粉粒大最积累,淀粉颗粒大而密集。随着胚性细胞的分裂,淀粉逐渐被消耗,到多细胞原胚期,胚体细胞内淀粉粒趋于消失。球形胚期淀粉粒又开始积累,但到成熟胚期,淀粉积累只限于生长点区域,尔后随着胚体萌发,淀粉含量又趋于减少。这一消长动态过程与小麦合子胚发生中淀粉代谢动态基本一致。     

小麦根尖细胞分化过程中DNA,RNA和蛋白质含量变化的研究

小麦(Triticum aestivum L.)种子在25℃条件下萌发3d,根生长至1～2cm长时,于双筒解剖镜下严格切取根分生区、伸长区和成熟区。用专一性荧光染料Hochest33258、Pyronin G和FITC分别染细胞核DNA、RNA和蛋白质,并用自动图像分析技术和细胞荧光测定术分别测定三个区中各125个细胞核DNA的相对含量和各100个细胞中RNA和蛋白质的相对含量。核DNA相对含量随着根尖细胞分化的进程,DNA含量递增,成熟区细胞中含量最高。RNA的相对含量则与之相反,在分生区细胞中含量最高,成熟区细胞中含量最低。蛋白质的相对含量则在伸长区细胞中最高,分生区细胞中最低。讨论了根尖细胞分化过程中DNA、RNA和蛋白质三者之间变化的一些内在联系。