脱血红素细胞色素c插入磷脂单分子层能力的研究

介绍了一种改进的、用于研究膜脂-蛋白相互作用的气-液界面单分子层实验模型及实验装置,并在该实验装置上研究了来自马心和金枪鱼心的线粒体前体蛋白脱血红素细胞色素c与大豆磷脂单分子层的相互作用,实验结果表明这两种前体蛋白对大豆磷脂单分子层都具有较强的亲和性和插膜能力,其临界插膜压力分别为43mN/m、45mN/m.     

脱血红素细胞色素c对DMPG膜的插入研究

气－液界面单分子层实验发现鸡心脱血红素细胞色素ｃ对ＤＭＰＧ单分子层表现出很强的插入能力,这种插入能力受亚相溶液离子强度的调节。通过傅里叶变换红外光谱对鸡心脱血红素细胞色素ｃ与ＤＭＰＧ脂质体的作用进行了进一步研究,对磷脂不同区域的红外光谱分析表明鸡心脱血红素细胞色素ｃ不仅与ＤＭＰＧ头部存在静电相互作用而且与其疏水部分也存在相互作用。     

脱血红素细胞色素c与膜结合及插膜时的构象研究

应用特殊的单分子层样品制备技术,分别制备了与中性、酸性磷脂膜结合的和完全插膜的鸡心脱血红素细胞色素c样品,并运用圆二色谱(CD)、表面衰减全反射Fourier变换红外光谱(ATR-FTIR)对膜上蛋白的构象进行了鉴定.研究结果表明,蛋白在与膜结合及插入阶段的构象是不同的,膜界面性质的不同也会对蛋白的构象产生不同的诱导,在酸性磷脂DSPG膜表面,该蛋白是以α螺旋和β折叠混合的构象形式结合;而在中性磷脂DSPC膜表面是以β折叠为主的构象形式结合.插入 DOPG单分子层内时则是 α螺旋为主的构象形式.     

脱血红素细胞色素c的68~88肽段在插膜及与线粒体结合中具有关键作用

细胞色素c的前体蛋白——脱血红素细胞色素c是在细胞质中合成后运入线粒体的. 结合人工合成多肽及完整分子的缺失突变体探索了脱血红素细胞色素c跨膜转运中的关键肽段, 结果表明, 无论在单分子层插膜, 还是在与脂质体、线粒体的相互作用中, 脱血红素细胞色素c的68~88肽段都起着关键作用.     

C17S和H18D突变对鸡脱辅基细胞色素c跨线粒体膜输入的影响

体外转录鸡脱辅基细胞色素c(apocytochromec,简称apocyt.c)mRNA ,以之翻译apocyt.c并以3 5 S 甲硫氨酸标记 ,在纯化的鸡心线粒体上对它的跨膜转运与其经血红素加合酶催化转化为细胞色素c的关系进行了研究 .结果表明 ,即使在不利于形成细胞色素c的生化条件下鸡apocyt.c也能有效地输入线粒体 .为进一步证实apocyt.c的跨膜转运过程独立于转化为细胞色素c ,对apocyt.c的血红素结合位点进行基因的定点突变 ( 1 7位 :Cys→Ser;1 8位 :His→Asp) ,然后研究了 2个突变体apocyt.c的跨膜转运 .结果C1 7S和H1 8D都仍能有效地输入线粒体 ,但发现转运初速率已显著变慢     

日韩两国神经信息学的研究

第八届国际神经信息加工大会 (ＩＣＯＮＩＰ２００１)于２００１年１１月１４日 -１８日在上海举行［１］,这次会议由复旦大学主办 ,会议收到三百余篇论文 ,选出２９５篇作为会议发言和大字报展出 ,来自３１个国家和地区的代表出席会议 ,其中日本代表９５名。Ｉ ＣＯＮＩＰ２００１会后 ,在杭州召开中、日、韩三国神经生物学和神经信息学卫星会［２］ ,中日韩各有１０位代表(５位来自神经生物学 ,５位来自神经信息学 )在会上发言。作者有幸出席这二次会议 ,并代表中方就神经信息学的一个方面作发言。作者在会上遇到不少日韩两国的老朋友 ,据…     

BID蛋白因子诱导脂质体的渗漏和聚集

在大多数真核细胞凋亡中 ,线粒体扮演重要的角色。经一些因子诱导线粒体能释放细胞色素c、诱导凋亡因子 (AIF)等 ,从而引起一系列凋亡酶的激活反应 ,最后导致凋亡。Bcl-2家族蛋白具有调节线粒体释放细胞色素c和其它凋亡因子的作用 ,其中BID ,BAX ,BAK具有促进作用 ,而另一类Bcl-XL 则具有抑制作用。Bcl -2家族蛋白成员含有一些保守的微区称BH1 ,BH2 ,BH3 ,BH4等。BID分子只含有BH3微区。BID经凋亡酶8(Caspase8)处理后成为截短的Bid(truncatedBid,tBid),它能使线粒体明显渗漏或聚集 ,后者可在细胞核周围观察到这一现象。我们前曾报道tBid能诱导单层大脂体 (LUV )内包的胰蛋白酶或细胞色素c释放 ,本文研究并比较Bid ,tBid ,NBid(Bid分子的N端部分 )CBid(Bid分子的C端部分 )以及Bid的突变体 -Bid(D59A)和Bid(G94E)诱导LUVs释出内包的胰蛋白酶。结果表明 ,CBid、Bid和tBid具有相似的效果 ,而NBid ,Bid的两种突变体Bid(D59A)和Bid(G94E)则不能。如果比较上述几种蛋白因子与大豆磷脂脂质体的亲和力 ,其大小与它们诱导脂质体内包的胰蛋白酶泄出的能力相平行 ,即 ,tBid>Bid>Bid(D59A) ,而NBid和Bid(G94E)则几乎不能与脂质体相结合。Bid诱导脂质体的泄漏也与其磷脂组份有密切关系。脂质体中酸性磷脂 (如磷脂酸PA     

从美国生物物理学会第46届年会看国际生物物理发展趋势

由美国生物物理学会举办的第４６届年会于２００２年２月２３ -２７日在加州旧金山Ｍｏｓｃｏｎｅ会议中心举行 ,来自美国各地和其他国家的６０００余名代表出席了为期３天半的会议 ,与２００１年在波士顿的会议相比 ,参会代表人数增加了约５ %。来自亚洲国家的会议代表也占了相当的比例 ,其中日本代表无论在人数上和论文质量上都远远高于亚洲其他国家。笔者从２１日至２７日全程参加了此次会议 ,深切体会到美国生物物理大会对国际生物物理发展的影响 ,它虽然是一年一度的美国国内会议 ,但其规模远大于三年一届的国际生物物理大会(ＩＵＰＡ…     

劳埃晶体学时代的到来

(连载第十七卷第三期 )６．２．４胰蛋白酶（Ｔｒｙｐｓｉｎ） :扩散激发的 ｐＨ跳跃测定有序的催化溶剂结构Ｓｉｎｇｅｒ等人（１９９３）的研究表明通过仔细选择一个特异的底物有可能改变一个多步反应的动力学轨迹 ;ｐＨ跳跃能提供一个有效的 ,依赖于扩散的方法在整个晶体范围内触发一个慢催化事件。在这个例子中 ,丝氨酸蛋白酶胰蛋白酶在亲核反应残基Ｓｅｒ１９５处被 ｐ-胍基苯甲酸（ＧＢ）酰化。这个底物很容易形成一个酰基化酶中间物 ,但进行水解和再生游离酶却很慢。ＧＢ结合的胰蛋白酶单晶在 ｐＨ５．５下装在流槽中 ,在５秒钟内 ,…     

沉痛悼念路荣昭教授

中国共产党党员、中国科学院植物研究所教授路荣昭同志因心脏病突发、抢救无效 ,于２００１年４月１０日１７ :５０分在北京逝世 ,享年６９岁。路荣昭同志１９３３年１月２日出生于安徽省安庆市。１９５１年９月至１９５５年７月就读于北京农业大学农学系 ,毕业后到中国科学院原子能研究所工作 ,同年到中国科学院上海植物生理研究所罗宗洛教授的实验室进修。１９６２年由原子能研究所调到中国科学院植物研究所工作 ,先后在细胞研究室和光合作用研究室从事研究工作。其间于１９８０年１１月至１９８１年１月作为访问学者到美国凯特林实验室工…