薄层凝胶等电聚焦电泳的快速简便制胶方法

在薄层凝胶等电聚焦电泳技术中,制胶可谓是关键的一步。如果制胶失败,将造成时间上的浪费和经济上的损失(凝胶中所用的两性电解质载体——安福林的价格较昂贵)。如果制成的凝胶薄厚不匀或无支撑物,将会直接影响实验结果或给实验操作带来麻烦。我们针对这种情况,结合实验教学,摸索出一种快速、简便而效果较好的制胶方法。现简要介绍如下     

一种简单、快速、微量聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳方法

Bio-Rad公司的微量聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳(ModelⅢ Mini IEF Cell),不需要使用电极缓冲液,聚焦电泳时间仅用1.5小时,效果甚佳,但要使用该公司专有的凝胶支持薄膜,难于推广应用,我们经过试验,建立了一种简单、快速的微量凝胶等电聚焦电泳方法,40min完成等电聚焦过程,采用快速染色、脱色和干燥,将电泳图谱制成透明的薄膜,整个过程可以     

一种改进的超薄聚丙烯酰胺等电聚焦电泳实验

目的:介绍一种自制、简易、高效的平板微型聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳方法。方法:将载玻片黏合作为制胶模具,剪滤纸制成上样芯子进行等电聚焦电泳。结果:电泳条带清楚,样品容量大,电泳时间短,操作性强。结论:此方法简单、有效、实用,所需凝胶量少,节约成本,值得推广。     

用等电聚焦技术对两种斑鸠卵清蛋白的比较

用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦技术进行了珠颈斑鸠(Strptopelia chinensis chinensis)和山斑鸩(S.Orientalis orietalis)的卵清蛋白比较分析。结果表明.在pH3.5—10的梯度内,山斑鸠为21条带。珠颈斑鸠为18条带。其中主要区带的pI在4.5—6.0之间.其谱带较近似。在蛋白质分子水平上,两者是亲缘关系十分相近的两个种。     

南瓜单粒花粉可溶蛋白等电聚焦研究

利用显微操作方法对南瓜单个花粉可溶蛋白成功地进行了等电聚焦,获得了清晰的电泳谱带。分析其谱带表明,同一植株同一朵花上的花粉之间存在着蛋白谱带的差异,统计结果显示其按１：１的孟德尔规律分离。单花粉蛋白等电聚焦结合显微镜操作技术对于遗传育种和发衣生物学研究具有重要的应用前景。     

利用等电聚焦电泳研究黄单胞菌分类

对黄单胞菌的4个种及29个致病变种的代表菌株进行了等电聚焦电泳研究,发现所测定的黄单胞菌种间、致病变种间蛋白质图谱差别很大。电泳结果经聚类分析表明,某些致病变种间的差别并不一定比种间的差别小,说明某些致病变种可以上升到种这一分类地位。引起细菌性黑颖病的黄单胞菌禾谷致病变种、小麦致病变种、大麦致病变种间差别很小,仅有6条蛋白质谱带的差别。因此这3个致病变种的分类地位需重新考虑,同时说明等电聚焦电泳对黄单胞菌种下分类具有一定指导意义。     

单克隆抗体的等电聚焦

本文采用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦和Phast-system仪等电聚焦测定12份HBsAg McAb IgG的等电点,并对两种方法测定的误差和优缺点进行了讨论。     

一种改良的醋酸纤维素膜血清蛋白等电聚焦电泳方法

目前在等电聚焦电泳技术中,应用最多的是聚丙烯酰胺凝胶平板薄层等电聚焦。该法具有分辨率高的优点,但需采用高纯度试剂,价格昂贵,而且超薄层制板(≤0.5mm)技术要求也较高,这些条件限制了它的推广应用。利用醋酸纤维素膜进行等电聚焦,则可弥补上述缺点。但众所周知,醋酸纤维素膜存在较强     

超薄平板微型聚丙烯酰胺凝胶的等电聚焦电泳方法——介绍一种高效、快速的生物同工酶分析方法

介绍了一种简易、高效、快速的生物同工酶分析方法－－超薄平板微型聚丙烯酰胺凝胶的等电聚焦电泳 方法。该方法与目前国内外市场销售的同种用途等电聚焦产品（如ＢＩＯ－ＲＡＤ公司的ｍｏｄｅｌ１１Ｍｉｎｉ ＩＥＦ Ｃｅｌｌ）相比,具有以下优点：实验操作灵知,用途更广;谱带清晰;每次可实验的样本量大;电泳所需时间短;实验费用低;适用于多种酶系统的同工酶和等位酶分析;凝胶干燥不需任何设备且能长期保存;样本用量少。     

超薄平板微型聚丙烯酰胺凝胶的等电聚焦电泳方法--介绍一种高效、快速的生物同工酶分析方法

介绍了一种简易、高效、快速的生物同工酶分析方法——超薄平板微型聚丙烯酰胺凝胶的等电聚焦电泳方法。该方法与目前国内外市场销售的同种用途等电聚焦的产品 (如BIO- RAD公司的 model1 1 1 Mini IEF Cell)相比 ,具有以下优点 :实验操作灵活 ,用途更广 ;谱带清晰 ;每次可实验的样本量大 ;电泳所需时间短 ;实验费用低 ;适用于多种酶系统的同工酶和等位酶分析 ;凝胶干燥不需任何设备且能长期保存 ;样本用量少。     

我国有尾目三科代表种生物学和胚胎发育的比较

我国有尾目三科代表种生物学和胚胎发育的比较刘鉴毅（中国水产科学研究院长江水产研究所湖北沙市４３４０００）东方蝾螈（Ｃｙｎｏｐｓｏｒｉｅｎｔａｉｌｓ）、中国小鲵（Ｈｙｎｏｂｉｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）和中国大鲵（Ａｎｄｒｉａｓｄａ。ｉｄｉａｎｕｓ）在分类...     

目前最高分辨率的电泳──固相pH梯度等电聚焦

固相pH梯度等电聚焦是国际上80年代的新型电泳技术.利用一系列具有弱酸和弱碱性质的丙烯酰胺衍生物滴定时,在滴定终点附近形成的pH梯度并参与丙烯酰胺的共价聚合,从而形成固定的不随环境电场等条件变化的pH梯度,该方法具有比传统载体两性电解质等电聚焦更高的分辨率、更大的上样量.可用于分析和制备相近pI的蛋白质,多肽等.     

等电聚焦法测定2.5S NGF的等电点

采用水平等电聚焦法测定了２５Ｓｍ神经生长因子（ＮＧＦ）的等电点。经测定,纯化的２５ＳｍＮＧＦ的等电聚焦为三条带,这与文献报道相一致,等电点ｐＨ值分别为ｐＨ８７、９０、９３,其主要成分为β亚基ＮＧＦ及其修饰物的混合物,包括在羧基端失去８个氨基酸残基和在氨基端失去１个精氨酸残基,由这三种组分构成的ＮＧＦ统称为２５ＳｍＮＧＦ。     

全柱成像毛细管等电聚焦电泳测定艾塞那肽等电点

目的:采用新一代全柱成像毛细管等电聚焦电泳技术(CIEF-WCID)测定艾塞那肽等电点。方法:采用互补性金属氧化物半导体成像技术对样品等电聚焦过程进行实时记录,根据适宜的marker计算得到艾塞那肽的等电点,并对方法的准确度与重复性进行考察。结果:测得艾塞那肽等电点为5.46,与凝胶电泳结果基本一致,相对标准偏差为0.11%。CIEF-WCID方法快速准确,相对误差小于2.5%,重复性良好。结论:CIEF-WCID作为一种新的技术手段可用于艾塞那肽等电点的分析,方法快速、准确、重复性好,可为多肽的质量控制提供一种可靠的分析方法。     

普通烟草和黄花烟草及体细胞杂种过氧化物酶同工酶等电聚焦电泳

日本学者长尾照义(1978)用原生质体融合获得普通烟草与黄花烟草的体细胞杂种植株。1980年陈家玉等在国内首先获得普通烟草(Copus Yeusuku No.4)和黄花烟草(Yellow Flower)的体细胞杂种植株。之后,中国农科院烟草所(1981)也得到相同的结果。陈家玉等(1983)对上述杂种进行了形态学、细胞学和同工酶的分析并取得一定的结果。Dlineee等(1975)分析比较了用等电聚焦技术分离的过氧     

不同年龄,性别的眼镜蛇毒等电聚焦电泳及氨基酸分析

观察对不同年龄,不同性别的眼镜蛇毒分离和鉴定效果。方法等电聚焦电泳和氨基酸分析法。结果幼龄雄性眼镜蛇毒区带数远比成年者多,其氨基酸组成亦有不同。结论幼龄蛇与成年蛇蛇毒所含蛋白质种类和含量有所不同。     

循环自由流等电聚焦方法的建立及应用研究

等电聚焦是利用蛋白质分子或其它两性电解质分子的等电点不同,在一个连续、稳定、线性的pH梯度中进行蛋白质分析分离的技术。薄层凝胶等电聚焦具有高分辨率,但上样量小,聚焦后样品分析处理不便,仅局限于分析。循环自由流液相等电聚焦以液体循环流动代替固相载体,上样量大,聚焦后样品分析处理方便,有较大的制造潜力。Bier等已开展这项技术的研究。该技术应用到遗传工程上可对干扰素等进行精制纯化^[3]。本实验应用循环自由流等电聚焦仪(Recycling free-flow isoelectric fo-cusing,RIEF)进行了pH梯度的建立、模型化合物的分离、相关参数的比较,并被步应用于生物活性蛋白的精制和活性回收,旨在为遗传工程产品下游工艺提供一种新型而行之有效的方法。     

立枯丝核菌可溶性蛋白图谱研究 Ⅱ.用等电聚焦电泳比较各融合群及亚群

利用薄层(0.5mm)聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳对于pH3.5-10.0范围内立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)AG-1～AG-5各融合群及亚群共45个参试菌株的菌体可溶性蛋白进行了比较分析。参试菌株分别来自于日本、美国及国内鉴定的菌株。电泳结果表明:不同融合群或亚群的蛋白质图谱表现显著差异。AG-3、AG-4、A G-5各融合群和AG-1IA、IB,IC、AG-2-1、AG-2-2各亚群分别表现出各自的特征性图谱。以上结论与前篇(刘力、葛起新,1988)报道中的基本相符,且更为明确。针对试验结果,就可溶性蛋白等电聚焦电泳图谱与培养性状类型的比较以及不同菌培养时间对电泳结果的影响进行了分析讨论。