我国首个体细胞克隆牛胚胎移植中心成立

,中国农业大学和芦台经济技术开发区日前签署协议,中国第1个体细胞克隆牛胚胎移植中心在唐山正式成立。据了解,早在2001年,中国农业大学就和芦台经济技术开发区合作,建立了生物技术实验基地。第2年4月,中国第1头地方优质奶牛在芦台经济技术开发区诞生。此后,在这个开发区又陆续培育出5头体细胞克隆优质奶牛。今年又培育出具有世界最新药物蛋白基因的两头克隆奶牛。目前,芦台经济技术开发区的克隆牛成活率处于我国领先水平。此次成立的我国第1个体细胞克隆牛胚胎移植中心将成为华北地区克隆奶牛繁育基地和生物工程服务中心。摘自《科学时报》…     

国内首批克隆牛即将生产

山东银香伟业集团董事长王银香介绍说,2002年1、2月间在山东曹县五里墩降生的5头克隆牛已经全部怀孕,预产期为4月中上旬。中国科学院动物研究所陈大元教授说:“如果这一实验成功,将进一步证明克隆牛具有正常的生育繁殖能力。”此前,世界上第1头克隆羊“多莉”曾成功繁育过后代。2001年,中国科学院动物研究所在山东省曹县五里墩进行“家畜体细胞无性繁殖(克隆)”科学研究。2002年初,先后有14头体细胞克隆牛降生,成为中国第1批自主培育的本土克隆牛,并有5头顺利存活。摘自《科学时报》2004年3月26日国内首批克隆牛即将生产…     

利用核移植一卵产三头克隆犊牛获得成功

全国农业协作联合会(JA全农)的饲料畜产中央研究所的青柳敬人等利用核移植技术一卵产三头犊牛(双子×1,单子×1)获得成功。目前核移植的生存犊牛都是1卵产一头犊牛。从受精卵中得到三头存活犊牛在日本还是首例。除此之外,农林水产省家畜改良中心也预计今年11月中旬一卵生产五头犊牛克隆(双胞胎×2,单胞胎×1)。估计明年4月在枥本县酪农试验场诞生克隆牛。在日本克隆牛相继诞生。在这三年以美国、欧洲为中心确立克隆牛的生产技术。去年底报告了1卵产11头的克隆牛。加拿大Alta Genetics公司得到第Ⅲ代克隆牛、第Ⅳ代胚盘泡。     

世界首例二代克隆牛“茁壮成长”

著名美籍华人科学家、康涅狄格大学教授杨向中5月23日宣布,他和日本研究人员合作进行的克隆牛再克隆实验,即二代克隆牛实验已获得成功。这是世界上大动物再克隆实验的首个成功案例,标志着克隆技术又取得了新的突破。所谓二代克隆牛指的是用从第1代克隆牛身上取得的体细胞再次进行克隆。虽然再克隆实验早在6年前已在小鼠身上获得成功,但是在其他动物中的尝试,包括多莉羊的再克隆却一直没有成功。杨向中和日本鹿儿岛良种牛育种中心洼田力研究员继1998年使用一头日本著名种公牛的耳皮肤细胞克隆出4头第1代克隆牛后,又采集其中一头克隆牛的体细…     

体细胞克隆牛和转基因体细胞克隆牛的遗传学分析(英)

分析了来自同一细胞系的体细胞克隆牛甜甜、庆庆、浒娃及来源同一培养转基因体细胞系转基因体细胞克隆牛九妹、乐娃和1个妊娠8个月转基因流产胎牛8C2以及随机抽取的1头鲁西黄牛(LX)、1头褐斯坦牛(HS)在24个微卫星位点标记牛的基因型.结果表明24个多态位点均表现出多态,等位基因数为1～5个,平均为3.17个.根据网上公布的数据,按其最高频率计算,甜甜、庆庆、浒娃、九妹、乐娃、8C2与培养细胞系、转基因细胞系间匹配概率为1.17×10^－36,根据本研究观察到的数据计算,匹配概率为1.90×10^－23;而与随机抽取的1头鲁西黄牛及褐斯坦牛的基因型分别在23和20个位点上完全不同.     

热烈祝贺《动物学报》创刊70周年——莱阳农学院动物胚胎工程中心科研成果简介

2001年11月3日和6日,中国首例和第二例健康成活的体细胞克隆牛“康康”和“双双”在山东莱阳农学院动物胚胎工程中心实验场诞生。该项目是由山东省教育厅重大科研项目“克隆牛技术的研究（J01H06）”和莱阳农学院“克隆牛技术的研究（Y0006）”课题资助,研究出的体细胞克隆牛技术与国际上其他克隆牛技术相比,其创新点是：     

我国体细胞克隆牛的研究进展

近年来,由于体细胞克隆技术在畜牧业生产、疾病治疗、生物学基础理论研究及濒危动物保护等诸多领域所蕴藏的巨大应用价值,克隆效率成为科学界研究的热点问题。本文对克隆技术的相关影响因素进行了综述,研究表明,不同细胞系影响到体细胞克隆牛效率,胎儿细胞和颗粒细胞重构胚的囊胚发育率、犊牛成活率比成年成纤维细胞高。关于卵母细胞和克隆胚胎冷冻保存的研究表明,玻璃化冷冻法可以用于克隆胚胎以及卵母细胞的冷冻保存。在此基础上,讨论了国际上哺乳动物体细胞克隆研究新进展和体细胞克隆的效率,指出体细胞克隆中亟待解决的问题。     

小RNA与卵的生长

近日,中国农业大学成功地获得了中国第一头体细胞克隆猪,这是我国独立自主完成的首例体细胞克隆猪,标志着我国已成为第7个(继英国、日本、美国、澳大利亚、韩国及德国之后)拥有自主克隆猪能力的国家,填补了我国在这一领域的空白。猪的体细胞克隆难度     

初乳中乳腺上皮细胞体细胞克隆牛的诞生

《日经生物技术》１９９９年５月１０日第１５页报道：雪印乳业公司４月２６日宣布,来自初乳中乳腺上皮细胞的体细胞克隆牛诞生了。来自初乳中乳腺上皮细胞的体细胞克隆牛诞生也是世界首例。该公司受精卵移植研究所的研究组将含于黑白花荷兰牛种牛（雌牛）乳中的乳腺上皮细胞移植到除核的未受精卵中。核移植等实验方法使用的是英国Ｒｏｓｌｉｎ研究所的在血清饥饿状态下培养细胞的方法。移植给８头受胚牛时,确认３头妊娠,其中１头妊娠到第１５７天流产。１头于４月２０日（第２７９日）剖腹,另１头于４月２１日（第２８０天）人工分娩各…     

牛体细胞核移植显微操作环节的优化

本研究从牛卵母细胞去核方法(纺锤体观测仪法&Hoechst33342染色法)、供体细胞核引入去核卵细胞质的方法(卵细胞质注射法和电融合法)和重构胚胎电融合(3组参数)等3个环节对牛体细胞核移植的显微操作过程及相关参数进行了筛选优化。以核移植胚胎的卵裂率、囊胚发育率作为检测指标,对不同的方法所获得的克隆胚胎的卵分裂率与囊胚发育率进行比较,最后筛选获得1个优化的牛体细胞核移植操作程序,即采用Spindle view系统对牛卵母细胞进行去核操作,将供核体细胞注射到卵周隙,然后通过电融合法将供体核引入去核卵细胞质(电融合参数为1.9kV/cm,脉冲时程10μs,方波2次间隔2s)。以此核移植程序进行牛体细胞核移植实验,自获得克隆胚胎中筛选80枚优质囊胚移植到33头受体牛子宫内,最后2头母牛产下2头克隆牛犊,结果表明利用该优化的显微操作环节进行牛体细胞核移植可以获得体细胞克隆牛犊。     

体细胞克隆猪的研究进展

哺乳动物克隆不仅可以保护濒危动物 ,而且与干细胞工程技术相结合能应用于克隆性治疗 ,是目前生物技术领域研究的热点之一 ,具有重大的科学意义和应用价值。由于体细胞克隆猪在人类器官移植方面具有巨大的应用潜力 ,已成为当今体细胞克隆研究的热点。从 2 0 0 0年开始 ,在不同国家相继诞生了体细胞克隆猪及转基因猪 ,但是其成功效率很低 ( 1 %～ 2 % )。主要综述了影响体细胞克隆猪的几个因素 ,涉及胞质受体、供核细胞、显微操作、激活以及重组胚移植     

日本首例1卵产4头犊牛获成功

全国农业协同组合(JA全农)4月17日宣布,日本首例1卵产4头犊牛获得成功。这4头犊牛中克隆2头、亚克隆(2次反复核移植的)2头。预计今秋还有2组能生产含亚克隆(经过8次反复核移植的)牛的5头犊牛。使用核移植技术的克隆牛生产技术正稳步地进入实用化。     

转基因克隆牛

台湾大学农学院畜产学系科研人员用细胞核移植技术生产转基因克隆牛。其方法 :将受胎牛成纤维母细胞和卵丘细胞 ,经用电穿孔法把带有牛乳蛋白启动子 (α LA)序列与胞外岐氧化酶素 (ECSOD)的cDNA融合基因整合到其基因组 (genome)后 ,待 1月筛选并经PCR测试 ,证明已成功建立初代培养的两种供核细胞 ;另外应用这种携带有αLA ECSOD基因的受胎牛成纤维母细胞和牛卵丘细胞分别为供核源 ,经移植生产转基因克隆牛囊胚 ,试验结果共获 4 0个正常牛囊胚 ,其效率为 2 6 .7% (4 0 / 14 8)。将其中 2 0个源自核移植生产的囊胚移植于 13头受胚牛后…     

牛卵核移植技术的应用

用去核的牛卵母细胞进行核移植,形成重构胚,胚胎移植后,可产生克隆牛。将克隆牛的肉和奶制成肉粉和奶粉饲喂大鼠,大鼠的生理功能不受影响。牛卵核移植技术为珍稀动物的保护提供了一条重要途径,对于细胞治疗的研究也具有重要意义。通过牛卵核移植技术,可构建异种克隆胚胎,用以研究核质相互作用。将牛卵核移植技术和体细胞基因修饰技术相结合,可生产转基因克隆牛。     

日本日光地区森林中梅花鹿的夏季巢区面积和内部利用

为了估算梅花鹿(Cervusnippon)巢区面积和内部利用以及雌雄个体间的比较,于1993-1997年在日本国日光国立公园使用无线电遥测定位法测定了8头成年雌鹿和4头雄鹿(包括1头亚成年)在森林生境中的活动定位点。按照当地梅花鹿离开和返回越夏地的日期,使用每年6月1日至10月25日的无线电遥测定位数据,采用定值核心法(Fixed kernel)计算了梅花鹿的夏季巢区面积和内部利用密度分布。梅花鹿雄鹿夏季巢区面积(192·5±50·5 hm2)显著大于雌鹿(115·7±56·7 hm2,P=0·017) ,其半家区面积(HRS0·50)和核心区面积(HRS0·25)也显著大于雌鹿(依次为P=0·027和P=0·042) ,但巢区内部利用集中度指标Ah(HRS0·50/HRS0·95)和Ac(HRS0·25/HRS0·50)在雌雄鹿之间没有显著性差异(依次为P=0·999和P=0·234)。在无线电遥测的12头梅花鹿中, 11头个体的巢区为单核心型,只有1头成年雄鹿的巢区为双核心型。11头梅花鹿个体的混合数据显示巢区面积和体重之间存在显著性相关(P=0·049) [动物学报52 (2) : 235 -241 , 2006]。     

在Science杂志公开成牛体细胞克隆牛的实验数据

《日经生物技术》１９９８年１２月２１日号第１４页报道：于１９９８年１２月１１日号在Ｓｃｉｅｎｃｅ杂志上刊载了近畿大学农学部教授角田幸雄等小组进行的来自成牛的体细胞克隆牛培育的详细实验数据。该小组宣布,目前在世界上首次成功地诞生了来自成牛的体细胞克隆牛...     

大白×梅山杂交组合肉质性状的数量性状位点定位分析

为寻找影响猪肉质数量性状基因位点的染色体区域 ,以 3头英系大白公猪和 7头梅山母猪建立F2 资源家系。随机选留 14 7头F2 代个体 (1998年 81头 ,2 0 0 0年 66头 ) ,经检测均获得肉质性状表型数据。对资源家系内的所有个体位于染色体 1、2、3、4、6和 7上的 48个微卫星位点进行扩增。利用线性模型最小二乘法分别对各年度及两年综合后的肉质性状进行数量性状位点 (QTL)区间定位 ,利用置换法确定显著性阈值。研究结果表明 :在 2 0 0 0年群体中 ,猪 4号染色体 (SSC4)上定位了肌内脂肪QTL ,达到染色体极显著水平 (P <0 0 1)和基因组显著水平 (P <0 0 5) ,解释表型变异为 5 2 4% ,梅山猪具有增加肌内脂肪QTL ;两年度群体综合后 ,在上述 4号染色体同一区间 ,肌内脂肪QTL接近染色体显著水平 ;股二头肌pH值和半棘肌pH值QTL分别定位在SSC1和 3上 ;在 1998年和 2 0 0 0年群体中分别发现 1个和 3个达染色体显著水平 (P <0 0 5)的系水力QTL ;在 1998年群体中 ,肌肉含水量QTL位于SSC6;两年综合群体中 ,SSC2、6和 7上定位了肌肉含水量QTL ,达到染色体显著水平 ,含水量QTL均有印迹效应 ,梅山和大白猪各有增效基因     

重庆市柑橘介壳虫的发生态势

(中国植保网讯)柑橘蚧壳虫在重庆市以矢尖蚧为主,其次主要有黑点蚧、褐园蚧、红蜡蚧等,是柑橘生产上的重要害虫。据测报,预计重庆市2 0 0 4年第1代矢尖蚧为中等发生,局部地区为中等偏重发生,并在部分成年果园发生较重。预计全年发生面积约7 3 4万hm2 ( 1 1 0万亩) ,其中1代发生面积约5 3 4万hm2 ( 80万亩)。依据:( 1 )成虫基数较大。据各测报点5月上旬调查情况,渝北区目前百叶虫量平均为2 1 0 ( 1 80～3 60 )头;永川市百叶虫量平均5 0 4头,最高达1 1 4 3头;长寿区百叶虫量平均3 5头,最高76头;垫江县百叶虫量平均1 0 69 6头,最高达1 90 0头…     

克隆牛为克隆羊“作证”

克隆牛为克隆羊“作证”郑仲承（中国科学院上海生物化学研究所,上海２０００３１）关键词克隆羊克隆牛克隆羊多莉的诞生在社会各界引起强烈反响。但是,提供克隆用的体细胞的供体在制造多莉前就不在人世了,这些细胞是在液氮中“尘封”多年的。于是,有人质疑多莉的身份...     

甲基化对牛Igf-2r表达的影响及其在克隆牛发育中的作用

摘要：目的目前认为克隆效率低的主要原因是供体核的不完全重编程（reprogramming）导致在发育过程中一些重要的基因异常表达。本文主要研究表观遗传结构对Igf-2r表达的影响及其在克隆牛发育过程中的作用。方法 首先,运用DNA甲基化转移酶抑制剂5'-脱氧胞苷（5'-azacytidine,5'-AzaC）处理MDBK细胞（牛肾上皮细胞）,并通过实时荧光定量PCR方法对Igf-2r基因的表达进行定量分析。在此基础上,应用亚硫酸盐甲基化测序法检测5头克隆牛及1头正常牛脑、肺、心、肝组织Igf-2r印迹调控区DMR 2（DNA differentially methylated region,DMR）及非印迹调控区3'-UTR（3'-untranslated region,UTR）的DNA甲基化水平。结果 5'-aza处理MDBK细胞后,Igf-2r基因的表达上调。正常牛各组织中Igf-2r DMR 2区的DNA甲基化程度差异较大,3'-UTR区较稳定;与正常牛相比,克隆牛DMR 2区的甲基化程度变化较大,3'-UTR区无显著性变化。结论 DNA甲基化修饰影响Igf-2r基因的表达。正常牛不同组织中Igf-2r基因DMR 2区的DNA甲基化程度不同,提示Igf-2r基因的印迹调控方式在不同组织中可能不同。克隆牛发育过程中,调控Igf-2r基因印迹的DMR 2表观结构被明显改变,而非印迹调控区3'-UTR则无明显变化,提示Igf-2r基因印迹调控区被破坏,很可能是导致克隆牛发育异常的一个重要原因。关键词：Igf-2r,表观遗传结构,克隆牛,DNA甲基化,基因印迹