HMGB1在卵巢癌中的表达及临床意义

目的:探讨高迁移率组蛋白B1(HMGB1)在卵巢癌患者血清及组织中的表达及临床意义。方法:采用ELISA技术检测96例女性血清中HMGB1水平,其中盆腔肿物住院患者66例按照术后病理结果分为卵巢良性肿瘤组40例和卵巢癌组26例,健康女性30例作为正常对照组,并通过免疫组织化学技术进一步检测卵巢癌、卵巢良性肿瘤组织中的表达情况。结果:卵巢癌组HMGB1水平明显高于其他两组,差异有统计学意义(P<0.05),正常对照组和卵巢良性肿瘤组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:HMGB1测定有助于鉴别卵巢良恶性肿瘤。     

p27kip1、Cyclin D1在卵巢癌中的表达及临床意义

目的探讨p27kip1、Cyclin D1在卵巢癌发生方面的意义.方法应用免疫组织化学方法及半定量分析方法,检测50例卵巢癌、19例卵巢良性上皮肿瘤、 13例正常卵巢组织中的p27kip1和Cyclin D1表达,并分析它们与良恶性肿瘤、病理学分级、临床分期的相关性. 结果正常卵巢和卵巢良性肿瘤间,p27和Cyclin D1的各自表达无明显差异;p27在正常卵巢组织和卵巢良性上皮肿瘤中高表达,在卵巢癌中表达降低(P<0.05),且随着肿瘤分级、分期增高(恶性程度增高),阳性表达率逐渐下降;而Cyclin D1的表达则相反;两者在肿瘤中的表达呈负相关.结论 p27kip表达下降、Cyclin D1过表达可能在卵巢癌的发生中起重要作用,检测p27kip1、Cyclin D1在卵巢癌中的表达可预测肿瘤生物学行为特征,可以作为判断预后的指标.     

HIF-1α 在卵巢癌中的表达及与化疗耐药相关性研究

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在卵巢癌中的表达及其在卵巢癌化疗耐药中的作用。方法:采用免疫组化方法,检测96例卵巢癌组织,45例良性卵巢肿瘤和30例正常卵巢组织中HIF-1α的表达,分析其表达与临床病理特征及化疗耐药的相关性。结果:卵巢癌中HIF-1α的表达高于正常卵巢及良性卵巢肿瘤组织,且临床分期越晚其表达越高(P<0.001),而与肿瘤组织类型、病理分级及患者年龄无显著相关性。HIF-1α在卵巢癌化疗耐药组阳性率明显高于化疗敏感组(P<0.001)。结论:卵巢癌中HIF-1α高表达与卵巢癌的发生、发展、浸润和转移有关,与卵巢癌化疗耐药密切相关,HIF-1α可成为卵巢癌化疗新的分子治疗靶点。     

神经纤毛蛋白1在卵巢癌组织标本中的表达及临床意义

目的 检测神经纤毛蛋白1(neuropilin 1,NRP1)在卵巢癌组织中的表达水平与病理特征的关系,为其治疗和预后提供理论指导.方法 选取2013年至2019年于西安交通大学第一附属医院治疗的120例卵巢癌患者及配对的癌旁组织23例,利用实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹分析、免疫组织化学染色分别检测NRP1在卵巢癌...     

卵巢癌中HMGB1、BRCA1和p62蛋白的表达与其化疗敏感性的相关性

为了探讨卵巢癌中HMGB1、BRCA1和p62蛋白的表达与化疗敏感性的相关性,培养卵巢癌顺铂化疗耐药细胞ES-2和敏感细胞SKVO3,顺铂100 mg/m2环境培养5 d,分别采用Western blotting法和RT-PCR方法检测两种细胞中的HMGB1、BRCA1和p62蛋白表达情况,采用流式细胞术测算细胞凋亡率。敏感组细胞SKOV3和耐药组细胞ES-2中,BRCA1蛋白表达率分别为(38.08±22.56)%和(45.65±22.42)%,HMGB1蛋白表达率分别为(75.13±16.45)%和(83.08±24.22)%,p62蛋白表达率分别为(52.31±25.13)%和(37.26±21.09)%;顺铂处理后,敏感组SKOV3细胞中BRCA1蛋白表达量显著提高(p0.05),耐药组ES-2细胞中p62蛋白相对表达量高于敏感组SKOV3细胞(p0.01)。卵巢癌化疗后HMGB1下调与BRCA1、p62上调共存;卵巢癌中BRCA1蛋白的不同表达与化疗敏感性相关,其水平变化有可能作为一种新的肿瘤标志物,动态观察卵巢癌病情进展,为临床治疗提供客观指标。     

MMP-2、MMP-7在卵巢癌中的表达及其临床意义

目的 探讨MMP-2、MMP-7的表达与卵巢癌临床病理生物学行为的关系以及对患者预后的影响.方法 应用核酸原位杂交和免疫组化对97例卵巢上皮性癌和23例卵巢上皮性良性肿瘤组织进行MMP-2、MMP-7mRNA及蛋白的检测.结果 MMP-2、MMP-7 mRNA及蛋白的表达阳性率在卵巢癌组均显著高于良性肿瘤组(P<0.05).多因素分析,PTNM分期、MMP-2及MMP-7的表达是影响卵巢癌根治术后患者预后的独立因素(P<0.05);MMP-2阳性组与阴性组5年生存率分别为30.6%和76.0%,MMP-7阳性组与阴性组5年生存率分别为19.7%和80.6%,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 MMP-2、MMP-7的过表达促进卵巢癌的浸润和转移,联合检测MMP-2和MMP-7可能作为预测和评价患者预后的生物学指标.     

卵巢癌DKK-1的表达与肿瘤转移的相关性研究

目的：探讨DKK-1在卵巢上皮癌和淋巴结转移癌中表达及其与肿瘤侵袭的关系。方法：应用免疫组化SABC法,对80例卵巢上皮肿瘤手术标本进行DKK-1蛋白表达的测定。结果：DKK-1在卵巢上皮癌中阳性表达率为70．9％,其明显高于良性肿瘤及正常组织（P〈0．01）,有淋巴结转移的肿瘤的阳性表达率为46．7％,无淋巴结转移的肿瘤阳性表达率为80．0％,DKK．1低表达与卵巢癌侵袭和淋巴结转移关系密切（P〈0．05）。不同细胞分化等级与临床分期间DKK-1表达无明显差异（P〉0．05）。结论：DKK—1蛋白的表达下降可能是上皮性卵巢癌发生转移的一个早期事件,有望成为预测卵巢癌发生转移及判断患者预后的参考指标。     

血清长链非编码RNA MALAT-1 在卵巢癌诊断中的临床意义

目的:探讨血清长链非编码RNA MALAT-1检测在卵巢癌患者中的诊断作用。方法:收集187例在我院行卵巢肿瘤切除术患者术前血清。应用实时定量PCR检测血清中MALAT-1 m RNA的表达。MALAT-1 m RNA的拷贝数使用绝对定量(标准曲线)计算。MALAT-1的诊断价值采用ROC-AUC曲线和logistic回归分析并与血清CA125进行比较。结果:1本研究有效样本比例为88.77%(166/187)。卵巢良性肿瘤和恶性肿瘤比例分别为62.05%(103/166)和37.95%(63/166)。卵巢恶性肿瘤患者MALAT-1明显高于良性肿瘤患者(p0.001)。经ROC曲线分析,血清CA125和MALAT-1曲线下面积分别为0.726和0.844,且血清MALAT-1的诊断价值明显优于血清CA125(p=0.023)。经logistic回归分析,应用血清MALAT-1和CA125的预测准确性分别为78.92%和68.07%,应用血清MALAT-1可提高预测准确性10.85%。进一步的分析得出,取血清MALAT-1截断点为36.5时,其预测的敏感性和特异性分别高达84.1%和67.0%。结论:血清长链非编码RNA MALAT-1检测对卵巢肿瘤的性质具有良好的预测作用,可作为卵巢癌早期诊断的分子标志物。本研究结果需大样本前瞻性的研究进一步验证。     

Eotaxin-1在浆液性卵巢癌组织中的表达及临床意义研究

目的:研究嗜酸性粒细胞趋化因子1(Eotaxin-1)在浆液性卵巢癌组织中的表达及临床病理意义。方法:收集2013年4月至2014年5月于我院妇产科手术切除的60例浆液性卵巢癌及对应癌旁组织,采用免疫组织化学染色检测Eotaxin-1表达,分析Eotaxin-1蛋白与肿瘤临床病理资料之间的相关性。结果:浆液性卵巢癌组织中Eotaxin-1蛋白表达水平较对应癌旁组织显著升高(P0.05),浆液性卵巢癌组织中高表达Eotaxin-1蛋白与恶性组织病理分级、淋巴结转移及高TNM分期呈显著正相关(P0.05)。结论:Eotaxin-1蛋白在浆液性卵巢癌组织中表达上调,并与肿瘤恶性临床病理特征有关;Eotaxin-1可能成为浆液性卵巢癌早期诊断的重要标志物和生物靶向治疗的有效靶点之一,具有广阔的临床应用前景。     

HMGB1在胃癌组织及细胞系中表达的研究

目的:近年来的研究表明,高迁移率族蛋白(1HMGB1)在肿瘤的发生及恶性演变过程中发挥重要作用,本研究旨在探讨HMGB1在胃癌组织、正常组织、胃癌细胞系SGC-7901、BGC-823、HGC-27、AGS及正常胃黏膜细胞系GES中表达情况。方法:免疫组织化学法检测HMGB1在32例可手术切除的胃癌患者组织标本(包括癌组织和正常组织)的表达情况;RT-PCR及Westren Blot检测HMGB1在胃癌细胞系SGC-7901、BGC-823、HGC-27、AGS及正常胃粘膜细胞系GES的m RNA及蛋白质表达。结果:胃癌组织HMGB1免疫组织化学染色评分高于正常组织(P0.05);RT-PCR结果显示SGC-7901、BGC-823、HGC-27、AGS、GES细胞系HMGB1 m RNA表达丰度均较高;Westren Blot检测发现胃癌细胞系SGC-7901、BGC-823、HGC-27中HMGB1蛋白水平显著高于胃癌细胞系AGS及正常胃粘膜细胞系GES。结论:HMGB1在胃癌组织及正常组织中的表达具有显著性差异。胃癌细胞系SGC-7901、BGC-823、HGC-27相对于其它胃细胞系存在HMGB1高表达,适合后续基因敲除分析工作。     

人HMGB1分子的克隆、重组蛋白表达与生物学活性

采用RT-PCR,从重症肝炎病人外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells PBMCs）的mRNA中扩增高迁移率族蛋白1（high mobility group box－1 protein,HMGB1）基因,构建重组表达质粒pGEX4T-1-HMGB1,转化入大肠杆菌,测序证实其序列与基因数据库中HMGB1基因(NM_002128)一致。诱导表达的融合蛋白GST-HMGB1,用Glutathione Sepharose 4B亲和层析纯化,经Thrombin酶切得到HMGB1。结果显示：经Western-blotting检测,GST-HMGB1 和HMGB1均具有免疫活性; ELISA和MTT检测发现,两者均能刺激RAW264.7细胞产生大量TNF-α,明显刺激HeLa细胞增殖。GST-HMGB1具有良好的生物学活性,为今后的研究打下了基础。     

肺癌患者血清CEA、CYFRA21-1和NSE的检测及临床意义

目的探讨外周血癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的检测对肺癌的诊断、病理分型和疗效判断的临床用价值。方法采用化学发光法检测了62例肺癌患者、54例良性肺部疾病患者、36例健康人、40例肺癌患者手术前后血清CEA、CYFRA21-1和NSE的水平。结果肺癌患者手术前血清CEA、CYFRA21-1和NSE的含量明显高于良性肺部疾病组及正常对照组(P0.01)。鳞癌组、腺癌组和小细胞癌组之间肿瘤标志物CEA、CYFRA21-1和NSE水平差异有统计学意义。CEA阳性率以腺癌组最高(84%),CYFRA21-1阳性率以鳞癌组最高(85.2%),NSE阳性率以小细胞癌组最高(80.0%)。手术治疗后未复发转移组CEA、CYFRA21-1和NSE水平低于术前,而复发转移组与术前比变化不显著(P0.05)。结论血清CEA、CYFRA21-1和NSE的检测对不同病理类型肺癌患者的诊断、病情检测及疗效判断有较好的临床参考价值。     

Overexpression of CLIC1 in human gastric carcinoma and its clinicopathological significance

Gastric cancer is the second most common cancer worldwide and the fifth leading cause of cancer-related death in Taiwan. Identification of biomarkers is essential to improve patient survival. Fifty aberrantly expressed proteins were identified using 2-DE combined with MALDI TOF MS and were grouped based on their function. The overexpression of proteins was confirmed using real-time quantitative RT-PCR, Western blot, and immunohistochemical analysis. The clinicopathological correlations and prognostic significance of these aberrantly expressed proteins were evaluated to determine the novel gastric cancer biomarkers. In this study, expression of chloride intracellular channel 1 (CLIC1) is significantly up-regulated in 67.9% of gastric patients and was selected for further study. The CLIC1 expression in tumor tissues was increased by 1.95-fold (range, 0.01-6.19-fold) compared with that expressed by adjacent noncancerous mucosa. Elevated CLIC1 expression was strongly correlated with lymph node metastasis, lymphatic invasion, perineural invasion, and pathological staging. Additionally, the 5-year survival rate for the low CLIC1 expression group (n = 28; <1.72-fold) was higher than that for the high CLIC1 expression group (n = 28; >or=1.72-fold) (log rank, p = 0.0300). Experimental results indicate that overexpression of CLIC1 is a potential prognostic marker for gastric cancer.     

HIV感染者/AIDS病人高迁移率族蛋白1的表达及其临床意义

通过检测74例处于不同病期的HIV感染者/AIDS患者和10例健康对照者PBMCs中HMGB1 mRNA的表达水平及其外周血浆HMGB1、TNF-a和IL-2水平,比较各组之间表达水平的差异及其与CD4＋T淋巴细胞的关系.发现HMGB1 mRNA的表达水平及血浆HMGB1含量在AIDS病人组明显高于感染者组和正常对照组（P〈0.05）;AIDS患者经HAART治疗后疗效差组HMGB1 mRNA的表达水平及血浆HMGB1含量也明显高于疗效好组（P〈0.05）;而经HAART治疗后效果好且免疫功能恢复的患者HMGB1 mRNA的表达及血浆HMGB1含量均较治疗前明显下降（P〈0.05）;当CD4＋T细胞数低于200/μL时,血浆HMGB1含量以及PBMCs中HMGB1 mRNA表达水平与CD4＋T细胞数呈负相关.显示HMGB1在HIV/AIDS发病及病情进展过程中可能起重要作用,HMGB1血浆含量及PBMCs中HMGB1 mRNA的表达水平高低与HIV/AIDS患者病情轻重密切相关.     

人高迁移率族蛋白B1，高迁移率族蛋白B1Abox和Bbox的原核表达、纯化及高迁移率族蛋白B1多克隆抗血清的制备

目的：获取重组人高迁移率族蛋白B1（HMGB1）,HMGB1Abox和Bbox的纯化蛋白,制备HMGB1的多克隆抗血清。方法：采用PCR方法扩增人HMGB1,HMGB1的Abox和Bbox目的基因片段,构建原核表达载体,进行原核表达与蛋白纯化,然后用HMGB1免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗血清。采用ELISA检测抗血清效价,用免疫组化检测HMGB1在小鼠肝损伤组织中的表达。结果：成功构建了人HMGB1,HMGB1的Abox和Bbox原核表达载体pET28-HMGB1、pET28一Abox、pET28-Bbox,在E．co1iBL21中表达,镍亲和层析柱提纯,获取纯净目的蛋白。HMGB1免疫新西兰大白兔后,抗血清效价为1：2,000,000,具有高度特异性。免疫组化显示小鼠坏死肝组织HMGB1表达增加。结论：本研究获得了人HMGB1以及HMGB1的Abox和Bbox的纯化蛋白,制备了人HMGB1的多克隆抗血清,为HMGB1的结构、组织表达谱及其功能的研究奠定了基础。