直接注射法制作ICR 小鼠肝癌原位移植瘤模型

目的:培养鼠肝癌H22细胞,直接注射法制作ICR小鼠肝癌原位移植瘤,为后续实验奠定基础。方法:鼠肝癌H22细胞体外培养,将调整好的对数生长期的肝癌细胞直接注射小鼠肝脏,2周后解剖观察,并进行组织HE染色。结果:所有实验小鼠均可见肿瘤生长,HE染色示肝细胞肝癌。结论:直接注射法制作ICR小鼠肝癌原位移植瘤模型简便易行,值得推广应用。     

注射法制作ICR小鼠肝癌模型及其改进

应用直接注射法制作ICR小鼠原发肝癌模型并成功地进行方法改进。对模型小鼠进行了体重监测、原位移植成功率统计和病理检查,结果表明改进后的直接注射法制作小鼠原发肝癌模型的成功率显著提高,并成功模拟出肿瘤的多器官转移及人类肝癌常见的临床症状、体征。模型可以很好的满足抗肿瘤药物开发、肝癌发生发展机制研究的需要。同时,直接注射法改进方案和理念解决了直接注入细胞产生返漏的技术难题,为进一步建立其他脏器的原发或继发性癌症移植模型打下了基础。     

肠道病毒71型（EV71）对ICR小鼠的感染

目的研究肠道病毒71型经不同途径感染不同日龄ICR小鼠后的感染状况,了解肠道病毒71型的感染特点,为了解EV71小鼠感染机制和模型制备提供实验信息和技术支撑。方法分别通过口腔途径、颅腔途径、肌肉途径及腹腔途径感染1日龄、7日龄及3~4周龄SPF级ICR小鼠,定期安乐动物,采集各器官组织进行病原学诊断,确定EV71病毒感染情况;同时建立一步RT-PCR、病毒分离、IFA及IEA等方法。结果经腹腔途径感染成年鼠出现竖毛、弓背、消瘦症状,其他各途径感染小鼠感染后未见竖毛、弓背、觅食减少、体重减轻、精神呆滞及神经系统症状。颅腔注射3~4周龄ICR小鼠能在脑组织检测到病毒RNA,腹腔注射和肌肉注射1日龄乳鼠能在肌肉组织和肠道检测到病毒RNA,其中,肌肉组织病毒分离可检测到活病毒。本研究同时建立了分子生物学、血清学方法,为今后研究其它适合EV71的动物模型奠定了基础。结论临床分离的EV71毒株通过口腔接种、颅腔、肌肉、腹腔注射途径感染1日龄、7日龄及3~4周龄SPF级ICR小鼠的疾病程度和病毒检出不同,ICR乳鼠及成年鼠可作为该病毒感染机制、病毒体内分布等基础研究,但用作EV71动物模型应用,感染程度尚不十分理想。     

肝癌转基因小鼠模型的应用研究进展北大核心CSCD

肝细胞癌是全球范围内的恶性肿瘤,由于其进展迅速、易于复发转移,早期诊断和有效治疗一直是临床难题,对于肝癌的发病机制也亟待进一步阐明。利用基因工程手段构建的肝癌转基因小鼠模型,为肝癌发病机制研究和药物筛选提供了宝贵的研究材料。结合经典研究与近年进展,对常用肝癌转基因小鼠模型的构建方法、模型特点、特别是应用研究状况进行了分类介绍,并展望了未来发展的方向。     

近交系小鼠移植性肝癌模型建立及对比分析

目的：通过对比分析选择建立原位移植性肝癌模型的最佳小鼠品系。方法选取C57、C3H和BALB／c各10只小鼠分别作为模型组Ⅰ、模型组Ⅱ和模型组Ⅲ,沿腹中线开腹后将H22细胞接种到各模型组小鼠肝脏实质内。于注射后第15天剖腹探查,观察各组成瘤率,测量腹水量和肿瘤体积,并进行肿瘤病理学分析。结果三组小鼠存活率均为100％,15天后三组小鼠均产生腹水,但三组腹水量之间不具有统计学差异。模型组Ⅰ小鼠肝癌移植成功率为100％,高于模型组Ⅱ的60％和模型组Ⅲ的30％。模型组Ⅰ小鼠肝脏肿瘤全部为大块紧实灰白色病灶,其肿瘤平均体积显著大于模型组Ⅱ和模型组Ⅲ（ P＜0.05）。病理结果证实三组小鼠肝脏的灰白色病灶均为原位肝细胞癌。结论 C57小鼠是复制原位移植性肝癌模型较为理想的实验动物,为今后研究原位肝癌的发病机制提供良好的实验平台。     

人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型、细胞系建立及其生物学特性研究

目的建立人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型和相应体外细胞系.方法将病理证实的人卵巢浆液性乳头状腺癌手术切除标本移植于SCID小鼠皮下,成瘤后行鼠间传代,取移植瘤细胞体外分离培养、传代和建系,并应用细胞、分子生物学手段对移植瘤和建系细胞进行一系列生物学特性检测.结果历时14个月传至5代,皮下移植瘤存活率为90%,持续6个月,体外建系(OVA-319)细胞生长稳定.镜下观察组织形态学和超微结构符合原肿瘤组织基本特征;染色体分布在12～46条之间,多为异倍体,显示人类肿瘤异常染色体;流式细胞术和RT-PCR技术分析原代、体内移植瘤和OVA-319细胞结果一致,表现为瘤细胞生长活跃、细胞周期分布相仿,MAGE-2基因在mRNA水平异常表达.结论人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型和OVA-319细胞系为人类肿瘤的研究提供了良好的实验材料.     

人肝癌裸小鼠常位移植实验研究

采用硫贲妥钠（３０ｍｇ／ｋｇ、３０％乙醇配制）麻醉和蘸上立止血（２５０ｋＩＵ／ｍｌ）的明胶海棉止血措施确保了人肝癌裸小鼠常位移植术能安全、可靠地进行。本中心建立的两株人肝癌裸小鼠移植瘤株（ＨＨＣ４、ＨＨＣ１５）已成功地移植于裸小鼠（ＳＰＦ级）肝脏内,移植瘤生长良好、传代稳定和持续分泌ＡＦＰ。荷瘤（ＨＨＣ１５）３～６周裸小鼠血清ＡＦＰ含量与瘤体积的增加呈正相关。常位移植前（７ｄ）裸小鼠皮下注射０．１ｍｌ０．５％ＣＣ１（Ｖ／Ｖ。橄榄油配制）能明显提高ＨＨＣ４常位移植的成功率（Ｘ２检验、Ｐ＜０．０１）;在微量ＣＣｌ４作用下,裸小鼠肝细胞受损伤,发生肝硬化,在此基础上所移植和生长的人肝癌常位移植瘤与大多数人肝癌病变发生的肝脏病理生理学特点相似,本模型的建立更适用于抗肝癌药物的模拟治疗和筛选。     

ICR小鼠肠道中乳酸菌组成的克隆文库研究

目的对健康雄性ICR小鼠肠道内乳酸菌的组成结构进行研究。方法收集10只健康雄性ICR小鼠的新鲜粪便样品,提取粪便样品中微生物的总DNA,采用乳酸菌类群特异性引物（Lac1）和细菌通用性引物（1391r）的组合扩增16SrRNA基因并构建乳酸菌特异性克隆文库,研究小鼠肠道内各种乳酸菌的组成和比例。结果克隆文库的分析结果表明罗伊乳杆菌（Lactobacillus reuteri）和约氏乳杆菌（Lactobacillus johnsonii）为ICR小鼠肠道内的优势种,其他还包括鼠乳杆菌（Lactobacillus murinus）、阴道乳杆菌（Lactobacillus vaginalis）、肠乳杆菌（Lacto-bacillus intestinalis）等乳酸菌以及一个潜在的乳酸菌新种。结论健康ICR小鼠肠道内乳酸菌的多样性较高;L.re-uteri种可能具有较高的菌株水平多样性。     

从ICR小鼠脂肪组织对resistin基因的扩增

目的 PCR扩增ICR小鼠脂肪组织的resistin基因,为进一步在ICR小鼠中开展resistin的相关研究提供必要的基础.方法 在脂肪组织中抽提总RNA,用RT-PCR进行resistin基因的体外扩增,经电泳检测和测序后用DNAMAN软件进行碱基序列分析.结果 抽提的总RNA完整性较好,RT-PCR产物电泳检测获...     

口服他莫昔芬法建立ICR小鼠子宫腺肌病模型

目的使用口服他莫昔芬法建立ICR小鼠子宫腺肌病模型,并检测其病灶特征、动情周期、血管生成、子宫炎症等变化,以介绍和评价这一动物模型。方法新生ICR小鼠（15只）连续4 d滴喂他莫昔芬,并与同龄对照小鼠（15只）分别于42、85-95、135-145日龄处死,使用苏木素-伊红染色检测子宫病理改变;阴道脱落细胞法检测动情周期变化;免疫组化补体31（CD31）染色计算子宫微血管的密度、直径及所占面积比;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测子宫缓激肽受体、神经激肽受体的基因表达。结果使用口服他莫昔芬法建立ICR小鼠子宫腺肌病模型的造模率为100%,且疾病严重程度随病程进展。部分给药小鼠可出现动情周期紊乱。85-95及135-145日龄给药小鼠子宫肌层微血管密度和面积比均高于对照小鼠（P〈0.05）。135-145日龄给药小鼠子宫缓激肽受体、神经激肽受体的基因表达较对照组明显升高（P〈0.05）。结论口服他莫昔芬法可方便、高效的建立腺肌病小鼠模型,出现腺肌病相关的血管生成、炎症状态、疼痛相关受体表达增高等特征,是研究腺肌病发生、发展的良好模型。     

肝癌自发性破裂出血的MRI诊断

目的：探讨肝癌自发性破裂出血的MRI图像特征。方法：对6例经手术或肝动脉血管造影确诊为原发性肝癌破裂出血患者的MR图像进行回顾性分析,总结其临床特点及MRI图像特征。结果：6例患者均行MR平扫及增强扫描,肝被膜下出血4例,腹腔内出血2例。出血表现为T1WI呈高或等信号,T2WI呈高或低信号,5例可清晰显示肿瘤破口。结论：MR诊断肝癌自发性破裂出血及时、准确,T1WI及延迟扫描冠状位图像对诊断有定性意义。     

Identification and Validation of a Prognostic Model Based on Three MVI-Related Genes in Hepatocellular Carcinoma

MVI has significant clinical value for treatment selection and prognosis evaluation in hepatocellular carcinoma (HCC). We aimed to construct a model based on MVI-Related Genes (MVIRGs) for risk assessment and prognosis prediction in patients with HCC. This study utilized various statistical analysis methods for prognostic model construction and validation in the Cancer Genome Atlas (TCGA) and International Cancer Genome Consortium (ICGC) cohorts, respectively. In addition, immunohistochemistry and qRT-PCR were used to analyze and identify the value of the model in our cohort. After the analyses, 153 differentially expressed MVIRGs were identified, and three key genes were selected to construct a prognostic model. The high-risk group showed significantly lower overall survival (OS), and this trend was observed in all subgroups: different age groups, genders, stages, and grades. Risk score was a risk factor independent of age, gender, stage, and grade. Moreover, the ICGC cohort validated the prognostic value of the model corresponding to the TCGA. In our cohort, qRT-PCR and immunohistochemistry showed that all three genes had higher expression levels in HCC samples than in normal controls. High expression levels of genes and high-risk scores showed significantly lower recurrence-free survival (RFS) and OS, especially in MVI-positive HCC samples. Therefore, the prognostic model constructed by three MVIRGs can reliably predict the RFS and OS of patients with HCC and is valuable for guiding clinical treatment selection and prognostic assessment of HCC.     

肝癌自发性破裂出血的MRI诊断

目的:探讨肝癌自发性破裂出血的MRI图像特征。方法:对6例经手术或肝动脉血管造影确诊为原发性肝癌破裂出血患者的MR图像进行回顾性分析,总结其临床特点及MRI图像特征。结果:6例患者均行MR平扫及增强扫描,肝被膜下出血4例,腹腔内出血2例。出血表现为T1WI呈高或等信号,T2WI呈高或低信号,5例可清晰显示肿瘤破口。结论:MR诊断肝癌自发性破裂出血及时、准确,T1WI及延迟扫描冠状位图像对诊断有定性意义。     

抗VEGFR-2嵌合Fab抗体对裸鼠肝癌原位移植瘤新生血管生成的影响

目的:检测抗VEGFR-2嵌合Fab抗体对裸鼠肝癌原位移植瘤血管生成的影响.方法:建立裸鼠肝癌H22细胞原位移植瘤模型,随机分成生理盐水组(n=12)和抗体组(n=12).采用免疫组织化学SP染色法对两组肝脏移植瘤进行血管染色,观察其微血管密度(MVD)情况.结果:成功建立裸鼠H22肝癌原位移植瘤模型,HE染色显示肝脏移植瘤为肝细胞肝癌,免疫组化结果显示肝脏实体瘤内微血管密度抗体组较生理盐水组显著性减少(25.64± 1.53 vs 8.65± 1.79,P＜0.05).结论:抗VEGFR-2嵌合Fab抗体能够抑制裸鼠肝癌原位移植瘤的血管生成.     

肝细胞癌根治性切除术后预后因素分析

目的:探讨影响肝细胞癌患者根治性术后预后相关因素。方法:回顾性分析2004年1月1日至2009年12月31日245例我院行根治性切除术的肝细胞癌患者,采用Kaplan-Meier法和Cox比例风险模型分析临床资料、手术过程、病理特征与预后的关系。结果:多因素分析结果显示术前AFP水平、术中出血量、TNM分期是影响无进展生存时间和总生存时间的独立风险因素。术前AFP水平越高、术中出血量越大、TNM分期越晚则患者无进展生存时间及总生存时间明显缩短。此外,患者出现肿瘤组织局部坏死、门静脉癌栓,则总生存时间明显缩短。结论:术前AFP水平、术中出血量、TNM分期是外科根治性切除术后肝细胞癌患者复发及死亡的相关因素,对于临床医师判断预后及延长术后生存时间具有重要的临床意义。     

肝癌破裂出血行肝动脉栓塞治疗的护理

目的:探讨肝癌自发性破裂出血行急诊肝动脉栓塞治疗手术前后的护理方法。方法:回顾性分析17例原发性肝癌自发性破裂出血患者的急救及护理措施的临床资料。结果:17例患者入院后均有失血性休克表现,经肝动脉栓塞治疗后,治愈出院14例,死亡1例,放弃治疗2例,治疗总有效率为82.4%,死亡率为5.9%。结论:急诊肝动脉栓塞治疗肝癌破裂出血简单、有效,手术前后的护理非常重要,术前应密切注意患者病情变化,做好术前准备,术后常规止血、止吐,加强支持护理,及时观察手术并发症及疗效,积极预防和治疗各种并发症,是降低患者死亡率的关键。     

The In Ovo Chick Chorioallantoic Membrane (CAM) Assay as an Efficient Xenograft Model of Hepatocellular Carcinoma

The chick chorioallantoic membrane (CAM) begins to develop by day 7 after fertilization and matures by day 12. The CAM is naturally immunodeficient and highly vascularized, making it an ideal system for tumor implantation. Furthermore, the CAM contains extracellular matrix proteins such as fibronectin, laminin, collagen, integrin alpha(v)beta3, and MMP-2, making it an attractive model to study tumor invasion and metastasis. Scientists have long taken advantage of the physiology of the CAM by using it as a model of angiogenesis. More recently, the CAM assay has been modified to work as an in vivo xenograft model system for various cancers that bridges the gap between basic in vitro work and more complex animal cancer models. The CAM assay allows for the study of tumor growth, anti-tumor therapies, and pro-tumor molecular pathways in a biologically relevant system that is both cost- and time-effective. Here, we describe the development of CAM xenograft model of hepatocellular carcinoma (HCC) with embryonic survival rates of up to 93% and reliable tumor take leading to growth of three-dimensional, vascularized tumors.