PDIA1和EF1D在左侧和右侧结肠癌差异表达的实验研究

目的：初步确定蛋白质二硫化异构酶A1和延伸因子1-delta为左侧和右侧结肠癌中差异表达蛋白,为左侧和右侧结肠癌在肿瘤生物学方面的差异提供分子遗传学依据。方法：收集人左侧结肠癌（LSCC）和右侧结肠癌（RSCC）组织标本,进行二维凝胶电泳、质谱分析和生物信息学分离和鉴定左右侧结肠癌中差异表达蛋白质,进一步应用RT—PCR、WesternBlot和免疫组织化学技术检测蛋白质二硫化畀构酶A1和延伸因子1-delta在左侧和右侧结肠癌中的表达状态。结果：筛选并成功鉴定出左侧和右侧结肠癌中16种差异表达蛋白质,与右侧结肠癌比较,lO种蛋白在左侧结肠癌表达上调,6种蛋白在左侧结肠癌表达下调,其中蛋白质二硫化异构酶A1在左侧结肠癌中表达上调,延伸因子1-delta在左侧结肠癌中表达下调,并通过RT-PCR、Western Blot和免疫组化方法证实了在左侧和右侧结肠癌中该两种蛋白表达的差异,与蛋白质组学结果一致。结论：左侧结肠癌和右侧结肠癌的蛋白质组存在差异,其中蛋白质二硫化异构酶A1和延伸因子1—delta在mRNA和蛋白水平均存在差异,这些可能是左侧和右侧结肠癌生物学行为差异的原因。     

PDIA1 和EF1D 在左侧和右侧结肠癌差异表达的实验研究

目的:初步确定蛋白质二硫化异构酶A1和延伸因子1-delta为左侧和右侧结肠癌中差异表达蛋白,为左侧和右侧结肠癌在肿瘤生物学方面的差异提供分子遗传学依据。方法:收集人左侧结肠癌(LSCC)和右侧结肠癌(RSCC)组织标本,进行二维凝胶电泳、质谱分析和生物信息学分离和鉴定左右侧结肠癌中差异表达蛋白质,进一步应用RT-PCR、Western Blot和免疫组织化学技术检测蛋白质二硫化异构酶A1和延伸因子1-delta在左侧和右侧结肠癌中的表达状态。结果:筛选并成功鉴定出左侧和右侧结肠癌中16种差异表达蛋白质,与右侧结肠癌比较,10种蛋白在左侧结肠癌表达上调,6种蛋白在左侧结肠癌表达下调,其中蛋白质二硫化异构酶A1在左侧结肠癌中表达上调,延伸因子1-delta在左侧结肠癌中表达下调,并通过RT-PCR、Western Blot和免疫组化方法证实了在左侧和右侧结肠癌中该两种蛋白表达的差异,与蛋白质组学结果一致。结论:左侧结肠癌和右侧结肠癌的蛋白质组存在差异,其中蛋白质二硫化异构酶A1和延伸因子1-delta在mRNA和蛋白水平均存在差异,这些可能是左侧和右侧结肠癌生物学行为差异的原因。     

PTEN基因通过调控ROS抑制结肠癌细胞增殖

为了探讨PTEN基因在结肠癌中的作用以及其机制研究,MTT法检测结肠癌细胞细胞增殖;蛋白免疫印迹检测结肠癌细胞中Ki67蛋白的表达;DCFDA染色流式细胞仪检测结肠癌细胞中ROS水平。结果表明PTEN基因能明显抑制结肠癌细胞细胞增殖;PTEN基因能显著降低结肠癌细胞中Ki67蛋白的表达;细胞内ROS水平在PTEN基因处理组中明显高于空质粒结肠癌细胞组;NAC预处理可明显抑制PTEN基因抑制的细胞增殖;NAC预处理可显著抑制PTEN基因对结肠癌细胞Ki67蛋白的降低作用。PTEN基因能够抑制结肠癌细胞增殖并上调结肠癌细胞内ROS水平。     

结肠癌中p63蛋白表达及临床病理意义

研究结肠癌中p63蛋白表达及与临床病理生物学行为的关系,揭示其在结肠癌中的临床病理学意义.癌旁组织中和结肠癌组织p63阳性率分别为42%和74%.两组间比较存在显著差异(P<0.01).p63阳性率在结肠癌组织浸润达粘膜层、肌层中为62%,在结肠癌组织浸润达浆膜层中为91%,两组间比较存在差异(P<0.05);p63阳性率在发生淋巴结转移的结肠癌组织中为86%.在无淋巴结转移的结肠癌组织中为59%,两组间比较存在差异(P<0.05);p63阳性率在A B期结肠癌组织中为57%,在C D期结肠癌组织中为89%,两组间比较存在差异(P<0.01);p63阳性率在高分化结肠癌组织中为55%,在中低分化结肠癌组织中为87%,两组间比较存在差异(P<0.05).p63表达上调参与结肠癌发生,并与结肠癌侵袭、淋巴结转移和临床演进关系密切.     

乳酸菌与结肠癌

摘要:流行病学调查表明,结肠癌的发病率逐年增高。结肠癌的发病是多因素协同作用的结果,这使得对结肠癌的预防和治疗都面临困境。研究普遍认为人体肠道微生态系统的平衡是预防结肠癌的关键,而摄入乳酸菌可起到维持肠道微生物菌群平衡的作用。因此,乳酸菌的生物学功能和抗肿瘤作用日渐受到研究人员的关注。本文结合我们课题组的研究成果,从结肠癌的发病原因着手,详述了乳酸菌抑制结肠癌的可能途径或机制,最后总结了乳酸菌各成分及其代谢产物在潜在抑制结肠癌过程中发挥的作用。     

宝鸡地区80 例结肠癌患者发病危险因素研究

目的:探讨宝鸡地区结肠癌患者的发病的高风险因素,为减少宝鸡地区结肠癌的发病率和死亡率采取有效措施提供理论依据。方法:对我院收治的80例结肠癌患者的病史资料进行统计分析,通过收集同期入院的非癌结肠疾病患者作为对照资料,对危险因素进行详细对比,通过单因素分析和Logistics回归分析,得出高风险影响因素。结果:流行病学研究表明,结肠癌发病率随着年龄的增加显著上升,且在发病患者中,男性患者显著多于女性患者(P0.05)。而结肠癌的病灶分布部位表明,乙状结肠癌发病率最高;单一风险因素的研究表明,低膳食纤维饮食、糖尿病史、高血压史、结肠癌家族史、以及结肠炎史都显著影响结肠癌的发病率(P0.05);Logistics多因素分析表明低膳食纤维饮食、糖尿病史、高血压史和结肠癌家族史是结肠癌的主要危险因素(P.0.05)。结论:高血压、糖尿病、结肠癌家族病史以及低膳食纤维饮食是宝鸡地区结肠癌患病的主要风险因素。为控制宝鸡地区结肠癌的发病率,需要针对性的对结肠癌高危人群进行理论指导和及时的筛查与对应干预措施。     

凋亡相关蛋白与多药耐药相关蛋白在结肠癌的表达及其意义

目的研究凋亡相关蛋白Bcl-2、P53和多药耐药相关蛋白Pgp、MRP在结肠癌中的表达,探讨之间的相关性及病理意义。方法用免疫组织化学SP法检测43例结肠癌和16例正常结肠中的Bcl-2、P53、Pgp和MRP的表达。结果Bcl-2、P53、Pgp和MRP在结肠癌组织中的阳性表达率分别为79％、74％、91％和77％,明显高于在正常结肠组织中的表达（P〈0．05）。Bcl-2的表达与结肠癌的分化程度密切相关（P〈0．01）,Pgp的表达与结肠癌的淋巴结转移和临床分期密切相关（P〈0．05）,MRP的表达则与结肠癌的分化程度、淋巴结转移、临床分期均密切相关（P〈0．05）。结肠癌组织中Bcl—2与P53、Pgp、MRP的表达之间呈显著的正相关（r=0．324,P〈0．05;r=0．330,P〈0．05;r=0．508,P〈0．01）。结论结肠癌中存在Bcl-2、P53、Pgp和MRP蛋白表达的显著上调,提示结肠癌组织可存在多种多药耐药发生机制。Pgp和MRP的阳性表达与临床病理特征密切相关,可将二者阳性表达率的上调作为结肠癌预后不良的指针。结肠癌组织中Bcl—2表达与种多药耐药相关因子P53、Pgp、MRP密切相关,提示结肠癌的发生与笺药耐药相关因子之间可能存在一定内在的联系,而Bcl-2在结肠癌多药耐药发生过程中发挥极其重要的作用。     

左半结肠癌和右半结肠癌基因差异表达谱的建立

目的:初步探索左半结肠癌和右半结肠癌中基因表达的差异,为左右半结肠癌生物学特性上的差别提供分子遗传学依据。方法:以左右半结肠癌组织为研究对象,提取组织总RNA,依次进行样品RNA进行荧光标记,杂交和清洗,芯片扫描和芯片图像的采集和数据分析。结果:成功建立了左半结肠癌,左半结肠癌旁,右半结肠癌,右半结肠癌旁的基因表达谱,应用SAM软件分析比较得到左半结肠癌与右半结肠癌的差异基因共有11个,包括乳酸脱氢酶B链,泛素D,磷脂酰-4-3磷酸激酶C2-α,FAT,双特异性蛋白磷酸酶2,细胞周期蛋白依赖性激酶4抑制剂D,酪蛋白激酶-1结合蛋白,突触结合蛋白-13,锌指蛋白560,公认未定性蛋白,IgGFc结合蛋白。左半结肠癌旁与右半结肠癌旁的差异基因共有4个,包括金属蛋白酶7,早期生长反应蛋白1,左半结肠癌旁组织中下调的基因包括突触孔蛋白,膜相关磷脂酶A2基因。结论:左半结肠癌和右半结肠癌以及相应癌旁组织中存在差异表达基因,这些基因表达的差异可能是左右半结肠癌生物学性质差异的分子遗传学基础。     

结肠癌干细胞:信号通路抑制剂与肿瘤耐药性

作为当前威胁人类生命的常见癌症之一,结肠癌的复发与转移严重影响了患者的预后,而近年来肿瘤干细胞理论的兴起则为肿瘤治疗提供了全新的思路。在结肠癌中,结肠癌干细胞不仅参与肿瘤的复发与转移,同时,还能引起癌细胞对化疗药产生耐药性。因其生长依赖于多种信号通路的作用,故靶向结肠癌干细胞生长所需的信号通路将成为未来根治结肠癌的重要研究方向。现就目前关于结肠癌干细胞信号通路的分子靶向抑制剂研究进展及结肠癌干细胞与化疗药耐药性的关系作一综述。     

CyclinD1在结肠癌中的检测及意义

目的探讨结肠癌组织中Cyclin D1的表达量及与结肠癌发生和发展的关系及意义。方法选取2012年至2014年广西医科大学附属肿瘤医院手术切除的结肠癌标本105例,观察Cyclin D1表达情况。结果 Cyclin D1的表达率与临床分期、分化程度、有无淋巴结转移有关(P0.05);结论Cyclin D1蛋白与结肠癌的分化程度有关,提示在结肠癌的预后判断有重要价值。     

S100A4基因在结肠癌中的表达及意义

目的：通过检测S100A4基因在结肠癌细胞系及结肠癌组织中的表达,探讨其与结肠癌的关系。方法：运用RT-PCR法检测不同结肠癌细胞系中S100A4基因的表达情况;通过原位杂交和免疫组化方法检测61例结肠癌标本中S100A4基因的表达。结果：结肠癌细胞系Lovo及HT29均有S100A4基因表达。S100A4蛋白和RNA在结肠癌中表达率分别为36．1％和34.4％,而在正常结肠组织中不表达（p〈0．05）。临床分期晚比临床分期早的患者S100A4表达明显增高（p〈0.05）;有淋巴结转移的患者比无淋巴结转移的患者S100A4表达明显增高（p〈0．05）。此外,S100A4表达还与肿瘤大小,病理学分级,肉眼分型等相关。结论：结肠癌中S100A4基因表达增高,而且与肿瘤的侵袭及转移密切相关,是判断结肠癌生物学行为及预后的有价值的指标。     

MS4A12基因在结肠癌中的表达及对结肠癌细胞增殖的影响

探讨MS4A12基因在结肠癌发生过程中的表达及其与结肠癌细胞增殖的关系,利用GEO数据库下载含正常结肠、不典型增生结肠腺瘤和结肠癌组织的基因芯片数据GSE37364,对MS4A12基因表达进行标准化后,再对其进行表达差异分析。通过对结肠癌细胞系Lo Vo进行MS4A12基因沉默,以此研究MS4A12基因对结肠癌细胞增殖的影响。MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,荧光定量PCR检测相关基因的表达。MS4A12基因在正常、腺瘤和结肠癌组织中表达依次降低(p0.001)。MS4A12基因沉默后,细胞增殖较对照明显升高(p0.05),且S期细胞比例较对照组升高,G1期细胞比例降低(p0.05)。本研究发现抑制MS4A12基因可以明显促进结肠癌细胞增殖,且在结肠癌发生过程中其表达逐渐降低,这提示MS4A12可能与结肠癌的发生有关并可为结肠癌早期诊断提供依据。     

朊蛋白在结肠癌及结肠炎组织中的表达及其临床意义

目的：观察朊蛋白（PrPc）在正常结肠粘膜、结肠炎及结肠癌组织中的表达,并探讨其临床意义。方法：采用免疫组织化学法分别检测PrPc在正常结肠组织、结肠炎及结肠癌组织（各40例）中的表达,并分析其在结肠癌及结肠炎组织中的表达与患者性别、分化程度、TNM分期、淋巴结转移及炎症程度等临床特征间的关系。结果：PrPc在正常结肠及结肠癌组织中均有表达,在结肠炎中表达较低,在结肠癌组织中阳性表达率为60％（24／40）,明显高于正常结肠组织的35％（14／40）及结肠炎组织的30％（12／40）（P〈0．05）。轻度结肠炎中PrPc的阳性表达率明显高于重度结肠炎,结肠癌中PrPc的表达与患者的肿瘤分级、分期显著相关（P〈0．05）。结论：PrPc在结肠癌中的表达增高,在结肠炎中表达较低,可作为临床判断结肠癌恶性程度及结肠炎炎症程度的重要参考指标。     

Livin在结肠癌中的表达及与上皮-间质转化的关系

目的探讨livin在结肠癌组织中表达的临床意义及其与上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的关系。方法应用免疫组织化学方法检测70例结肠癌及相应癌旁正常结肠黏膜组织中livin和EMT标志物的表达,对livin表达与结肠癌临床病理特征及livin与EMT标志物表达的相关性进行统计学分析。应用Western blot法检测8例新鲜结肠癌组织中livin与E-cadherin、vimentin和N-cadherin表达情况。结果结肠癌组织中livin的表达阳性率为61.4%,明显高于相应癌旁正常结肠黏膜组织中livin的表达阳性率8.6%;livin表达与结肠癌患者淋巴结转移和TNM分期有明显相关性。E-cadherin、vimentin和N-cadherin在结肠癌组织中阳性表达率分别为35.7%、32.9%和60%;livin与E-cadherin的表达呈负相关,与vimentin和N-cadherin表达呈正相关。Western blot结果也证实livin高表达的结肠癌组织中,E-cadherin呈低表达,vimentin和N-cadherin呈高表达。结论 Livin表达与结肠癌组织EMT标志物有关,livin可能通过诱导结肠癌细胞发生EMT,从而促进结肠癌的侵袭和转移。     

Oct-4在IIIB期结肠癌组织中的表达及与 CD45RO+细胞浸润相关性研究

摘要：目的 观察转录因子Oct-4在IIIB期结肠癌患者癌组织中的表达,并探讨Oct-4表达水平、部位同CD45RO+淋巴细胞浸润密度之间的相关性,为结肠癌的诊断和判断预后提供依据。方法 选取佳木斯大学附属第一医院65例经外科手术治疗切除的ⅢB期结肠癌患者的癌组织标本、36例癌旁组织标本及24例正常结肠组织标本。采用免疫组织化学染色法检测Oct-4,比较各组组织中Oct-4水平以及分布状况。同时,分析其与CD45RO+淋巴细胞浸润密度的关系。结果 （1）Oct-4在结肠癌组织中高表达,在结肠癌旁组织中表达较弱,在正常结肠组织中无表达。（2）Oct-4蛋白表达中、强阳性的结肠癌组织中CD45RO+细胞浸润密度低于Oct-4水平阴性、弱阳性表达的组织。细胞核中表达Oct-4蛋白的结肠癌组织中CD45RO+T淋巴细胞浸润密度高于核浆共表达的结肠癌组织。结论 Oct-4在IIIB期结肠癌肿瘤细胞中表达,可作为诊断的参考指标;且Oct-4表达水平的高低可作为判断预后的标准。     

Integrin beta1在结肠癌及其淋巴转移灶中的表达及临床意义

目的：检测integrin-beta1在结肠癌组织中的表达水平差异,研究其与结肠癌临床病理特征及其预后的关系。方法：采用免疫组化 SP法检测integrin 茁1在82例结肠癌原发灶及其淋巴结转移灶中的表达情况。结果：邻近正常结肠粘膜组织integrin beta1的阳性表 达率为93.33 %,原发灶癌细胞integrin beta1的表达率为73.17 %,两者之间integrin beta1的阳性表达率比较P<0.01;结肠癌转移性淋 巴结组织integrin beta1的阳性表达率为87.67 %,结肠癌非转移性淋巴结组织integrin beta1的阳性表达率为11.29 %,两者之间integrin 茁1的阳性表达率比较P<0.01。在所有与结肠癌相关的临床病理因素中,是否穿透浆膜层、有无淋巴结转移、分化程度不同、Dukes 分期不同,integrin beta1的阳性表达率比较P 值均小于0.05。结论：Integrin beta1与结肠癌分化程度、侵袭深度、淋巴结转移状况及 Dukes 分期等病理因素密切相关,其表达水平的检测对评估结肠癌淋巴结转移程度和分析结肠癌分期具有一定临床实用价值。     

miR-25抑制结肠癌细胞凋亡

为了通过结肠癌细胞实验,探究miR-25对结肠癌细胞凋亡的影响,本研究通过qRT-PCR检测结肠癌细胞中miR-25的表达情况;通过CCK-8法检测miR-25抑制剂转染组细胞活力状态;将miR-25抑制剂转染至结肠癌细胞,通过蛋白免疫印迹法检测结肠癌细胞中Bax和Bcl-2蛋白的表达情况;通过Caspase-3活性检测试剂盒检测结肠癌细胞中Caspase-3表达情况;通过流式细胞仪检测结肠癌细胞中ROS水平;通过Elisa试剂盒检测4-HNE、GSH和MDA含量。结果表明:结肠癌细胞中miR-25表达明显高于正常结肠粘膜组;miR-25抑制剂转染结肠癌细胞后,结肠癌细胞活力明显低于空载体对照组;miR-25抑制剂转染后,结肠癌细胞中Bax蛋白显著高于空载体对照组(p0.05),且Bcl-2蛋白低于空载体对照组(p0.05),Caspase-3活性高于空载体对照组(p0.05);miR-25抑制剂转染后,结肠癌细胞中ROS水平明显高于空载体对照(p0.05);miR-25抑制剂转染后,结肠癌细胞中ROS水平明显高于对照组(p0.05);miR-25抑制剂转染后结肠癌细胞中4-HNE (p0.05)和MDA (p0.05)含量明显增加,GSH (p0.05)含量显著降低。miR-25抑制剂可促进结肠癌细胞凋亡,其机制可能与增加结肠癌细胞中ROS水平导致氧化应激水平增强有关。     

肥胖与结肠癌的研究进展

结肠癌是全球第三大常见的癌症,一直是西方发达国家癌症死亡的主要原因之一。近几年中国结肠癌的发病率在快速增长,预计未来几年将会持续增长。肥胖已经成为21世纪以来全球公共卫生最严重的问题之一。根据流行病学的研究数据表明,肥胖会增加结肠癌的风险。了解肥胖增加结肠癌风险的相关机制有助于研究出新的防治策略,来防止越来越多由肥胖引发结肠癌的病例。现从脂质代谢、脂肪因子、炎症因子和最新治疗靶标这四个方面对肥胖和结肠癌的关系进行综述。     

S100A11在结肠癌的表达及其与临床特征的关系

目的：探讨S100A11在结肠癌和正常肠粘膜组织中的表达及其与患者临床特征的的关系。方法：采用RT-PCR、WesternBlotting技术,检测S100A11在24例结肠癌及正常肠粘膜中的表达,并分析S100A11与患者年龄,性别,临床病理分型之间的关系。结果：S100A11mRNA在结肠癌组织的表达量（0.944＋0.032）高于正常肠粘膜组织中的表达量（0.828＋0.079）,两组比较差异有统计学意义（p〈0.05）。S100A11蛋白在结肠癌组织中的表达量（0.951＋0.02）高于在正常肠粘膜组织中的表达量（0.860＋0.05）,两组比较差异有统计学意义（p〈0.05）。但与患者临床特征之间比较差异无统计学意义（p〉0.05）。结论：S100A11在结肠癌组织中表达量高于正常肠粘膜组织,提示其与结肠癌的发生和发展有关.是判断结肠癌生物学行为的有价值的参考指标。     

结肠癌患者血清及癌组织中VEGF的表达水平及临床意义

目的探讨结肠癌患者血清及癌组织中血管内皮生长因子（VEGF）的表达水平及临床意义。方法选择不同TNM分期的结肠癌患者88例,同时收集因外伤而切除部分结肠组织的患者43例作为对照组,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测不同患者在结肠癌手术前后血清中VEGF水平,利用实时定量PCR,免疫印迹及免疫组织化学染色法测定癌组织及正常对照组中VEGF表达水平,分析VEGF在血清及癌组织中表达水平与临床病理因素相关性。结果 TNM各期结肠癌患者手术前后血清VEGF水平均高于对照组,且差异有统计学意义（P〈0.05）。各期结肠癌患者术前血清VEGF表达高于术后表达水平,差异有统计学意义（P〈0.05）。与对照组相比,结肠癌组织中VEGF表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论血清及癌组织中VEGF表达水平与结肠癌的临床病理分级及血管浸润呈正相关,有望作为结肠癌病理分级和手术疗效及预后的评价指标。